文 悅 孟凡悅 李 琛
(東北林業(yè)大學家居與藝術設計學院,黑龍江 哈爾濱 150040)
蒼耳(Xanthium sibiricumPatrin ex Widder)菊科蒼耳屬植物,廣泛分布于我國東北、華北、華東、華南、西北及西南各省區(qū)。蒼耳全株均有一定的藥用價值,其主要化學成分,包括酚酸、揮發(fā)油、倍半萜內酯、脂肪酸、黃酮、水溶性苷等。其中,酚酸類和倍半萜內酯類為主要藥效成分[1-4],具有抗炎、抗氧化、抗過敏、抗腫瘤、抗菌、鎮(zhèn)痛等多方面的作用[2-5]。對蒼耳進行開發(fā)和利用,既可以緩解野生蒼耳干枯易燃所帶來的環(huán)境壓力,又可以提高植物資源的利用率[6-7]。目前,蒼耳提取物受到農(nóng)業(yè)、醫(yī)學等領域的持續(xù)關注,其常見的提取工藝有水蒸氣蒸餾法、溶劑浸提法、超聲輔助提取法、微波輔助提取法和超臨界CO2萃取法。本文對蒼耳提取物的化學成分、提取方法及應用領域進行了總結,旨在為蒼耳有效成分的高效提取與合理利用提供參考。
蒼耳的產(chǎn)地、品種、部位、提取方式等不同均對酚酸、揮發(fā)油、倍半萜內酯、脂肪酸、黃酮、水溶性苷等活性成分的提取有影響,其中酚酸類、黃酮和倍半萜內酯類為主要的功能性成分。洪燕等[8-11]先后從蒼耳中分離出多種酚酸類化合物,包括綠原酸、新綠原酸、咖啡酸等,是抗菌抗炎的有效活性成分[12-14],如表1 所示。黃酮是大量存在于植物中的一類天然活性成分,具有抗氧化、抗菌、增強免疫力等作用[15-18]。倍半萜內酯是一大類次生代謝產(chǎn)物,蒼耳提取物中含有蒼耳亭、蒼耳醇等物質[19],如表2 所示,具有抗菌消炎、抗過敏、抗腫瘤等作用[20-23]。
表1 蒼耳草中酚酸類化合物Tab.1 Phenolic acids in Xanthium sibiricum Patrin ex Widder
表2 蒼耳草中倍半萜內酯類化合物Tab.2 Sesquiterpene lactones in Xanthium sibiricum Patrin ex Widder
針對蒼耳中化學物質的提取方法有很多,主要包括水蒸氣蒸餾法、溶劑浸提法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法、超臨界CO2萃取法等。
水蒸氣蒸餾法屬于比較傳統(tǒng)的方法,將蒼耳草與水共同蒸餾,使揮發(fā)性成分隨水蒸氣一并餾出,經(jīng)冷凝分取揮發(fā)性成分,具有操作簡單、技術成熟、成本低廉等優(yōu)點,一般用于提取蒼耳揮發(fā)油。覃振林等[24]利用該方法提取了蒼耳揮發(fā)油,并采用氣相色譜-質譜-計算機分析技術,從中分離出78個組分,確認了蒼耳子中的24種成分和蒼耳草中的32種成分。王淑萍等[25]采用該方法提取蒼耳子中的揮發(fā)油,發(fā)現(xiàn)其得油率為0.2 mL/100g。雖然水蒸氣蒸餾法技術較為成熟,但其提取率和產(chǎn)量均較低。
溶劑浸提法是利用蒼耳中各組分在特定溶劑中溶解度的差異,使其完全分離或部分分離的方法,常用的溶劑有水、乙醇等。熊海蓉等[26]通過正交試驗確定了蒼耳子中抗寒物質的最佳提取工藝條件,其具體參數(shù)為乙醇濃度為50%、料液比為1∶9 (g/mL)、提取溫度為80 ℃、提取時間為40 min、提取次數(shù)為3次。在此條件下,粉體抗寒物質的產(chǎn)率為10.0%。張成等[27]在對比研究蒼耳子和田基黃中的黃酮總含量時,也采用正交試驗法確定了乙醇浸提法的最佳工藝條件。結果顯示,蒼耳子最佳浸提條件為乙醇濃度為60%,提取溫度為70 ℃,提取時間為4 h,料液比為1∶30 (g/mL)。在此條件下,蒼耳子中總黃酮的提取率為3.89%。任雪峰等[28]在采用水提法提取蒼耳單寧時,在單因素試驗的基礎上利用響應面分析法優(yōu)化蒼耳單寧的提取工藝,發(fā)現(xiàn)其最佳提取工藝條件為料液比為1∶40 (g/mL),提取溫度為50 ℃,提取時間為95 min。在此條件下,蒼耳單寧的提取率和理論提取率接近。溶劑浸提法雖然操作簡單,但提取時間較長,無法適應現(xiàn)代工業(yè)的需求。
超聲輔助提取法是利用超聲波的空化和機械效應破壞蒼耳的細胞結構,使溶劑滲透到細胞中,加速有效成分的溶解。一般情況下,超聲輔助提取法比水蒸氣蒸餾法所用的時間更短,提取率也更高[29]。王浩等[30]采用超聲輔助提取法對東北蒼耳子倍半菇類化合物的提取進行了研究,確定其最佳提取工藝為13倍量的無水乙醇,浸泡時間為3 h,超聲波萃取40 min。李貴花等[31]通過單因素試驗,考察了乙醇體積分數(shù)、料液比、浸泡時間和超聲時間等因素對超聲輔助提取蒼耳子總黃酮過程的影響。在此基礎上,進行Box-Beknhen中心組合設計,以蒼耳子總黃酮提取得率為響應值,采用響應面分析法研究了各因素及其交互作用對蒼耳子總黃酮提取率的影響。結果表明,在乙醇體積分數(shù)為61%,料液比1∶26 (g/mL),浸泡時間為15 h,超聲提取時間為26 min提取工藝下,蒼耳子總黃酮的得率可達44.15 mg/g,與模型預測值基本一致。
微波輔助提取法是利用電磁場的作用,使蒼耳中的某些成分與基體分離,并保持提取物原本狀態(tài)的方法,具有快速高效、加熱均勻等優(yōu)點。王佩華等[32]利用微波輔助技術提取了蒼耳莖中的總黃酮。在溶劑為乙酸乙酯,微波功率為800 W,處理時間為2 min,料液比為1∶15 (g/mL)的條件下,黃酮的平均提取率為12.08%。與溶劑浸提方法相比,該方法的提取時間更短,提取效率更高。趙文英等[33]通過單因素試驗,考察了不同溶劑、微波功率、微波作用時間及料液比對微波輔助提取蒼耳子油的影響,確定了最佳提取工藝,即溶劑為無水乙醇,微波功率為595 W,處理時間為12 min,料液比為1∶10。該法提取的蒼耳子油與傳統(tǒng)方法提取的蒼耳子油的成分無明顯差異。高齊等[34]在提取蒼耳子生物堿時,考察了乙醇濃度、提取溫度、提取時間、料液比對等參數(shù)的影響,并通過正交試驗確定了最佳提取條件,即乙醇濃度為70%,微波處理時間為5 min,微波處理溫度為50 ℃,料液比為1∶25。在此條件下,蒼耳子生物堿的提取率可達2.41%。
超臨界CO2萃取法是以超臨界CO2為溶劑,從蒼耳中把有效成分萃取出來,這種方法更加高效, 避免了有機溶劑的殘留和高溫帶來的不利影響, 品質更佳[35]。然而其處理設備昂貴,目前未實現(xiàn)大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。徐鵬翔等[36]采用超臨界CO2萃取技術對蒼耳葉中的揮發(fā)油進行提取,并考察了萃取時間、萃取溫度、萃取壓力、粉碎目數(shù)等對萃取率的影響。結果表明,在萃取時間為90 min,萃取溫度為35 ℃,萃取壓力為28 MPa的工藝條件下,揮發(fā)油的提取率可達4.56%。王虹等[37]分別采用水蒸氣蒸餾法和超臨界CO2萃取法提取了蒼耳子中的揮發(fā)油,并采用氣相色譜-質譜法對其化學成分進行分析,共鑒定出74個成分。其中,超臨界CO2萃取法提取的揮發(fā)油中鑒定出成分69個,水蒸氣蒸餾法提取的揮發(fā)油中鑒定出成分有63個,兩者共有成分58個,說明超臨界CO2萃取法不能完全取代水蒸氣蒸餾法。
蒼耳提取物含有豐富的活性物質,對一些植物病原菌具有很強的抑制作用,可用來防治蚜蟲、粘蟲等農(nóng)業(yè)害蟲。近年來,關于蒼耳在農(nóng)業(yè)領域的研究日益增加。孟學英等[38]通過對蒼耳提取物蒼耳亭的化學結構進行改造,合成得到18 種單體化合物,并采用室內生測法測定了化合物對二斑葉螨和粘蟲的殺蟲活性。結果表明,蒼耳提取物不僅對二班葉螨雌成螨具有較好的觸殺活性,對粘蟲也具有良好的觸殺、胃毒和拒食作用。王春等[39]發(fā)現(xiàn),蒼耳不同部位的提取物對大豆蚜均有一定的毒殺活性,毒殺活性大小依次為葉>莖>種子>根。當蒼耳葉提取物濃度在75 mg/mL以下時,對其天敵瓢蟲的殺傷力較小,可以安全應用。梁魁景等[40]通過菌絲生長速率測定法和病原孢子萌發(fā)率測定法發(fā)現(xiàn),蒼耳提取物對大蔥紫斑病原菌具有較強的抑制作用。何源等[41]以意大利蒼耳全草為原料,經(jīng)90%乙醇超聲輔助提取后,分別用不同溶劑進行萃取,最終得到石油醚相、氯仿相和乙酸乙酯相。采用菌絲生長速率法研究各相對灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、茄交鏈孢(Alternaria solani)、尖孢鐮刀菌(Fusarium Oxysporum)、鏈格孢(Alternaria alternata)等植物病菌的抑菌活性。結果表明,這3 種萃取相對4 種植物病原真菌均具有顯著抑制且呈濃度依賴性。其中,氯仿萃取相對4 種植物病原真菌抑制效果最好,當濃度為800 μg/mL時,其抑制率可達50%以上。
蒼耳是一種傳統(tǒng)的中藥材,其提取物具有抗菌消炎作用,可以用于治療鼻炎、腫瘤等。邵深深等[42]發(fā)現(xiàn),蒼耳種子水提液可能通過抑制LAT/PLCY1/PKC信號通路的表達,抑制肥大細胞脫顆粒,從而改善小鼠過敏性鼻炎的癥狀。池英超[43]隨機選擇2020 年1~12 月某醫(yī)院接收的急性鼻竇炎患者100 例,以數(shù)表法分為對照組和觀察組,每組50 例。對照組采用常規(guī)西藥治療,觀察組采用蒼耳子散治療,結果發(fā)現(xiàn),對急性鼻竇炎患者應用蒼耳子散治療效果顯著,可有效改善其臨床癥狀,降低機體炎癥水平,促進康復。王霄彤等[23]發(fā)現(xiàn),蒼耳亭對過敏性皮炎有明顯的治療作用,其機制可能是通過抑制上皮細胞產(chǎn)生的TSLP以及巨噬細胞產(chǎn)生TNF-c發(fā)揮抗炎作用。蔡亞云等[21]通過體外腫瘤細胞抑制試驗及體內抗腫瘤試驗證明了蒼耳亭對肝癌細胞較強的抑制作用,并與其濃度有關。
蒼耳提取物不僅在農(nóng)業(yè)及醫(yī)學領域具有廣闊的應用前景,在食品保鮮領域也極具開發(fā)利用價值。崔國庭等[44]發(fā)現(xiàn),蒼耳葉提取物對獼猴桃潰瘍菌有抑制作用,其最低抑菌濃度為50 μg/mL。當濃度高于100 μg/mL時,其可對潰瘍菌細胞壁的完整性造成破壞,引起獼猴桃潰瘍菌菌內分子如糖、蛋白質、核酸外泄。王菲等[18]利用微膠囊技術以酵母細胞為壁材,以蒼耳子黃酮為芯材,通過單因素與正交試驗優(yōu)化了蒼耳子黃酮微膠囊的制備條件,隨后以汁液損失率、揮發(fā)性鹽基氮、pH值和菌落總數(shù)為指標,考察了蒼耳子黃酮、蒼耳子黃酮微膠囊及殼聚糖對冷鮮肉的保鮮作用。結果表明,當芯壁比為1 ∶3,在30 ℃下振蕩7 h制得的微膠囊較好,包埋率可達51.8%,酵母微膠囊與殼聚糖對冷鮮肉的保鮮效果接近9 d。蘆站根[45]研究發(fā)現(xiàn),蒼耳的4 種不同溶劑(丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯)提取液對蘋果輪紋病菌均具有較好的抑制效果,其抑菌率為53.5%~65.41%。
不同方法提取的蒼耳提取物,其主要成分與含量均有不同。綜上所述,傳統(tǒng)的水蒸氣蒸餾法操作簡單,成本較低,但其提取物的成分較為單一,且提取率較低。溶劑浸提法所用的溶劑種類較多,無法適應現(xiàn)代工業(yè)的需要。超聲輔助提取法及微波輔助提取法適用于大部分蒼耳有效成分的提取,且具有提取設備簡單、效率高、時間短等優(yōu)勢。雖然超臨界CO2萃取法的提取效率很高,但其高成本卻是主要問題。
蒼耳提取物已廣泛應用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)學等領域,前景巨大。然而,蒼耳提取物的發(fā)展和應用仍有很大的進步空間。首先,當前市場環(huán)境缺乏針對蒼耳提取物工藝的行業(yè)標準,再加上蒼耳本身質量和提取工藝的影響,導致蒼耳提取物的質量參差不齊,極大地影響了其進一步的推廣使用。其次,在農(nóng)業(yè)應用方面,真正用于實際生產(chǎn)的案例較少,田間應用推廣還存在不少問題。最后,對蒼耳提取物活性成分的作用機制及毒性研究不深。
因此,未來可針對以上不足開展深入研究,總結規(guī)律并積累經(jīng)驗,為蒼耳提取物的廣泛應用奠定理論基礎。