楊 琪

安徽省全誠司法鑒定中心，安徽 合肥 230041

一、法醫(yī)DNA 檢驗技術(shù)的發(fā)展歷程

法醫(yī)DNA 檢驗技術(shù)自1985 年英國遺傳學家Alec Jeffreys 首次發(fā)現(xiàn)“DNA 指紋”以來，經(jīng)歷了三十多年的歷史，先后由DNA 指紋圖技術(shù)、擴增片段長度多態(tài)性（以下簡稱“AMP-FLP”）分析技術(shù)、線粒體DNA 檢測技術(shù)三大技術(shù)革命組成。目前適用的DNA 檢驗技術(shù)主要有：多基因座短串聯(lián)重復(fù)片段（以下簡稱“STR”）復(fù)合擴增檢測技術(shù)、線粒體DNA 檢測技術(shù)和單核苷酸多態(tài)性（以下簡稱“SNP”）分析技術(shù)。

早期的DNA 指紋技術(shù)雖然可以應(yīng)用于案件的偵查，但是由于方法繁雜、周期長、實驗條件要求高等因素的制約，使得DNA 指紋技術(shù)無法滿足司法鑒定的要求，沒有得到更廣泛的發(fā)展，這就有了后來的基于聚合酶鏈式反應(yīng)（以下簡稱“PCR”）技術(shù)發(fā)展起來的AMP-FLP 分析技術(shù)。該技術(shù)既具有基因組VNTR 基因座多態(tài)性又能迅速、高效進行擴增。AMP-FLP 分析是DNA 指紋技術(shù)的重大突破，其需要的DNA 的量少，檢測效率高，也能處理陳舊、腐敗的檢材，可進行多個基因座復(fù)合擴增。該技術(shù)試驗周期短、可靠性高、操作簡單。但是AMP-FLP 分析靈敏度不及STR 高，如果DNA 降解嚴重，較大的等位基因不容易擴增出來。

為了克服AMP-FLP 分析技術(shù)的缺陷，1988 年，Saiki 等人首次提出短串聯(lián)重復(fù)片段（STR），并且將其應(yīng)用于PCR 擴增，伴隨著先進的DNA 測序儀的發(fā)明，熒光標記多基因座STR 復(fù)合擴增檢測技術(shù)產(chǎn)生了。STR 復(fù)合擴增分析方法簡便，分型圖譜簡單，有利于實現(xiàn)DNA 大數(shù)據(jù)的存儲和檢索。STR技術(shù)也是目前使用頻率最高的DNA 分型技術(shù)。

自20 世紀90 年代中期，線粒體DNA 序列分析得到了飛速的發(fā)展，線粒體DNA 測序用于確認家族中母系親屬之間的親緣關(guān)系，其出現(xiàn)主要為解決毛干等無核生物組織或者極微量檢材的DNA鑒定難題。伴隨著DNA 測序技術(shù)及儀器的升級，線粒體DNA 測序分析技術(shù)得到廣泛的推廣和應(yīng)用，使法醫(yī)DNA 鑒定的應(yīng)用范圍不斷擴大，可以對來自人體的全部生物樣品進行檢驗，尤其適用于毛干和指甲等特殊生物檢材的DNA 分析。檢測的靈敏度要比核DNA 高，適用于微量、陳舊和高度降解的生物檢材的鑒定。

SNP 分析技術(shù)，指在基因組上單個核苷酸的變異形成的遺傳變異，從而導(dǎo)致核酸序列多態(tài)性。隨著分子生物學與生物信息學的相關(guān)理論的飛速發(fā)展，通過建立相應(yīng)的遺傳標記與特定的表型之間對應(yīng)關(guān)系，法醫(yī)DNA 表型刻畫（以下簡稱“FDP”）推斷研究應(yīng)運而生［1］。FDP 推斷通過對犯罪嫌疑人的DNA 進行分析，從而推斷出其人體表征的一系列特征，包括容貌、身高、發(fā)色、膚色等，克服了模擬畫像中的某些失真缺點，能夠為偵查破案提供重要線索。

二、法醫(yī)DNA 檢驗技術(shù)的應(yīng)用價值

（一）法醫(yī)DNA 檢驗技術(shù)在刑事案件中偵破的重要價值

眾所周知，刑事案件的偵破需要第一時間獲得完整、有效的證據(jù)，但是由于受各種人為和客觀因素的影響，常出現(xiàn)證據(jù)鏈缺失，影響了案件的及時偵破。在DNA 檢驗技術(shù)飛速發(fā)展的今天，法醫(yī)物證鑒定將DNA 技術(shù)應(yīng)用得淋漓盡致，使得其在刑事案件的偵破中發(fā)揮了越來越重要的作用?？梢該Q句話說，法醫(yī)DNA 檢驗技術(shù)使得許多應(yīng)用其他技術(shù)無法攻破的“死案”得以偵破成為可能。

（二）法醫(yī)DNA 檢驗技術(shù)在司法鑒定中的重要價值

法醫(yī)DNA 檢驗技術(shù)在司法鑒定中的重要價值主要體現(xiàn)在解決個體識別和親子鑒定案件。司法鑒定中的個體識別案件，以交通事故案件居多，對事故現(xiàn)場的現(xiàn)場遺留的生物檢材進行DNA 檢測，進而確定案件現(xiàn)場遺留的生物檢材是否為交通事故的受害者所留。司法鑒定中的親子鑒定是通過人類遺傳標記進行DNA 檢測，通過遺傳分析，對有爭議的父母和子女進行血緣關(guān)系鑒定，由此來解決非婚生子女入戶、補辦醫(yī)學出生證明、早年失散孩子的認親、離婚案例中孩子撫養(yǎng)權(quán)糾紛、孩子出國留學、財產(chǎn)繼承及公證等一系列問題。

三、法醫(yī)DNA 檢驗遇到的特殊案例

（一）性反轉(zhuǎn)案例一

楊某的妻子陳某，因與丈夫感情不和，家庭矛盾繁瑣，孤身一人從四川老家到常州市武進區(qū)與王某一起生活。2019 年3 月5 日，楊某乘火車從重慶來到常州市尋找妻子陳某。2019 年3 月6 日，楊某在一出租房內(nèi)找到王某與妻子，遂向王某提出要求，要妻子和他一起回老家生活。王某拒絕，三人發(fā)生言語沖突，楊某持隨身攜帶的水果刀向王某刺去。結(jié)果，楊某卻誤將自己的妻子當場刺死。

案發(fā)后，當?shù)毓矙C關(guān)立即參與調(diào)查，并從案發(fā)現(xiàn)場提取了楊某刺死陳某用的水果刀、現(xiàn)場陳某衣物上的可疑血跡及現(xiàn)場房間地面上滴落的可疑血跡等相關(guān)的DNA 物證檢材，送往當?shù)毓簿址ㄡt(yī)物證DNA 實驗室進行檢驗。為鎖定案發(fā)現(xiàn)場的物證，早日攻破該命案做好準備。

DNA 實驗室檢測結(jié)果顯示，該現(xiàn)場生物檢材遺留者是一位男性個體。

隨后，辦案機關(guān)接到當?shù)毓簿址ㄡt(yī)物證DNA實驗室的鑒定報告，所有案發(fā)現(xiàn)場提取的物證檢材上均檢出相同男性DNA 分型。這樣的檢驗結(jié)果讓這些辦案民警困惑了，明明案發(fā)現(xiàn)場死亡的是一名女性受害者，并且別的在場男性人員沒有留下血跡，怎么會所有現(xiàn)場物證檢材均檢出男性DNA 分型呢？隨后，他們與當?shù)毓簿址ㄡt(yī)物證DNA 實驗室的工作人員進行溝通。為了慎重起見，DNA 實驗室工作人員又將所有的送檢檢材重新檢驗了一遍。并且，在第二次檢驗中，還要求辦案民警對案發(fā)現(xiàn)場三名當事人重新提取樣本，以確保檢驗結(jié)果準確無誤。

檢測結(jié)果依舊與之前的檢測結(jié)果相同，所有現(xiàn)場檢材均檢測出男性DNA 分型，并且與比對樣本中的死者的DNA 分型相同。由此，檢測人員推測該受害者是否就是一個染色體基因型是XY，但是社會性別是女性的個體。

通過AGCU X19 STR 熒光檢測試劑盒檢測該特別樣本的基因型，實驗結(jié)果顯示所有X19 試劑盒基因位點上均出單峰，沒有檢測到一個位點出雙峰。經(jīng)分析這個樣本的出峰情況，可以理解為這個樣本從其父母那里遺傳得來的X 染色體上所有已檢測的19 個STR 基因位點上，均檢測出純合子的現(xiàn)象，而這一現(xiàn)象發(fā)生在一個正常女性樣本檢測結(jié)果中的概率基本上為零。提示這個樣本可能就是不同于正常女性個體的特殊樣本。

其后，鑒定人員通過AGCU Y24 STR 熒光檢測試劑盒進一步檢測該特別樣本的基因型，實驗結(jié)果顯示所檢基因型與正常男性個體檢測出的基因分型出峰情況相同，且能夠檢測出與這個試劑盒陽性控制樣本9948 在所列的Y 染色體24 個STR 基因座上出現(xiàn)的峰值情況——幾乎所有Y24試劑盒基因位點上（除DYS527a/b、DYS385a/b上出雙峰）均出單峰，與這個試劑盒的陽性樣本Control DNA 9948 出峰狀況完全相同，也就是說這個樣本不是一個女性樣本STR 檢測出的陰性結(jié)果，而是與正常男性樣本檢測的結(jié)果出峰情況是一致的。

上述一系列實驗的檢測結(jié)果，均顯示該名社會性別為女性的受害者，DNA 分型的確檢測出染色體核型為46XY 的男性分型特征。回訪當事人親屬，了解到該“女性”就是因為存在染色體性別與表型性別反轉(zhuǎn)的疾病，所以才導(dǎo)致其夫妻倆一直未能夠正常生育出孩子，夫妻倆感情矛盾日益凸顯。

（二）性反轉(zhuǎn)案例二

2020 年4 月5 日，丈夫王某和妻子張某帶著孩子王某來到我司法鑒定中心要求做親子鑒定，用于后期辦理孩子入戶。鑒定中心的工作人員仔細核實了他們所提供的材料，按照司法鑒定程序受理了這個案件，并像往常一樣開展實驗。經(jīng)分析被鑒定人DNA 基因圖譜，發(fā)現(xiàn)孩子的母親張某的DNA 圖譜的性別峰值顯示出男性的XY 特征。鑒定中心的工作人員帶著對其實驗結(jié)果的疑問，反復(fù)重新做了幾次實驗，發(fā)現(xiàn)結(jié)果仍然與之前的實驗結(jié)果相同。后來，為了驗證這個個體的真正性別，仍然，做了用AGCU X19 STR 熒光檢測試劑盒、AGCU Database Y24 熒光檢測試劑盒對這個樣本進行驗證，發(fā)現(xiàn)，這個母親的樣本確實表現(xiàn)出男性個體的基因型。

后來，從側(cè)面走訪打聽到，被鑒定人就是因為沒有生育能力，夫妻倆才決定收養(yǎng)一個小孩。而他們來司法鑒定中心做親子鑒定的目的就是辦理領(lǐng)養(yǎng)手續(xù)。

（三）性反轉(zhuǎn)案例三

2023 年4 月15 日，我司法鑒定中心為客戶上門出診一個親子鑒定的案例，一對夫婦要求和自己的孩子做親子鑒定，用于落實后期孩子需要申報戶口的事情。在履行司法鑒定程序時鑒定人員問起：“被鑒定當事人（即指這對父母和孩子）有沒有做過骨髓移植手術(shù)及有沒有輸血史時？”孩子父母回答，這個孩子有白血病病史，成功完成了骨髓移植手術(shù)。但是手術(shù)過去已有約3 年時間了。針對這種特殊的情形，我們對孩子除了采集了血樣樣本，還采集了毛發(fā)，口腔擦拭物，而父母親的樣本我們只采集了血樣。經(jīng)過對此案例中的三個樣本進行DNA 檢驗發(fā)現(xiàn)，孩子的血樣樣本與孩子父母親的血樣樣本的DNA 分型不符合親子血緣關(guān)系特征，并且這個孩子的血樣樣本所檢出的DNA 分型與其性別基因型不匹配，這個孩子原本是個女性卻檢測出來是個男性個體。但是后來，鑒定人員又通過對孩子的毛發(fā)、口腔擦拭物進行DNA 檢測，發(fā)現(xiàn)他們?nèi)说臉颖臼欠嫌H生血緣關(guān)系特征的。

四、性反轉(zhuǎn)案例所引發(fā)的思考

第一，染色體核型為46XY 的女性是存在一種性分化疾病的非正常女性。這種疾病也可稱作性逆轉(zhuǎn)綜合征［2］，是一種由于性別決定和分化異常導(dǎo)致的兩性畸形，其主要特征是患者的染色體核型與臨床表型相反。這種疾病的發(fā)病率臨床表型為1∶100000。［3］

第二，染色體核型為46XY 的女性若發(fā)育成為正常的男性個體，需要睪丸決定因子和雄激素。睪丸決定因子促使睪丸的形成，而后分泌苗勒管抑制因子和雄激素。單純性腺發(fā)育不全由于某些因素影響，導(dǎo)致性腺在胚胎早期發(fā)育不正常，不能正常產(chǎn)生苗勒管抑制因子和雄激素，因而輸卵管和子宮的發(fā)育不能夠受到抑制，男性外生殖器也不能夠正常發(fā)育，造成性腺發(fā)育異常。

第三，染色體核型為46XY 的女性是單純性腺發(fā)育不全患者，在早期成長中一般沒有特別的異常，只是到了青春期會出現(xiàn)第二性別特征不明顯，并且伴有原發(fā)性或者繼發(fā)性的閉經(jīng)現(xiàn)象。

第四，染色體核型為46XY 的女性（或是染色體核型為46XX 的男性），是日常檢案中出現(xiàn)的特別案例，已經(jīng)陸續(xù)有文獻報道。由此也應(yīng)該引起鑒定人員對其有更深層次的認識。這些性別異常樣本的檢出結(jié)果有可能將案件的偵查引入錯誤的方向。試想下，如果某案件的嫌疑人是染色體核型為46XX 的男性個體，其遺留在某案發(fā)犯罪現(xiàn)場的生物檢材經(jīng)DNA 檢驗后，則會因其染色體性腺性別為女性，而將偵查方向錯誤指向女性群體，真正的犯罪嫌疑人卻得以逍遙法外。所以法醫(yī)鑒定人員對性發(fā)育異常的性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象應(yīng)該有一定的認識，在平時的檢案中，如遇到檢測DNA性別信息與其他證據(jù)提示的性別信息不符時，應(yīng)考慮可能存在性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象，并且將其線索提供給案件偵查人員。

第五，在做完骨髓移植手術(shù)之后，受體的血樣所檢出的DNA 分型發(fā)生性反轉(zhuǎn)的現(xiàn)象，近些年陸續(xù)有許多報道。其原因在于，骨髓干細胞是負責造血的，試想下，如果骨髓移植手術(shù)的供體是位男性，但是接受骨髓移植手術(shù)的患者是位女性，那么在骨髓移植手術(shù)結(jié)束后，該位女性個體的造血功能仍然由該位男性個體的骨髓干細胞在執(zhí)行，所以術(shù)后通過DNA 檢測能夠發(fā)現(xiàn)，該女性患者的染色體核型有時就會發(fā)生性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象。因此，臨床上不乏存在得了白血病的人通過骨髓移植手術(shù)后（供體和自己的血型不一致），自己的血型會發(fā)生改變的情況?；谶@一點，對于涉及案件現(xiàn)場的物證，如果發(fā)現(xiàn)檢測的實驗結(jié)果出現(xiàn)當事人性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象，鑒定人員可以通過走訪該名當事人，了解他（她）既往病史以及有無做過骨髓移植手術(shù)等情況，旨在為偵查案件的人員提供一些新的思路，不至于使案件的偵破走進“死胡同”。

第六，在法醫(yī)物證親子、親緣關(guān)系鑒定中，如果遇到經(jīng)過Amelogenin 基因座檢測得出的性別信息與被檢測人員的性別信息不一致的情況，尤其需要注意被檢測人員是未成年人群體時，可以告知其監(jiān)護人盡快去醫(yī)院做進一步檢查，提前進行醫(yī)療干預(yù)，避免為出現(xiàn)異常結(jié)果的被鑒定人日后生活帶來麻煩。