王文怡, 余靜恬, 王潔蓮

(武漢科技大學(xué)附屬天佑醫(yī)院, 湖北 武漢 430064)

糖尿病腎病(DN)作為臨床上一種較為常見的糖尿病并發(fā)癥,其主要由患者腎臟發(fā)生病變引起腎小球硬化所導(dǎo)致的,嚴(yán)重者會(huì)發(fā)展為終末期腎病,影響患者的健康和生命[1]。DN發(fā)病非常隱匿且早期無明顯腎臟功能損傷,因此患者常常錯(cuò)過最佳治療時(shí)期,為臨床治療帶來極大的困難和挑戰(zhàn)[2]。因此,尋找可信的輔助檢測(cè)指標(biāo),并根據(jù)指標(biāo)的診斷及時(shí)制定治療策略,以延緩疾病的發(fā)展,進(jìn)而改善患者預(yù)后十分迫切。目前,盡管診斷方式多樣,但是由于早期DN癥狀很輕,無明顯的腎功能及尿常規(guī)指標(biāo)變化,精準(zhǔn)診斷DN變的十分困難。正五聚蛋白3(PTX3)是一種炎癥反應(yīng)標(biāo)志物,可以鑒別血管內(nèi)皮功能損傷,在DN診斷中具有潛在的臨床價(jià)值[3]。分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)是一種脂肪細(xì)胞因子,與肥胖、胰島素抵抗、炎癥等密切相關(guān),其在DN患者血清中明顯升高,可能參與DN的發(fā)生發(fā)展。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)是一種脂質(zhì)運(yùn)載蛋白,研究發(fā)現(xiàn),其在腎臟上皮細(xì)胞中有所表達(dá),是腎臟損傷的標(biāo)志物之一,并可作為診斷DN的輔助因子?；诖?本研究選取2020年12月至2023年6月本院就診的86例DN患者,分析血清PTX3、SFRP4、尿液NGAL以及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)DN的診斷價(jià)值,為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2020年12月至2023年6月就診的86例DN患者為研究對(duì)象,年齡為25～55歲,平均(39.90±4.56)歲,男46例,女40例;另選40例單純2型糖尿病患者為對(duì)照組,年齡為22～56歲,平均(38.70±4.32)歲,男22例,女18例;對(duì)照組和DN組年齡(t=1.398,P=0.165)、性別(χ2=0.025,P=0.874)比較,差異不顯著(P>0.05),具有可比性。根據(jù)Mogensen分期標(biāo)準(zhǔn)[4],將尿微量白蛋白排泄率(UAER)≤20 μg/min納入早期(Ⅰ～Ⅱ期)組(24例),20 μg/min

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn)：納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有臨床資料均記錄完整;②對(duì)照組和DN組分別符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南》和《糖尿病腎病防治專家共識(shí)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn),并通過腎臟病理穿刺進(jìn)行驗(yàn)證;③年齡在18～65周歲內(nèi)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有腎衰竭、腎炎等或合并其他傳染病史者;②患有心、肝等臟器功能異常;③患有惡性腫瘤者。本研究受試者均簽署知情同意書,且獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.3方法：收集患者入組當(dāng)日清晨靜脈血3mL,離心獲取血清;收集患者入組當(dāng)天12h尿液,混勻后取4mL備用。然后采用酶聯(lián)免疫試劑盒分別檢測(cè)血清中PTX3、SFRP4水平以及尿液中NGAL水平。PTX3,SFRP4試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所,NGAL試劑盒采購(gòu)于英國(guó)Abcam公司。

2 結(jié) 果

2.1對(duì)照組和DN組血清中PTX3、SFRP4以及尿液中NGAL水平比較：DN組血清中PTX3、SFRP4和尿液NGAL水平較對(duì)照組升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組PTX3 SFRP4和NGAL水平比較

2.2輕度DN組和中重度DN組血清中PTX3、SFRP4以及尿液中NGAL水平比較：輕度DN組患者血清中PTX3、SFRP4和尿液NGAL水平較中重度DN組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 輕度DN組和中重度DN組血清中PTX3 SFRP4以及尿液中NGAL水平比較

2.3早、中、晚期組DN患者血清中PTX3、SFRP4以及尿液中NGAL水平比較：中期組血清中PTX3、SFRP4和尿NGAL水平均高于早期組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);晚期組血清中PTX3、SFRP4以及尿液中NGAL水平較中期組升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 早期中期和晚期組患者血清中PTX3 SFRP4以及尿液中NGAL水平比較

2.4血清中PTX3、SFRP4水平和尿液中NGAL以及三者聯(lián)合對(duì)DN的診斷價(jià)值：ROC曲線分析結(jié)果顯示,血清中PTX3、SFRP4水平和尿液中NGAL水平單獨(dú)診斷DN的AUC分別為0.909、0.849、0.923,三者聯(lián)合診斷DN的AUC為0.985,優(yōu)于血清PTX3、SFRP4和尿液NGAL各自單獨(dú)診斷(Z三者聯(lián)合-PTX3=2.670、Z三者聯(lián)合-SFRP4=3.976、Z三者聯(lián)合-NGAL=2.510,P=0.008、0.000、0.012)。見表4和圖1。

圖1 血清PTX3、SFRP4水平以及尿液NGAL水平診斷DN的ROC曲線

表4 血清中PTX3 SFRP4水平和尿液中NGAL以及三者聯(lián)合對(duì)DN的診斷價(jià)值

3 討 論

目前,人們對(duì)DN的發(fā)病機(jī)制知之甚少,且臨床缺乏特異性臨床癥狀和體征,因此及早發(fā)現(xiàn)DN高危因素并采取針對(duì)性干預(yù)措施,或早期診斷DN并制定個(gè)體化治療方案,對(duì)改善患者預(yù)后有重要的臨床價(jià)值。

PTX3是一種多聚糖蛋白,共包含381個(gè)氨基酸,由巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生,在機(jī)體先天免疫中扮演重要角色,具有補(bǔ)體激活和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的作用,而且該蛋白與多種臨床疾病相關(guān),包括慢性腎病等[6]。有研究報(bào)道DN患者升高的PTX3水平與24h尿蛋白含量呈正相關(guān),表明PTX3參與DN的發(fā)展,降低DN患者體內(nèi)PTX3水平可能會(huì)緩解DN的病情[7-8]。本研究結(jié)果顯示DN組血清PTX3表達(dá)水平明顯升高,提示血清PTX3水平可能參與DN的發(fā)生;另外,研究發(fā)現(xiàn)中重度DN組患者血清中PTX3顯著高于輕度組,中、晚期組患者血清PTX3水平高于早期組,且晚期組高于中期組,提示PTX3表達(dá)水平可一定程度評(píng)估DN患者病情嚴(yán)重程度及發(fā)展進(jìn)程,推測(cè)糖尿病患者血清PTX3水平升高可能會(huì)促進(jìn)患者高糖環(huán)境下的腎臟炎癥反應(yīng),進(jìn)而增加DN的發(fā)生[6]。進(jìn)一步ROC曲線分析顯示,PTX3診斷DN的AUC為0.909,提示對(duì)DN的診斷具有一定的臨床價(jià)值。

SFRP家族作為Wnt信號(hào)通路抑制劑,競(jìng)爭(zhēng)性抑制wnt蛋白,與細(xì)胞膜上的卷曲蛋白受體結(jié)合,在許多疾病中研究廣泛已有研究顯示其與2型糖尿病發(fā)展有關(guān)[9]。吳勝元等[10]研究發(fā)現(xiàn),DN患者血清中SFRP4水平明顯升高,而當(dāng)患者服用芪地補(bǔ)腎方治療改善腎功能后,血清SFRP4水平顯著降低,提示SFPR4是腎臟損傷的標(biāo)志物。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,DN組血清SFRP4表達(dá)水平明顯升高,這一結(jié)果與吳勝元等[10]研究基本一致,提示SFRP4可能參與DN的發(fā)生發(fā)展。本研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)中重度DN組患者血清中PTX3、SFRP4水平均顯著高于輕度組,中、晚期組患者血清PTX3、SFRP4水平高于早期組,且晚期組高于中期組,提示PTX3水平具有評(píng)估DN患者病情嚴(yán)重程度及發(fā)展進(jìn)程的潛力,推測(cè)SFRP-4可通過抑制Wnt信號(hào)通路導(dǎo)致機(jī)體胰島素抵抗,并促進(jìn)高糖環(huán)境下腎組織纖維化進(jìn)程,加重腎小球硬化病變和腎組織炎癥反應(yīng),促進(jìn)DN發(fā)生。且本研究ROC曲線分析顯示,SFRP4診斷DN的AUC為0.849,提示SFRP4可以作為預(yù)測(cè)DN的指標(biāo)。

NGAL最初在中性粒細(xì)胞中發(fā)現(xiàn),近年來研究發(fā)現(xiàn)其在肝臟、腎臟上皮細(xì)胞以及心肌細(xì)胞等中亦有表達(dá)[11]。與健康人群相比,DN患者尿液和血液中NGAL水平均顯著增加,而且疾病嚴(yán)重程度越高,尿液和血液中NGAL表達(dá)水平亦隨之增加,血和尿中NGAL水平與尿蛋白含量呈正相關(guān)[12]。因此,其在DN診斷中的價(jià)值受到人們廣泛關(guān)注,測(cè)定尿液中NGAL水平可能有助于臨床醫(yī)生準(zhǔn)確診斷早期DN。本研究結(jié)果顯示,DN組尿液中NGAL水平均明顯高于對(duì)照組,提示NGAL與DN的發(fā)生密切相關(guān)。另外,本研究發(fā)現(xiàn)輕度DN組患者尿液中NGAL水平明顯低于中重度DN組,且中期組尿NGAL水平高于早期組,晚期組尿液中NGAL水平高于中期組,提示NGAL水平可反應(yīng)疾病嚴(yán)重程度和腎功能損傷程度,推測(cè)NGAL水平升高可能會(huì)導(dǎo)致糖尿病患者出現(xiàn)急性腎小管損傷,進(jìn)而增加DN的發(fā)生率。另外,本研究ROC曲線分析顯示尿NGAL診斷DN的AUC為0.923,提示尿NGAL對(duì)DN具有一定的診斷價(jià)值。本研究ROC曲線進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),血清PTX3、SFRP4和尿NGAL三者聯(lián)合診斷DN的AUC為0.985,其診斷價(jià)值大于單一診斷,且具有更高的敏感度,提示三者聯(lián)合對(duì)DN的診斷價(jià)值高于單一診斷,檢測(cè)三者水平對(duì)DN的發(fā)生及患者病情發(fā)展評(píng)估具有較高的臨床價(jià)值。

綜上所述,血清PTX3、SFRP4水平以及尿液NGAL水平與DN患者嚴(yán)重程度相關(guān),可有效區(qū)分DN輕重程度以及腎臟損傷分期,對(duì)DN臨床診斷及治療具有重要的指導(dǎo)意義,而且三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)DN診斷的效能更高。但是,本研究未深入闡明PTX3、SFRP4以及NGAL在DN發(fā)生發(fā)展過程中的病理機(jī)制,后期將增加樣本量進(jìn)行多中心動(dòng)態(tài)研究并通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探究三者在DN發(fā)生發(fā)展過程中的病理機(jī)制,為三者作為診斷DN的標(biāo)志物提供更充分的臨床依據(jù)。