韓悅殷，劉夢遠，代華平△，王 辰

（1中國醫(yī)學科學院，北京協(xié)和醫(yī)學院，北京 100730；2中日友好醫(yī)院呼吸中心呼吸與危重癥醫(yī)學科，國家呼吸醫(yī)學中心，國家呼吸臨床研究中心，中國醫(yī)學科學院呼吸病學研究院，北京 100029）

結(jié)節(jié)病（sarcoidosis）是以非干酪樣壞死性上皮樣肉芽腫為病理特征的系統(tǒng)性肉芽腫性疾病，以肺和胸內(nèi)淋巴結(jié)受累最為常見。肉芽腫病變分為中心區(qū)和周邊區(qū)兩部分，中心區(qū)由淋巴細胞包繞上皮樣細胞或多核巨細胞而成；周邊區(qū)由淋巴細胞、單核細胞和成纖維細胞組成［1］。結(jié)節(jié)病的病因和發(fā)病機制至今尚未被闡明，其臨床表現(xiàn)異質(zhì)性大，疾病進程難以預測。目前認為，結(jié)節(jié)病的發(fā)生是由于遺傳易感者受到特定的抗原刺激，巨噬細胞或樹突狀細胞識別、提呈抗原，引起免疫應答過度激活，其中的免疫病理機制包括巨噬細胞功能改變、輔助性T 細胞1（T helper 1 cells，Th1）免疫反應過度激活、Th17/調(diào)節(jié)性T細胞（regulatory T cells，Treg）失衡等［2-3］。動物模型作為研究人類疾病的重要手段，能模擬疾病的發(fā)生發(fā)展，有助于闡明疾病的病因和發(fā)病機制。本研究著重就結(jié)節(jié)病動物模型的構(gòu)建背景、構(gòu)建方法及近年來相關(guān)研究概況作一介紹。

1 痤瘡丙酸桿菌（Propionibacterium acnes，P. acnes）

1.1P.acnes與結(jié)節(jié)病的臨床聯(lián)系P.acnes是寄生于皮膚與黏膜的一種革蘭陽性無莢膜厭氧菌，可作為機會致病菌引起內(nèi)源性感染。日本學者Ishige等［4］對來自結(jié)節(jié)病、結(jié)核和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者的淋巴結(jié)進行P.acnes16S核糖體RNA基因測序，發(fā)現(xiàn)結(jié)節(jié)病患者淋巴結(jié)中P.acnes豐度遠高于非結(jié)節(jié)病患者，提示P.acnes可能與結(jié)節(jié)病的發(fā)生相關(guān)。此外，P.acnes在結(jié)節(jié)病患者的肺、心臟、眼和皮膚的檢出頻率均高于非結(jié)節(jié)病患者［5-7］。Negi 等［8］通過電鏡和P.acnes特異性抗原染色，發(fā)現(xiàn)結(jié)節(jié)病患者肺組織肉芽腫內(nèi)含有缺乏細胞壁的Hamazaki-Wesenberg小體（HW 小體），且其P.acnes特異性抗原染色呈陽性，由此推測HW 小體是由細胞壁缺陷的P.acnes所形成。關(guān)于P.acnes的研究多來自日本，而中國與歐洲的研究也有相關(guān)報道：與非結(jié)節(jié)病患者相比，結(jié)節(jié)病患者的淋巴結(jié)內(nèi)P.acnes豐度升高［9-10］；中國學者Zhou 等［11］分析65 例結(jié)節(jié)病和95 例非結(jié)節(jié)?。ńY(jié)核、肺癌和非特異性淋巴腺炎）患者淋巴結(jié)內(nèi)P.acnes16S 核糖體RNA 拷貝數(shù)，以50.5 拷貝/毫升作為臨界值進行結(jié)節(jié)病的診斷，其敏感度為73.8%，特異度為92.6%，曲線下面積為84.3%。這些研究結(jié)果提示P.acnes可能與結(jié)節(jié)病的發(fā)生相關(guān)。

1.2P.acnes動物模型及相關(guān)研究 McCaskill等［12］預先對C57BL/6 小鼠腹腔注射滅活P.acnes使其致敏，第14天予滅活P.acnes氣管注射，于第21天誘導出沿支氣管血管束分布的肉芽腫模型。肉芽腫以CD68+細胞為核心，周邊CD4+T 細胞和B 細胞散在分布。此模型被多個研究者所采用［13-15］，后由Jiang等［14］改進，在預先腹腔注射使小鼠致敏后，分別于第14 和28 天氣管注射滅活P.acnes，成功誘導出肉芽腫后繼發(fā)纖維化的模型。研究結(jié)果顯示，在重復氣管注射滅活P.acnes后，小鼠肺部膠原沉積增加，I、III 型膠原蛋白表達升高，肺組織和支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中轉(zhuǎn)化生長因子β1 表達上調(diào)，提示肉芽腫進一步發(fā)展形成纖維化可能是持續(xù)的P.acnes刺激所致。經(jīng)滅活P.acnes刺激的小鼠肉芽腫模型具備部分結(jié)節(jié)病的特征，如早期肺組織血管緊張素轉(zhuǎn)化酶水平升高［12］，干擾素γ（interferon-γ，IFN-γ）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等Th1 細胞因子上調(diào)［12，14］，BALF中炎癥細胞計數(shù)增加［12，14］，以及外周血和BALF 中Th17/Treg 比值上調(diào)［15］等。此外，姜丁源［16］以同樣方法對白細胞介素17A（interleukin-17A，IL-17A）基因敲除小鼠進行滅活P.acnes刺激，但并沒有觀察到肉芽腫，提示在肉芽腫的形成過程中，IL-17A 是必不可少的關(guān)鍵因子。這個發(fā)現(xiàn)在Song等［15］的研究中也得到驗證，盡管兩者構(gòu)建模型的方法略有不同——后者預先腹腔注射使小鼠致敏后，分別于第14、28 和42 天氣管注射滅活P.acnes。Werner 等［17］從結(jié)節(jié)病患者淋巴結(jié)中分離出具有活性的P.acnes，隨后在小鼠中予以單次氣管注射，9 d 后誘導出肉芽腫模型。隨后，該團隊分別敲除髓樣分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）和細胞色素b-245 β 鏈（cytochrome b-245 beta chain，CybB）基因，以同樣方法進行P.acnes刺激，發(fā)現(xiàn)在兩種基因敲除小鼠肺中均誘導出比野生型（wild-type，WT）小鼠更嚴重的肉芽腫炎癥。與WT小鼠相比，MyD88基因敲除小鼠肺組織C-X-C 基序趨化因子配體1（C-X-C motif chemokine ligand 1，CXCL1）、CXCL2 和IL-1α 表達減少，CybB基因敲除小鼠肉芽腫內(nèi)巨噬細胞中有更多的P.acnes殘留，提示肉芽腫的發(fā)生可能是MyD88通路介導的促炎信號通路缺陷，或CybB 通路產(chǎn)生活性氧減少而造成細菌清除能力受損所致。

此外，部分研究者采用滅活P.acnes皮下注射致敏，再予靜脈注射滅活P.acnes激發(fā)免疫應答的方法制作肉芽腫模型。Ichiyasu 等［18］預先以滅活P.acnes加入弗氏不完全佐劑（incomplete Freund's adjuvant，IFA）進行皮下注射，再經(jīng)靜脈注射滅活P.acnes，在家兔中成功誘導出以上皮樣巨噬細胞為中心的肺部肉芽腫模型。Kishi 等［19］以相同的方式制作小鼠模型，但結(jié)果顯示肉芽腫病變多數(shù)在肝臟出現(xiàn)，而肺部極少，提示相對于小鼠而言，家兔對滅活P.acnes經(jīng)靜脈途徑誘導的肺部免疫應答可能更為強烈［20］。同時，他們預先將經(jīng)滅活P.acnes體外誘導成熟的樹突狀細胞與滅活P.acnes混合后進行皮下注射，再將上述混合物靜脈注射入小鼠體內(nèi)，結(jié)果表明相對于直接注射滅活P.acnes，此方法誘導的肺部肉芽腫數(shù)量增多、直徑增大，且出現(xiàn)多核巨細胞，表明樹突狀細胞是啟動肉芽腫細胞免疫的關(guān)鍵免疫細胞。

2 分枝桿菌

2.1 分枝桿菌與結(jié)節(jié)病的臨床聯(lián)系 Esteves 等［21］采用薈萃分析發(fā)現(xiàn)分枝桿菌［包含結(jié)核分枝桿菌（Mycobacteriumtuberculosis，MTB）和非結(jié)核分枝桿菌］和P.acnes都與結(jié)節(jié)病患病風險相關(guān)，比值比分別為6.8 和18.8，提示分枝桿菌也可能是結(jié)節(jié)病的潛在病原之一。曾有研究者在結(jié)節(jié)病患者的肺和淋巴結(jié)中檢測到分枝桿菌DNA［22-23］。分枝桿菌特異性抗原，如超氧化物歧化酶A（superoxide dismutase A，sodA）、6 kD 早期分泌性抗原靶蛋白（early secreted antigenic target 6-kD protein，ESAT-6）、過氧化氫酶-過氧化物酶（catalase-peroxidase，KatG）等，可以被結(jié)節(jié)病患者外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）和BALF 中的T 細胞識別并引起Th1型免疫反應［24-25］。Chen等［25］發(fā)現(xiàn)，相對于已接受治療或處于非活動期的結(jié)節(jié)病患者，未經(jīng)治療并且處于活動期的患者BALF 中的T 細胞經(jīng)分枝桿菌抗原刺激誘發(fā)的Th1 型免疫反應更加劇烈，提示這些對分枝桿菌敏感的T 細胞可能與疾病進展相關(guān)。Drake 等［26］進行了一項隨機雙盲安慰劑對照的多中心臨床試驗（CLEAR試驗）以評估抗結(jié)核藥物對結(jié)節(jié)病的療效。該研究招募了97名患者，其中49名患者接受CLEAR 方案［前8 周左氧氟沙星500 mg/d，乙胺丁醇1 200 mg/d，阿奇霉素250 mg/d 和利福平600 mg/d（或利福丁300 mg/d），后8 周根據(jù)個人耐受度服用上述4 種藥物中的2 種］，48 名患者接受安慰劑。結(jié)果顯示，抗結(jié)核藥物治療除了減輕PBMCs 受ESAT-6 刺激而誘發(fā)的免疫反應外，對用力肺活量、6 min步行距離、圣喬治呼吸問卷評分等指標均無明顯改善。盡管出現(xiàn)此陰性結(jié)果的原因可能是分枝桿菌并非結(jié)節(jié)病的病因的假設(shè)所引起，但研究設(shè)計中的方法缺陷也提供了可能的解釋，如納入患者處于疾病穩(wěn)定期、服藥時間不足、結(jié)局指標不敏感等?？傊?，目前的研究結(jié)果提示分枝桿菌在結(jié)節(jié)病的發(fā)病中可能起到一定的作用，但證據(jù)并不十分充足。

2.2 分枝桿菌動物模型及相關(guān)研究 目前多數(shù)研究采用MTB來源的抗原進行結(jié)節(jié)病樣動物模型的構(gòu)建。MTB直接感染動物被用于構(gòu)建結(jié)核病模型［27-28］，而單純MTB抗原可以用來制作結(jié)節(jié)病樣非壞死性上皮樣肉芽腫模型。Swaisgood 等［29］預先以20 μg sodA加入IFA 中，通過皮下注射使小鼠致敏，2 周后將sodA 與瓊脂糖珠偶聯(lián)并經(jīng)靜脈注射激發(fā)免疫應答。該實驗的原理是瓊脂糖珠和抗原偶聯(lián)可以減緩抗原的降解，經(jīng)靜脈流經(jīng)肺部毛細血管網(wǎng)時，由于瓊脂糖珠不能通過毛細血管基底膜，因而形成微小栓塞駐留于肺間質(zhì)中，其偶聯(lián)的抗原得以持續(xù)激活肺部免疫應答［30］。該實驗結(jié)果顯示，小鼠肺內(nèi)巨噬細胞圍繞瓊脂糖珠聚集形成肉芽腫結(jié)構(gòu)。肉芽腫以巨噬細胞為核心，CD4+T 細胞和B 細胞散在分布，且存在少許多核巨細胞；BALF 中IL-2 和IFN-γ 表達升高，IL-4和IL-5 水平無變化，呈Th1 型免疫反應。此外，路聰哲［30］采用與Swaisgood 等［29］相似的造模方法（50 μg sodA，其余相同）構(gòu)建小鼠模型，結(jié)果顯示sodA 能夠引起Th17/Treg 失衡及相關(guān)細胞因子IL-6、IL-17 表達升高。Zhang 等［31］也采用與前者等相似的造模方法（20 μg sodA，其余相同），7周后仍然能觀察到散在的肉芽腫。此時肉芽腫由上皮樣細胞構(gòu)成，周圍散在分布淋巴細胞和漿細胞；BALF 內(nèi)CD4/CD8 比值升高；淋巴結(jié)中CD4+IFN-γ+T細胞比例升高而CD4+IL-4+T 細胞比例不變，符合Th1 型免疫反應。此外，Gon?ales 等［32］以同樣的方式（20 μg sodA）在正五聚蛋白3（pentraxin 3，PTX3）基因敲除小鼠中進行sodA的刺激，結(jié)果表明巨噬細胞中PTX3的缺失能夠引起C5a介導補體通路的異常激活，從而促進巨噬細胞代謝重編程，導致其增生、聚集。

Perez 等［33］將海藻糖6，6'-二霉菌酸酯（trehalose 6，6'-dimycolate，TDM）與礦物油VR6 混合后靜脈注射入小鼠體內(nèi)，于5 d 后誘導出肉芽腫炎癥，于14 d后消退。該模型肺組織TNF-α、IL-1β 和IL-6 表達升高，而IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5、L-10 等Th1 和Th2 型細胞因子水平無變化。結(jié)合結(jié)節(jié)病患者肺泡巨噬細胞中TNF-α、IL-1β 和IL-6 表達升高這一研究報道［34］，上述結(jié)果提示該模型誘導的肉芽腫炎癥可能處于極早期的巨噬細胞免疫應答階段，后續(xù)的細胞免疫應答還未激活。Huppertz 等［35］將TDM 加入IFA 中靜脈注射，1周后誘導出以巨噬細胞為核心的小鼠肺肉芽腫模型。結(jié)果顯示肉芽腫內(nèi)巨噬細胞高表達IL-1β；同時該研究在結(jié)節(jié)病患者肉芽腫內(nèi)也發(fā)現(xiàn)IL-1β 和胱天蛋白酶1（caspase-1）表達升高。已知核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3，NLRP3）炎癥小體通過激活caspase-1 促進IL-1β 的成熟和分泌［36］。該研究團隊在NLRP3-/-小鼠（NLRP3 表達減少）和mir-223-/-小鼠（NLRP3 表達升高）中進行上述TDM 靜脈注射，結(jié)果表明前者肉芽腫數(shù)量減少而后者數(shù)量增多，提示NLRP3/IL-1β 信號通路活性上調(diào)能促進結(jié)節(jié)病肉芽腫的發(fā)生。

3 外源性粒子

3.1 外源性粒子與結(jié)節(jié)病的臨床聯(lián)系 Beijer 等［37］的研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)節(jié)病患者PBMCs 經(jīng)金屬（鋁、鈹、鋯）或硅刺激后淋巴細胞增殖實驗反應增強。淋巴細胞增殖試驗和記憶淋巴細胞免疫刺激試驗（memory lymphocyte immuno-stimulation assay，MELISA）用于評估患者對抗原的超敏反應［38-39］。Fireman 等［40］納入13 例肺活檢確診為非壞死性肉芽腫患者（11 例結(jié)節(jié)病，2例慢性鈹疾?。┻M行MELISA。結(jié)果顯示9/13患者對至少一種金屬（包括鎳、鈦、鉻、鈹?shù)龋┑腗ELISA試驗呈陽性反應。同時，F(xiàn)ireman 等［41］利用能量色散X射線譜對患者病理切片進行金屬成分分析，發(fā)現(xiàn)在12/13 患者的肉芽腫內(nèi)識別出至少一種金屬的存在。這些結(jié)果均提示肉芽腫的出現(xiàn)可能與環(huán)境暴露相關(guān)。一項針對消防員的研究結(jié)果指出，與醫(yī)務工作者和歷史對照相比，消防員結(jié)節(jié)病平均年發(fā)病率和點患病率升高。此外，美國911 事件發(fā)生后，環(huán)境中可吸入顆粒物和環(huán)境污染物含量增多，Izbicki 等［42］發(fā)現(xiàn)，當?shù)叵绬T結(jié)節(jié)病年發(fā)病率與往年相比顯著升高，同樣提示環(huán)境暴露在結(jié)節(jié)病發(fā)病中的重要作用。

3.2 外源性粒子動物模型及相關(guān)研究 多壁碳納米管（multi-walled carbon nanotube，MWCNT）由燃料燃燒而成，廣泛存在于室內(nèi)和室外環(huán)境中，是空氣中粒徑小于2.5 μm 顆粒物（PM2.5）的組成部分［43］。Huizar 等［44］對小鼠進行氣管注射MWCNT，病理結(jié)果顯示肺部出現(xiàn)大量MWCNT 沉積，沉積物旁形成以巨噬細胞和CD3+T 細胞為主的肉芽腫；同時發(fā)現(xiàn)肺組織TNF-α、IL-18 等Th1 型細胞因子和C-C 基序趨化因子配體7（C-C motif chemokine ligand，CCL7）、IL-10、IL-13等Th2型細胞因子表達增加，呈現(xiàn)混合T淋巴反應。Mohan 等［45］收集MWCNT 模型小鼠肺泡巨噬細胞和結(jié)節(jié)病患者BALF細胞，分別以健康小鼠和健康志愿者為對照進行基因表達差異性分析，結(jié)果表明在MWCNT 模型小鼠及結(jié)節(jié)病患者中均發(fā)現(xiàn)適應性免疫通路、T 細胞信號轉(zhuǎn)導通路、IL-12/IL-17信號轉(zhuǎn)導通路和氧化磷酸化通路活性上調(diào)，提示MWCNT 模型小鼠與結(jié)節(jié)病患者具有相似的免疫特征。Mular 等［46］對小鼠進行MWCNT 和ESAT-6 氣管注射。結(jié)果顯示，相比于單獨氣管注射MWCNT，同時將MWCNT和ESAT-6氣管注射入小鼠能誘導出更加嚴重的肺部肉芽腫炎癥；且小鼠肺肉芽腫內(nèi)纖連蛋白1 表達增加，出現(xiàn)膠原纖維沉積；BALF 內(nèi)骨橋蛋白、CCL2、基質(zhì)金屬蛋白酶12 等促纖維化因子表達上調(diào)。該實驗結(jié)果佐證了結(jié)節(jié)病可能是由多個病原引起的觀點。此外，先前研究發(fā)現(xiàn)結(jié)節(jié)病患者的肺泡巨噬細胞中過氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferator activated receptor-γ，PPARγ）表達減弱［47］，因此該研究團隊構(gòu)建了條件性巨噬細胞PPAR-γ基因敲除模型，隨后以相同方法在PPAR-γ基因敲除小鼠中進行MWCNT 和ESAT-6 氣管注射。結(jié)果表明PPAR-γ缺乏能夠促進ESAT-6 潴留，增加巨噬細胞中唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素F（sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin F，Siglec-F）的表達，并促使IL-13、血小板源性生長因子A、轉(zhuǎn)化生長因子β 等促纖維化因子表達上調(diào)，提示PPAR-γ在結(jié)節(jié)病纖維化進展中的重要作用。

4 轉(zhuǎn)基因動物

Linke 等［48］在小鼠髓系來源細胞中條件性敲除結(jié)節(jié)性硬化復合癥2（tuberous sclerosis complex 2，Tsc2）基因，激活巨噬細胞中的哺乳動物雷帕霉素靶蛋白復合物1（mammalian target of rapamycin complex 1，mTORC1）通路，導致肺、淋巴結(jié)、肝中巨噬細胞肥大、增生和聚集。這些巨噬細胞表現(xiàn)出M2型極化的特點，其高表達半乳糖凝集素3（galectin 3）、幾丁質(zhì)酶樣蛋白3（chitinase-like protein 3）等M2 型極化因子，低表達M1 型極化因子——誘導型一氧化氮合酶。將Tsc2基因敲除小鼠與WT 小鼠來源的巨噬細胞進行轉(zhuǎn)錄組分析，發(fā)現(xiàn)E2F 轉(zhuǎn)錄因子靶基因集在Tsc2基因敲除小鼠中高度富集。細胞周期蛋白依賴性激酶4（cyclin-dependent kinase 4，CDK4）能通過激活E2F 促使細胞周期由G1期向S 期轉(zhuǎn)變［49］。該研究進一步發(fā)現(xiàn)Tsc2/mTORC1 通路通過激活CDK4 促進代謝重編程，同時該通路的異常激活能夠抑制核因子κB 信號通路以及減緩細胞凋亡，進而導致肉芽腫的發(fā)生。該研究隨后在結(jié)節(jié)病患者中進行驗證，結(jié)果顯示結(jié)節(jié)病患者肉芽腫內(nèi)巨噬細胞高表達p-S6（mTORC1 激活標志）和Ki-67；同時分析一個納入自限性和進展性結(jié)節(jié)病的肺組織數(shù)據(jù)集，結(jié)果表明進展性結(jié)節(jié)病肺組織中mTORC1 通路、E2F 通路及糖酵解通路活性上調(diào)，提示巨噬細胞中Tsc2/mTORC1信號通路異常激活促進肉芽腫的發(fā)生發(fā)展。

5 小結(jié)和展望

現(xiàn)有的動物模型是基于結(jié)節(jié)病可能的病因而構(gòu)建的，但由于病因和發(fā)病機制不明，導致目前尚沒有一個公認的結(jié)節(jié)病動物模型。在臨床上，結(jié)節(jié)病的診斷需綜合臨床、影像和病理學資料進行判斷，幾乎所有結(jié)節(jié)病（除了L?fgren 綜合征）的確診均需提供病變區(qū)域非干酪樣壞死性上皮樣細胞肉芽腫的病理結(jié)果。因此病理觀察到肉芽腫結(jié)構(gòu)是目前評價結(jié)節(jié)病模型構(gòu)建是否成功的金標準。

由于構(gòu)建模型方法不完全一致，不同研究團隊構(gòu)建的動物模型組織學和免疫學特點不盡相同。（1）在組織學上，sodA誘導的肉芽腫內(nèi)可見多核巨細胞，而單純P.acnes誘導的肉芽腫內(nèi)難以見到多核巨細胞，將誘導成熟的樹突狀細胞與滅活P.acnes混合后注射，方看到多核巨細胞的形成；MWCNT 誘導的肉芽腫內(nèi)許多巨噬細胞形態(tài)為紡錘形，呈“漩渦樣”生長；Tsc2基因敲除小鼠肉芽腫內(nèi)的巨噬細胞胞體增大，胞質(zhì)增多，體現(xiàn)出“過度肥大”的特征。（2）在免疫學上，P.acnes和sodA誘導的動物模型以Th1型免疫反應為主，BALF 內(nèi)淋巴細胞比例增加，體現(xiàn)結(jié)節(jié)病患者以CD4+Th1 型淋巴反應為主的特點；TDM 誘導的小鼠肉芽腫炎癥可能處于極早期的巨噬細胞免疫應答階段；MWCNT 與ESAT-6 同時吸入小鼠模型佐證了結(jié)節(jié)病可能由多個病因引起的觀點；sodA 靜脈注射、重復P.acnes吸入和MWCNT 吸入的小鼠能誘導出持續(xù)時間較長的肉芽腫，其中重復P.acnes吸入小鼠和MWCNT 吸入小鼠模型肉芽腫內(nèi)出現(xiàn)膠原沉積，體現(xiàn)肉芽腫后期進展為纖維化的特征；Tsc2基因敲除小鼠體現(xiàn)了結(jié)節(jié)病出現(xiàn)系統(tǒng)性肉芽腫（肺、淋巴結(jié)、肝、皮膚）的特征?，F(xiàn)有的動物模型均有各自不足之處，如P.acnes誘導需要多次氣管注射，可能增加操作的難度；TDM 誘導的小鼠模型只能引起為期10 d 的肉芽腫炎癥［35］；MWCNT 吸入小鼠模型BALF內(nèi)炎癥細胞計數(shù)和淋巴細胞計數(shù)沒有升高［44，50］，與結(jié)節(jié)病患者的臨床表現(xiàn)不相符等等。

盡管目前的動物模型不能完全復刻結(jié)節(jié)病的特征，但它們?yōu)檠芯拷Y(jié)節(jié)病的發(fā)生發(fā)展提供了許多新思路，如通過P.acnes小鼠模型發(fā)現(xiàn)IL-17A 在結(jié)節(jié)病肉芽腫形成中的重要作用；通過MTB 抗原小鼠模型發(fā)現(xiàn)PTX3缺失能夠促進巨噬細胞增生、聚集，以及發(fā)現(xiàn)NLRP3/IL-1β 通路的異常活化與肉芽腫的形成相關(guān)；通過MWCNT 模型發(fā)現(xiàn)PPAR-γ 在結(jié)節(jié)病纖維化中的作用；通過Tsc2基因敲除小鼠模型發(fā)現(xiàn)巨噬細胞中mTORC1 的激活對肉芽腫的發(fā)生和維持具有重要作用等等。在動物模型的基礎(chǔ)上，結(jié)合臨床樣本進行分析，有望進一步揭示結(jié)節(jié)病的發(fā)病機制。