習(xí)丙文

(中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，江蘇 無錫 214081)

四、黏孢子蟲的基礎(chǔ)生物學(xué)特征

黏孢子蟲大多數(shù)寄生在海淡水魚的組織器官內(nèi)，其在進化上與后生動物中的刺絲胞動物水螅、水母等有較近的親緣關(guān)系。國內(nèi)外報道的黏孢子蟲種類約2 000多種，其中我國報道魚的寄生黏孢子蟲約600多種。黏孢子蟲可以廣泛寄生在魚的體表、鰭、鰓、肌肉、腦及內(nèi)臟器官或神經(jīng)系統(tǒng)等組織器官。部分黏孢子蟲種類可對野生或養(yǎng)殖魚造成嚴(yán)重危害；如國內(nèi)嚴(yán)重危害鯽魚養(yǎng)殖的“喉孢子蟲”(洪湖碘泡蟲)(圖1)、“膚孢子蟲”(武漢單極蟲)，鯉和鏡鯉腸道形成囊腫的吉陶單極蟲以及寄生在鰱腦腔和頭皮的鰱碘泡蟲等。在歐美地區(qū)，腦黏體蟲(Myxobolus cerebralis)寄生造成的虹鱒“旋轉(zhuǎn)病”、角形蟲(Myxobolus cerebralis)引起的鮭鱒腸炎、腸黏體蟲(Enteromyxumspp.)引起的鲆鯛腸炎、球孢蟲(Sphaerosporaspp.)引起的鯉鰾炎等都造成野生或養(yǎng)殖魚嚴(yán)重發(fā)病死亡。

圖1 喉孢子蟲

黏孢子蟲的生活史中存在兩宿主兩發(fā)育階段。自Wolf 等(1984)開創(chuàng)性地研究發(fā)現(xiàn)腦黏體蟲生活史需要經(jīng)歷鮭鱒和正顫蚓兩種替換宿主的體內(nèi)碘泡蟲和三突放射孢子蟲兩個發(fā)育階段后，目前越來越多的黏體蟲如軟孢子蟲綱的鮭苔蘚四囊蟲和黏孢子蟲綱的碘泡蟲、單極蟲、球孢蟲、角形蟲、尾孢蟲、擬尾孢蟲、四極蟲、兩極蟲、楚克拉蟲、霍氏蟲、細(xì)囊蟲等多個類群，被廣泛證實其完整的生活史需要經(jīng)歷兩個交替宿主(無脊椎動物和脊椎動物)。在黏體蟲生活史中，多數(shù)種類的成熟孢子從魚宿主釋放進入水體后，被底棲無脊椎動物宿主(如顫蚓、蘇氏尾鰓蚓等)攝食，在腸上皮細(xì)胞間發(fā)生有性增殖并釋放出放射孢子蟲；放射孢子蟲懸浮在水體中，與魚宿主相遇后再次侵染魚體，通過移行、增殖和細(xì)胞分化，在靶組織或器官生成成熟孢子。通過DNA核酸序列分析，國內(nèi)學(xué)者從池塘底棲蘇氏尾鰓蚓中分別發(fā)現(xiàn)和鑒定出鯽寄生吳李碘泡蟲、培養(yǎng)碘泡蟲、汪氏單極蟲、武漢單極蟲、龜殼單極蟲以及鯉寄生的吉陶單極蟲等重要黏孢子蟲病原在其生活史中所對應(yīng)放射孢子蟲(Xi 等，2015；習(xí)丙文等，2016；Zhao等，2017)。

黏孢子蟲類群的孢子落入水體底部后被寡毛類、多毛類等環(huán)節(jié)動物攝食進入消化道，孢子極囊的極絲伸出，將孢子錨定在宿主腸上皮，孢子殼瓣破裂，釋放出孢質(zhì)侵入腸上皮。孢質(zhì)在宿主腸上皮進行裂體生殖，產(chǎn)生了兩核細(xì)胞期細(xì)胞；兩核細(xì)胞期細(xì)胞經(jīng)歷有絲分裂和減數(shù)分裂，再通過接合生殖形成泛孢子母細(xì)胞；泛孢子母細(xì)胞通過增殖和分化形成殼瓣細(xì)胞、極囊細(xì)胞和孢質(zhì)細(xì)胞，逐漸發(fā)育成為放射孢子蟲。目前報道的黏孢子蟲無脊椎動物宿主有正顫蚓、蘇氏尾鰓蚓、夾雜帶絲蚓、普通仙女蟲等。國內(nèi)發(fā)現(xiàn)報道的放射孢子蟲多數(shù)寄生于蘇氏尾鰓蚓(Wang等，2001；Xi等，2015；Zhao等，2017)。

黏孢子蟲侵入魚體后的發(fā)育過程仍然存在大量認(rèn)知空白。在鮭鱒寄生腦黏體蟲的研究中發(fā)現(xiàn)，放射孢子蟲在識別和侵染魚體的初始階段沒有嚴(yán)格的宿主特異性。放射孢子蟲在魚體黏液所含的核苷肌酐、鳥苷等觸發(fā)因子刺激下，極囊中的極絲射出，將孢體黏附到鰭條、鰓、皮膚或腸道；胞質(zhì)體內(nèi)的阿米巴狀細(xì)胞鉆入上皮細(xì)胞間,開始黏孢子蟲在魚體的前孢子生成階段發(fā)育(Kallert 等，2011)。胞質(zhì)體中的多細(xì)胞團發(fā)生解聚，形成單個原始細(xì)胞；原始細(xì)胞通過內(nèi)分裂和出芽生殖產(chǎn)生多個次級細(xì)胞。這些細(xì)胞具有很強的阿米巴樣運動能力和持續(xù)增殖活力，可以在宿主體內(nèi)存活較長時期，并同時不斷移行侵入內(nèi)部組織；此后，通過血液或神經(jīng)系統(tǒng)等被遷移到靶器官或組織。當(dāng)細(xì)胞移動到靶組織或器官后，進入孢子生成階段；細(xì)胞發(fā)生兩兩聯(lián)合，一個細(xì)胞包裹另一個細(xì)胞形成泛孢子母細(xì)胞；被包裹的內(nèi)細(xì)胞通過分裂生成一定數(shù)目生殖細(xì)胞并分化出成熟孢子所需的殼片、極囊、孢質(zhì)細(xì)胞。

目前研究發(fā)現(xiàn)不同種類黏孢子蟲的細(xì)胞發(fā)育模式總體相似，但在細(xì)胞增殖位點和遷移路徑等方面存在較大差異。如莫氏球孢蟲感染鯉魚后在鰓和表皮最終形成成熟的孢子和孢囊，然而在魚體血液循環(huán)系統(tǒng)經(jīng)常會檢測到大量不斷增殖和處于不同發(fā)育時期的前孢子生成階段細(xì)胞；這些發(fā)育階段的細(xì)胞曾被稱為鯉魚血液中的“UBO”(Holze等，2014；Hartigan等，2016)。腦黏體蟲通過虹鱒的鰓、皮膚、鰭條侵染魚體后，主要通過外周神經(jīng)系統(tǒng)移行到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)軟骨(Eszterbauer 等，2019)；此外研究發(fā)現(xiàn)其在感染早期也存在血液階段，隨時間推移病原在血液中豐度逐漸下降(Sipos等，2018)。角形蟲的成熟孢子多數(shù)出現(xiàn)在虹鱒腸道，但在其膽汁中經(jīng)常能檢測到大量發(fā)育階段的病原體(Alama-Bermejo 等，2019)。

五、黏孢子蟲的傳播途徑

多數(shù)黏孢子蟲感染魚主要是通過環(huán)節(jié)動物宿主水體釋放的放射孢子蟲。然而，在海水寄生腸黏體蟲屬種類中呈現(xiàn)“魚－魚”水平傳播模式，自然水體中發(fā)病魚可以直接感染健康魚。目前研究得知，腸黏體蟲的傳染模式與其寄生在魚腸黏膜層密切相關(guān)。由于被感染魚出現(xiàn)腸炎和脫黏，導(dǎo)致攜帶具感染力的病原滋養(yǎng)體隨腸黏膜排入水中，被健康魚攝食后侵染和定殖在新宿主的腸道。國內(nèi)在鯽感染洪湖碘泡蟲的感染傳播途徑研究中發(fā)現(xiàn)，人工授精、室內(nèi)循環(huán)水孵化、養(yǎng)殖的異育銀鯽幼魚能PCR檢出洪湖碘泡蟲病原陽性，表明黏孢子蟲存在隨魚卵傳播現(xiàn)象(Wang 等，2020；楊坤等，2021)。

六、黏孢子蟲病防治方法

根據(jù)目前黏孢子蟲病的流行病學(xué)、病原生物學(xué)和防控技術(shù)的研究進展，針對養(yǎng)殖魚黏孢子蟲病防治，建議從以下幾個方面開展預(yù)防和控制：①繁育用親本的病原檢測，避免親本將病原帶入苗種場并傳染子代。由于隱性感染的癥狀不明顯，核酸PCR檢測優(yōu)于傳統(tǒng)顯微鏡檢查。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，喉孢子蟲(洪湖碘泡蟲)在國內(nèi)不同地區(qū)鯽魚種群的隱性感染比較普遍，如草金魚、紅鯽、銀鯽等。這也是造成當(dāng)前異育銀喉孢子蟲病在全國各地發(fā)生率高、危害嚴(yán)重的原因。從繁育親本篩選純化著手，建立不攜帶病原親本種群。②用于苗種培育的池塘，由于多年養(yǎng)殖后淤泥較厚，沉積的孢子多并且水蚯蚓類傳染宿主較多，在放苗前必須做好清塘和消毒。習(xí)慣用雞糞等動物糞肥進行苗種入塘前肥水的塘口容易出現(xiàn)水蚯蚓，建議采用有機肥水類產(chǎn)品。③苗種售賣和購買前做好病原檢測，可以降低病原傳播擴散和養(yǎng)殖發(fā)病。建議隨機取20～30 尾苗種到實驗室或檢測機構(gòu)進行檢測。④在黏孢子蟲病流行季節(jié)，在飼料添加牛至香酚有一定的預(yù)防作用。⑤對于暴發(fā)鯽“鰓孢子”和“膚孢子”病的情況，可采用氨基酸碘消毒，內(nèi)服鹽酸氯苯胍和牛至香酚控制死亡；喉孢子和腸道、肝寄生的黏孢子蟲可以采用內(nèi)服鹽酸氯苯胍和牛至香酚控制。暴發(fā)黏孢子蟲病的塘口，在新放苗養(yǎng)殖前最好做好清塘消毒。

(全文完)