羅遠(yuǎn)華,葉秀仙,鐘淮欽,黃敏玲*

(1.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所,福建 福州 350013;2.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究中心,福建 福州 350013;3.福建省特色花卉工程技術(shù)研究中心,福建 福州 350013)

文心蘭(Oncidiumhybridum)又名金蝶蘭、舞女蘭或瘤瓣蘭等,是指蘭科文心蘭屬植物,主要分布于美國(guó)、墨西哥、巴拉圭、秘魯、巴西、牙買(mǎi)加、阿根廷等中南美洲的熱帶和亞熱帶地區(qū)[1]。文心蘭植株輕巧、花色豐富、花姿優(yōu)美、部分品種具香味,適應(yīng)性廣、花期長(zhǎng)、觀(guān)賞與經(jīng)濟(jì)價(jià)值高,在切花、盆花及景觀(guān)等方面應(yīng)用廣泛,與蝴蝶蘭、石斛、大花蕙蘭并列為四大洋蘭,是世界重要的商品花卉。

近年來(lái),文心蘭在福建、廣東、海南、云南、貴州等地得到快速發(fā)展,栽培面積不斷增加。但文心蘭優(yōu)質(zhì)種苗的生產(chǎn)嚴(yán)重滯后,采用傳統(tǒng)的分株方式繁殖種苗時(shí)不僅繁殖系數(shù)低[2],成本高,且種苗參差不齊,產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定等問(wèn)題普遍存在;組培繁育技術(shù)雖相對(duì)完善[3-5],但由于市場(chǎng)化品種的不斷更新,種苗工廠(chǎng)化、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)程度較低,種苗供應(yīng)不足等嚴(yán)重影響了文心蘭產(chǎn)業(yè)規(guī)模的提升。目前,還未見(jiàn)有關(guān)文心蘭組培苗繁育技術(shù)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),為了規(guī)范文心蘭組培苗繁育技術(shù),確保種苗質(zhì)量,提高生產(chǎn)效率,在查閱相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上,對(duì)多年來(lái)不同類(lèi)型品種的組培繁育技術(shù)研究[6-8]進(jìn)行了總結(jié),提出了文心蘭組培苗繁育技術(shù)規(guī)程,并應(yīng)用于生產(chǎn),對(duì)提高優(yōu)質(zhì)種苗自給率,提升文心蘭產(chǎn)業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力等具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

1 組培苗繁育

1.1 母株選擇

符合需求;植株生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害、無(wú)表型病毒特征、具有品種典型性狀。切取外植體前植株提前7～10 d停止?jié)菜?/p>

1.2 外植體選取

植株進(jìn)入盛花期時(shí),宜選用5～10 cm長(zhǎng)的幼嫩花梗,或葉片未展開(kāi)的嫩芽作為外植體。

1.3 外植體消毒

幼嫩花梗取材后,在超凈工作臺(tái)上先用75%(V/V)酒精浸濕的脫脂棉擦拭表面后置入無(wú)菌水中清洗1～2次,取出后剝除幼嫩花梗的苞片,然后置入0.1% HgCl2水溶液中振蕩消毒6～10 min,取出用無(wú)菌水沖洗4～5次,最后用無(wú)菌吸水紙吸干表面水分備用;嫩芽取材后,先用手術(shù)刀剝除外部較大的鞘葉,自來(lái)水沖洗30～60 min,接著在超凈工作臺(tái)上用75%的酒精振蕩浸泡20～30 s,用無(wú)菌水沖洗1～2次后,置入加了1～2滴吐溫-80的0.1% HgCl2水溶液中振蕩消毒6～10 min,無(wú)菌水沖洗3～4次,用手術(shù)刀再次剝除剩余的鞘葉后,再次置入加了1～2滴吐溫-80的0.1% HgCl2水溶液中振蕩消毒3～5 min,無(wú)菌水沖洗4～5次后,用無(wú)菌吸水紙吸干表面水分后備用。

1.4 誘導(dǎo)培養(yǎng)

在超凈工作臺(tái)上,將已消毒的外植體置于接種盤(pán)上,用鑷子和接種刀將幼嫩花梗切割成帶1～2個(gè)節(jié)的花梗切段;或包括生長(zhǎng)點(diǎn)在內(nèi)的0.3～0.5 cm長(zhǎng)的嫩芽莖尖頂端組織,平放接種于事先準(zhǔn)備好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中1/2MS+6-BA(2.0～4.0)mg/L+NAA(0.2～0.4)mg/L+蔗糖25 g/L+瓊脂(6.5～7.0)g/L,pH值5.6～5.8。培養(yǎng)溫度22～26 ℃,光照強(qiáng)度500～1000 lx,光照時(shí)間10～12 h/d。

1.5 增殖培養(yǎng)

誘導(dǎo)培養(yǎng)50～60 d后,成活外植體可誘導(dǎo)出單芽、叢芽或類(lèi)原球莖,將誘導(dǎo)出的材料從外植體上切割下來(lái)進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)。單芽或叢芽進(jìn)行叢芽增殖培養(yǎng),類(lèi)原球莖進(jìn)行類(lèi)原球莖增殖培養(yǎng)。

切除單芽或叢芽基部無(wú)分生能力的組織及已展開(kāi)的葉片后,豎向接種在增殖培養(yǎng)基中1/2MS+花寶1號(hào)1.5 g/L+6-BA(2.0～4.0)mg/L+椰汁100 ml/L+蔗糖(25～30)g/L+瓊脂(6.5～7.0)g/L,pH值5.6～5.8進(jìn)行叢生芽增殖培養(yǎng);選取健壯的類(lèi)原球莖接種在增殖培養(yǎng)基中:1/2MS+花寶1號(hào)1.5 g/L+6-BA(2.0～4.0)mg/L+NAA(0.2～0.4)mg/L+椰汁150 ml/L+蔗糖(25～30)g/L+瓊脂(6.5～7.0)g/L,pH值5.6～5.8進(jìn)行增殖培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度22～26 ℃,光照強(qiáng)度1500～2000 lx,光照時(shí)間12～14 h/d。40～50 d繼代1次,叢芽繼代次數(shù)不宜超過(guò)12次,類(lèi)原球莖不宜超過(guò)10次。隨著繼代增殖次數(shù)的增加,可根據(jù)長(zhǎng)勢(shì)將6-BA濃度降低至1.0～3.0 mg/L,NAA濃度降低至0.1～0.3 mg/L。

1.6 分化培養(yǎng)

選取健壯的類(lèi)原球莖接種在分化培養(yǎng)基中:1/2MS+花寶1號(hào)1.0 g/L+6-BA(0.5～1.0)mg/L+蔗糖(25～30)g/L+瓊脂7.0 g/L,pH值5.6～5.8。培養(yǎng)溫度22～26 ℃,光照強(qiáng)度1500～2000 lx,光照時(shí)間14～16 h/d。分化培養(yǎng)50～60 d后類(lèi)原球莖陸續(xù)發(fā)育成芽苗,分化不完全的類(lèi)原球莖可再次進(jìn)行分化培養(yǎng)。

1.7 生根培養(yǎng)

將葉片展開(kāi)的叢芽苗或類(lèi)原球莖分化出的芽苗(株高≥3.0 cm)切割成單苗,按植株大小、壯弱分級(jí)后,接種于生根培養(yǎng)基中1/2MS+花寶1號(hào)1.0 g/L+NAA(0.1～0.3)mg/L+香蕉泥50 g/L+蔗糖(20～25)g/L+活性炭1.0 g/L+瓊脂7.0 g/L,pH值5.6～5.8。培養(yǎng)溫度為22～26 ℃,光照強(qiáng)度2000～2500 lx,光照時(shí)間14～16 h/d。根據(jù)品種株型與培養(yǎng)容器規(guī)格確定適宜的接種數(shù)量,培養(yǎng)40～60 d后可獲得具有根、莖、葉的完整植株。

1.8 煉苗

當(dāng)生根苗株高≥5.0 cm、葉片≥3片、具2～3條根時(shí),可移出培養(yǎng)室進(jìn)行煉苗。煉苗室無(wú)陽(yáng)光直射,散射光光照強(qiáng)度5000～6000 lx,溫度20～28 ℃,空氣相對(duì)濕度60%～80%,環(huán)境清潔。將培養(yǎng)瓶一字排開(kāi)放置于苗床或煉苗架上,煉苗15～20 d。

1.9 試管苗質(zhì)量

品種純正;生長(zhǎng)健壯,葉片舒展,葉色濃綠,根系粗壯;無(wú)污染;變異率≤5%。參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[9],文心蘭試管苗分級(jí)及標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)表1。

表1 文心蘭試管苗分級(jí)及其標(biāo)準(zhǔn)

2 組培苗移栽

2.1 環(huán)境條件

移栽大棚要求光照均勻,空氣流通,水源清潔;溫度20～28 ℃,空氣相對(duì)濕度 60%～80%,光照強(qiáng)度5000～10000 lx。

2.2 洗苗與消毒

將組培苗從培養(yǎng)容器中小心取出,用清水將粘附在根系上的培養(yǎng)基清洗干凈,并按植株大小進(jìn)行分級(jí),整個(gè)過(guò)程應(yīng)盡可能減少對(duì)植株的機(jī)械損傷。將分級(jí)好的組培苗放置在塑料筐內(nèi),置入800～1000倍多菌靈或百菌清水溶液中消毒3～5 min,取出后放置在移栽大棚育苗床上晾15～20 min后可移栽。

2.3 基質(zhì)

水苔作為移栽基質(zhì),種植前先將水苔放入清水中浸泡24 h,撈出后用清水清洗1～2遍后充分?jǐn)D出水分,用力擠壓水苔至不出水即可。

2.4 移栽

用適量抖松的水苔包裹住組培苗的根部置入口徑5 cm且底部帶孔的白色育苗杯中,要求水苔的用量要適中,組培苗生長(zhǎng)點(diǎn)的位置要露出水苔面,水苔面要低于杯沿0.5～1.0 cm,移栽過(guò)程應(yīng)盡可能減少對(duì)植株的機(jī)械損傷。移栽后放入專(zhuān)用育苗托盤(pán)中,整齊擺放在育苗床上。

2.5 栽培管理

2.5.1 水分管理。移栽后適當(dāng)控水,保持水苔濕潤(rùn)狀態(tài)。水苔將要干透時(shí)及時(shí)澆水,一般早上澆水,澆水時(shí)要澆透,使整個(gè)水苔濕潤(rùn)。

2.5.2 施肥管理。移栽2～3 d后即可噴施葉面肥,下午噴施,葉面濕潤(rùn)不滴水為宜,植株勿帶水過(guò)夜。移栽30 d內(nèi),每3～4 d噴施2000倍水溶性平衡肥(N∶P∶K=20∶20∶20)1次;移栽30 d后每4～5 d噴施1次,濃度提高至1500倍;移栽90 d后每6～7 d噴施1次,濃度提高至1000倍,此階段可在杯中補(bǔ)施緩釋肥(N∶P∶K=14∶14∶14)1次,每杯約0.5～1.0 g。

2.5.3 主要病蟲(chóng)害防治。預(yù)防為主,防治結(jié)合[2、10-11]。每15 d噴灑1次800～1000倍多菌靈、百菌清或甲基托布津等廣譜性殺菌劑預(yù)防病害的發(fā)生,發(fā)現(xiàn)病株時(shí)要及時(shí)隔離;根據(jù)蟲(chóng)害的季節(jié)性發(fā)生,要提前預(yù)防;各種農(nóng)藥要交替使用。文心蘭小苗主要病蟲(chóng)害防治參見(jiàn)表2。

表2 文心蘭小苗主要病蟲(chóng)害防治

2.6 移栽苗質(zhì)量

不同品種的組培苗移栽180～270 d后可達(dá)移栽苗標(biāo)準(zhǔn),要求生長(zhǎng)健壯,葉片舒展,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá);變異率≤5%。參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[9],文心蘭移栽苗分級(jí)及標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)表3。

表3 文心蘭移栽苗分級(jí)及其標(biāo)準(zhǔn)