魏 杰，劉勝宇

（江蘇省徐州市動物疫病預防控制中心，江蘇 徐州 221006）

禽白血?。╝vian leukosisleukemia, AL）是由禽白血病病毒（avian leukosis virus, ALV）引起的禽類多種腫瘤性疾病的統(tǒng)稱[1]。ALV 共分為A～J 10 個亞群，較為常見的外源性亞群是A、B 和J亞群，其中J 亞群是從肉雞分離到的一個亞群，可以感染蛋雞，且發(fā)病率和致病力都比較高。現在所說的禽白血病的防治主要針對的是A、B、J亞群。E 亞群主要為內源性的低致病力或不致病的一類病毒，不可忽視的一點是雖然內源性病毒（主要是E 亞群）大多不具有致病性，但其廣泛存在，并且在該病的檢測和凈化過程中帶來巨大的干擾。該病不僅可導致雞群產蛋和蛋質下降，使其生產性能嚴重降低，而且可引起雞群一定程度的死亡，對養(yǎng)雞業(yè)特別是種雞業(yè)的發(fā)展帶來嚴重影響。

自2021 年以來，飼料成本持續(xù)上漲，肉雞行情持續(xù)低迷，同時全國大部分地區(qū)地方品種商品雞群AL 暴發(fā)現象加劇[2-3]，禽白血病防控形勢愈加嚴峻。徐州地區(qū)由于家禽養(yǎng)殖呈現數量多、品種多、養(yǎng)殖分散的特點，使得凈化和防控AL變得非常困難，由AL 造成死亡及淘汰的直接經濟損失逐年增加，而由ALV 感染后造成的免疫抑制、對疫苗免疫應答能力下降、繼發(fā)感染等間接損失更是無法估量。因此AL 凈化防控技術研究十分必要。經過調查研究，目前已總結出一整套行之有效的防控辦法。

1 采用ELISA 和RT-PCR 相結合的方法，篩選并建立起AL 監(jiān)測診斷的標準方法

利用此方法，對雞場特別是種雞場進行系統(tǒng)的流行病學調查，掌握AL 的發(fā)病及分布規(guī)律，研究AL 生物凈化防控措施，并在部分養(yǎng)雞場進行實驗應用，評價使用效果，進而在周邊地區(qū)推廣，使AL 防控工作更加規(guī)范、有力，促進養(yǎng)禽業(yè)健康、穩(wěn)定、可持續(xù)發(fā)展。

1.1 綜合監(jiān)測技術

以往AL 的防控措施主要集中在對祖代及原種代雞的檢測及凈化上。由于AL 帶毒雞常呈隱性感染，高代次帶毒率相對較低很少暴發(fā)該病，且凈化過程還會對選種造成影響，所以祖代及原種場對該病不重視，造成疫病不斷流行，凈化效果有限。

然而，隨著垂直傳播過程，該病的帶毒率會逐步擴大，危害逐步顯現，對父母代和商品代雞的危害逐步增大，但對父母代和商品代進行凈化卻往往得不償失。

通過對不同代次采取動態(tài)監(jiān)測措施，掌握疫病流行分布規(guī)律，針對該病在不同代次的特點，采用不同的檢疫及凈化措施，實現對該病的有效控制。

1.1.1 原種代及祖代 采用ELISA 方法對P27 抗原及A/B、J 抗體進行流行病學調查。凈化過程參考P27 抗原指標，當其陽性率低于10%時，可淘汰全部陽性雞。當P27 陽性率高于10%時，參考Ab 抗體結果，可保留Ab 抗體陰性者。當ELISA（P27 抗原或抗體）檢測結果小于4%時，采用RT-PCR 方法檢測，淘汰全部陽性雞。

監(jiān)測目的：逐步淘汰AL 陽性雞，使種群不斷得到凈化。當雞群取得相對較高潔凈度時，采用更高靈敏度的RT-PCR 方法進行檢測以達到凈化目的。

1.1.2 父母代 采用ELISA 方法，1 日齡雛雞檢P27 抗原建議淘汰陽性雞，28 日齡檢P27 抗原及A/B、J 抗體，建議分群及淘汰。

監(jiān)測目的：（1）早期淘汰AL 陽性雞，減少凈化成本，降低發(fā)病風險及隱性帶毒所造成的經濟損失（主要包括死亡動物、藥物費用、獸醫(yī)費用、飼料轉換率下降、生產水平下降等）。（2）對上游產品及下游產品的質量評估和反饋以及疾病的預警，監(jiān)督和促進祖代雞群的凈化工作。

1.1.3 商品代 采用ELISA 方法對P27 抗原及A/B、J 抗體進行流行病學調查，了解疾病的發(fā)生和分布規(guī)律。

監(jiān)測目的：用于流行病學調查，掌握疫病的發(fā)展和分布，分析疾病同源性，在高度凈化期可對疫病流行進行監(jiān)控預警。

1.2 血清學與分子生物學結合檢測方法

病毒分離：國際上比較成功的方法是美國喬治亞大學禽病診斷和研究中心采用的對核心群雞全部采血漿接種DF-1 細胞，9 d 后檢測P27 抗原的方法。此方法優(yōu)點是，檢測特異性和檢出率均很高，如嚴格實施4～5 年，就有可能實現基本凈化，此后只需抽樣監(jiān)控，不再檢測。缺點是對實驗室條件要求很高，需要投入的資金、設備和人力較大，這種方法無法在基礎大面積推廣運用。

RT-PCR：此方法具有較高的特異性和靈敏性，能夠鑒別內源性與外源性病毒。但是其成本較高，一般實驗室不具備檢測條件，僅限于小范圍檢測，尚不具備推廣的條件。

酶聯(lián)免疫吸附試驗：采用該方法對ALV-P27抗原進行檢測，當樣本在DF-l 細胞上或者直接用泄殖腔棉拭子樣品檢測出ALV-P27 抗原時，判為ALV 陽性，否則判為陰性，但不能嚴格區(qū)分外源性或內源性，需要結合其他檢測方法。

根據當前動物防疫體系發(fā)展水平，研究一種血清學與分子生物學結合檢測方法。其基本原則是采用ELISA 方法檢測泄殖腔棉拭子及蛋清中P27 抗原，陽性者均全部淘汰。該方法優(yōu)點在于簡便、易操作且成本相對較低，每次可檢測所有個體樣品。但是該方法存在2 個主要缺點：（1）不能區(qū)別內源性E 亞群ALV，將會把感染了內源性E 群但外源性ALV 陰性雞淘汰掉。當陽性率高時，對選種不利，很難被育種專家接受。（2）單靠泄殖腔棉拭子及蛋清中P27 抗原檢測，其靈敏度尚不足以檢測出所有感染雞，只能保持雞群相對較高的潔凈度，但不能完全凈化，檢測和凈化過程需不斷進行。

根據第一種情況，采用P27 抗原與A/B、J抗體檢測相結合的方法。當P27 抗原陽性率較高時，同時檢測血液中A/B 亞型、J 亞型AL 抗體，適當保留P27 抗原陽性AB、J 型AL 抗體陰性雞。根據第二種情況，當雞群處于較高潔凈度時，采用RT-PCR 方法對該病實施后期凈化是適應本地區(qū)實際情況的用于檢測及凈化AL 的可行方法。

2 禽白血病流行病學調查

選取38 個具有代表意義的規(guī)模雞場進行AL流行病學調查，其中36 個場檢出了P27 抗原及ALV-A/B 抗體，調查表明AL 在主要雞群中普遍存在。由于AL 主要是由種雞向下一代垂直傳播，祖代雞場的感染將會直接傳給父母代及商品代雞場，并逐代放大。

目前對AL 沒有可以利用的疫苗和有效的藥物進行防治，所以防控該病主要采取對雞群進行ALV 檢測，淘汰帶毒的種雞，通過不斷凈化以達到純種群的目的。因此對祖代及原種場的凈化是控制該病的關鍵。然而，由于該病常呈隱性感染或發(fā)病不明顯，常常被養(yǎng)殖者所忽視?？刂圃摬∫环矫嫘枰扇〈胧┲贫◤娭菩苑ㄒ?guī)或標準對種禽場進行監(jiān)督凈化；另一方面可以嘗試對商品雛雞進行檢測，以便使養(yǎng)殖者了解商品雛雞帶毒情況，從而督促種禽場不斷凈化雞群以提高商品雛雞質量，最終達到從種禽場控制該病的目的。

3 取得成效

某種禽場通過父母代的檢測及凈化，使其商品代P27 抗原檢出率降低15.33%，經生產性能指標測定，其商品代死亡淘汰率降低1%。

經逐步檢疫和淘汰，某海賽克斯（褐）祖代雞場P27 抗原陽性率下降5.3%，父母代生長期成活率提高1.2%，產蛋期成活率提高1%，商品代生長期成活率提高1.1%，產蛋期成活率提高1%。

4 存在問題及下一步研究方向

（1）根據國內外有關研究的報道，一些禽源性疫苗中可能存在AL 污染，這種新的疾病傳播模式應作進一步研究。

（2）AL 目前尚無有效的治療方法，也無有效的疫苗可供預防[4]，故AL 的防控主要以檢疫凈化種群的方式為主。要從根本上防控AL，應從祖代及原種代著手凈化種群。而目前我國種禽群AL 帶毒情況不一，且調運過程中檢疫存在一定困難，這就造成了子代來源及帶毒情況的復雜性。下一步的工作中，要重點加強祖代及原種代種群的凈化，從根本上防控該病的發(fā)生。

（3）一直以來，防控該病主要以防控垂直傳播為主，卻往往忽視了AL 水平傳播的潛在威脅，未來要重點對家禽的水平傳播模式進行研究。

AL 病毒可引起家禽免疫抑制，嚴重影響疫苗的免疫效果，可造成禽流感等重大動物疫病免疫失敗，從而增加疫病流行率，給養(yǎng)禽業(yè)造成較大威脅的同時，對公共衛(wèi)生亦造成一定影響。對AL 的凈化與防控，可有效降低AL 帶毒及發(fā)病率，對生態(tài)及公共衛(wèi)生意義十分重大。