郭靜, 李曉光, 李明, 李鳳娟, 周宏, 王春光
(遼寧省國(guó)有昌圖縣付家林場(chǎng),遼寧鐵嶺 112517)
樟子松(Pinussylvestnisvar.mongolica)為松科(Pinaceae)松屬(Pinus)喬木,在東北主要分布于我國(guó)大興安嶺和呼倫貝爾草原紅花爾基沙地,生長(zhǎng)快、材質(zhì)好,且抗寒抗旱性能優(yōu)良[1],是我國(guó)北方半干旱風(fēng)沙地區(qū)主要的防風(fēng)固沙林、農(nóng)田、草場(chǎng)防護(hù)林、水土保持林和用材林樹種。其能防風(fēng)固沙,且材質(zhì)優(yōu)良、用途廣泛,成為中國(guó)三北防護(hù)林工程中重要的常綠針葉樹種[2]。
紅松(Pinuskoraiensis)為松科松屬的常綠高大喬木,是第三紀(jì)孑遺樹種。在我國(guó)只分布在小興安嶺到長(zhǎng)白山一帶[3],具有食用、藥用以及工業(yè)用材等重要價(jià)值。紅松早期生長(zhǎng)緩慢,要求立地條件較高。天然紅松保有量較少,人工造林成活率低,生長(zhǎng)緩慢,短期內(nèi)難以見成效,且只有在剛進(jìn)入結(jié)果期時(shí)少量結(jié)實(shí),以后逐年遞減[4]。
樟子松與紅松同為松科松屬,生長(zhǎng)結(jié)構(gòu)和生長(zhǎng)特性近似,具有較強(qiáng)的親和力,以樟子松為砧木、紅松為接穗嫁接成活率較高。而且由于紅松接穗已經(jīng)攜帶母體年齡信息,嫁接后可以促進(jìn)提早結(jié)實(shí),獲得早期效益[5]。
施肥是培育優(yōu)良苗木的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)之一,傳統(tǒng)施肥存在土壤的富營(yíng)養(yǎng)化和土壤板結(jié)等問(wèn)題,同時(shí)基于樹木的養(yǎng)分需求規(guī)律,探究新型綠色施肥方式具有深遠(yuǎn)意義[6]。許多研究表明,在樹木生殖生長(zhǎng)階段進(jìn)行合理的施肥可以提高苗木生長(zhǎng)及代謝水平,有效地改善土壤條件,避免營(yíng)養(yǎng)流失,提高結(jié)實(shí)量[7]。適量增加氮素能增加樹木生物量、提高光合利用效率及促進(jìn)植株滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的累積,增強(qiáng)植株抗旱性;磷肥在一定程度上可以降低植物葉片熱能的耗散,提升光合電子傳遞速率[8]。在施氮肥的同時(shí),適當(dāng)添加磷肥,可以保持土壤中植物可利用資源的平衡,合理的氮磷配比更能促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育、節(jié)省肥料[9]。生物菌肥作為一種新型的生物“肥料”,不僅可以通過(guò)促進(jìn)微生物的生命活動(dòng)進(jìn)而加快植物對(duì)土壤中營(yíng)養(yǎng)元素的吸收利用,還能釋放生長(zhǎng)激素、減少有害微生物的生成,從而促進(jìn)植物生長(zhǎng)[10]。因此,本研究通過(guò)設(shè)置氮肥、磷肥及生物菌肥8個(gè)不同配施處理,以不施肥樹木作為空白對(duì)照,探討氮肥、磷肥及生物菌肥配施對(duì)紅松嫁接樟子松的生長(zhǎng)情況和生理特性的影響,以期為紅松嫁接樟子松的綠色生產(chǎn)和后期豐產(chǎn)栽培制定合理施肥方案提供有效理論依據(jù)與技術(shù)參考。
試驗(yàn)地位于鐵嶺市昌圖縣西北部,付家機(jī)械林場(chǎng)樟子松林木良種基地69林班13小班2004年建立的樟子松1.5代園。地理坐標(biāo)為124°30′E,43°31′10″N。該地區(qū)屬于溫帶半濕潤(rùn)半干旱大陸性季風(fēng)氣候區(qū),年平均氣溫6.3 ℃,年平均降水量400~636 mm,年蒸發(fā)量1 843 mm,年無(wú)霜期為145~155 d,有效積溫3 333.6 ℃。土壤為沙壤土,pH為6~7[11]。該地區(qū)有機(jī)質(zhì)含量低,其中有效磷含量13.8 mg/kg,速效磷含量為3.77 mg/kg。
試驗(yàn)材料以16 a紅松嫁接樟子松為研究對(duì)象。通過(guò)施用不同尿素(含N量>46%)、過(guò)磷酸鈣(含P2O5>12%)、生物菌肥進(jìn)行配施。本試驗(yàn)于2021年6月末進(jìn)行紅松嫁接樟子松施肥試驗(yàn)。
本試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),共設(shè)置了8個(gè)處理組、1個(gè)對(duì)照組(CK)(表1),每個(gè)小區(qū)隨機(jī)選取6棵樹,進(jìn)行3次實(shí)驗(yàn)重復(fù),共162棵樹。施肥方式采用環(huán)狀溝施肥法,在樹冠滴水線外側(cè)稍遠(yuǎn)處挖寬5~10 cm,深度約20 cm。將提前配好的肥料均勻地撒入溝內(nèi)后,回土蓋平,并對(duì)試驗(yàn)植株掛牌標(biāo)記。
表1 紅松嫁接樟子松氮肥、磷肥及生物菌肥配肥設(shè)計(jì)Table 1 Design plan for nitrogen fertilizer, phosphorus fertilizer, and biomicrobial fertilizer blending of Pinus koraiensis grafted with Pinus sylvestris var. mongolica
1.4.1 生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定
施肥前對(duì)紅松嫁接樟子松進(jìn)行生長(zhǎng)量調(diào)查,施肥后于2022年4月進(jìn)行紅松嫁接樟子松各處理生長(zhǎng)量測(cè)定。胸徑采用立木測(cè)定法,用胸徑尺測(cè)量樹木地面向上1.3 m處直徑即可,樹高采用布魯萊測(cè)高器測(cè)定。
1.4.2 生理指標(biāo)測(cè)定
施肥后第二年的7月中旬,每個(gè)處理選取向陽(yáng)面生長(zhǎng)良好的針葉,取樣后將針葉放入冰盒帶回實(shí)驗(yàn)室,用于生理指標(biāo)測(cè)定。葉綠素含量測(cè)定選用丙酮法[11];可溶性糖含量和淀粉含量采用蒽酮比色法測(cè)定[12];可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定;游離脯氨酸含量采用茚三酮法測(cè)定[13];丙二醛含量采用硫代巴比妥酸法測(cè)定[14];過(guò)氧化物酶(POD)活性采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定[15];電導(dǎo)率采用浸泡法測(cè)定。
使用IBM SPSS Statistics 25.0與Microsoft Excel 2010軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理及分析,采用Duncan法對(duì)所測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。
從圖1可以看出:不同施肥處理對(duì)于紅松嫁接樟子松的樹高生長(zhǎng)具有極顯著影響(P<0.01)。各施肥處理紅松胸徑平均增長(zhǎng)量從小到大依次為處理3<處理6<處理9<處理8<處理5<處理7<處理2<處理1<處理4。處理4的胸徑增長(zhǎng)量比CK增加了9.17%,且對(duì)胸徑增長(zhǎng)影響最大。樹高平均增長(zhǎng)量從小到大依次為處理1<處理4<處理3<處理2<處理5<處理7<處理8<處理6<處理9。處理9的樹高增長(zhǎng)量比CK增加了47.90%。施肥對(duì)胸徑和樹高增長(zhǎng)均有較好促進(jìn)作用,處理4能更好地促進(jìn)莖直徑生長(zhǎng),增加胸徑;處理9能夠更好地促進(jìn)根或莖生長(zhǎng),增加樹高。綜合分析,處理9是促進(jìn)生長(zhǎng)的最佳配比施肥方案。
由表2可知,不同氮肥、磷肥、生物菌肥配比施肥對(duì)葉綠素a、葉綠素b和葉綠素總量均具有顯著性影響(P<0.05)。與CK相比,其余8個(gè)處理葉綠素a、葉綠素b和葉綠素總含量大多明顯升高。處理4與處理9的總?cè)~綠素含量均較高,其中處理9水平下葉綠素含量最高達(dá)到1.656 mg/g,是CK(0.852 mg/g)的194.37%,意味著在其生長(zhǎng)期單位時(shí)間內(nèi),較其他處理制造有機(jī)物更多,生物量增長(zhǎng)更快。施肥處理下,葉綠素總含量最低的處理6(0.958 mg/g)仍是CK的112.44%。結(jié)果表明,施肥能顯著提高葉綠素a、葉綠素b和葉綠素總含量,處理9為最佳配比施肥方案。
圖1 不同施肥處理對(duì)紅松嫁接樟子松胸徑、樹高生長(zhǎng)的影響Figure 1 Effects of different fertilization treatments on the growth of Pinus koraiensis grafted withPinus sylvestris var. mongolica at chest diameter and tree height注:不同小寫字母表示相同時(shí)間下不同處理間差異極顯著(P<0.01)。
表2 不同施肥處理對(duì)紅松嫁接樟子松葉綠素含量的影響Table 2 Effect of different fertilization treatments on chlorophyll content of Pinus koraiensis grafted withPinus sylvestris var. mongolica
從表3可以看出:所有處理中可溶性糖含量均高于CK,存在顯著差異(P<0.05)??扇苄蕴呛孔罡呤翘幚?(18.378 mg/g),其次是處理2(7.706 mg/g)和處理7(6.197 mg/g),與CK(3.49 mg/g)的可溶性糖含量相比分別提髙了426.59%、120.80%和77.56%。說(shuō)明施肥能夠使樹體在冬季存儲(chǔ)能量與物質(zhì)。淀粉是植物細(xì)胞生命活動(dòng)的能量來(lái)源。處理9的淀粉含量是CK處理的29.03倍且具有極顯著差異(P<0.01)。從大到小排序?yàn)樘幚?>處理6>處理7>處理8>處理4>處理3>處理5>處理2>處理1。不同施肥處理紅松嫁接樟子松可溶性蛋白含量具有極顯著性差異(P<0.01),可溶性蛋白含量最高為處理9(3.071 mg/g),其次為處理3(2.116 mg/g)和處理5(1.545 mg/g)。較CK(0.253 mg/g)相比分別提高了1 113.83%、736.36%和510.67%。施肥處理下,可溶性蛋白含量最低的處理7(0.303 mg/g)較CK也提高了19.76%。綜合分析,處理9是促進(jìn)樹木體內(nèi)可溶性糖、淀粉與可溶性蛋白含量增長(zhǎng)的最佳配比施肥組合。
表3 不同施肥處理對(duì)紅松嫁接樟子松可溶性糖、淀粉和可溶性蛋白含量Table 3 Soluble sugar, starch and soluble protein contents ofPinus koraiensis grafted with Pinus sylvestris var. mongolicaby different fertilization treatments
由表4可知不同施肥處理下紅松嫁接樟子松的丙二醛含量具有極顯著差異(P<0.01),過(guò)氧化物酶活性及游離脯氨酸具有顯著性差異(P<0.05)。丙二醛含量從大到小排序?yàn)樘幚?>處理7>處理5>處理4>處理8>處理3>處理6>處理2>處理9;過(guò)氧化物酶活性從大到小排序?yàn)樘幚?>處理2>處理7>處理8>處理6>處理3>處理4>處理5>處理1,處理9的過(guò)氧化物酶活性最強(qiáng),為2 157.778,其次為處理2,為2 073.333,活性最低的為CK,為1 023.333。處理9和處理2分別較CK高出110.86%與102.61%。由此可知處理9(N2P2S2)的施配比能夠使紅松嫁接樟子松具有更好的抗逆性。游離脯氨酸含量的變化趨勢(shì)與丙二醛含量相似,從大到小排序?yàn)樘幚?>處理3>處理7>處理8>處理4>處理9>處理6>處理5>處理2,其中游離脯氨酸含量在CK取得最大值88.410 μg/g,在處理2取得最小值18.046 μg/g,CK的游離脯氨酸含量為處理2的4.9倍。相對(duì)電導(dǎo)率的從大到小排序?yàn)樘幚?>處理5>處理8>處理2>處理9>處理6>處理4>處理3>處理7。處理7的細(xì)胞膜透性最小,傷害最低。CK細(xì)胞膜透性最大,傷害最大。由此可見,施肥處理可以降低細(xì)胞膜透性。
表4 不同施肥處理對(duì)紅松嫁接樟子松抗逆性生理指標(biāo)的影響Table 4 Effect of different fertilization treatments on the physiological indexes of stress resistance ofPinus koraiensis grafted with Pinus sylvestris var. mongolica
對(duì)各生理指標(biāo)進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析,如表5所示。結(jié)果表明:葉綠素a濃度與葉綠素b濃度呈極顯著正相關(guān)(r=0.799,P<0.01),葉綠素a濃度與淀粉含量顯著正相關(guān)(r=0.452,P<0.05),葉綠素a與丙二醛含量呈顯著負(fù)相關(guān)(r=0.463,P<0.05),葉綠素a濃度與過(guò)氧化物酶活性呈顯著正相關(guān)(r=0.476,P<0.05)。葉綠素b濃度與葉綠素含量呈極顯著正相關(guān)(r=0.885,P<0.01),葉綠素b濃度與淀粉含量呈極顯著正相關(guān)(r=0.493,P<0.01),葉綠素b含量與過(guò)氧化物酶活性呈顯著正相關(guān)(r=0.426,P<0.05)。葉綠素含量與淀粉含量呈顯著正相關(guān)(r=0.417,P<0.05),葉綠素含量與過(guò)氧化物酶活性呈顯著正相關(guān)(r=0.421,P<0.05)。淀粉含量與過(guò)氧化物酶活性呈顯著正相關(guān)(r=0.447,P<0.05)??扇苄缘鞍缀颗c丙二醛含量呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.428,P<0.05)。丙二醛含量與過(guò)氧化物酶活性呈極顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.497,P<0.01),丙二醛含量與游離脯氨酸呈顯著正相關(guān)(r=0.435,P<0.05)。過(guò)氧化物酶活性與相對(duì)電導(dǎo)率呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.437,P<0.05)。
表5 不同施肥處理對(duì)紅松嫁接樟子松生理指標(biāo)的相關(guān)性分析Table 5 Correlation analysis of different fertilization treatments on physiological indicators ofPinus koraiensis grafted with Pinus sylvestris var. mongolica
配比施肥能顯著促進(jìn)樹木高生長(zhǎng)和徑生長(zhǎng),提高林木抗逆性。姜岳閩[16]研究施肥對(duì)杉木的胸徑、材積生長(zhǎng)都有較好的促進(jìn)作用,而且施肥量越大效果越好,這一結(jié)果與本研究結(jié)論施肥對(duì)胸徑、樹高增長(zhǎng)有較好促進(jìn)作用相一致。在過(guò)去的研究中,樹高和胸徑的關(guān)系被廣泛視為整體生長(zhǎng)特征,而很少有研究探究施肥對(duì)二者之間的影響差異。樹木在生長(zhǎng)過(guò)程中需要合理分配養(yǎng)分和能量來(lái)支持不同部位的生長(zhǎng),不同施肥處理可能導(dǎo)致植物對(duì)養(yǎng)分的分配方式發(fā)生變化。
可能存在處理4情況,施肥后樹木優(yōu)先支持胸徑增長(zhǎng),樹高增幅較少。因此,在施肥處理中需要謹(jǐn)慎權(quán)衡樹高和胸徑的需求,以達(dá)到最佳的生長(zhǎng)效果。
光合作用是植物生長(zhǎng)的基礎(chǔ),葉綠素a是光合作用中最重要的光捕捉分子,調(diào)節(jié)植物對(duì)光能的吸收和利用。葉綠素b主要促進(jìn)光合作用的進(jìn)行,調(diào)節(jié)葉片顏色和光合作用效率,以及保護(hù)葉片原生質(zhì)體不受環(huán)境脅迫的影響。葉綠素是光合作用中將光能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能的關(guān)鍵物質(zhì),其含量高低可以直接影響到植物光合能力的大小[17]。本研究發(fā)現(xiàn)不同施肥處理下紅松嫁接樟子松葉綠素含量光合指標(biāo)參數(shù)均高于不施肥CK,這與鄧家欣等[18]的研究結(jié)果基本一致,適量施用化肥、有機(jī)肥能促進(jìn)植物生長(zhǎng),增大其葉面積,提高葉片葉綠素含量。同時(shí)說(shuō)明適量施肥能增加紅松嫁接樟子松葉綠素含量,有利于改善植株光合性能,促進(jìn)紅松嫁接樟子松干物質(zhì)的積累。張明月等[19]對(duì)羅漢松的研究發(fā)現(xiàn)施肥后葉綠素a、葉綠素b含量均高于對(duì)照;葉綠素a/b比值越大,膜脂過(guò)氧化作用越強(qiáng),品種抗旱性越弱,本實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行施肥處理的比值均顯著高于CK,說(shuō)明合理施肥可以提高植物抗旱性。羅帥[20]對(duì)油茶花的研究結(jié)果表明,施氮磷鉀肥有利于提高葉片葉綠素含量,本研究與以上研究結(jié)果一致。
淀粉和可溶性糖是植物的主要光合產(chǎn)物,其中可溶性糖是淀粉合成的底物。而淀粉可以通過(guò)淀粉水解酶水解為可溶性糖??扇苄蕴遣粌H是植物體內(nèi)主要的能源物質(zhì)和碳源,也是重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)??扇苄蕴呛吭黾佑欣诩?xì)胞通過(guò)提高細(xì)胞質(zhì)的濃度與細(xì)胞內(nèi)的能量供給來(lái)增強(qiáng)葉片的抗寒性。張相鋒等[21]對(duì)植物的耐鹽性研究表明施肥可以使植物體內(nèi)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量顯著升高。葉片中可溶性蛋白在植株的新陳代謝過(guò)程中起重要作用,可溶性蛋白含量可以反映其對(duì)惡劣環(huán)境的抵抗能力和維持自身生命活動(dòng)的穩(wěn)定性;植物體內(nèi)可溶性蛋白含量的提高,可以提高植物的抗寒能力,使其更好地適應(yīng)環(huán)境[22]。過(guò)氧化物酶是植物在逆境條件下酶促防御系統(tǒng)的關(guān)鍵酶之一,在逆境下維持其較高的生物活性,能夠使植物表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗性,同時(shí)能使組織中所含的某些碳水化合物轉(zhuǎn)化成木質(zhì)素,增加木質(zhì)化程度[23]。研究表明過(guò)氧化物酶活性的高低是指示植物抗旱性強(qiáng)弱的重要指標(biāo),適量施肥可降低多種作物的細(xì)胞膜透性,提高葉片中過(guò)氧化物酶的活性[24]。
相對(duì)電導(dǎo)率是常用來(lái)衡量植物抗寒能力強(qiáng)弱的一個(gè)生理指標(biāo),自然環(huán)境氣溫降低時(shí),植物會(huì)通過(guò)調(diào)節(jié)自身各項(xiàng)生理反應(yīng)來(lái)適應(yīng)低溫環(huán)境[25]。張璐等[26]對(duì)文冠果研究結(jié)果表明,植物細(xì)胞的細(xì)胞膜往往會(huì)發(fā)生細(xì)胞膜膜脂組成和滲透性的變化,從而導(dǎo)致電解質(zhì)的滲出。相對(duì)電導(dǎo)率的數(shù)值越大,細(xì)胞膜的透性就越大,從而細(xì)胞內(nèi)部就越不穩(wěn)定。游離脯氨酸是植物體內(nèi)滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)[27]。丙二醛是細(xì)胞受到脅迫后細(xì)胞膜過(guò)氧化作用分解的最終產(chǎn)物,是植物的抗逆性指標(biāo),含量越多說(shuō)明植物受到的活性氧毒害越嚴(yán)重,從而導(dǎo)致植株代謝能力越弱。王瑞等[28]研究表明配比施肥合理時(shí),植物葉片丙二醛含量會(huì)逐漸減少。
生理指標(biāo)的相關(guān)性分析結(jié)果表明:葉綠素a、葉綠素b與葉綠素呈極顯著正相關(guān),同時(shí)葉綠素a、葉綠素b和葉綠素之間的關(guān)系也受氮素水平的影響[29]。葉綠素含量與淀粉含量和過(guò)氧化物酶活性呈顯著正相關(guān),淀粉通過(guò)影響植物的碳代謝和生理狀況進(jìn)而影響葉綠素含量和分布[30]。葉綠素a濃度與可溶性蛋白含量呈極顯著正相關(guān),可溶性蛋白是重要的蛋白質(zhì)儲(chǔ)備,參與植物生理過(guò)程并影響葉綠素含量和分布,而光合作用中葉綠素a參與電子傳遞,水解的電子與可溶性蛋白結(jié)合生成氧化物影響植物代謝[31]。本研究結(jié)果表明施肥對(duì)改善植物體營(yíng)養(yǎng)狀況,促進(jìn)葉綠素合成,提高光合效率具有良好作用,進(jìn)而有利于植物生長(zhǎng)發(fā)育。
過(guò)氧化物酶活性與丙二醛含量呈極顯著負(fù)相關(guān)且與相對(duì)電導(dǎo)率呈顯著負(fù)相關(guān),表明當(dāng)施肥處理后的植株受到脅迫時(shí),植物細(xì)胞膜會(huì)遭到一定程度的破壞,細(xì)胞膜的透性也隨之增大,這就使得電導(dǎo)率就出現(xiàn)不同程度的增大,從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)不同程度地外滲[32]。通過(guò)迅速提高過(guò)氧化物酶活性調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透勢(shì),降低了丙二醛含量,直接保護(hù)了細(xì)胞膜[33]。
本研究表明,適當(dāng)配比施肥能夠使與抗性有關(guān)的可溶性蛋白含量、過(guò)氧化物酶活性等生理生化指標(biāo)顯著提高,而相對(duì)電導(dǎo)率、丙二醛含量下降。這些指標(biāo)的變化意味著總體上可以避免因遭受不良?xì)夂驐l件導(dǎo)致的代謝紊亂對(duì)細(xì)胞和膜造成的傷害,并且在一定程度上提高了抗氧化代謝能力,從而增強(qiáng)樹體抗性。
通過(guò)選取不同濃度氮肥、磷肥及生物菌肥配施,可以顯著促進(jìn)紅松嫁接樟子松的生長(zhǎng),極大地提高果材兼用的質(zhì)量和品質(zhì),提高樹木的抗逆性。研究篩選出N2P2S2處理9(尿素300 g/株,過(guò)磷酸鈣200 g/株,生物菌肥150 g/株)為最佳施肥組合。該配比施肥能顯著提高紅松嫁接樟子松生長(zhǎng)量、可溶性糖、可溶性蛋白、淀粉及葉綠素的含量,降低丙二醛、游離脯氨酸含量,并能夠提升過(guò)氧化物酶活性,從而在一定程度上提高了紅松嫁接樟子松抗氧化代謝能力,從而增強(qiáng)樹體抗性。本研究結(jié)果為紅松嫁接樟子松的綠色生產(chǎn)和后期豐產(chǎn)栽培制定施肥方案提供理論依據(jù)與技術(shù)參考。