孫燕，王俊燕，呂杰

（山東省濰坊市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 山東濰坊 261100）

人類與動(dòng)物之間的和諧發(fā)展是確保人類和自然共同生存的必要條件。動(dòng)物作為地球生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，不僅豐富了人類的生活和心靈世界，也在我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展中發(fā)揮著重要的推動(dòng)力量。然而，在經(jīng)濟(jì)工業(yè)化進(jìn)程的加速下，畜牧業(yè)作為支撐我國(guó)經(jīng)濟(jì)實(shí)力的重要產(chǎn)業(yè)，動(dòng)物的生存環(huán)境遭受了嚴(yán)重破壞。這種破壞不僅導(dǎo)致動(dòng)物免疫系統(tǒng)出現(xiàn)嚴(yán)重問(wèn)題，還使動(dòng)物疫病呈現(xiàn)出復(fù)雜多樣的特點(diǎn)。從簡(jiǎn)單的病毒感染轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾N病毒感染，并伴隨著多種并發(fā)癥的出現(xiàn)，這對(duì)動(dòng)物的生命構(gòu)成了嚴(yán)重威脅，同時(shí)也給我國(guó)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來(lái)了阻礙，甚至威脅到人類的生命安全。為此需要加大對(duì)動(dòng)物疫病的防治。借助現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，如抗體檢測(cè)技術(shù)能夠更好地加強(qiáng)動(dòng)物疫情監(jiān)測(cè)，掌握抗體的消散情況，為后續(xù)階段的疫病防控提供相應(yīng)的支撐。

1 動(dòng)物疫病常見抗體檢測(cè)技術(shù)原理

動(dòng)物疫病抗體檢測(cè)是通過(guò)檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)的特定病原體抗體來(lái)評(píng)估其免疫狀態(tài)和疫病暴露情況。常用的動(dòng)物疫病抗體檢測(cè)技術(shù)包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）、凝集試驗(yàn)（HA）和蛋白微陣列等。

1.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

技術(shù)原理是將待檢測(cè)動(dòng)物血清中的抗體與已知抗原結(jié)合，然后使用酶標(biāo)記的二抗或酶標(biāo)記的抗人或抗動(dòng)物IgG 檢測(cè)復(fù)合物，通過(guò)酶的催化作用產(chǎn)生可測(cè)定的信號(hào)。將抗原涂覆在試驗(yàn)板上，加入待測(cè)血清樣品，如果樣品中存在對(duì)應(yīng)的抗體，則與抗原結(jié)合。然后加入酶標(biāo)記的二抗或酶標(biāo)記的抗人/抗動(dòng)物IgG 進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)添加底物使酶催化反應(yīng)發(fā)生，并測(cè)量生成的顏色或熒光強(qiáng)度來(lái)判斷抗體的存在與否[1]。

1.2 中和試驗(yàn)

該種方法的技術(shù)原理是將待檢測(cè)動(dòng)物血清與病原體進(jìn)行混合，通過(guò)觀察混合物對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物的感染能力來(lái)判斷抗體的中和作用。將病原體與待測(cè)血清混合，如果樣品中存在特定的中和抗體，則可以阻止病原體進(jìn)入細(xì)胞或感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，從而顯示出中和作用。

1.3 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)

補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)的技術(shù)原理將待檢測(cè)動(dòng)物血清與已知抗原結(jié)合，然后加入補(bǔ)體，觀察是否有補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)發(fā)生。操作過(guò)程中將抗原與待測(cè)血清混合，如果樣品中存在對(duì)應(yīng)的抗體，則抗原與抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物。然后添加補(bǔ)體，如果抗原-抗體復(fù)合物存在，補(bǔ)體會(huì)結(jié)合到復(fù)合物上，引發(fā)補(bǔ)體激活反應(yīng)，根據(jù)是否有補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)發(fā)生來(lái)判斷抗體的存在與否。

1.4 凝集試驗(yàn)

凝集試驗(yàn)的原理是將待檢測(cè)動(dòng)物血清與已知抗原結(jié)合，形成凝集反應(yīng)。將抗原與待測(cè)血清混合，如果樣品中存在對(duì)應(yīng)的抗體，則抗原和抗體會(huì)結(jié)合形成凝集反應(yīng)，可通過(guò)觀察凝集的程度來(lái)判斷抗體的存在與否。

1.5 蛋白微陣列

在固相載體上固定多種病原體蛋白抗原，然后與待檢測(cè)血清混合，通過(guò)檢測(cè)血清中特定抗體與抗原的結(jié)合來(lái)判斷抗體的存在與否。將待檢測(cè)血清樣品與蛋白微陣列芯片上的抗原進(jìn)行反應(yīng)，如果樣品中存在特定的抗體，則與相應(yīng)的抗原結(jié)合。然后通過(guò)熒光或其他信號(hào)檢測(cè)技術(shù)來(lái)判斷抗體與抗原的結(jié)合情況。

這些技術(shù)都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)和適用范圍，具體選擇何種技術(shù)取決于目標(biāo)疫病和實(shí)驗(yàn)條件的要求。在實(shí)際操作中，需要根據(jù)具體情況選擇適當(dāng)?shù)目贵w檢測(cè)技術(shù)，并且遵循相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)[2]。

2 動(dòng)物疫病抗體檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用的意義

動(dòng)物疫病抗體檢測(cè)技術(shù)是對(duì)動(dòng)物體內(nèi)感染病原體后產(chǎn)生的抗體進(jìn)行檢測(cè)的一種方法。此技術(shù)在動(dòng)物防疫和疫病控制中具有重要的意義，一方面動(dòng)物疫病抗體檢測(cè)能夠更好地幫助確診疾病。通過(guò)抗體檢測(cè)可以確定動(dòng)物是否患有某種疾病。對(duì)于一些臨床癥狀不明顯或癥狀相似的疾病，抗體檢測(cè)可以幫助我們更快速地確認(rèn)疫病類型，從而采取相應(yīng)的治療和預(yù)防措施。另一方面確定疫病狀況。抗體檢測(cè)可用于確定動(dòng)物群體中病原體的傳播情況和疫病的流行狀況。對(duì)于常見的動(dòng)物疫病，如豬瘟、禽流感等，通過(guò)對(duì)動(dòng)物群體進(jìn)行抗體檢測(cè)，可以及時(shí)防控傳染病，減少病害的發(fā)生和傳播。再一方面檢測(cè)免疫效果。人工免疫是預(yù)防和控制動(dòng)物疫病的重要手段?？贵w檢測(cè)可以評(píng)估動(dòng)物接種疫苗后的免疫效果，有助于制定合理的免疫計(jì)劃，提高動(dòng)物群體的免疫水平。最后一方面監(jiān)測(cè)動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量。肉類、乳制品等動(dòng)物產(chǎn)品是人們?nèi)粘ｏ嬍车闹匾獊?lái)源?？贵w檢測(cè)可以對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品中存在的病原體進(jìn)行檢測(cè)，保證消費(fèi)者的食品安全。

3 抗體檢測(cè)技術(shù)在動(dòng)物疫病防控中的具體應(yīng)用

3.1 評(píng)估疫苗質(zhì)量

首先，疫苗免疫效果評(píng)估?？贵w檢測(cè)可用于評(píng)估疫苗對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生的免疫效果。通過(guò)檢測(cè)動(dòng)物接種疫苗后體內(nèi)產(chǎn)生的特定抗體水平，可以判斷疫苗是否能夠有效誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。這有助于確定疫苗的免疫保護(hù)效果以及接種計(jì)劃和程序的有效性。其次，疫苗批次一致性評(píng)估。針對(duì)同一疫苗的不同批次，抗體檢測(cè)可用于評(píng)估其免疫原性和一致性。通過(guò)檢測(cè)不同批次疫苗接種后動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生的抗體水平，可以判斷不同批次疫苗的免疫效果是否相當(dāng)。這有助于確保不同批次疫苗的質(zhì)量穩(wěn)定性和一致性。再次，疫苗免疫程序監(jiān)測(cè)?？贵w檢測(cè)可用于監(jiān)測(cè)動(dòng)物群體的免疫狀況和疫苗接種覆蓋率。通過(guò)定期檢測(cè)動(dòng)物群體的抗體水平，可以評(píng)估免疫程序的覆蓋范圍和效果。這有助于確定免疫計(jì)劃的有效性，并及時(shí)采取措施來(lái)提高免疫覆蓋率[3]。第四，疫苗效價(jià)測(cè)定。抗體檢測(cè)可用于測(cè)定疫苗的效價(jià)。通過(guò)將不同稀釋倍數(shù)的疫苗接種給動(dòng)物，然后檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生的抗體水平，可以確定疫苗的效價(jià)。這有助于確定疫苗的適當(dāng)用量和接種方式，并確保疫苗在預(yù)期效果上的一致性。最后，疫苗免疫保護(hù)期評(píng)估?？贵w檢測(cè)可用于評(píng)估疫苗提供的免疫保護(hù)期。通過(guò)定期檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)的抗體水平，可以判斷疫苗提供的免疫保護(hù)期是否達(dá)到預(yù)期。這有助于制定合理的免疫接種間隔和重新接種計(jì)劃。

3.2 制定符合本地實(shí)際的免疫接種程序

抗體檢測(cè)可以用于檢測(cè)動(dòng)物血清或體液中的抗體水平，從而確定動(dòng)物是否已經(jīng)接種相關(guān)疫苗或已感染過(guò)相應(yīng)病原體，如果動(dòng)物已經(jīng)具有足夠的免疫力，就不必進(jìn)行疫苗接種。根據(jù)抗體檢測(cè)結(jié)果和疫苗免疫需求，可以制定完善的疫苗免疫接種計(jì)劃。對(duì)于一些特定的免疫接種需要，如免疫策略、計(jì)劃調(diào)整可以根據(jù)抗體檢測(cè)結(jié)果實(shí)時(shí)調(diào)整。抗體檢測(cè)還可以評(píng)估動(dòng)物接種疫苗后的免疫效果，通過(guò)檢測(cè)抗體水平改變來(lái)確定疫苗的免疫效果，以此調(diào)整接種程序和增強(qiáng)免疫效果。疫苗是預(yù)防和控制疾病的重要手段。抗體檢測(cè)可以監(jiān)測(cè)疫苗的效力，從而更新疫苗庫(kù)存，以保證動(dòng)物的免疫狀態(tài)。

3.3 評(píng)估免疫接種效果

抗體檢測(cè)可以檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)特定病原體的抗體水平，進(jìn)而識(shí)別動(dòng)物是否已經(jīng)接種過(guò)對(duì)應(yīng)的疫苗或?qū)υ摬≡w產(chǎn)生了自然免疫力。通常情況下，動(dòng)物接種疫苗后會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，而且該抗體的水平可以反映出免疫效果的好壞。因此，通過(guò)抗體檢測(cè)可以了解疫苗的接種效果以及預(yù)防的范圍、強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間等因素，以評(píng)估疫苗的效果和制定接下來(lái)的免疫策略。在疫苗免疫接種之后隨著時(shí)間的推移，動(dòng)物體內(nèi)的抗體水平會(huì)逐漸下降，如果下降到一定程度，就需要重新接種疫苗。通過(guò)抗體檢測(cè)可以監(jiān)測(cè)動(dòng)物體內(nèi)抗體的水平變化，從而判斷是否需要進(jìn)行重復(fù)免疫。如果抗體檢測(cè)結(jié)果顯示動(dòng)物體內(nèi)的抗體水平不足以提供有效保護(hù)，就需要調(diào)整免疫計(jì)劃。通過(guò)抗體檢測(cè)可以明確動(dòng)物在免疫中產(chǎn)生抗體的能力，以調(diào)整免疫策略并提高免疫效果。

3.4 開展疫病診斷

抗體檢測(cè)技術(shù)在疫病診斷方面有廣泛的應(yīng)用。主要涵蓋了病原體感染診斷、免疫相關(guān)疫病診斷，傳染病流行病學(xué)調(diào)查，疫病監(jiān)測(cè)和篩查?？贵w檢測(cè)可用于確定動(dòng)物是否感染了特定的病原體，如細(xì)菌、病毒或寄生蟲等。通過(guò)檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)特定病原體的抗體水平，可以判斷是否存在病原體感染。這有助于確定病原體感染的類型、程度和感染時(shí)間。另外抗體檢測(cè)還可以用于診斷免疫相關(guān)疫病，如自身免疫疫病和過(guò)敏反應(yīng)等。通過(guò)檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)特定自身抗體或過(guò)敏相關(guān)抗體的水平，可以判斷是否存在免疫相關(guān)疫病。這有助于確定疫病的類型和嚴(yán)重程度。進(jìn)行動(dòng)物傳染病流行病學(xué)調(diào)查期間應(yīng)用抗體檢測(cè)技術(shù)能夠評(píng)估動(dòng)物群體中特定病原體的暴露和感染情況。通過(guò)檢測(cè)群體中的抗體水平，可以評(píng)估疫病的傳播程度、感染率和免疫水平等。這有助于制定合理的預(yù)防和控制策略。最為重要的是抗體檢測(cè)可用于進(jìn)行疫病的監(jiān)測(cè)和篩查，以及早期發(fā)現(xiàn)和控制疫病的傳播。通過(guò)定期檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)的抗體水平，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)潛在的疫病問(wèn)題，并采取相應(yīng)的措施來(lái)防止疫情擴(kuò)散。

4 結(jié)語(yǔ)

總的來(lái)說(shuō)，在畜牧業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的引領(lǐng)下，抗體檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用范圍越來(lái)越廣泛，因此這一技術(shù)的重要性需要得到充分重視。不僅僅是將其作為一種抗體檢疫手段，還應(yīng)該將其融入到動(dòng)物疫病防控的各個(gè)環(huán)節(jié)中，以發(fā)揮其作用和優(yōu)勢(shì)。因此，在推進(jìn)各項(xiàng)工作的過(guò)程中，動(dòng)物疫病防控部門應(yīng)該全面了解抗體檢測(cè)技術(shù)，并注重優(yōu)化應(yīng)用方案，加強(qiáng)宣傳工作，使廣大畜牧獸醫(yī)工作者和養(yǎng)殖戶對(duì)這項(xiàng)技術(shù)有一定的了解。這樣在今后的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過(guò)程中，才能合理地運(yùn)用這種技術(shù)，并結(jié)合動(dòng)物的實(shí)際情況，提高動(dòng)物疫病的防控效果?！?/p>