伊木然江·蘇布哈提，艾尼瓦爾·吾買爾，木塔力甫·艾買提

1 新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥理學(xué)教研室，烏魯木齊 830017；2 新疆醫(yī)科大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室

帕金森?。≒D）是一種慢性進(jìn)行性神經(jīng)退行性疾病，與年齡相關(guān)，可被定義為環(huán)境因素與遺傳易感性相互作用的多因素疾病［1］。多項(xiàng)研究顯示，PD 及其他神經(jīng)退行性疾病與2 型糖尿?。═2DM）之間存在一定程度的相關(guān)性［2］。T2DM 在細(xì)胞代謝、神經(jīng)元活力及神經(jīng)行為等方面對(duì)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生影響，其病理生理機(jī)制包括胰島素抵抗、氧化應(yīng)激、線粒體功能障礙、神經(jīng)炎癥和蛋白質(zhì)折疊異常等，可導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞功能障礙或死亡，從而觸發(fā)PD等神經(jīng)退行性病變［3-4］。二肽激肽酶4（DPP-4）抑制劑是一種新型抗糖尿病藥物，能夠通過(guò)抑制體內(nèi)DPP-4 酶的活性增強(qiáng)腸促胰島素效應(yīng)，進(jìn)而促進(jìn)胰島β 細(xì)胞分泌胰島素和抑制胰島α細(xì)胞分泌胰高血糖素來(lái)達(dá)到降低血糖的目的。目前，DPP-4 抑制劑西格列汀、利格列汀、維格列汀、沙格列汀及阿格列汀等已在我國(guó)上市并列入醫(yī)保藥品目錄［5-6］。管雅文等［7］研究顯示，在原有治療方案基礎(chǔ)上給予T2DM 合并PD 患者利格列汀治療24 周可明顯改善患者的運(yùn)動(dòng)功能?，F(xiàn)有研究大多對(duì)某一個(gè)DPP-4抑制劑對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的保護(hù)作用進(jìn)行探討，而DPP-4抑制劑改善PD 的作用機(jī)制及潛在治療靶點(diǎn)等問(wèn)題尚未明確。2021 年8 月—2023年2月，本研究通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)，初步探討了DPP-4 抑制劑對(duì)PD 的干預(yù)作用及其相關(guān)機(jī)制，以期為DPP-4抑制劑在PD 治療中的應(yīng)用提供新的見(jiàn)解。

1 材料與方法

1.1 DPP-4抑制劑對(duì)PD體外模型的干預(yù)作用觀察

1.1.1 主要材料 神經(jīng)細(xì)胞株P(guān)C-12 購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所細(xì)胞庫(kù)。DMEM高糖培養(yǎng)基、馬血清和特級(jí)胎牛血清均購(gòu)自以色列Biological Industries，胰蛋白酶購(gòu)自美國(guó)Gibco，DMSO 購(gòu)自美國(guó)Sigma，魚(yú)藤酮（ROT）購(gòu)自美國(guó)MedChemExpress，二氧化碳培養(yǎng)箱、生物安全柜及酶標(biāo)儀均購(gòu)自美國(guó)Thermo Fisher Scientific，電熱恒溫水槽購(gòu)自上海一恒，倒置顯微鏡購(gòu)自日本Nikon，低溫高速離心機(jī)購(gòu)自美國(guó)Sigma。

1.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)及分組 PC-12 細(xì)胞置于含10%胎牛血清、5%馬血清、100 U/mL青霉素及100 g/mL鏈霉素的DMEM 高糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期后，以5×103/孔接種到96孔板中，在CO2培養(yǎng)箱（37 ℃、5% CO2、飽和濕度）中常規(guī)培養(yǎng)16～18 h。將細(xì)胞分為對(duì)照組、模型組、模型+西格列汀組、模型+利格列汀組、模型+維格列汀組。

1.1.3 PD 體外模型建立及藥物干預(yù)處理 待細(xì)胞貼壁后，去掉原培養(yǎng)基，除對(duì)照組外各組均使用ROT 建立PD 體外模型。結(jié)合前期預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及參考文獻(xiàn)報(bào)道，選擇0.2 μmol/L 的ROT 作為PD 模型的造模濃度。模型組加入含0.2 μmol/L ROT 的完全培養(yǎng)基，模型+西格列汀組、模型+利格列汀組、模型+維格列汀組同時(shí)加入含0.2 μmol/L 的 ROT 及20 μmol/L 的西格列汀、5 μmol/L 的利格列汀、10 μmol/L的維格列汀含藥培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h，對(duì)照組常規(guī)培養(yǎng)不做任何處理。

1.1.4 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察 去除處理24 h 后的各組細(xì)胞原培養(yǎng)液，用37 ℃提前預(yù)熱的PBS 輕輕沖洗2～3 次，利用倒置顯微鏡觀察各組細(xì)胞間的形態(tài)差異，并拍照記錄。

1.1.5 細(xì)胞增殖能力觀察 采用CCK-8 法。各組細(xì)胞處理24 h后，去掉原含藥培養(yǎng)液，每孔加入200 μL新鮮培養(yǎng)基，在避光條件下每孔加入20 μL的CCK-8試劑溶液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中孵育2 h 后，用酶標(biāo)儀檢測(cè)各組在450 nm處的吸光度（A）值。計(jì)算各組細(xì)胞存活率，以此表示細(xì)胞增殖能力。細(xì)胞存活率=目的組A值/對(duì)照組A值×100%。

1.2 DPP-4抑制劑作用于PD的機(jī)制分析

1.2.1 DPP-4 抑制劑作用于PD 的相關(guān)靶點(diǎn)收集利用Swiss Target Prediction、SEA、Super-Pred 及PharmMapper 等數(shù)據(jù)庫(kù)分別獲取DPP-4 抑制劑西格列汀、利格列汀、維格列汀、沙格列汀及阿格列汀的藥物靶點(diǎn)，在“Select Species”中選擇“Homo Sapiens”，下載人源靶點(diǎn)，并將5 種藥物靶點(diǎn)信息利用UniProt 數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理、合并去重復(fù)等操作后得到藥物作用靶點(diǎn)。以“Parkinson's Disease”為疾病關(guān)鍵詞，通過(guò)DisGeNet、OMIM 和GeneCards 等數(shù)據(jù)庫(kù)獲得PD 相關(guān)的疾病靶點(diǎn)。通過(guò)UniProt 數(shù)據(jù)庫(kù)將疾病靶點(diǎn)名轉(zhuǎn)換為相對(duì)應(yīng)的基因名稱，合并去重后最終得到PD 相關(guān)的疾病靶點(diǎn)。最后將篩選得到的5 種DPP-4 抑制劑治療靶點(diǎn)和PD 疾病靶點(diǎn)輸入到韋恩圖制作平臺(tái)，比對(duì)取交集后得到DPP-4 抑制劑治療PD的潛在作用靶點(diǎn)。將每個(gè)藥物與PD的交集靶點(diǎn)再取交集，得到DPP-4抑制劑作用于PD 的相關(guān)靶點(diǎn)。

1.2.2 DPP-4 抑制劑作用于PD 關(guān)鍵靶點(diǎn)篩選 將DPP-4 抑制劑作用于PD 的相關(guān)靶點(diǎn)輸入到String 數(shù)據(jù)庫(kù)中，生物種類選定為“Homo sapiens”構(gòu)建蛋白—蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)。然后將其.TSV格式文件導(dǎo)入到Cytoscape 3.7.2軟件中，利用NetworkAnalyzer工具進(jìn)行拓?fù)浞治?，選取基因滿足度（Degree）值＞平均值的基因作為DPP-4 抑制劑對(duì)PD 產(chǎn)生作用的關(guān)鍵靶點(diǎn)。

1.2.3 DPP-4 抑制劑作用于PD 的關(guān)鍵靶點(diǎn)GO 基因功能與KEGG 作用通路分析 將DPP-4 抑制劑作用于PD 的關(guān)鍵靶點(diǎn)基因輸入到DAVID 數(shù)據(jù)庫(kù)中，限定物種為“Homo Sapiens”，得到GO 基因功能和KEGG 作用通路分析結(jié)果。從GO 基因功能分析P＜0.05 的數(shù)據(jù)中按Count 值大小排序，選擇前15 的數(shù)據(jù)；從KEGG 通路分析P＜0.05 的數(shù)據(jù)中選擇最相關(guān)的20個(gè)通路進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)結(jié)果采用微生信數(shù)據(jù)平臺(tái)進(jìn)行可視化。

1.2.4 DPP-4抑制劑作用于PD的核心靶點(diǎn)篩選分別將DPP-4 抑制劑治療PD 的關(guān)鍵靶點(diǎn)以及KEGG 信號(hào)通路導(dǎo)入到Cytoscape 3.7.2 軟件，構(gòu)建“藥物—疾病—靶點(diǎn)—通路”網(wǎng)絡(luò)，篩選與PD相關(guān)信號(hào)通路關(guān)系最為密切的靶點(diǎn)作為DPP-4抑制劑治療PD的核心靶點(diǎn)。

1.2.5 DPP-4 抑制劑與核心靶點(diǎn)的分子對(duì)接驗(yàn)證 為了初步預(yù)測(cè)和研究目標(biāo)蛋白和配體在分子水平上的關(guān)系，采用CB-Dock 2 對(duì)接平臺(tái)進(jìn)行分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)。首先將核心靶點(diǎn)的UniProt ID 輸入到AlphaFold 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)下載靶點(diǎn)蛋白的PDB格式文件。利用PubChem 數(shù)據(jù)庫(kù)下載5 種DPP-4 抑制劑3D結(jié)構(gòu)的SDF格式文件，將藥物和核心靶點(diǎn)的文件上傳到CB-Dock 2 數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取對(duì)接結(jié)果。CB-Dock 2可以自動(dòng)識(shí)別目標(biāo)蛋白質(zhì)的結(jié)合位點(diǎn)、計(jì)算中心位置、制定對(duì)接盒尺寸，并使用對(duì)接程序AutoDock Vina進(jìn)行對(duì)接。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Graphpad Prisim 9.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料采用Shapiro-Wilk 法行正態(tài)性檢驗(yàn)，呈正態(tài)分布以-x±s表示，多組間比較行單因素方差分析，兩組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)比較 對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)完整，增長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞呈多角形，細(xì)胞之間類似突觸樣連接且突觸較長(zhǎng)；模型組細(xì)胞密度減少，細(xì)胞皺縮，細(xì)胞與細(xì)胞間的突觸樣連接斷裂，且觀察到較多圓形的損傷細(xì)胞；模型+西格列汀組、模型+利格列汀組、模型+維格列汀組較模型組細(xì)胞形態(tài)得到改善，恢復(fù)到正常狀態(tài)下的細(xì)長(zhǎng)、多角形態(tài)。見(jiàn)OSID碼圖1。

2.2 各組細(xì)胞增殖能力比較 對(duì)照組、模型組、模型+西格列汀組、模型+利格列汀組、模型+維格列汀組細(xì)胞存活率分別為100.00% ± 0.00%、81.85% ±0.64%、96.04% ± 2.43%、90.74% ± 1.32%、88.59% ± 0.76%；模型組細(xì)胞存活率低于對(duì)照組、模型+西格列汀組、模型+利格列汀組、模型+維格列汀組（P均＜0.05），對(duì)照組、模型+西格列汀組、模型+利格列汀組、模型+維格列汀組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 DPP-4 抑制劑作用于PD 的相關(guān)靶點(diǎn)收集結(jié)果 共收集西格列汀藥物靶點(diǎn)486 個(gè)、利格列汀藥物靶點(diǎn)665 個(gè)、維格列汀藥物靶點(diǎn)524 個(gè)、沙格列汀藥物靶點(diǎn)507個(gè)、阿格列汀藥物靶點(diǎn)408個(gè)，PD 疾病相關(guān)靶點(diǎn)1 121 個(gè)。將5 種DPP-4 抑制劑的靶點(diǎn)分別與PD 疾病相關(guān)靶點(diǎn)取交集分別得到80、76、88、77、62 個(gè)交集靶點(diǎn)，將交集靶點(diǎn)進(jìn)行二次取交集，共得到DPP-4 抑制劑作用于PD 的36 個(gè)相關(guān)靶點(diǎn)。見(jiàn)OSID碼圖2。

2.4 DPP-4 抑制劑作用于PD 的關(guān)鍵靶點(diǎn)篩選結(jié)果 PPI 網(wǎng)絡(luò)顯示，DPP-4 抑制劑作用于PD 相關(guān)靶點(diǎn)中Degree 值＞平均值（12.7）的關(guān)鍵靶點(diǎn)共有16個(gè)，分別為ALB、IGF1、STAT3、CASP3、EGFR、ESR1、MAPK14、PPARG、MAPK1、HMOX1、NOS3、REN、MMP3、IL2、AR、IGF1R。見(jiàn)OSID碼圖3。

2.5 DPP-4 抑制劑作用于PD 的關(guān)鍵靶點(diǎn)GO 基因功能與KEGG 作用通路分析結(jié)果 GO 分析結(jié)果顯示，DPP-4 抑制劑作用于PD 的關(guān)鍵靶點(diǎn)共同涉及的生物過(guò)程主要包括信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞遷移的正向調(diào)控和細(xì)胞凋亡的負(fù)向調(diào)控等，細(xì)胞組分主要包括細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞核和大分子配合物等，分子功能主要包括酶結(jié)合、蛋白質(zhì)結(jié)合、蛋白絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶活性、蛋白酪氨酸激酶活性、跨膜受體蛋白酪氨酸激酶活性等。KEGG 通路富集分析共得到20 條信號(hào)通路，與PD 較為相關(guān)的信號(hào)通路為PI3KAKT 信號(hào)通路、FoxO 信號(hào)通路、MAPK 信號(hào)通路等。見(jiàn)OSID碼圖4、5。

2.6 DPP-4 抑制劑作用于PD 的核心靶點(diǎn)篩選結(jié)果 藥物—疾病—靶點(diǎn)—通路網(wǎng)絡(luò)圖顯示，在PI3KAKT、FoxO 及MAPK 信號(hào)通路中均有富集的靶點(diǎn)為IGF1、EGFR、IGF1R及MAPK1。見(jiàn)OSID碼圖6。

2.7 核心靶點(diǎn)的分子對(duì)接驗(yàn)證結(jié)果 分子對(duì)接結(jié)果顯示，5 種DPP-4 抑制劑均與PD 相關(guān)核心靶點(diǎn)蛋白有較好的結(jié)合，其結(jié)合能均小于-5.0 kcal/mol。見(jiàn)OSID碼圖7。

3 討論

PD 是常見(jiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，在中老年人中多發(fā)并呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)［8］。DPP-4 抑制劑是新型T2DM 治療藥物，而T2DM 與PD 之間存在一定聯(lián)系。有研究顯示，T2DM 不僅是PD 發(fā)病的危險(xiǎn)因素，而且是PD 運(yùn)動(dòng)及非運(yùn)動(dòng)癥狀的改變因素［9］。并且，存在糖尿病并發(fā)癥的人群罹患PD的風(fēng)險(xiǎn)也會(huì)升高［10］。一項(xiàng)病例對(duì)照研究顯示，服用DPP-4 抑制劑的病例展現(xiàn)出較低的PD發(fā)病率［11］；一項(xiàng)回顧性研究也發(fā)現(xiàn)，服用DPP-4抑制劑的糖尿病PD 患者顯示出更高的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體基線和更好的運(yùn)動(dòng)功能［12］。基于T2DM 與PD 之間的聯(lián)系，理論上降糖藥物或抗糖尿病的方法可能成為治療或者改善PD 或糖尿病合并PD 的新選擇。DPP-4 抑制劑是近幾年上市的新型口服降糖藥物，其通過(guò)增加腸促胰素水平間接刺激胰島β細(xì)胞分泌胰島素來(lái)發(fā)揮降糖作用。近期一項(xiàng)病例對(duì)照研究結(jié)果表明，接受DPP-4 抑制劑治療與T2DM 及T2DM 合并PD 患者的未來(lái)PD 發(fā)展風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)［13］。因此，評(píng)估現(xiàn)有的抗糖尿病藥物在神經(jīng)退行性疾病中的作用，并且基于PD和糖尿病的相關(guān)性及共同病理機(jī)制，權(quán)衡抗糖尿病藥物修飾或改善PD 進(jìn)展的可能性具有重要意義［12］。探討DPP-4抑制劑對(duì)PD的干預(yù)作用及其相關(guān)機(jī)制或可為PD的治療提供新的方向。

為了在細(xì)胞水平上初步驗(yàn)證DPP-4 抑制劑對(duì)PD 的保護(hù)作用，我們選用大鼠PC-12 細(xì)胞作為本研究的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞。PC-12 細(xì)胞能表達(dá)酪氨酸羥化酶并合成多巴胺，是國(guó)內(nèi)外神經(jīng)退行性疾病研究中常用的體外實(shí)驗(yàn)細(xì)胞，具有增長(zhǎng)速度塊、傳代穩(wěn)定、對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境要求不高等優(yōu)點(diǎn)，是神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究的較為成熟的模擬實(shí)驗(yàn)對(duì)象［14］。PD 的體外建模方法有很多種，其中利用ROT 建立損傷模型是較為成熟的方法。ROT 導(dǎo)致PD 的毒性機(jī)制受多因素的影響，如α 突觸核蛋白異常聚集、線粒體功能異常、活性氧產(chǎn)生增加、抗氧化防御系統(tǒng)受損及細(xì)胞異常凋亡等［15］。本研究選擇ROT 作為PC-12 細(xì)胞PD 模型建立的造模藥物，結(jié)合前期預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和參考文獻(xiàn)報(bào)道，選擇0.2 μmol/L 的ROT 濃度作為PD 模型的造模濃度。通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、CCK-8 法觀察西格列汀、維格列汀和利格列汀與ROT 共同干預(yù)后的PC-12 細(xì)胞增殖情況發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞增殖受到抑制、細(xì)胞形態(tài)受損，提示0.2 μmol/L的ROT 建立PD 體外模型造模成功。在ROT 基礎(chǔ)上，同時(shí)加入西格列汀、利格列汀和維格列汀后，與模型組比較，細(xì)胞存活率升高，細(xì)胞形態(tài)更為完整。皺縮變形的細(xì)胞群體占比例更小，細(xì)胞形態(tài)接近對(duì)照組細(xì)胞，同時(shí)細(xì)胞存活率也得到了改善。這些結(jié)果進(jìn)一步提示DPP-4 抑制劑組能夠提高細(xì)胞存活率，阻斷ROT對(duì)PC-12細(xì)胞的損傷，起到保護(hù)細(xì)胞形態(tài)完整和增殖能力的作用。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)以網(wǎng)絡(luò)靶標(biāo)作為核心要點(diǎn)，在藥物發(fā)現(xiàn)、藥物解析及治療疾病方面發(fā)揮獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，可以作為單體藥物、中醫(yī)藥領(lǐng)域藥理作用靶點(diǎn)解釋方面很好的工具［16］。本研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法得到了5 種DPP-4 抑制劑作用于PD 的36 個(gè)相關(guān)靶點(diǎn)及16個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)。GO富集結(jié)果表明，關(guān)鍵靶點(diǎn)可能主要通過(guò)酶結(jié)合、蛋白質(zhì)結(jié)合等方式在細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞核等處發(fā)揮信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞遷移的正向調(diào)控和細(xì)胞凋亡的負(fù)向調(diào)控等生物行為。對(duì)關(guān)鍵作用靶點(diǎn)的KEGG 通路分析結(jié)果表明，DPP-4 抑制劑作用于PD 產(chǎn)生干預(yù)作用的主要機(jī)制很可能與PI3KAKT、FoxO、MAPK 等信號(hào)通路有關(guān)。建立藥物—疾病—靶點(diǎn)—通路網(wǎng)絡(luò)顯示，IGF1、EGFR、IGF1R 和MAPK1 這4 個(gè)靶點(diǎn)除了Degree 值較高外，均富集在PI3K-AKT、FoxO 和MAPK 信號(hào)通路，且分子對(duì)接結(jié)果也顯示，IGF1、EGFR、IGF1R 和MAPK1 與DPP-4抑制劑之間主要通過(guò)氫鍵相結(jié)合，其結(jié)合能均小于-5.0 kcal/mol，提示以上靶點(diǎn)可能是DPP-4 抑制劑在PD治療方面發(fā)揮重要作用的靶點(diǎn)。

研究表明，胰島素/IGF1 信號(hào)通路受損可能與PD 的病理生理過(guò)程有關(guān)。PD 患者中胰島素/IGF1信號(hào)發(fā)生改變，可表現(xiàn)為黑質(zhì)致密部嚴(yán)重變性，胰島素受體底物1 表達(dá)增加［17-18］。在DPP-4 抑制劑治療PD 的靶點(diǎn)中，IGF1 和IGF1R 具有較高的Degree 值，在二次交集靶點(diǎn)的KEGG信號(hào)通路結(jié)果也顯示，5種DPP-4抑制劑通過(guò)這兩個(gè)通路發(fā)揮作用。因此DPP-4抑制劑改善PD 的作用可能是通過(guò)調(diào)節(jié)IGF1 來(lái)實(shí)現(xiàn)。此外，MAPK1 也參與多種細(xì)胞過(guò)程，如細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞存活等，在PD病程進(jìn)展過(guò)程中發(fā)揮一定作用［19］。在PD 病理生理過(guò)程中，激活PI3K/AKT 信號(hào)通路能夠促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞存活，限制神經(jīng)元損傷，并阻斷炎癥神經(jīng)元死亡。研究顯示，AKT 可通過(guò)抑制促凋亡細(xì)胞因子同時(shí)激活抗凋亡細(xì)胞因子來(lái)調(diào)節(jié)促凋亡和抗凋亡之間的平衡，從而影響神經(jīng)元存活［20］。這提示DPP-4 抑制劑很可能通過(guò)介導(dǎo)PI3K/AKT 信號(hào)通路和凋亡通路來(lái)保護(hù)神經(jīng)元。由上可見(jiàn)，DPP-4 抑制劑治療PD 的過(guò)程是一個(gè)多靶點(diǎn)，多通路共同作用的結(jié)果，其中PI3K-AKT 通路和胰島素抵抗通路可能發(fā)揮主要的作用。

綜上所述，前述網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究結(jié)果中，我們發(fā)現(xiàn)DPP-4 抑制劑對(duì)PD 體外模型具有積極地干預(yù)作用，其可能通過(guò)IGF1、EGFR、IGF1R 及MAPK1 等核心靶點(diǎn)作用于PI3K-AKT、FoxO、MAPK 等信號(hào)通路發(fā)揮作用。PD 的病理生理過(guò)程是復(fù)雜的，因此應(yīng)被視為一種全身性疾病，而不僅僅是一種神經(jīng)退行性疾病，包括DPP-4 抑制劑等用于治療T2DM 的手段有望在單純T2DM 中預(yù)防或者降低PD 的發(fā)生概率，且在T2DM合并PD中治療或改善PD癥狀。