宋 玉, 吳雪妮

1.陜西理工大學(xué) 生物科學(xué)與工程學(xué)院, 陜西 漢中 723000;2.陜西省資源生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 陜西 漢中 723000;3.陜南秦巴山區(qū)生物資源綜合開發(fā)協(xié)同創(chuàng)新中心, 陜西 漢中 723000;4.秦巴生物資源與生態(tài)環(huán)境省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(培育), 陜西 漢中 723000

大型真菌是一類能夠產(chǎn)生大型肉眼可見的子實(shí)體或菌核的真菌,泛指廣義上的蘑菇或蕈菌,多數(shù)隸屬于擔(dān)子菌門(Basidiomycota),少數(shù)屬于子囊菌門(Ascomycota)[1]。自然界中大型真菌種類繁多,營腐生、寄生、共生等多種營養(yǎng)方式,因此在生態(tài)系統(tǒng)中扮演著重要角色[2]。此外,很多大型真菌富含多種氨基酸、礦質(zhì)元素和生物活性成分等,具有重要的食用和(或)藥用價(jià)值[3]。我國最新統(tǒng)計(jì)出的食用菌有1 020種,藥用菌有692種[3],充分說明大型真菌是一類豐富的生物資源,具有很大的開發(fā)潛力。

陜西理工大學(xué)的坐落地點(diǎn)——漢中市,位于陜西省西南部,地處秦巴腹地,北依秦嶺,南屏巴山,兼跨漢江、嘉陵江兩大流域,屬于溫和濕潤的亞熱帶氣候,自然生態(tài)環(huán)境優(yōu)越。陜西理工大學(xué)一直重視校園環(huán)境保護(hù),校園內(nèi)綠化良好,植被類型豐富。秦巴山區(qū)優(yōu)越的大環(huán)境,再加上對(duì)校園生態(tài)環(huán)境的保護(hù),均為校園內(nèi)大型真菌的生長創(chuàng)造了良好條件。

筆者從2020年9月份開始對(duì)陜西理工大學(xué)校園內(nèi)的大型真菌種類進(jìn)行調(diào)查,共采集到標(biāo)本157份。結(jié)合形態(tài)學(xué)和ITS序列分析,共鑒定出大型真菌72種,隸屬于25科49屬(另外有3個(gè)物種的科尚未確定),其中包括中國新記錄種2個(gè),陜西省新紀(jì)錄種22個(gè)。此外,本次調(diào)查的所有物種都簡要闡述了其食藥用價(jià)值或毒性特征,部分物種的宏觀子實(shí)體照片以圖版形式呈現(xiàn)(圖1—圖3)。本次調(diào)查將為大型真菌相關(guān)的教學(xué)工作提供新鮮素材,可進(jìn)一步完善陜西省大型真菌名錄。

a.Morchella esculenta (L.) Pers.(羊肚菌); b.Agaricus beijingensis R.L. Zhao, Z. L. Ling & J. L. Zhou(北京蘑菇); c.Chlorophyllum hortense (Murrill) Vellinga(變紅青褶傘); d—e.Coprinus comatus (O. F. Müll.) Pers(毛頭鬼傘); f.Conocybe apala (Fr.) Arnolds(阿帕錐蓋傘); g.Lepiota brunneoincarnata Chodat &C. Martín(肉褐鱗環(huán)柄菇); h.Marasmius maximus Hongo(大蓋小皮傘); i.Agrocybe pediades (Fr.) Fayod(平田頭菇)

a.Coprinellus micaceus (Bull.) Vilgalys, Hopple & Jacq. Johnson(晶粒小鬼傘); b. Coprinopsis atramentaria (Bull.) Redhead,Vilgalys & Moncalvo(墨汁擬鬼傘); c.Lacrymaria lacrymabunda (Bull.) Pat.(淚珠垂齒菌); d.Candolleomyces candolleanus (Fr.) D. W?cht. & A. Melzer(黃蓋小脆柄菇); e.Coprinellus xanthothrix (Romagn.) Vilgalys, Hopple & Jacq. Johnson(庭院小鬼傘); f.Agrocybe dura (Bolton) Singer(硬田頭菇); g.Psathyrella spadiceogrisea (Schaeff.) Maire(灰褐小脆柄菇)

a.Agrocybe praecox (Pers.) Fayod(春生田頭菇); b.Melanoleuca griseobrunnea Antoní(灰褐铦囊菌); c.Paxillus involutus (Batsch) Fr.(卷邊樁菇); d.Lepista sordida (Schumach.) Singer(花臉香蘑); e.Scleroderma bovista Fr.(大孢硬皮馬勃); f.Cyathus stercoreus (Schw.) de Toni(糞生黑蛋巢菌)

1 材料與方法

1.1 材料采集與預(yù)處理

從2020年9月—2022年10月,在大型真菌生長期(溫暖濕潤的4—10月)從陜西理工大學(xué)南北兩個(gè)校區(qū)校園(院墻內(nèi))的湖邊、綠地、草坪、針葉樹及闊葉樹林地上采集大型真菌。對(duì)新鮮標(biāo)本的子實(shí)體進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)拍照,測(cè)量并記錄宏觀形態(tài)特征及生境信息。所有新鮮標(biāo)本用烘箱在40 ℃下烘干,然后與干燥劑密封保存于陜西省食藥用菌工程技術(shù)研究中心。

1.2 真菌的鑒定

1.2.1 形態(tài)鑒定

根據(jù)記錄的標(biāo)本形態(tài)特征,廣泛查閱大型真菌相關(guān)的彩色圖譜及分類學(xué)著作[1,4-10],并在必要時(shí)用顯微鏡觀察微觀形態(tài)特征(比如孢子、擔(dān)子等),經(jīng)過宏觀和微觀形態(tài)比較,正確界定所采集標(biāo)本的種名及其分類地位,并對(duì)其經(jīng)濟(jì)應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行歸納統(tǒng)計(jì)[11-13]。

1.2.2 ITS序列鑒定

對(duì)于未能根據(jù)形態(tài)特征完成鑒定或形態(tài)鑒定結(jié)果存疑的標(biāo)本,進(jìn)一步進(jìn)行ITS序列分析。采用CTAB法從新鮮標(biāo)本中提取核基因組DNA[14]。PCR擴(kuò)增ITS(Internal Transcribed Spacer,內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū))片段,引物為ITS1(5′-TCC GTA GGT GAA CCT GCG G-3′)和ITS4(5′-TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC-3′)[15];PCR擴(kuò)增程序?yàn)?94 °C預(yù)變性5 min;94 °C變性30 s,52 °C退火30 s,72 °C延伸1 min;72 °C總延伸12 min[16]。將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送至北京擎科生物技術(shù)有限公司西安分公司進(jìn)行測(cè)序,獲得ITS序列后,上傳至GenBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行Blast比對(duì)。根據(jù)分子比對(duì)結(jié)果及形態(tài)學(xué)比較,綜合給出明確的物種鑒定結(jié)論。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)本ITS序列Blast比對(duì)結(jié)果

157份標(biāo)本中,獲取了102份標(biāo)本的ITS序列。對(duì)這102份標(biāo)本的ITS序列進(jìn)行Blast比對(duì),結(jié)果匯總于表1。

表1 102份標(biāo)本的ITS序列Blast比對(duì)結(jié)果

3 結(jié)論與分析

3.1 物種鑒定結(jié)論

共采集大型真菌標(biāo)本157份,基于形態(tài)學(xué)和ITS序列分析,共鑒定出物種72個(gè),涉及25科49屬;其中,有食用價(jià)值的大型真菌17種,藥用價(jià)值的有14種,食藥兩用的有8種,毒菌15種,其余39種功用尚不明確;中國新紀(jì)錄種2個(gè),陜西省新記錄種22個(gè)。物種名錄匯總于表2。

表2 陜西理工大學(xué)校園大型真菌資源物種名錄

3.2 校園大型真菌優(yōu)勢(shì)科、屬、種分析

從陜西理工大學(xué)校園內(nèi)采集到的72種(25科49屬)大型真菌資源中,物種數(shù)超過3個(gè)的科有6個(gè),分別是傘菌科(14種)、小皮傘科(7種)、小脆柄菇科(7種)、球蓋菇科(6種)、類臍菇科(4種)、紅菇科(4種)。以上6科共42種,約占調(diào)查總物種數(shù)的58%,其他19個(gè)科(包括科未定的3個(gè)物種)占比約為42%(圖4)。

圖4 各科大型真菌物種數(shù)占比圖

此次調(diào)查的物種共涵蓋49個(gè)屬,含3種及以上的屬有7個(gè),分別是傘菌屬(6種)、小皮傘屬(4種、田頭菇屬(4種)、錐蓋傘屬(3種)、裸腳傘屬(3種)、鬼傘屬(3種)、乳菇屬(3種)。上述7個(gè)屬共有26種,約占陜西理工大學(xué)校園大型真菌總數(shù)的36%。

從采集頻率和標(biāo)本份數(shù)上分析,校園中常見的物種主要有毛頭鬼傘、細(xì)皺鬼筆、五棱散尾鬼筆、肉褐鱗環(huán)柄菇、灰褐铦囊菌、大蓋小皮傘、墨汁擬鬼傘,屬于常見物種。

4 討論

本次針對(duì)陜西理工大學(xué)校園內(nèi)大型真菌的初步調(diào)查共采集到72個(gè)物種,涵蓋25科49屬(另外有3個(gè)物種的科尚未確定),說明該園區(qū)內(nèi)大型真菌資源很豐富。這些近在咫尺的資源是大型真菌科普和教學(xué)的良好素材。其中,食用菌17種,藥用菌14種,食藥兩用菌8種,具有食藥用菌種質(zhì)資源開發(fā)的價(jià)值[12-13]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)的15種毒菌需要格外引起關(guān)注,要加強(qiáng)科普力度,謹(jǐn)防學(xué)生誤采誤食而引起中毒。尤其肉褐鱗環(huán)柄菇(圖1g)屬于急性肝損害型劇毒蘑菇[11],在校園內(nèi)多處可見,是常見物種(生長期從4月份持續(xù)到10月),應(yīng)高度重視。

此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)中國新紀(jì)錄種2個(gè),陜西省新記錄種22個(gè),進(jìn)一步完善了陜西省大型真菌名錄。陜西省新紀(jì)錄種占本次總調(diào)查物種數(shù)的30%左右,但其多數(shù)在鄰省(如河南和四川)早有報(bào)道[33-34],說明陜西省大型真菌資源的調(diào)查還不充分,有必要進(jìn)行更加深入的研究。