李 祥 ，劉卜瑋，楊盛婷，袁 章，李卓昭，張 凱，舒 燕，蔣立峰，史萬(wàn)剛，李世強(qiáng)，黃炳森，何 瑜，袁紅兵，龐 立，侯顯耀*

（1.南充市畜牧站，四川南充 637000；2.營(yíng)山縣畜禽繁育改良站，四川營(yíng)山 637700；3.南充市嘉陵區(qū)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展中心，四川南充 637500）

南充黑山羊原產(chǎn)于營(yíng)山縣和南充市嘉陵區(qū)，經(jīng)丘區(qū)自然環(huán)境和當(dāng)?shù)厝嗣耖L(zhǎng)期選育，逐漸形成體型適中、抗病力強(qiáng)、耐粗飼管理的地方羊遺傳資源。2021 年12月，南充黑山羊通過(guò)國(guó)家畜禽遺傳資源委員會(huì)鑒定，納入國(guó)家畜禽遺傳資源名錄。南充市范圍內(nèi)共計(jì)存欄南充黑山羊群體17000 只左右，當(dāng)?shù)囟嘁圆柹窖?、川中黑山羊等大型肉羊品種為父本，本地南充黑山羊?yàn)槟副荆M(jìn)行雜交生產(chǎn)，雜交后代的生長(zhǎng)速度、繁殖力等性狀表現(xiàn)優(yōu)異，為養(yǎng)殖戶脫貧奔康做出了重要貢獻(xiàn)。血液理化指標(biāo)與動(dòng)物的適應(yīng)性、免疫力等密切相關(guān)，畜禽的生理特性在一定程度上取決于其體內(nèi)理化指標(biāo)。目前，趙中權(quán)等[1-3]研究發(fā)現(xiàn)，大足黑山羊、和田山羊、馬鞍山羊、薩能奶山羊、南江黃羊等的紅細(xì)胞密度、血紅蛋白濃度及白細(xì)胞密度等重要血液理化指標(biāo)在不同品種間有一定差異，薩能奶山羊的紅細(xì)胞密度和血紅蛋白濃度高于其他山羊品種，南江黃羊的白細(xì)胞密度低于其他山羊品種，血液理化指標(biāo)的差異可能與羊的飼養(yǎng)方式及用途有關(guān)。羊血液理化指標(biāo)的研究大多集中在不同品種間或不同性別成年羊的血液理化指標(biāo)差異研究上，系統(tǒng)探索同一品種的不同年齡、不同性別血液理化指標(biāo)的差異還未見報(bào)道。本試驗(yàn)對(duì)南充黑山羊2月齡、周歲、成年3 個(gè)階段公、母羊的血液理化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，探索南充黑山羊血液理化指標(biāo)的變化規(guī)律，可為山羊疾病的診斷、品種鑒定等提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物的選擇

本試驗(yàn)于2022 年12月在四川省營(yíng)山縣綠草牲畜養(yǎng)殖專業(yè)合作社開展。選擇同一時(shí)期、不同生長(zhǎng)階段的羊，要求系譜清楚、體況相似、健康無(wú)病，周歲及成年母羊處于空懷期。2月齡（斷奶）羊、周歲羊及成年羊公、母羊各5 只，共計(jì)30 只。

1.2 飼養(yǎng)條件

飼養(yǎng)方式：舍飼；海拔高度：370m；飼料組成：精料補(bǔ)充料、小麥秸稈、青綠飼料，上午、下午各飼喂一次。

1.3 采樣準(zhǔn)備

試驗(yàn)羊采血前禁食12h。準(zhǔn)備好冰盒、一次性采血針、采血管、酒精棉球。

1.4 血液采集

羊只保定后，用酒精棉球?qū)︻i部采樣部位進(jìn)行消毒，用抗凝采血管和促凝采血管分別采集靜脈血液5 mL，并上下輕微搖晃均勻后置于冰盒中。

1.5 血樣檢測(cè)

委托南充市順慶區(qū)川北動(dòng)物醫(yī)院對(duì)血樣進(jìn)行檢測(cè)，血液分析儀由美國(guó)愛德士公司生產(chǎn)（型號(hào)為Catalyst Dx SD1），生化分析儀由山東博科有限公司生產(chǎn)（型號(hào)為BK-1200）。

1.6 測(cè)定內(nèi)容

1.6.1 生理指標(biāo)

白細(xì)胞（White blood cell，WBC）、紅細(xì)胞（Red blood cell，RBC）、紅細(xì)胞積壓（Hematocrit，HCT）、平均紅細(xì)胞積壓（Mean corpuscular volume，MCV）、白蛋白（Albumin，ALB）、球蛋白（Globulin，GLOB）、白蛋白/ 球蛋白比（ALB/GLOB）、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)（Red cell volume distribution width，RDW），共計(jì)8 項(xiàng)血液生理指標(biāo)。

1.6.2 生化指標(biāo)

血紅蛋白（Haemoglobin，HGB）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（Mean corpuscular hemoglobin，MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（Mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC）、血 糖（Glucose，GLU）、肌酐（Creatine，CREA）、血尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）、血尿素氮/肌酐比（BUN/CREA）、磷離子（Phosphorus ions，PHOS）、鈣離子（Calcium ions，CA）、總蛋白（Total protein，TP）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（Alanine Transaminase，ALT）、堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALKP）、谷氨酸轉(zhuǎn)移酶（Glutamate transferase，GGT）、總膽紅素（Total bilirubin，TBIL）、膽固醇（Cholesterol，CHOL）、胰淀粉酶（Pancreatic Amylase，AMYL）、脂肪酶（Lipase，LIPA），共計(jì)17 項(xiàng)血液生化指標(biāo)。

1.7 數(shù)據(jù)處理

所有檢測(cè)數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，利用prism 8.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行ANOVA 分析。

2 試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，WBC、RBC、HCT、RDW、MCV等5 項(xiàng)生理指標(biāo)和HGB、CREA、BUN/CREA、MCH、MCHC 5 項(xiàng)生化指標(biāo)在南充黑山羊不同年齡階段、不同性別之間呈現(xiàn)一定的差異。而GLU、BUN、PHOS、CA、TP、ALB、GLOB、ALB/GLOB、ALT、ALKP、GGT、TBIL、CHOL、AMYL、LIPA 15 項(xiàng)理化指標(biāo)在各年齡、性別間差異不顯著（P＞0.05）。南充黑山羊在各年齡、性別的血液理化指標(biāo)變化情況見表1。

表1 南充黑山羊不同性別、年齡血液理化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

2.1 與年齡相關(guān)的差異

WBC、RBC、HGB、HCT、RDW 和MCH 6項(xiàng)指標(biāo)與南充黑山羊的年齡相關(guān)，2月齡公羊的WBC 顯著高于成年公羊（P＜0.05），而2月齡母羊WBC 極顯著高于周歲母羊和成年母羊（P＜0.01）；2月齡公羊和周歲公羊RBC 極顯著高于成年公羊（P＜0.01），而2月齡母羊RBC 極顯著高于成年母羊（P＜0.01）；周歲公羊HCT 與2月齡及成年公羊差異不顯著（P＞0.05），而周歲母羊HCT 顯著高于成年母羊（P＜0.05），與2月齡母羊差異不顯著（P＞0.05）；2月齡公羊RDW 顯著高于成年公羊（P＜0.05），但母羊RDW 在各年齡段差異不顯著（P＞0.05）；成年公羊MCH 極顯著高于2月齡公羊（P＜0.01），而周歲母羊MCH極顯著高于2月齡母羊（P＜0.01）。

2.2 與性別相關(guān)的差異

CREA、BUN/CREA、MCV 和MCHC 4 項(xiàng)指標(biāo)與南充黑山羊性別相關(guān)，成年公羊CREA 顯著高于成年母羊（P＜0.05），隨年齡增加有升高的趨勢(shì)，而BUN/CREA 的變化趨勢(shì)則相反；成年公羊MCV 顯著高于成年母羊（P＜0.05）；公羊MCHC 隨年齡增加而降低，而母羊MCHC 在周歲最低。

2.3 與其他山羊品種血液指標(biāo)的比較

RBC、HGB、WBC 是3 項(xiàng)重要的血液理化指標(biāo)，南充黑山羊這3 項(xiàng)指標(biāo)與其他山羊存在差異，RBC 高于貴州水城黑山羊、波爾山羊和和田羊，低于南江黃羊和薩能奶山羊；HGB 高于南江黃羊、大足黑山羊和波爾山羊，與貴州水城黑山羊和薩能奶山羊接近；WBC 高于南江黃羊、大足黑山羊、波爾山羊和薩能奶山羊，低于和田羊，與貴州水城黑山羊接近。南充黑山羊與其他山羊品種部分血液理化指標(biāo)的比較見表2。

表2 與其他山羊品種部分血液理化指標(biāo)的比較

3 分析與討論

血液的理化指標(biāo)包括血液的生理參數(shù)和血清的生化參數(shù)，生理參數(shù)主要反映出動(dòng)物體內(nèi)血液中的各種血細(xì)胞比例，血清生化參數(shù)主要反映出動(dòng)物體內(nèi)血液中酶、激素等各種物質(zhì)的含量和活性。正常情況下，動(dòng)物的血液理化指標(biāo)在一定范圍內(nèi)波動(dòng)，當(dāng)某些指標(biāo)超出或者低于正常范圍時(shí)，表明動(dòng)物處于非正常狀態(tài)。通過(guò)分析動(dòng)物的血液理化指標(biāo)，可評(píng)估家畜生長(zhǎng)發(fā)育狀態(tài)，為某些疾病的診斷提供直接依據(jù)[6,7]。

3.1 年齡相關(guān)血液理化指標(biāo)分析

WBC 主要負(fù)責(zé)機(jī)體內(nèi)大部分非特異免疫和所有的特異性免疫過(guò)程[8]，當(dāng)外來(lái)病菌入侵體內(nèi)時(shí)，白細(xì)胞通過(guò)變形穿過(guò)毛細(xì)血管壁，迅速將病菌包圍并吞噬[9]。劉幸君[10]研究發(fā)現(xiàn)，波爾山羊、萊蕪黑山羊、文登奶山羊等山羊的WBC 隨著年齡增加而顯著或極顯著降低，但小尾寒羊、薩?？搜虻染d羊的WBC 變化趨勢(shì)相反，隨著年齡增加而顯著增加。本試驗(yàn)?zāi)铣浜谏窖騑BC 的變化與前人研究存在一定差異，表明WBC 變化趨勢(shì)在不同物種間及同一物種不同品種之間差異較大，也可能與飼喂的地域差異有關(guān)。在其他物種中也有相似研究，張繼才等[11]研究表明，成年短角牛WBC 比斷奶犢牛低48.13%。本試驗(yàn)成年羊WBC 比斷奶羊低40.65%，南充黑山羊WBC 與短角牛的變化趨勢(shì)基本一致。RBC、HGB 的值對(duì)鑒別動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)不良、貧血等有著重要意義，成年南充黑山羊的RBC 值高于大足黑山羊，與南江黃羊和薩能奶山羊接近，而HGB 高于大足黑山羊和南江黃羊，與薩能奶山羊接近[1]，說(shuō)明RBC、HGB 的差異可能與物種和飼養(yǎng)條件有關(guān)。

3.2 性別相關(guān)血液理化指標(biāo)分析

安徽白山羊[2]、貴州白山羊[12]成年公羊CREA顯著或極顯著高于成年母羊，與南充黑山羊成年公、母羊CREA 的規(guī)律相似。南充黑山羊成年公羊的MCV 顯著高于成年母羊，公羊MCV 隨著年齡增長(zhǎng)有上升的趨勢(shì)，周歲母羊MCV 顯著高于2月齡和成年母羊，10月齡和田公羊的MCV高于母羊[3]，與本試驗(yàn)結(jié)果一致，但貴州白山羊和貴州黑山羊[13]成年公、母羊的MCV 差異不顯著。從數(shù)值分析，和田羊MCV 的均值為70.84 fL，貴州白山羊?yàn)?5.52 fL，南充黑山羊?yàn)?0.07 fL，表明MCV 與飼養(yǎng)環(huán)境的海拔高度密切相關(guān)，海拔越高，MCV 的數(shù)值越大。MCHC 在機(jī)體與氧的結(jié)合、運(yùn)輸、利用等過(guò)程中起著重要作用[14]，貴州黑山羊母羊的MCHC 在各年齡段差異不顯著，貴州白山羊周歲及成年羊的MCHC 均高于南充黑山羊[10]，但南充黑山羊成年公羊、母羊的MCHC 均高于和田羊及貴州白山羊，與波爾山羊和薩能奶山羊接近[7,9]，這可能與品種及飼養(yǎng)條件有關(guān)。

4 試驗(yàn)結(jié)論

本試驗(yàn)首次對(duì)南充黑山羊不同年齡、不同性別的血液理化指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)測(cè)定，發(fā)現(xiàn)WBC、RBC、HGB、HCT、RDW 和MCH 6 項(xiàng)指標(biāo)與南充黑山羊的年齡相關(guān)，CREA、BUN/CREA、MCV 和MCHC 4 項(xiàng)指標(biāo)與南充黑山羊性別相關(guān)。這些血液理化指標(biāo)特征可作為南充黑山羊品種特性及疾病診斷的參考數(shù)據(jù)。