魯葉慧 欒軍杰 劉星 吳瑗 林靜
[摘要] 目的 探索血根堿(SAN)在小鼠煙曲霉菌感染角膜炎模型中的抗炎作用。方法 應(yīng)用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度SAN(0、62.5、125.0、250.0、500.0、1 000.0 μg/L)對(duì)小鼠來(lái)源巨噬細(xì)胞(RAW264.7)增殖活力的影響;制備小鼠煙曲霉菌角膜炎模型,取感染第3天眼球,應(yīng)用蘇木精-伊紅(HE)染色檢測(cè)小鼠角膜組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度,ELISA法檢測(cè)小鼠角膜組織腫瘤壞死因子α(TNF-α)及環(huán)氧化酶2(COX-2)的蛋白表達(dá)水平;采用RT-PCR和ELISA方法檢測(cè)巨噬細(xì)胞中白細(xì)胞介素1β(IL-1β)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、TNF-α及單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-1)的蛋白和mRNA的表達(dá)。結(jié)果 500.0 μg/L的SAN對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性無(wú)影響(F=0.292,P>0.05);HE染色顯示,500.0 μg/L SAN組小鼠角膜組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)相較于模型組明顯減少;500.0 μg/L SAN可顯著下調(diào)煙曲霉菌誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1的mRNA和蛋白表達(dá)及小鼠模型中TNF-α、COX-2的蛋白表達(dá)水平,差異均有顯著性(F=20.939~2 690.170,P<0.01)。結(jié)論 SAN通過(guò)抑制炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和下調(diào)炎癥遞質(zhì)的表達(dá)在煙曲霉菌感染中發(fā)揮抗炎作用。
[關(guān)鍵詞] 血根堿;巨噬細(xì)胞;小鼠;炎癥;煙曲霉菌
[中圖分類號(hào)] R392;R379.6
[文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A
[文章編號(hào)] 2096-5532(2023)04-0507-06
doi:10.11712/jms.2096-5532.2023.59.113
[網(wǎng)絡(luò)出版] https://link.cnki.net/urlid/37.1517.R.20230918.1620.001;2023-09-20 10:53:36
ANTI-INFLAMMATORY EFFECT OF SANGUINARINE AGAINST MOUSE ASPERGILLUS FUMIGATUS KERATITIS LU Yehui, LUAN Junjie, LIU Xing, WU Yuan, LIN Jing (Department of Ophthalmology, The Affiliated Hospital of Qingdao University, Qingdao 266003, China)\; [ABSTRACT] Objective To explore the anti-inflammatory effect of sanguinarine (SAN) in a mouse model of Aspergillus (A.) fumigatus keratitis. Methods The effects of SAN at different concentrations (0, 62.5, 125.0, 250.0, 500.0, 1 000.0 μg/L) on the proliferative activity of mouse-derived macrophages (RAW264.7) were determined by using Cell Counting Kit-8. A mouse model of A.fumigatus keratitis was prepared. The eyes were taken on the third day of infection. The degree of inflammatory cell infiltration in the mouse cornea was determined with hematoxylin-eosin (HE) staining. The protein expression of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in the cornea was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The mRNA and protein expression levels of interleukin 1β (IL-1β), interleukin 6 (IL-6), TNF-α, and monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1) in macrophages were measured by RT-PCR and ELISA. Results SAN at 500.0 μg/L had no significant effect on the activity of RAW264.7 cells (F=0.292,P>0.05). HE staining revealed a significant decrease in inflammatory cell infiltration in the cornea in the SAN (500.0 μg/L) group compared with the model group; SAN at 500.0 μg/L significantly down-regulated the mRNA and protein expression of IL-1β, IL-6, TNF-α, and MCP-1 in A.fumigatus-induced RAW264.7 cells and the protein le-vels of TNF-α and COX-2 in the mouse model (F=20.939-2 690.170,P<0.01). Conclusion SAN exerted anti-inflammatory effects against A.fumigatus infection via inhibiting inflammatory cell infiltration and down-regulating the expression of inflammatory mediators.
[KEY WORDS] sanguinarine; macrophages; mice; inflammation; Aspergillus fumigatus
真菌性角膜炎是一種嚴(yán)重的角膜感染性疾病,在亞洲和非洲等發(fā)展中國(guó)家發(fā)病率高[1]。絲狀真菌如煙曲霉菌和鐮刀菌是誘發(fā)真菌性角膜炎的主要原因,一旦其分生孢子透過(guò)角膜上皮進(jìn)入到基質(zhì),孢子會(huì)迅速萌發(fā),誘發(fā)癥狀。目前,真菌性角膜炎的一線治療是局部使用那他霉素、伏立康唑、兩性霉素B等藥物[2],但這些藥物存在水溶性差、滲透性差及嚴(yán)重的不良反應(yīng),因此亟待開(kāi)發(fā)可用于臨床的低毒高效的治療藥物。血根堿(SAN)為一種季銨鹽類苯并菲啶生物堿,是來(lái)源于血根草、大白屈菜和博落回的一類重要的天然異喹啉生物堿[3-4]。 SAN具有多種藥理活性,包括抗腫瘤、抗菌、抗炎和改善心血管功能等[5-9]。最近的研究顯示,在大鼠的神經(jīng)源性疼痛模型中,SAN可以通過(guò)抑制白細(xì)胞介素1β(IL-1β)、白細(xì)胞介素6(IL-6)等炎癥因子的表達(dá)來(lái)減輕疼痛[10-12]。SAN在急、慢性炎癥中發(fā)揮抗炎作用。但是SAN能否在真菌性角膜炎中發(fā)揮抗炎作用尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究旨在探討SAN對(duì)煙曲霉菌感染的巨噬細(xì)胞及小鼠角膜炎癥的調(diào)節(jié)作用,為治療真菌性角膜炎提供一種新思路。
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
小鼠來(lái)源的RAW264.7巨噬細(xì)胞系購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院細(xì)胞庫(kù)(上海)。實(shí)驗(yàn)所用40只8周大小健康的C57BL/6雌鼠購(gòu)于山東濟(jì)南朋悅有限公司,體質(zhì)量20~30 g,按照青島大學(xué)附屬醫(yī)院動(dòng)物委員會(huì)批準(zhǔn)的方案飼養(yǎng)。SAN(100 mg,純度98%)由麥克林試劑公司提供,用體積分?jǐn)?shù)0.001的DMSO溶解后以2 g/L儲(chǔ)備液-20 ℃儲(chǔ)存;RNAex pro reagent裂解液(艾科瑞生物工程有限公司);酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)試劑盒(Biolegend公司);蘇木精-伊紅(HE)染色試劑盒(碧云天,中國(guó));煙曲霉菌(CPCC 3.0772,中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心(北京))。
1.2 研究方法
1.2.1 煙曲霉菌絲制備 煙曲霉菌絲及滅活煙曲霉菌絲制備方法基于本實(shí)驗(yàn)室原有步驟,進(jìn)行優(yōu)化[13]。將煙曲霉標(biāo)準(zhǔn)菌株接種于酵母膏胨葡萄糖培養(yǎng)液(葡萄糖10 g、蛋白胨100 g、酵母5 g溶解于雙蒸水中定容1 L),置35 ℃培養(yǎng)箱孵育4~7 d后于超凈工作臺(tái)研磨菌絲至20~30 μm大小,一半經(jīng)3次離心后重懸,用DMEM稀釋至1×1011CFU/L;另一半浸泡于體積分?jǐn)?shù)0.75乙醇中,24 h后重復(fù)前述步驟,獲得滅活煙曲霉菌用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
1.2.2 CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SAN對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力的影響 RAW264.7細(xì)胞以4×108CFU/L接種于96孔板中,孵育12 h至細(xì)胞密度約70%更換含SAN(濃度分別為0、62.5、125.0、250.0、500.0、1 000.0 μg/L)培養(yǎng)液,繼續(xù)孵育24 h后,以無(wú)菌PBS洗滌3次,更換含CCK-8的培養(yǎng)液繼續(xù)孵育2 h后,使用酶標(biāo)儀(PerkinElimer, 美國(guó))測(cè)各孔450、600 nm波長(zhǎng)處的吸光度值。每個(gè)樣本設(shè)5個(gè)復(fù)孔,實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。
1.2.3 小鼠分組及處理 32只健康小鼠隨機(jī)分為N組、500.0 μg/L SAN處理組(SAN組)、AF處理組及AF+500.0 μg/L SAN處理組(AS組),每組8只,每只小鼠的右眼為實(shí)驗(yàn)眼,左眼為空白對(duì)照眼。建模:AF組和AS組小鼠腹腔注射80 g/L水合氯醛約0.08 mL后,用手術(shù)無(wú)菌刀片刮除中央角膜上皮形成約2 mm×2 mm缺損區(qū)域,做井字劃痕、涂抹煙曲霉菌、覆蓋光滑的角膜接觸鏡并縫合眼瞼,24 h后拆除縫線。N組和AF組小鼠以雙蒸水點(diǎn)眼治療,每次5 μL,每天4次;SAN組和AS組小鼠以500.0 μg/L SAN點(diǎn)眼治療,每次5 μL,每天4次。治療第3天,以頸椎脫臼法處死小鼠,獲得小鼠角膜組織。6只健康小鼠隨機(jī)分為AF處理組和AS處理組,建模后分別以雙蒸水和500.0 μg/L SAN點(diǎn)眼治療,每次5 μL,每天4次,治療第3天以頸椎脫臼法處死小鼠,取小鼠眼球。
1.2.4 細(xì)胞刺激 RAW264.7細(xì)胞接種于12孔板,孵育至細(xì)胞密度約80%后換液。將細(xì)胞分為N組、SAN組、AF組、AS組,AF組及AS組每孔加入60 μL滅活煙曲霉菌絲,2 h后SAN組及AS組加入SAN溶液使SAN終濃度為500.0 μg/L,8 h后收集細(xì)胞樣本用于細(xì)胞RT-PCR實(shí)驗(yàn)(每組6孔); 24 h后收集細(xì)胞上清液,離心后取上清液用于細(xì)胞ELISA檢測(cè)(每組8孔)。
1.2.5 HE染色檢測(cè)小鼠角膜中炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)AS處理組(n=3)和AF處理組(n=3)的眼球分別在含OCT包埋劑的EP管(2 mL)中調(diào)整至合適位置后迅速液氮凍存,使用Leica冷凍切片機(jī)切取角膜中央最大截面處8 μm厚的角膜切片。應(yīng)用HE染色試劑盒染色,按說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行操作,自然晾干后中性樹(shù)膠封片。光學(xué)顯微鏡下觀察小鼠角膜中炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)情況。
1.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)細(xì)胞因子的mRNA表達(dá) 細(xì)胞中加入RNAex pro reagent裂解液后,在冰上裂解0.5 h,用無(wú)菌的200 μL黃槍頭刮取細(xì)胞收集至2 mL的 EP管中,根據(jù)RNAex pro reagent試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,建立2 μg逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系。使用RT-PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng),以β-actin為內(nèi)參,檢測(cè)巨噬細(xì)胞中IL-1β、IL-6、TNF-α及單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-1)的mRNA表達(dá)。引物及其序列來(lái)自GenBank,由艾科瑞生物有限公司設(shè)計(jì)及合成。見(jiàn)表1。
1.2.7 相關(guān)蛋白表達(dá)檢測(cè) 應(yīng)用ELISA試劑盒檢測(cè)小鼠RAW264.7細(xì)胞中IL-1β、IL-6、TNF-α以及MCP-1及小鼠角膜組織中TNF-α和COX-2的蛋白表達(dá),根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。使用酶標(biāo)儀檢測(cè)450 nm及570 nm波長(zhǎng)處吸光度。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
使用SPSS 26.0、Graph Pad Prism 9.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量資料結(jié)果以±s表示,多組比較采用單因素方差分析及雙因素析因方差分析,組間兩兩比較采用Tukey法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 不同濃度SAN溶液對(duì)巨噬細(xì)胞活力的影響
不同濃度的SAN(0、62.5、125.0、250.0、500.0、1 000.0 μg/L)與RAW264.7細(xì)胞共孵育24 h后,1 000.0 μg/L SAN溶液處理組巨噬細(xì)胞的存活率低于其他各組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.272,P<0.05)。500.0 μg/L濃度以內(nèi)的SAN處理組的細(xì)胞存活率與正常對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)圖1。后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇500.0 μg/L作為研究濃度。
2.2 煙曲霉菌對(duì)小鼠角膜組織中炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)的影響
HE染色觀察結(jié)果顯示,感染煙曲霉菌3 d后,500.0 μg/L SAN組和AF組相比,小鼠角膜基質(zhì)層水腫明顯減輕,炎癥細(xì)胞數(shù)量顯著減少,組織病理結(jié)構(gòu)更為有序(圖2)。
2.3 各組細(xì)胞中IL-1β、IL-6、TNF-α以及MCP-1 mRNA 表達(dá)水平比較
析因設(shè)計(jì)的方差分析結(jié)果顯示,滅活菌絲處理產(chǎn)生的單獨(dú)效應(yīng)(FAF=131.211~253.824,P<0.01)、SAN處理產(chǎn)生的單獨(dú)效應(yīng)(FSAN=28.794~119.300,P<0.01)、不同滅活菌絲處理組間(F=141.468~360.577,P<0.01)和不同SAN處理組間(F=10.373~18.560,P<0.01)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,滅活菌絲處理與SAN處理之間存在交互作用(FAF×SAN=10.566~18.536,P<0.01)。與N組和SAN組相比較,AF組細(xì)胞炎癥遞質(zhì)IL-1β、IL-6、TNF-α和MCP-1的mRNA表達(dá)水平明顯升高;與AF組相比,AS組炎癥遞質(zhì)IL-1β、IL-6、TNF-α和MCP-1的mRNA表達(dá)水平明顯下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=20.939~37.097,P<0.01)。見(jiàn)表2。
2.4 各組細(xì)胞中IL-1β、IL-6、TNF-α和MCP-1 蛋白表達(dá)水平比較
析因設(shè)計(jì)的方差分析結(jié)果顯示,滅活菌絲處理產(chǎn)生的單獨(dú)效應(yīng)(FAF=1 765.400~6 636.850,P<0.01)、SAN處理產(chǎn)生的單獨(dú)效應(yīng)(FSAN=98.002~3 070.111,P<0.01)、不同滅活菌絲處理組間(F=1 490.936~9 367.445,P<0.01)和不同SAN處理組間(F=63.775~1 347.574,P<0.01)差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,滅活菌絲處理與SAN處理存在交互作用(FAF×SAN=61.187~1 342.599,P<0.01)。與N組和SAN組相比,AF組中炎癥遞質(zhì)IL-1β、IL-6、TNF-α和MCP-1的蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào);AS組與AF組相比,炎癥遞質(zhì)IL-1β、IL-6、TNF-α和MCP-1的蛋白表達(dá)水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=124.949~2 690.170,P<0.01)。見(jiàn)表3。
2.5 各組小鼠角膜中TNF-α和COX-2 蛋白表達(dá)水平比較
析因設(shè)計(jì)的方差分析顯示,滅活菌絲處理產(chǎn)生的單獨(dú)效應(yīng)(FAF=1 207.798、1 569.370,P<0.01)、SAN處理產(chǎn)生的單獨(dú)效應(yīng)(FSAN=75.086、260.364,P<0.01)、不同滅活菌絲處理組間(F=942.588、1 554.091,P<0.01)和不同SAN處理組間(F=295.009、356.222,P<0.01)的差異均有顯著性,滅活菌絲處理與SAN處理有交互作用(FAF×SAN=275.643、340.296,P<0.01)。與N組和SAN組相比較,AF組小鼠感染煙曲霉菌3 d后,炎癥遞質(zhì)TNF-α和COX-2蛋白表達(dá)水平明顯升高;AS組與AF組相比,小鼠感染煙曲霉菌3 d后,炎癥遞質(zhì)TNF-α和COX-2的蛋白表達(dá)水平明顯降低,差異有顯著性(F=570.488、696.427,P<0.01)。見(jiàn)表4。
3 討論
真菌性角膜炎是由致病真菌誘導(dǎo)的嚴(yán)重眼部感染性疾病,其致病因素中植物劃傷引起的角膜損傷約占40%~60%[14],另外隱形眼鏡的使用[15]、長(zhǎng)期使用抗生素或類固醇[16]、既往眼部手術(shù)史[17]都是重要的致病因素。當(dāng)煙曲霉菌首次攻擊宿主時(shí),其毒力決定簇誘發(fā)宿主發(fā)生強(qiáng)烈的固有免疫反應(yīng)[10],固有免疫系統(tǒng)包括巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞等,是抵御真菌感染的第一道防線;它能夠快速啟動(dòng)并消除入侵的煙曲霉菌[11]。這種防御機(jī)制涉及特異性受體的識(shí)別、指示信號(hào)通路的激活和多種炎癥遞質(zhì)的產(chǎn)生,從而加強(qiáng)炎癥反應(yīng)。但是大量的炎癥遞質(zhì)可引發(fā)嚴(yán)重的炎癥反應(yīng),會(huì)加重感染組織的損傷,使真菌感染的病程延長(zhǎng),產(chǎn)生一系列危險(xiǎn)的并發(fā)癥如角膜穿孔甚至患眼失明[12]。真菌性角膜炎的發(fā)病率逐漸增高,且臨床缺乏有效治療藥物,迫切需要找到新的高效低毒治療藥物。
SAN是一種以苯并菲啶結(jié)構(gòu)為特征的生物堿類天然小分子,具有高效抗炎[18-19]、抗菌[4,7,20]、抗腫瘤[21]等藥理活性。已有研究表明,在大鼠LPS介導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)中,SAN可以通過(guò)抑制大鼠H9c2心肌細(xì)胞釋放炎癥遞質(zhì)IL-1β、IL-6和TNF-α發(fā)揮抗炎作用[22]。此外有研究顯示,在LPS誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞內(nèi)毒性休克模型中,SAN通過(guò)抑制小鼠巨噬細(xì)胞釋放TNF-α及NO發(fā)揮抗炎作用[18]。然而,SAN在真菌性角膜炎中是否發(fā)揮抗炎作用尚未有報(bào)道。炎癥從本質(zhì)上說(shuō)是機(jī)體的防御反應(yīng),在初期往往起到積極作用,例如炎性充血可增加局部組織血流量,使組織得到更多的氧氣、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等,增加組織代謝和抗擊力[23]。但持續(xù)的炎癥反應(yīng)使得巨噬細(xì)胞產(chǎn)生過(guò)量的炎癥遞質(zhì),可能加重角膜損傷;還會(huì)導(dǎo)致角膜蛋白沉積,造成角膜水腫甚至角膜穿孔。本研究首先探究SAN在小鼠巨噬細(xì)胞中的安全濃度,結(jié)果表明500.0 μg/L SAN對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞沒(méi)有影響,可作為安全濃度用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。本文研究感染第3天的小鼠角膜組織HE染色結(jié)果顯示,500.0 μg/L SAN組和AF組相比,小鼠角膜基質(zhì)層水腫明顯減輕,炎癥細(xì)胞數(shù)量顯著減少,組織病理結(jié)構(gòu)更為有序。ZHENG等[24]研究顯示,在LPS誘導(dǎo)的小鼠乳腺炎模型中,SAN通過(guò)顯著減少LPS引起的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)、減輕腺泡結(jié)構(gòu)的破壞,進(jìn)而修復(fù)血-乳屏障發(fā)揮抗炎功能。本文研究結(jié)果與其一致。因此,SAN可能通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)中的免疫細(xì)胞過(guò)度激活,對(duì)煙曲霉菌性角膜炎起到治療作用。
在真菌性角膜炎中,炎癥細(xì)胞過(guò)度激活會(huì)導(dǎo)致大量的炎癥遞質(zhì)釋放加重炎癥反應(yīng)[25]。已有研究證實(shí),IL-1β是參與角膜抗真菌免疫應(yīng)答的重要炎癥因子,主要由激活的單核細(xì)胞產(chǎn)生,介導(dǎo)急性炎癥應(yīng)答[26]。在右旋糖酐硫酸鈉誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型中,SAN通過(guò)阻斷NLRP3-(Caspase-1)/IL-1β通路,降低炎癥因子IL-1β的表達(dá),對(duì)小鼠結(jié)腸炎具有治療作用[27]。本研究結(jié)果顯示,SAN能夠明顯抑制小鼠RAW264.7細(xì)胞中煙曲霉菌刺激引起的IL-1β基因及蛋白表達(dá)升高。提示SAN可能通過(guò)抑制IL-1β的表達(dá)發(fā)揮抗炎作用。炎癥因子TNF-α、IL-6及趨化因子MCP-1為反映角膜炎癥的重要指標(biāo),TNF-α、IL-6和MCP-1的表達(dá)升高可以介導(dǎo)白細(xì)胞募集和巨噬細(xì)胞遷移及浸潤(rùn)[28]。LIN等[29]研究顯示,在吲哚美辛誘導(dǎo)的大鼠腸道炎癥模型中,SAN可以通過(guò)降低大鼠腸道組織中TNF-α和IL-6的水平發(fā)揮抑炎作用。有研究顯示,在LPS刺激的人單核細(xì)胞白血病THP-1細(xì)胞系中,SAN可以通過(guò)下調(diào)炎癥遞質(zhì)IL-1β、MCP-1和IL-6的基因表達(dá)發(fā)揮保護(hù)作用[30]。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,SAN能顯著減少煙曲霉菌刺激的小鼠巨噬細(xì)胞中IL-6、TNF-α和MCP-1的表達(dá)。另有研究顯示,在真菌感染宿主后,宿主體內(nèi)的單核巨噬細(xì)胞等會(huì)迅速誘導(dǎo)COX-2的表達(dá)增加,導(dǎo)致下游的抑炎因子表達(dá)被抑制,對(duì)角膜炎的預(yù)后造成不利影響[31]。本文對(duì)真菌性角膜炎小鼠模型研究顯示,SAN能顯著下調(diào)COX-2及TNF-α的表達(dá)。LI等[19]研究顯示,在LPS誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷模型中,SAN通過(guò)抑制COX-2的表達(dá)抑制炎癥細(xì)胞因子的釋放,進(jìn)而抑制炎癥反應(yīng),降低急性肺損傷小鼠的致死率。本文研究結(jié)果與其相一致。因此,應(yīng)用SAN治療也可以通過(guò)減輕真菌性角膜炎中炎癥遞質(zhì)的過(guò)度表達(dá),從而改善真菌性角膜炎的預(yù)后。
綜上所述,SAN可以通過(guò)減少炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)和下調(diào)炎癥遞質(zhì)的表達(dá),減輕小鼠角膜煙曲霉菌感染后的炎癥反應(yīng),有望成為治療真菌性角膜炎的新型藥物。但SAN在真菌性角膜炎中的具體抗炎機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。
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(本文編輯 黃建鄉(xiāng))
青島大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)2023年4期