鄭曉麗

(龍巖人民醫(yī)院消化內(nèi)科,福建 龍巖 364000)

非酒精性脂肪肝屬于臨床常見的慢性肝病,好發(fā)于各年齡段人群,具有較高的發(fā)病率,目前發(fā)病率為15%～30%,在我國慢性肝病的發(fā)病率中排名第一,但目前臨床未完全明確其發(fā)病機(jī)制[1]。相關(guān)研究表明,腸道菌群與非酒精性脂肪肝的發(fā)生、發(fā)展息息相關(guān),當(dāng)機(jī)體腸道菌群平衡狀態(tài)被打破,益生菌數(shù)量減少、致病菌數(shù)量增多可誘發(fā)腸道炎癥,破壞腸黏膜屏障,并通過腸-肝軸損傷肝臟,加重非酒精性脂肪肝患者的病情[2]。由此可推斷,當(dāng)非酒精性脂肪肝患者出現(xiàn)腸道菌群失衡時,可提高腸道炎癥發(fā)生的危險性。目前關(guān)于非酒精性脂肪肝患者腸道菌群與腸道炎癥相關(guān)性的研究較少。鑒于此,該研究主要分析非酒精性脂肪肝患者的腸道菌群與腸道炎癥的關(guān)系及微生態(tài)制劑治療效果,詳細(xì)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究開展時間為2021.01～2022.12,研究對象為非酒精性脂肪肝患者(研究組,n=43)與健康體檢者(對照組,n=43)。對照組中男23例、女20例;年齡40歲～72歲,平均(56.39±7.25)歲。研究組中男25例、女18例;年齡38歲～75歲,平均(56.84±7.36)歲;病程時間3個月～3年,平均(1.58±0.42)年。對比兩組性別、年齡的分布情況,無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。

納入標(biāo)準(zhǔn):研究組經(jīng)超聲、CT檢查診斷為非酒精性脂肪肝,符合《非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018年更新版)》[3]的診斷標(biāo)準(zhǔn);對照組受檢者身體健康,既往無高血壓、血脂異常、糖尿病、肝腎功能損傷、酗酒等病史;年齡38歲～75歲;研究者清楚該研究的全部流程,自愿加入。

排除標(biāo)準(zhǔn):并發(fā)酒精性肝炎、肝硬化、病毒性肝炎等其他肝臟疾病者;存在腸道感染、克羅恩病等其他炎癥性腸病史者;入組前一個月內(nèi)使用過抗生素、抗凝、抗非酒精性脂肪肝等可能會影響檢測結(jié)果的藥物者;存在精神疾病史或認(rèn)知功能失常者。

1.2 方法

1.2.1檢測方法

兩組均接受腸道菌群、腸道炎癥指標(biāo)檢測,詳細(xì)方法為:(1)檢測前期準(zhǔn)備及樣本采集:告知患者在檢測前7天內(nèi)不可使用瀉藥,前5天內(nèi)不可食用乳酸制品(比如酸奶等)、益生元相關(guān)微生物制品,前3天內(nèi)飲食清淡。檢測當(dāng)天告知糞便取樣方法,要求其使用糞便器采集5g新鮮糞便,并在-80℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?2)腸道菌群檢測:取1mg糞便置入EP管內(nèi),加入0.9mL的磷酸緩沖鹽溶液(PBS)稀釋糞便,確保糞便與PBS混合均勻,并將其制成不同濃度的稀釋液,然后抽取200μL的稀釋液涂抹在培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)腸道菌群。觀察培養(yǎng)基情況,確定平板長出菌落后,使用每克糞便濕質(zhì)量中菌落形成單位的對數(shù)值(即log CFU/g)代表最終結(jié)果。(3)腸道炎癥指標(biāo)檢測:取50mg糞便置入提取液2450μL,待糞便與提取液混合均勻后靜置30min,隨后取1mL上清液,使用離心機(jī)進(jìn)行離心分離,離心時間為5min,離心速度設(shè)為2000×g,完成離心處理后獲取100μg上清液、100μg標(biāo)準(zhǔn)品,利用酶聯(lián)免疫吸附法(試劑盒廠家:北京科瑞美科技有限公司)檢測糞便鈣衛(wèi)蛋白(FC)表達(dá)水平。判斷標(biāo)準(zhǔn):當(dāng)FC表達(dá)水平>50μg/g,代表存在腸道炎癥。

1.2.2治療方法

研究組患者接受微生態(tài)制劑治療,即使用雙歧桿菌四聯(lián)活菌片(生產(chǎn)單位:杭州遠(yuǎn)大生物制藥有限公司;國藥準(zhǔn)字S20227006;規(guī)格0.5g)進(jìn)行治療,使用方法:一天三次,一次1.5g,溫開水吞服,總共治療3個月。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)腸道炎癥指標(biāo)與腸道菌群的檢測結(jié)果。

(2)使用Spearman分析腸道菌群與腸道炎癥的關(guān)系。

(3)觀察治療前與治療3個月后患者的腸道炎癥與腸道菌群指標(biāo),腸道炎癥指標(biāo)為FC,腸道菌群指標(biāo)包括大腸埃希菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌、羅氏菌與乳酸桿菌。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 評價兩組的腸道炎癥指標(biāo)

從表1的結(jié)果可知,在FC表達(dá)水平上,研究組高于對照組(P<0.05)。

表1 評價兩組的腸道炎癥指標(biāo)

2.2 對比兩組的腸道菌群數(shù)量

從表2的結(jié)果能夠看出,在大腸埃希菌、腸球菌及金黃色葡萄球菌上,研究組高于對照組;在羅氏菌與乳酸桿菌上,研究組低于對照組(P<0.05)。

表2 對比兩組的腸道菌群數(shù)量

2.3 分析腸道菌群與腸道炎癥的關(guān)系

根據(jù)Spearman相關(guān)性分析,大腸埃希菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌與FC呈正相關(guān)關(guān)系,羅氏菌、乳酸桿菌與FC呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05),見表3。

表3 分析腸道菌群與腸道炎癥的關(guān)系

2.4 評價研究組患者治療前后的腸道菌群、腸道炎癥指標(biāo)

研究組患者治療后,FC、大腸埃希菌、腸球菌及金黃色葡萄球菌低于治療前,羅氏菌、乳酸菌高于治療前,對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表4。

表4 評價研究組患者治療前后的腸道菌群、腸道炎癥指標(biāo)

3 討論

非酒精性脂肪肝在臨床較為常見,是指除了酒精及其他明確肝損傷因素外導(dǎo)致彌漫性肝細(xì)胞大泡性脂肪病變的一類綜合征,主要疾病類型有單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、肝硬化等[4]。非酒精性脂肪肝是一種慢性疾病,發(fā)病早期無明顯癥狀,隨著病情進(jìn)展可出現(xiàn)肝功能損傷癥狀,若未及時治療可進(jìn)展為肝纖維化、肝硬化、肝癌等,甚至危及生命危險[5]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),非酒精性脂肪肝是誘發(fā)肝癌的危險因素,故加強(qiáng)對疾病的早期診治是十分必要的[6]。

當(dāng)前,臨床關(guān)于非酒精性脂肪肝的發(fā)病原因未完全明確,但大量研究證實腸道菌群與非酒精性脂肪肝具有相關(guān)性,腸道菌群失衡可增加非酒精性脂肪肝的發(fā)生[7]。本研究顯示,研究組的大腸埃希菌、腸球菌及金黃色葡萄球菌高于對照組,羅氏菌與乳酸桿菌低于對照組(P<0.05),進(jìn)一步證實腸道菌群在非酒精性脂肪肝的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。大腸埃希菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌、羅氏菌、乳酸桿菌是臨床常見的腸道菌群,其中大腸埃希菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌是致病菌,羅氏菌、乳酸桿菌是益生菌,致病菌具有破壞腸黏膜屏障的作用,益生菌的主要作用是維持腸黏膜安全,致病菌與益生菌維持腸道菌群平衡,當(dāng)致病菌數(shù)量增加、益生菌數(shù)量減少時使得腸道菌群失衡、腸道黏膜屏障受損,大量內(nèi)毒素物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體,誘發(fā)炎癥反應(yīng)與肝臟氧化應(yīng)激反應(yīng),最終損傷肝臟功能[8]。臨床研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)非酒精性脂肪肝患者出現(xiàn)腸道菌群失衡、腸道屏障受損現(xiàn)象時,內(nèi)毒素血癥會刺激釋放大量的炎癥因子,引發(fā)肝臟內(nèi)部的炎癥反應(yīng),進(jìn)而加重對肝細(xì)胞的損傷程度,加重患者的病情,推測腸道炎癥與非酒精性脂肪肝的發(fā)生發(fā)展可能存在相關(guān)性[9]。FC是臨床常見的腸道炎癥指標(biāo),當(dāng)機(jī)體發(fā)生腸道炎癥反應(yīng)后,中性粒細(xì)胞會聚集在腸道炎癥部位,并釋放大量的FC,故通過觀察FC表達(dá)水平能反映腸道炎癥損傷程度[10]。該研究發(fā)現(xiàn),研究組的FC高于對照組(P<0.05),這與黃澤鑫[11]的研究報道相似,表明腸道炎癥與非酒精性脂肪肝具有相關(guān)性。該研究發(fā)現(xiàn),根據(jù)Spearman相關(guān)性分析,大腸埃希菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌與FC呈正相關(guān)關(guān)系,羅氏菌、乳酸桿菌與FC呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05),這與蘇沛珠等[12]研究報道相似,提示非酒精性脂肪肝患者的腸道菌群與腸道炎癥存在相關(guān)性,腸道菌群失衡是加重腸道炎癥、促進(jìn)非酒精性脂肪肝病情發(fā)展的危險因素。該研究發(fā)現(xiàn),研究組患者經(jīng)微生態(tài)制劑治療后,其腸道菌群、腸道炎癥指標(biāo)均優(yōu)于治療前(P<0.05)。分析其原因可能為:雙歧桿菌四聯(lián)活菌片作為微生態(tài)制劑,能直接補(bǔ)充外源性的益生菌,增加機(jī)體益生菌和數(shù)量,抑制腸道中某些致病菌,促進(jìn)腸道菌群處于平衡,從而修復(fù)受損腸道黏膜屏障,減輕腸道炎癥反應(yīng)[13]。

綜上所述,非酒精性脂肪肝患者的腸道菌群與腸道炎癥具有相關(guān)性,腸道菌群、腸道炎癥在非酒精性脂肪肝的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中具有重要作用。針對非酒精性脂肪肝患者,實施微生態(tài)制劑治療的效果顯著,有利于調(diào)節(jié)腸道菌群,減輕腸道炎癥反應(yīng),實現(xiàn)疾病轉(zhuǎn)歸。