郭文勇，廖翠平，代金剛，高雅，阿拉坦朝魯門，額尼日勒，黨海霞，圖雅

1.中國中醫(yī)科學院 中醫(yī)臨床基礎(chǔ)醫(yī)學研究所，北京 100700；

2.中國中醫(yī)科學院 醫(yī)學實驗中心，北京 100700；

3.內(nèi)蒙古民族大學 蒙醫(yī)藥學院，內(nèi)蒙古 通遼 028000；

4.中國中醫(yī)科學院 中醫(yī)藥研究發(fā)展中心，北京 100700

綿馬貫眾為鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨Dryopteris crassirhizomaNakai.的干燥根莖及葉柄殘基，異名貫眾、東北貫眾，主要產(chǎn)于黑龍江、遼寧、吉林等地[1-2]。其味苦、澀，性微寒，有小毒，歸肝、胃經(jīng)，具有清熱解毒、涼血止血、殺蟲的功效，臨床多用于治療風熱感冒，溫毒濕熱斑疹，吐血，咳血，便血，崩漏，血痢，帶下，鉤、蛔、絳蟲等腸道寄生蟲病，風寒濕痹，腰膝酸軟，遺尿等[3-4]?，F(xiàn)代藥理研究表明，綿馬貫眾具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化等藥理活性[2]。綿馬貫眾近緣植物較多，臨床使用品種不一，影響其臨床用藥的安全性和有效性。本文基于中藥質(zhì)量標志物（Q-marker）的核心概念[5]，結(jié)合文獻資料綜合分析預測綿馬貫眾的Q-marker，從化學成分的特有性、傳統(tǒng)藥性藥效理論、化學成分可測性、網(wǎng)絡(luò)藥理學方面對綿馬貫眾Q-marker 進行預測，推動建立科學合理的綿馬貫眾藥材質(zhì)量評價體系。

1 本草考證

綿馬貫眾始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為下品，曰：“一名貫節(jié)，一名貫渠，一名百頭”[6]?！吨袊幉膶W》中對貫眾原植物的描述為“多年生草本，根莖短，斜生或直立，連同葉柄基部密生闊卵狀披針形黑褐色大鱗片。葉簇生，羽片鐮狀披針形，基部上側(cè)呈耳狀，邊緣有細鋸齒，葉脈網(wǎng)狀。孢子囊群生于羽片下面的內(nèi)藏小脈頂端，囊群蓋大，圓盾形”[7]。中藥貫眾基原植物構(gòu)成較為復雜，據(jù)文獻報道我國中藥貫眾的基原植物不少于35 種，分屬于6科12 屬[8]?！吨兴幋筠o典》中記載貫眾的原植物有7種[9]。其中，鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨D.crassirhizomaNakai.是貫眾最主要的基原植物，綿馬貫眾為貫眾的正品。在《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》）1977 年版中對貫眾相關(guān)近緣藥用植物的記載為粗莖鱗毛蕨D.crassirhizomaNakai.和紫萁貫眾Osmunda japonicaThunb.2 種[10]，自《中國藥典》1995 年版起均將綿馬貫眾單列[4,11]。因綿馬貫眾基原植物歷史記載較為混亂，目前研究多通過紅外指紋圖譜[12]、質(zhì)體基因組及組成分析[13]、基因測序技術(shù)[14-15]等方法對綿馬貫眾進行鑒定和質(zhì)量評價。

2 化學成分

綿馬貫眾中含有多種類型化合物，如間苯三酚類、黃酮類、萜類、甾體類、苯丙素類、脂肪族類、苷類和多糖等物質(zhì)[18-50]。

2.1 間苯三酚類

間苯三酚類化合物是綿馬貫眾的主要活性成分[16]，且是抗流感病毒的主要有效成分[17]。目前從綿馬貫眾中分離得到的間苯三酚類化合物有39個，并根據(jù)環(huán)數(shù)目將其分類[2]。綿馬貫眾中間苯三酚類化合物詳情見表1，結(jié)構(gòu)式見增強出版附加材料。

表1 綿馬貫眾中的間苯三酚類化合物

2.2 黃酮類

綿馬貫眾中黃酮類化合物見表2，結(jié)構(gòu)式見增強出版附加材料。高增平[23]對綿馬貫眾進行了系統(tǒng)的化學成分研究，分離鑒定獲得 [2R,3R]-2,3-順-3,5,7,3′,5′-五羥基黃烷-8-C-α-D-吡喃葡萄糖苷（[2R,3R]-2,3-cis-3,5,7,3′,5′-pentahydroxyflavan-8-C-α-Dglucopyranoside）。Lee等[35]通過生物追蹤分離法從綿馬貫眾中分離鑒定獲得包括綿馬貫眾苷A（crassirhizomoside A）在內(nèi)的10個黃酮類化合物。

表2 綿馬貫眾中的黃酮類化合物

2.3 萜類

目前，已從綿馬貫眾中分離獲得24 個萜類化合物，主要為單萜類及三萜類化合物，詳情見表3，結(jié)構(gòu)式見增強出版附加材料。

2.4 甾體類

周榮華[38]通過色譜和化學分離技術(shù)從綿馬貫眾中獲得牛膝甾酮A（inokosterone A）和坡那甾酮A（ponasterone A）2 種甾體類化合物。袁麗鵬等[49]采用液相色譜等方法從綿馬貫眾石油醚提取物中分離鑒定出3 個甾體類化合物。綿馬貫眾中甾體類化合物詳情見表4，結(jié)構(gòu)式見增強出版附加材料。

2.5 苯丙素類

有研究利用波譜技術(shù)和化學方法從綿馬貫眾中分離出咖啡酸（caffeic acid，92）[23]。Min 等[36]報道運用多種現(xiàn)代分離和波譜技術(shù)從綿馬貫眾乙醇部位獲得 (7S,8R)-二氫脫氫二松柏基醇-9′-O-β-葡萄糖苷（93）和4,7,9,9′-四羥基-3,3′-二甲氧基-8-O-4′-新木質(zhì)素-9′-O-β-D-葡萄糖苷（94）。鄒月紅[50]利用硅膠、十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）及高效液相色譜法（HPLC）等多種分離手段對東北貫眾60%乙醇組分進行分離純化獲得對羥基苯基丙烯酸（95）。

2.6 脂肪族類

高增平等[41]采用氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）從綿馬貫眾中首次分離鑒定獲得9 個脂肪族類化合物，分別為丁基環(huán)己烷、1-甲基乙基-環(huán)己烷、9-(1-甲基亞乙基)-二環(huán)[6.1.0]壬烷、環(huán)己烷基環(huán)己烷、3,7,11-三甲基-2,6,10-三烯十二烷-1-醇、順式十氫萘、2,3,4,4a,5,6-六氫-1,4a-二甲基-7-(1-甲基乙基)-萘、[1aR-(1aα,7α,7a,7b)]-1a,2,3,5,6,7,7a,7b-八氫-1,1,7,7a-四甲基-1H-環(huán)丙烷[a]萘、2-[(2R)-羥基-正二十一碳酰基]-(3R,4S)-二羥基-(2S,3R,4S)-正十八烷三醇。綿馬貫眾中脂肪族類化合物詳情見表5，結(jié)構(gòu)式見增強出版附加材料。

2.7 糖類

Chang等[34]通過多種色譜技術(shù)從綿馬貫眾中分離鑒定出鱗毛蕨苷和1-β-D-glucopyranosyloxy-3-methoxy-5-hydroxybenzene 2 種糖苷類化合物。有研究報道從綿馬貫眾乙醇部位獲得3-甲基-2,6-二羥基-4-O-β-D-半乳糖基-苯乙酮[36]。高增平等[22-23]從綿馬貫眾甲醇提取物中測得蔗糖、β-D-吡喃果糖、α-D-呋喃果糖和β-D-呋喃果糖。綿馬貫眾中糖類化合物詳情見表6，結(jié)構(gòu)式見增強出版附加材料。

表6 綿馬貫眾中的糖類化合物

2.8 色原酮類

有研究通過多種色譜技術(shù)從綿馬貫眾中分離鑒定出色原酮類化合物雙花母草素（biflorin，123）、異雙花母草素（isobiflorin，124）[34]，結(jié)構(gòu)式見增強出版附加材料。

3 藥理作用

3.1 抑菌、抗菌作用

胡昌江等[51]以金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、類白喉桿菌等9 個菌種的生長活性為指標，對綿馬貫眾飲片進行研究，發(fā)現(xiàn)其具有較強的抑菌活性。陳紅云等[52]采用藥敏實驗篩選了綿馬貫眾的抗菌活性部位，發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾甲醇總提取物的抗菌活性弱于單個提取部位，其中石油醚提取物和正丁醇提取物具有明顯的抗金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌的活性。賈小舟等[53]研究了綿馬貫眾中3個間苯三酚類成分對3種真菌的抑菌活性，發(fā)現(xiàn)3個間苯三酚類成分對紅色毛癬菌和犬小孢子菌的抑菌活性均優(yōu)于對須癬毛癬菌的抑菌活性。此外，有研究表明，綿馬貫眾不同萃取部位的抑菌活性與用藥量呈正相關(guān)，其中三氯甲烷萃取部位和乙酸乙酯萃取部位的抑菌活性較強，水萃取部位的抑菌活性最小[54]。劉釗[55]采用正己烷、三氯甲烷、丙酮和乙醇對綿馬貫眾中抗感染部位進行洗脫，并對這4 個部分分別進行藥理活性篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)4 個部分均具有抗菌活性，且抗革蘭陽性菌活性優(yōu)于抗革蘭陰性菌和真菌，其中正己烷部分抗革蘭陽性菌能力較強；同時進一步對正己烷部分分離出的4 個間苯三酚類化合物進行活性篩選，發(fā)現(xiàn)黃綿馬酸AB抗菌活性較強。董小云[56]以金黃色葡萄球菌血管性血友病因子結(jié)合蛋白（vWbp）作為藥物作用靶點，研究綿馬貫眾素對vWbp活性、金黃色葡萄球菌體外導管感染模型和金黃色葡萄球菌感染小鼠腎膿腫的影響，結(jié)果表明綿馬貫眾素可直接與vWbp 相結(jié)合，通過抑制vWbp 活性而降低金黃色葡萄球菌毒力。Li 等[57]研究發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾素ABBA 可減輕由金黃色葡萄球菌引起的小鼠肺組織損傷和炎癥，并采用分子動力學模擬研究方法證實ABBA 可通過蛋白殘基Arg-70、His-71、Ala-72、Gly-73、Tyr-74、Glu-75、Tyr-83、Gln-87與vWbp 相互作用，從而干擾vWbp 與凝血酶原的結(jié)合。高云飛等[58]采用生長速率法測定綿馬貫眾素ABBA 對馬鈴薯干腐病4 種主要致病鐮孢菌的抑制效果，并研究不同質(zhì)量濃度的綿馬貫眾素ABBA 對接骨木鐮孢菌菌絲和孢子萌發(fā)率的影響，結(jié)果顯示其對4 種鐮孢菌均有一定的抑制作用，質(zhì)量濃度為1 mg·mL-1時對接骨木鐮孢菌抑制率高達95.2%，且在0.5 mg·mL-1時可有效抑制接骨木鐮孢菌孢子的萌發(fā)。Jung 等[59]發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾正己烷餾分中的亞油酸是其最有效的抗菌成分，可通過抑制生物膜形成而降低變形鏈球菌的細胞活力。并且有研究報道綿馬貫眾的甲醇提取物對變形鏈球菌具有殺菌和抑菌活性[60]。

3.2 抗病毒作用

3.2.1 抗流感病毒 楊關(guān)林等[61]采用雞胚體外抗病毒實驗評價了綿馬貫眾、黃芩、金銀花、苦參和連翹的抗病毒活性，結(jié)果顯示綿馬貫眾對甲型流感病毒FM1 株的預防和治療作用均優(yōu)于其他4 味中藥。陳建新等[30]采用高效液相色譜-質(zhì)譜法對綿馬貫眾抗禽流感病毒活性部位進行分離檢測，發(fā)現(xiàn)多聚間苯三酚類衍生物是其主要活性成分。孫科峰等[62]通過小鼠實驗觀察綿馬貫眾水、乙醇2 種提取物對滴鼻感染FM1 株流感病毒的小鼠肺指數(shù)的影響，發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾的水和乙醇提取物均有一定的抗病毒作用，可減低病毒引起的肺損傷。閆艷韜等[63]通過分子對接方法篩選出與H1N1 流感病毒神經(jīng)氨酸酶（NA）有較好結(jié)合的4 種化合物（綿馬酸ABA、綿馬酸ABB、綿馬酸ABP、綿馬貫眾素ABBA），并對其進行活性驗證，結(jié)果表明綿馬貫眾素ABBA 對NA 抑制作用最強，半數(shù)抑制濃度（IC50）值為（26.73±0.57）μmol·L-1。王娟[64]采用分子對接技術(shù)篩選獲得6 個間苯三酚類候選化合物，通過體內(nèi)外活性實驗及免疫機制研究，發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾素ABBA、綿馬酸ABA 具有較強的抗NA 作用，且與陽性對照藥奧司他韋相比綿馬貫眾素ABBA 具有較好的直接殺滅病毒的作用，其作用靶點可能為神經(jīng)氨酸酶；體內(nèi)小鼠實驗也表明綿馬貫眾素ABBA 可通過降低促炎因子白細胞介素-6（IL-6）、IL-12、γ-干擾素（INFγ）、IL-10 和增加抗炎因子人單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等表達減輕感染病毒小鼠的肺部炎癥。劉暢等[65]采用犬腎MDCK 細胞通過細胞病變法（CPE）對具有NA 抑制活性的綿馬貫眾素ABBA 抗病毒活性進行驗證，實驗結(jié)果表明，其對多種流感病毒毒株均具有良好的抑制作用。此外，有研究報道綿馬貫眾中化合物綿馬貫眾素ABBA 具有較好的抗H5N1、H7N9 流感病毒NA的作用[66-68]。

3.2.2 抗冠狀病毒 Jin 等[69]通過免疫熒光實驗發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾素ABBA 和綿馬酸ABA 可抑制嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2 型（SARS-CoV-2）蛋白酶活性，并對新型冠狀病毒（COVID）-19 等冠狀病毒感染有一定治療作用。

3.2.3 抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）Yang 等[70]采用體外細胞實驗發(fā)現(xiàn)黃綿馬酸AB 可通過誘導豬肺泡巨噬細胞中的IFN-α、IFN-b、IL-1b表達，達到抑制PRRSV復制的作用。

3.2.4 抗乙肝病毒及護肝降酶作用 袁麗鵬[71]通過反相被動血凝抑制實驗（RPHI）發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾具有抗乙肝病毒活性。鄭民實等[72]利用ELISA技術(shù)對250種中草藥水提物進行HBsAg 實驗，結(jié)果表明貫眾水提物（0.05 mg·mL-1）可有效地抗乙肝病毒。有文獻報道綿馬貫眾有效組分（100 mg·kg-1）能使α-半乳糖胺鹽誘導的小鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（SGPT）水平升高、血清蛋白水平降低，恢復至正常水平；能使小鼠肝糖原含量顯著升高，但不能恢復到正常水平[73]。韋四煌等[74]發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾提取物高、中、低3個劑量（50、100、200 mg·kg-1）均可明顯降低CCl4肝損傷小鼠模型組和D-氨基半乳糖肝損傷小鼠模型組的血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）含量和肝勻漿的丙二醛（MDA）含量，但對血清天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）的含量無明顯影響。

3.2.5 抗艾滋病毒（HIV）有研究發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾和其他多種藥物具有抑制HIV 的作用[75]。張麗霞[37]從綿馬貫眾根的甲醇提取液中分離得到了5 種化合物，并對其進行HIV 逆轉(zhuǎn)錄活性篩選，結(jié)果顯示綿馬貫眾A、綿馬貫眾苷C、霍苷A和山柰素對與HIV逆轉(zhuǎn)錄相關(guān)的DNA 聚合酶（DDDP）有較好的抑制活性。

3.2.6 抗腺病毒Ⅲ型和單純皰疹病毒Ⅰ型 有研究報道綿馬貫眾對腺病毒Ⅲ型、皰疹病毒有較強的作用；其水和醇提取物對腺病毒Ⅲ型、脊髓灰質(zhì)炎Ⅱ型、埃柯Ⅸ型、柯薩奇A9 型、柯薩奇B3 型、柯薩奇B5型、乙型腦炎、單純皰疹等代表性病毒株有較強的抗病毒作用[32,76-78]。

3.3 抗腫瘤作用

Lee等[79]建立牙齦鱗狀細胞癌侵襲下頜小鼠模型和無胸腺小鼠模型，采用人類蛋白酶陣列研究方法，發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾乙醇提取物具有抗侵襲和抗牙齦鱗狀細胞癌作用。有研究報道綿馬貫眾素ABBA 可能通過半胱天冬酶介導的線粒體途徑誘導人肝癌HepG2細胞凋亡[80]。金哲[81]采用MTT 法檢測發(fā)現(xiàn)，綿馬貫眾素ABBA可抑制人非小細胞肺癌A549細胞、人肝癌HepG2 細胞和人乳腺癌MCF-7 細胞，其中HepG2細胞對其最敏感。劉釗[55]研究發(fā)現(xiàn)，黃綿馬酸AB具有抗腫瘤活性。

3.4 抗氧化作用

劉乙等[82]采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法和鐵離子還原/總抗氧化能力（FRAP）法發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾甲醇提取液可有效清除DPPH 自由基，且其對DPPH 自由基清除活性與鐵離子還原能力增強的趨勢基本一致。李佳穎等[83]報道綿馬貫眾多糖具有很強的DPPH 自由基清除活性、羥基自由基清除活性，且對DNA 的氧化損傷有顯著的保護作用。多項研究表明，綿馬貫眾總多酚、黃綿馬酸PB及黃綿馬酸AB 具有有效的抗氧化活性，其中，黃綿馬酸PB、黃綿馬酸AB 可抑制脂質(zhì)過氧化[84-85]。Zhao 等[86]利用陰離子交換色譜法（DEAE-52）和Sephadex G-100柱從綿馬貫眾中純化獲得1種新型三螺旋多糖的酸性多糖組分（DCP-3），發(fā)現(xiàn)其對DPPH 自由基、羥基自由基和超氧陰離子具有很強的清除活性，并能還原鐵離子。

3.5 驅(qū)蟲作用

有研究表明，綿馬貫眾可通過破壞線蟲體表的防御結(jié)構(gòu)和體內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)，干擾線蟲體內(nèi)的新陳代謝，使線蟲體內(nèi)的保護酶系和神經(jīng)傳導酶系活性表達失衡，而抑制南方根結(jié)線蟲；總間苯三酚含量與綿馬貫眾殺蟲活性存在一定的相關(guān)性，乙酸乙酯萃取段是魚類指環(huán)蟲的最佳殺蟲部位[87-88]；白綿馬素AP、霍苷A 和山柰苷具有顯著的殺滅線蟲活性，其中，白綿馬素AP 可使指環(huán)蟲體壁結(jié)構(gòu)出現(xiàn)應(yīng)激變化，皮層產(chǎn)生孔洞、突起等多種損傷[89-90]。Lu等[91]研究發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾甲醇提取物對金魚鰓部的中型指環(huán)蟲有顯著的殺滅作用。趙玉敏等[92]利用均勻設(shè)計方法對實驗數(shù)據(jù)進行分析處理，發(fā)現(xiàn)粗莖鱗毛蕨乙醇提取物對菜青蟲有拒食作用。

3.6 止血作用

熊威等[93]采用小鼠斷尾和肝臟出血實驗研究綿馬貫眾炭碳點（DCC-CDs）的止血作用，發(fā)現(xiàn)DCC-CDs 具有良好的止血效果，能顯著減少小鼠斷尾和肝臟出血時間。

3.7 調(diào)節(jié)免疫

張強等[94]建立人工感染雞傳染性法氏囊病病毒（IBDV）模型，研究綿馬貫眾可溶性粉對IBDV的治療效果，結(jié)果顯示，綿馬貫眾可溶性粉（50 mg·kg-1）連續(xù)口服給藥5 d，可提高胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)而發(fā)揮免疫增強功效。Fu 等[95]通過體外脂多糖（LPS）刺激活化的小鼠骨髓衍生樹突狀細胞實驗和體內(nèi)同種異體皮膚抑制實驗研究綿馬貫眾素的免疫調(diào)節(jié)活性，結(jié)果顯示綿馬貫眾素可抑制樹突狀細胞的免疫刺激功能，并延長了皮膚同種異體移植物的存活時間。有研究報道綿馬貫眾中的山柰素-3-O-α-L-(4-O-乙?；?鼠李糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷可提高草魚的溶菌酶活性、補體C3、超氧化物歧化酶（SOD）、吞噬活性和免疫球蛋白M（IgM）水平[33]。Wang 等[96]測定了經(jīng)粗莖鱗毛蕨（DCR）處理的斑馬魚胚胎中黑色素含量和酪氨酸酶活性，結(jié)果表明DCR 以劑量依賴性方式顯著降低了斑馬魚胚胎中的黑色素含量和酪氨酸酶活性。

3.8 其他

田雪松等[97]研究綿馬貫眾水煎劑對去卵巢肥胖大鼠的影響，發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾水煎劑可明顯抑制去卵巢肥胖大鼠的體質(zhì)量增加、降低血清MDA水平、升高血清雌激素水平。Ha 等[98]通過小鼠實驗發(fā)現(xiàn)粗莖鱗毛蕨水提物不僅通過抑制破骨細胞前體中的核轉(zhuǎn)錄因子受體激活劑-κB配體（RANK）信號通路抑制破骨細胞分化，并可破壞成熟破骨細胞中的肌動蛋白環(huán)而抑制骨吸收。有研究報道綿馬貫眾中的丁酰-3-甲基間苯三酚對膠原和花生四烯酸誘導的血小板聚集有顯著的抑制活性[99]。高增平等[100]發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾的石油醚和乙酸乙酯萃取部位具有抗瘧活性。

4 綿馬貫眾的Q-marker的預測

中藥Q-marker 由劉昌孝院士于2016 年針對中藥質(zhì)量研究提出，以有效性、特有性、傳遞性與溯源性、可測性和處方配伍為核心內(nèi)容，追蹤可反映中藥安全性和有效性的標志性物質(zhì)的概念[5]。本研究基于植物親緣學及化學成分特有性證據(jù)、傳統(tǒng)藥性藥效、化學成分可測性和網(wǎng)絡(luò)藥理學5 個方面對綿馬貫眾進行Q-marker預測分析。

4.1 基于植物親緣學及化學成分特有性的Q-marker預測分析

藥用植物親緣學研究是用于探索藥用植物的親緣關(guān)系-化學成分-療效間相關(guān)性，對中藥植物資源開發(fā)具有重要指導意義[101]?；瘜W成分特有性可作為中藥鑒別、質(zhì)量評價和質(zhì)量控制的衡量標準[102]，也是進行藥用植物Q-marker 預測分析不可或缺的一部分。

據(jù)調(diào)查，全國中藥貫眾的原植物至少有35 種，分屬于6科12屬，曾用作貫眾的原植物有11科18屬58 種（含2 變種1 變形），經(jīng)1986—1987 年對全國商品貫眾品種的調(diào)查，確定了10 個主要品種[7,22,77]。高增平等[103]對我國31 省市56 份商品貫眾樣品進行研究，結(jié)果表明目前我國臨床上使用的商品貫眾共有7 種植物來源，分屬于4 個科5 個屬，分別為鱗毛蕨科鱗毛蕨屬植物粗莖鱗毛蕨D.crassirhizomaNakai.、遼東鱗毛蕨D.peninsulaeKitag.，蹄蓋蕨科峨眉蕨屬植物峨眉蕨Lunathyrium acrostichoides，烏毛蕨科狗脊蕨屬植物狗脊蕨Woodwardia japonica、單芽狗脊蕨Woodwardia unigemmata，烏毛蕨科烏毛蕨屬植物烏毛蕨Blechnum orientale，球子蕨科莢果蕨屬植物莢果蕨Matteuccia struthiopteris。羅愛國等[104]對我國5 個地區(qū)（河北、內(nèi)蒙古、山西、重慶及山東）商品貫眾進行品種鑒定，結(jié)果表明5 個地區(qū)的貫眾分屬3 個種，河北、內(nèi)蒙古及山西商品貫眾為綿馬貫眾正品（粗莖鱗毛蕨），重慶的貫眾為狗脊蕨，山東地區(qū)的貫眾為莢果蕨，5 個地區(qū)的貫眾均含有活性成分間苯三酚類化合物、鞣質(zhì)，間苯三酚類化合物含量最高為粗莖鱗毛蕨，其次為莢果蕨，最少為狗脊蕨。有研究報道，烏毛蕨、狗脊蕨、莢果蕨等蕨類植物是富含黃酮類化合物的植物資源[105-106]。因此，基于上述藥用植物親緣性和化學成分特有性分析，間苯三酚類、黃酮類成分可作為綿馬貫眾Q-marker篩選的重要參考。

4.2 基于傳統(tǒng)藥性藥效的Q-marker預測分析

綿馬貫眾味苦澀，性微寒，具有清熱解毒等功效。中藥臨床藥理研究表明，寒涼性藥物主要抑制機體能量和物質(zhì)代謝，具有抗細菌、抗真菌作用，其含有的化學成分以苷類、生物堿類、黃酮類居多[107-109]。陶瑾等[110]以中藥藥性理論為基礎(chǔ)，并利用網(wǎng)絡(luò)藥理學研究方法，發(fā)現(xiàn)苦味藥以黃酮和生物堿為主要活性成分。因此黃酮可被初步篩選為綿馬貫眾Q-marker 的參考。綿馬貫眾多用于預防流行性感冒，治療溫毒濕熱斑疹，吐血，咳血，便血，崩漏，血痢，帶下，鉤、蛔、絳蟲等腸道寄生蟲病[5]?，F(xiàn)代藥理學研究發(fā)現(xiàn)綿馬貫眾具有抗病毒[60]、抗菌[50]、抗腫瘤[78]、抗氧化[81]、止血[92]、驅(qū)蟲[86]等藥理作用。綿馬貫眾中含有的間苯三酚類成分，如黃綿馬酸AB、綿馬酸ABA、綿馬酸ABB、綿馬酸ABP、綿馬貫眾素ABBA 等，也具有抗菌[52]、抗真菌[57]、抗病毒[68]、抗腫瘤[54,79]、抗氧化[84]、驅(qū)蟲[86-89]、調(diào)節(jié)免疫[93]等藥理活性；其黃酮類成分，如綿馬貫眾苷、山柰素、霍苷A，具有抗艾滋病毒[37]、驅(qū)蟲[88-89]、調(diào)節(jié)免疫[32]等藥理作用；綿馬貫眾多糖成分具有抗氧化[82,85]等藥理活性，與綿馬貫眾傳統(tǒng)功效清熱解毒、涼血止血、殺蟲相呼應(yīng)。因此，間苯三酚類、黃酮類及多糖類化合物可作為綿馬貫眾Q-marker 篩選的參考。

4.3 基于化學成分可測性的Q-marker預測分析

化學成分可測性是確定中藥Q-marker 的基本條件之一，目前主要采用超高效液相色譜法（UPLC）、氣相色譜法、薄層色譜法、紫外-可見分光光度法、陰離子交換樹脂法等對中藥成分進行定性和定量分析。賈瑩瑩等[111]使用紫外-可見分光光度法對綿馬貫眾總黃酮含量進行測定，結(jié)果顯示綿馬貫眾總黃酮質(zhì)量分數(shù)為1.033 mg·g-1。劉暢等[31]采用UPLC同時測定綿馬貫眾抗病毒有效部位中綿馬酸ABB、綿馬貫眾素ABBA 和綿馬貫眾素ABBP 的含量，可為綿馬貫眾及其抗流感病毒有效部位的質(zhì)量控制提供參考。司云珊等[112]建立反向高效液相色譜法（RPHPLC）對綿馬貫眾中綿馬貫眾素進行分離，定量測定綿馬貫眾素的含量，用于綿馬貫眾的質(zhì)量控制。曹廣尚等[113]利用陰離子交換樹脂分離純化綿馬貫眾總多酚，該方法效率高、成本低。劉計權(quán)等[114]采用紫外-可見分光光度法測定綿馬貫眾不同萃取部位總間苯三酚的含量，測得綿馬貫眾中總間苯三酚類化合物的質(zhì)量分數(shù)為10.03%。由此可見，間苯三酚類成分如綿馬貫眾素ABBA、綿馬貫眾素ABBP 可能與綿馬貫眾藥效作用密切相關(guān)，可作為綿馬貫眾Qmarker的候選化合物。

4.4 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學的Q-marker預測分析

通過PubChem 小分子化合物數(shù)據(jù)庫（https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）、中藥系統(tǒng)藥理學數(shù)據(jù)庫及分析平臺（TCMSP，http：//tcmspw.com/tcmsp.php）和已發(fā)表文獻，建立綿馬貫眾的化學成分數(shù)據(jù)集共124 個化合物。依據(jù)口服生物利用度（OB）和類藥性（DL）進行篩選，共篩選出26個候選活性成分。將活性成分輸入SwissTargetPrediction數(shù)據(jù)庫進行目標靶點預測，以置信度（probability）>0.1 為條件[115]，篩選去重后獲得258 個靶點 [白綿馬素AA、綿馬酸BBB、(+)-兒茶素和 (-)-兒茶素無符合條件靶點]，并進一步預測了其可能的蛋白作用靶點，活性成分靶點圖見增強出版附加材料。根據(jù)網(wǎng)絡(luò)藥理學預測，建議以鐵線蕨酮、白綿馬素AP、白綿馬素BB、綿馬素BB、雙花母草素、丁基環(huán)己烷、咖啡酸、石竹烯、海綿甾醇、大豆素、胡蘿卜苷、里白烯、里白醇、雁齒烯、二十六烷酸、22(29)-何帕烯、何帕醇、山柰素、橙花叔醇、二十五烷醇、十八烷酸、蔗糖22 個化合物作為綿馬貫眾的Qmarker篩選范圍。

5 結(jié)語與展望

綿馬貫眾是常用中藥，具有廣泛的藥理作用，臨床療效顯著。本文通過文獻考證，鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨D.crassirhizomaNakai.的干燥根莖及葉柄殘基為綿馬貫眾的正品?；谥兴嶲-marker 理論，結(jié)合其化學成分、現(xiàn)代藥理活性研究等方面，推測間苯三酚類和黃酮類可作為其Q-marker，例如，黃綿馬酸AB、綿馬酸ABA、綿馬酸ABB、綿馬酸ABP、綿馬貫眾素ABBA、綿馬貫眾苷、山柰素、霍苷A 等化合物?；谥兴幩幮?、中藥藥性化學等理論對綿馬貫眾Q-marker 的預測分析結(jié)果，將進一步對綿馬貫眾的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、炮制、藥動學等方面進行深入的研究，以期為建立綿馬貫眾臨床運用的質(zhì)量控制和評價體系提供科學依據(jù)。