□文/白雪峰 吳丙銀 駱月茹
雞腎型傳染性支氣管炎是一種高度接觸性傳染病,特別是肉雞感染較為嚴(yán)重。腎型傳染性支氣管炎病毒主要侵害雞腎臟,發(fā)病率和死亡率都很高,對(duì)養(yǎng)雞業(yè)危害極大。由于該病毒血清型較多,各毒株之間抗原性差異很大,免疫效果還不確實(shí),為預(yù)防其傳染帶來了極大困擾。目前,有很多雞場采用抗生素控制繼發(fā)感染、補(bǔ)液通腎等綜合防治方法,但效果不確實(shí)。同時(shí)應(yīng)用抗病毒藥物、抗生素等進(jìn)行治療,由于藥物殘留問題使之應(yīng)用受限,因此亟須研發(fā)一些高效、低殘留的藥物來防治肉雞腎型傳染性支氣管炎。中藥由于其高效、低藥物殘留越來越多地應(yīng)用到動(dòng)物疫病的防治中,本研究就是按照傳統(tǒng)中獸醫(yī)理論進(jìn)行組方,通過防治效果比較篩選最佳中藥組方。
1.試驗(yàn)動(dòng)物。選取1 日齡肉仔雞240 只,隨機(jī)分為8 組。
2.主要藥品與試劑。肉雞腎型傳染性支氣管炎病毒毒株為前期試驗(yàn)中分離鑒定得到的病毒材料。中藥藥材:荊芥、防風(fēng)、羌活、獨(dú)活、麻黃、柴胡、前胡、桔梗、枳殼、茯苓、甘草、川芎、板藍(lán)根、大黃、車前子、瞿麥、黨參、雙花、連翹、淡豆豉、芥穗、竹葉、薄荷、蘆根、牛蒡子、瞿麥、萹蓄、黃芪、大青葉、貫眾、蟾酥,均購于安國藥材市場。
1.中藥組方。根據(jù)所學(xué)傳統(tǒng)中獸醫(yī)理論,上述中藥組成三個(gè)中藥方劑,具體如下:
組方1:荊芥30、防風(fēng)30、羌活25、獨(dú)活25、麻黃25、柴胡25、前胡25、桔梗30、枳殼25、茯苓30、甘草15、川芎20、板藍(lán)根30、大黃20、車前子15、瞿麥15、黨參20。
組方2:雙花45、連翹45、淡豆豉30、桔梗25、芥穗25、竹葉20、薄荷30、蘆根30、甘草20、牛蒡子20、大黃20、瞿麥10、萹蓄10、黃芪30。
組方3:麻黃100、板藍(lán)根60、大青葉60、貫眾60、獨(dú)活30、柴胡30、前胡30、桔梗50、川芎30、蟾酥2、甘草20。
2.中藥煎制。各組方分別用10 倍的水浸泡20 分鐘,煎煮20 分鐘,倒出藥液,加水再煎20 分鐘,2 次藥液合并、濃縮、離心后定容至生藥濃度為1 克/毫升,4℃保存,備用。
3.動(dòng)物分組及處理。將240 只1 日齡雛雞隨機(jī)分為8 組,每組30 只。具體為陰性對(duì)照組(正常組)、陽性對(duì)照組(感染組)、組方1 預(yù)防組、組方2 預(yù)防組、組方3 預(yù)防組、組方1 治療組、組方2 治療組、組方3 治療組。
預(yù)防組1 日齡雛雞常規(guī)飼養(yǎng)預(yù)飼3 天后,第4 天將煎制好的3 個(gè)中藥組方制劑按1%的比例飲水,分上、下午2 次給藥,連續(xù)飲用12 天。第12 天預(yù)防組和陽性對(duì)照組攻毒,IBV 毒株滴鼻0.3 毫升/只雞;陰性對(duì)照組不攻毒,不喂藥,滴鼻0.3 毫升生理鹽水,觀察10 天,統(tǒng)計(jì)發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。
治療組給常規(guī)飼養(yǎng)至10 天的雛雞攻毒,攻毒后治療組給藥,按2%比例飲水,2 次/日,每天上、下午各1 次,連用6 毫升;觀察10 天,統(tǒng)計(jì)發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。
表1 試驗(yàn)肉雞分組及給藥情況
4.藥物防治效果觀察
(1)人工感染后臨床觀察。觀察感染前后每組雛雞的臨床癥狀,如精神狀態(tài)、食欲是否正常、體溫、呼吸頻率以及呼吸是否困難等變化;統(tǒng)計(jì)每一組雞的發(fā)病及死亡的只數(shù);將死亡雛雞剖檢,觀察其病變。
(2)死亡率。試驗(yàn)期間,出現(xiàn)死亡,按照發(fā)病、死亡和存活的數(shù)目,各個(gè)算出發(fā)病的概率、死亡的概率和存活的概率。
發(fā)病的概率等于發(fā)病的數(shù)量除以這組實(shí)驗(yàn)雞數(shù)(30只)乘以100%,死亡的概率等于死亡的雞數(shù)除以這組實(shí)驗(yàn)雞數(shù)(30 只)乘以100%,存活的概率等于實(shí)驗(yàn)中存活的數(shù)目除以這組實(shí)驗(yàn)雞數(shù)(30只)乘以100%。
應(yīng)用Spss19.1軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。
中藥組方對(duì)肉雞感染的效果觀察結(jié)果表明,陽性對(duì)照組(感染組)雞只的死亡概率是66.8%,闡明了這一次成功地引發(fā)了人工誘導(dǎo)IBV 病的模型。中藥預(yù)防組1、2、3 的存活率分別為63.3%、66.67%、83.33%,顯著地比陽性對(duì)照組高33.3%(見表2)。
表2 中藥組方對(duì)肉雞感染預(yù)防成效觀察
中藥組方對(duì)肉雞感染治療成效觀察結(jié)果表明陽性對(duì)照組發(fā)病率為93.33%,死亡率為66.67%;中藥組方治療組1、2、3 發(fā)病率分別為33.33%、26.67%、16.67%,死亡率分別為26.67%、16.67%、10%。結(jié)果表明三個(gè)中藥組方對(duì)肉雞傳染性支氣管炎均有一定的治療效果,中藥組方治療效果最佳(見表3)。
表3 中藥組方對(duì)肉雞感染療效的觀察
肉雞腎型傳染性支氣管炎是引起肉雞接觸感染的特征傳染病之一,具有發(fā)病急、致死率高的特征。肉雞感染傳染性支氣管炎病毒后,除出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)癥狀外,主要以腎臟病變?yōu)橹鳎∽冎饕獮槟I炎腎腫、尿酸鹽堆積于腎臟,為其防治帶來巨大困擾。本研究結(jié)果表明陽性感染組染毒后感染率為93.33%。
目前,肉雞腎型傳染性支氣管炎的預(yù)防主要是免疫接種,但因腎型傳染性支氣管炎病毒變異快,血清型多,常致免疫失敗。同時(shí),肉雞腎型傳染性支氣管炎的治療主要采用抗生素控制繼發(fā)感染、補(bǔ)液通腎等綜合防治方法,但效果不確實(shí)。同時(shí)用抗病毒藥物、抗生素等進(jìn)行治療,有藥物殘留問題使之應(yīng)用受限。中藥有高效、低藥殘等優(yōu)點(diǎn),廣泛用于畜禽疾病防治中。研究采用的中藥組方均按中獸醫(yī)傳統(tǒng)理論進(jìn)行組方,組方1 的功效為驅(qū)散風(fēng)寒、發(fā)汗解表、除濕、宣肺平喘、止咳、利尿通便、解毒、補(bǔ)氣健脾;組方2 為清瘟解毒、祛風(fēng)解表、清肺止咳、化痰利咽,通便利尿以排毒,補(bǔ)氣以提高抗病能力;組方3 其功效為抗病毒、活血祛痰、宣肺平喘。本研究通過對(duì)三種中藥組方的預(yù)防和治療效果研究表明,三種中藥組方對(duì)肉雞腎型支氣管炎的防治效果極顯著(P<0.01);其中組方3 預(yù)防和治療效果最好,差異顯著(0.01<P<0.05),具體機(jī)理還需進(jìn)一步研究。