王向東， 梁大琦， 馬艷芝

（1.唐山師范學(xué)院實(shí)驗(yàn)管理中心，河北 唐山 063000； 2.唐山師范學(xué)院生命科學(xué)系，河北 唐山 063000；3.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，河北 保定 071000）

酸棗(Ziziphus acidojujubaC.Y.Cheng et M.J.Liu) ，別名棘、野棗、山棗，鼠李科棗屬，是棗的變種，廣泛分布在中國北方，如河北、山西、山東等地，常分布在海拔1 700 m以下的丘陵、山區(qū)的山坡或路旁等，喜歡溫暖干燥的環(huán)境[1]。

酸棗的研究主要集中在營養(yǎng)價(jià)值、藥用價(jià)值等方面[2]。楊沖等[3]研究表明，酸棗果肉含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，包括多種維生素、有機(jī)酸、礦質(zhì)元素和可溶性糖等。劉孟軍等[4]研究發(fā)現(xiàn)，新鮮的酸棗果肉中可滴定酸含量較高，可達(dá)0.29%～6.33%；孫延芳等[5]研究表明，酸棗果肉中可溶性總糖含量比栽培棗低，但高于大多數(shù)果品；趙祥忠等[6]研究指出，河北產(chǎn)酸棗的果肉中氨基酸類型豐富，包括18種氨基酸，其中包括人體必需的8種氨基酸。在藥用價(jià)值方面，中醫(yī)典籍《神農(nóng)本草經(jīng)》記載，酸棗有“安五臟，輕身延年”的功效，酸棗的鎮(zhèn)定催眠功效來自于酸棗仁中含有的生物活性成分，酸棗仁的鎮(zhèn)定催眠功效的主要成分之一是皂苷類化合物，也是近年來的研究熱點(diǎn)[3]。曾路等[7]對酸棗仁化學(xué)成分進(jìn)行分離提取，得到了酸棗仁皂苷A(jujubosides A)和酸棗仁皂苷B(jujubosides B)。另有研究[8-10]表明，皂苷、黃酮類成分為發(fā)揮鎮(zhèn)靜催眠作用的主要活性物質(zhì)，其中酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B、斯皮諾素被認(rèn)為是較為明確的活性成分，此外酸棗仁中的脂肪酸類、三萜類、黃酮類、生物堿類等多種化學(xué)成分，具有鎮(zhèn)靜催眠、抗驚厥、鎮(zhèn)痛、抗心率失常等作用[11]。張蕾等[12]用乙醇提取的酸棗果肉提取物對小鼠進(jìn)行灌胃，小鼠的睡眠時(shí)間明顯加長，具有鎮(zhèn)靜催眠效果。前人也曾對不同產(chǎn)地、不同品種不同器官酸棗品質(zhì)進(jìn)行評價(jià)，阮凱華等[13]對不同產(chǎn)地酸棗果肉的化學(xué)營養(yǎng)成分和抗氧化生物活性等進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)酸棗果肉中總多糖、總?cè)扑?、總酚等資源型化學(xué)成分含量豐富、抗氧化活性顯著；薛曉芳等[14]測定了不同品種酸棗不同器官（果實(shí)、果皮、果肉、葉片、花、種仁）總黃酮含量及果實(shí)黃酮提取液清除羥基自由基的能力，表明果肉中總黃酮含量最低，但各器官總黃酮含量都是酸棗＞中間類型＞栽培棗。李游等[15]利用HPLC（high performance liquid chormatography）指紋圖譜和酸棗仁皂苷A定量分析，對13個(gè)產(chǎn)地酸棗仁質(zhì)量進(jìn)行比較，聚類分析結(jié)果表明環(huán)境對酸棗仁質(zhì)量影響較大。

酸棗作為野生植物資源，既可以作為大棗的嫁接砧木，也可以作為深加工果品來源，酸棗仁更可入藥，越來越受到重視。酸棗種質(zhì)資源的搜集和評價(jià)為酸棗及其種仁的開發(fā)和利用提供了理論依據(jù)。本研究以10個(gè)產(chǎn)地酸棗果實(shí)及酸棗仁為試驗(yàn)材料，測定酸棗果實(shí)的營養(yǎng)成分，酸棗仁的皂苷A和皂苷B含量，并進(jìn)行隸屬函數(shù)分析，為優(yōu)良野生酸棗資源的篩選及酸棗的開發(fā)利用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料為市場上常見的野生酸棗，分別來自山西呂梁（S1）、山西長治（S2）、河北唐山（S3）、遼寧朝陽（S4）、新疆喀什（S5）、寧夏中衛(wèi)（S6）、河北邢臺（S7）、陜西榆林（S8）、河北承德（S9）、北京平谷（S10）。試驗(yàn)于2021年9月開始，同地區(qū)多株混合取樣，每地區(qū)采集處于全紅期的果實(shí)1 kg，隨機(jī)選取果實(shí)進(jìn)行后續(xù)處理測定。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 酸棗果實(shí)品質(zhì)指標(biāo)測定 取新鮮采集的全紅酸棗果實(shí)500 g，在70～80 ℃條件下烘干至恒重。得干燥樣品后充分研磨至粉末狀，過60目篩，保存?zhèn)溆?。采用考馬斯亮藍(lán)G-250法進(jìn)行可溶性蛋白含量的測定[16]；采用酸堿中和滴定法測定可滴定酸含量[17]；采用蒽酮-硫酸法測定可溶性糖含量[18]；采用苯酚-硫酸法測定多糖含量[19]；采用福林-酚法測定總酚含量[20]；采用2，6-二氯酚靛酚滴定法測定維生素C含量[21]；采用茚三酮法測定氨基酸含量[22]；采用比色法測定總黃酮含量[23]；所有測定重復(fù)3次。

1.2.2 酸棗種仁皂苷含量測定 用酸棗種仁生品進(jìn)行酸棗仁皂苷含量測定。剝?nèi)」?，砸出種仁，挑選完整種仁，室溫自然放置。高效液相色譜法測定酸棗仁皂苷A和皂苷B。取種仁50粒進(jìn)行粉碎，精密稱取樣品1 g加50 mL石油醚索氏提取4 h，取出揮干藥渣，藥渣加70%乙醇20 mL加熱回流2 h，旋干，用甲醇定容至5 mL，混勻過0.45 μm濾膜,上機(jī)檢測(Thermo U3000)皂苷含量。

色譜條件：色譜柱C18，4.6 mm×250 mm，5 μm，以乙腈（A）-水（B）為流動(dòng)相梯度洗脫（表1）。柱溫25 ℃，進(jìn)樣量10 μL，流速1.0 mL·min-1，檢測器ELSD，檢測參數(shù)75 ℃ 30 ℃。

表1 流動(dòng)相及流動(dòng)相梯度Table 1 Mobile phase and mobile phase gradient

參照下列公式計(jì)算酸棗仁皂苷含量。

式中，X為樣品中酸棗仁皂苷的含量（mg·kg-1），m為樣品質(zhì)量（g），V為樣品定容體積（mL），c為酸棗仁皂苷在標(biāo)曲上計(jì)算的質(zhì)量濃度（μg·mL-1）。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用 SPSS 19.0 軟件進(jìn)行差異顯著性分析，采用模糊數(shù)學(xué)的隸屬函數(shù)法進(jìn)行綜合評價(jià)[24-25]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)營養(yǎng)成分比較分析

不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)營養(yǎng)成分如表2所示。其中，可溶性糖含量以S5（新疆喀什）最高，達(dá)4.45 mg·g-1，顯著高于其他品種；最低的為S10（北京平谷）， 僅1.78 mg·g-1，其他品種介于二者之間。不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)中可滴定酸含量相對都較高，介于2.01%～9.49%，可滴定酸含量最高的是S2（山西長治），顯著高于其他品種；最低的為S5（新疆喀什），與S6（寧夏中衛(wèi)）含量差異不顯著，但二者均顯著低于其他品種。不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)中可溶性蛋白含量差異變化較大，最高的為S6（寧夏中衛(wèi)），達(dá)55.79 mg·g-1，與S4（遼寧朝陽，53.16 mg·g-1）和S8（山西榆林，48.53 mg·g-1)差異不顯著，但三者均顯著性高于其他品種；最低的為S2（山西長治），僅9.45 mg·g-1，與S9（河北承德，12.47 mg·g-1）差異不顯著，但均顯著低于其他品種，而且與同一省份的S1(山西呂梁)可溶性蛋白含量相差1倍以上。不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)氨基酸含量以S10（北京平谷）最高，達(dá)17.60 mg·g-1，顯著高于其他品種；最低為S9（河北承德），僅6.30 mg·g-1，與S4（遼寧朝陽，6.90 mg·g-1）和S7（河北邢臺，6.90 mg·g-1)差異不顯著，三者均顯著低于其他品種。綜上可知，不同產(chǎn)地對酸棗果實(shí)品質(zhì)影響較大，如可溶性糖含量以來自新疆喀什的S5最高，主要是因?yàn)樾陆貐^(qū)溫度較高，且晝夜溫差大，有利于糖分的積累。

表2 不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)營養(yǎng)成分Table 2 Nutritional quality of sour jujube fruits from different origins

2.2 不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)生物活性成分比較分析

由表3可知，不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)多糖含量變化較大，最高含量幾乎是最低含量的3倍，其中，多糖含量最高的為S7（河北邢臺），達(dá)79.34 mg·g-1，顯著高于其他品種，最低的為S9（河北承德），僅28.89 mg·g-1，與S3（河北唐山，33.80 mg·g-1）和S8（陜西榆林，36.48 mg·g-1）差異不顯著，但顯著低于其他品種。黃酮含量變化在25.37～70.03 mg·g-1，其中以S6（寧夏中衛(wèi)）酸棗果實(shí)黃酮含量最高，達(dá)70.03 mg·g-1，與S9（河北承德，68.53 mg·g-1）含量差異不顯著，二者均顯著高于其他品種；S7（河北邢臺）酸棗果實(shí)黃酮含量最少，僅25.37 mg·g-1，顯著低于其他品種。不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)中總酚含量差異較大，最高含量是最低含量的5倍多，其中，總酚含量最高的為S1（山西呂梁），達(dá)73.51 mg·g-1，顯著高于其他品種；最低的為S5（新疆喀什），僅14.13 mg·g-1，與S2（山西長治，14.53 mg·g-1）和S4（遼寧朝陽，15.09 mg·g-1）差異不顯著，但三者均顯著低于其他品種。維生素C含量介于18.40～75.23 mg·100 g-1，最高的為S6（寧夏中衛(wèi)），顯著高于其他品種；最低的為S5（新疆喀什），顯著低于其他品種。

表3 不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)生物活性成分Table 3 Bioactive components of sour jujube fruits from different origins

2.3 不同產(chǎn)地酸棗種仁生物活性成分比較

不同產(chǎn)地酸棗的酸棗仁皂苷A含量如圖1所示，S2（山西長治）、S5（新疆喀什）、S6（寧夏中衛(wèi)）、S8（陜西榆林）、S9（河北承德）的酸棗仁皂苷A含量小于0.03%，其他均大于0.03%。酸棗仁皂苷A含量最高的為S1（山西呂梁），為0.429 mg·g-1，顯著高于其他地區(qū)，最低的為S2（山西長治），僅0.138 mg·g-1，顯著低于其他地區(qū)，其他產(chǎn)地的介于二者之間。S1（山西呂梁）和S2（山西長治）均為山西產(chǎn)地，酸棗仁皂苷A含量差異也較大。

圖1 不同產(chǎn)地酸棗的酸棗種仁皂苷A含量Fig.1 Content of jujuboside A in seed kernel of sour jujube from different origins

不同產(chǎn)地酸棗的酸棗仁皂苷B含量如圖2所示，供試品種的酸棗仁皂苷B含量差異較大，最大值和最小值相差2倍以上。其中，酸棗仁皂苷B含量最高的為S10（北京平谷），達(dá)0.186 mg·g-1，顯著高于其他地區(qū)；含量最小的為S2（山西長治），僅0.060 mg·g-1，顯著低于其他地區(qū)，其他產(chǎn)地介于二者之間。

圖2 不同產(chǎn)地酸棗的酸棗種仁皂苷B含量Fig.2 Content of jujuboside B in seed kernel of sour jujube from different origins

2.4 不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)及酸棗仁品質(zhì)綜合評價(jià)

對供試材料可溶性糖含量等8個(gè)品質(zhì)指標(biāo)進(jìn)行隸屬函數(shù)值計(jì)算，隸屬函數(shù)值越高，供試材料綜合品質(zhì)越好。不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)品質(zhì)綜合評價(jià)如表4所示，其中，隸屬函數(shù)值最高的為S6（寧夏中衛(wèi)），最低的為S9（河北承德），其他品種介于二者之間。隸屬函數(shù)值從高到低即果實(shí)品質(zhì)從高到低依次為：S6（寧夏中衛(wèi)）、S8（陜西榆林）、S1（山西呂梁）、S5（新疆喀什）、S4（遼寧朝陽）、S2（山西長治）、S3（河北唐山）、S10（北京平谷）、S7（河北邢臺）、S9（河北承德）。從表4可知，S5（新疆喀什）酸棗果實(shí)可溶性糖含量最高而可滴定酸含量最低，口感最甜，這和新疆喀什當(dāng)?shù)貧夂驐l件有關(guān)，溫度高、晝夜溫差大有利于糖分積累。S6（寧夏中衛(wèi)）酸棗果實(shí)的Vc含量、可溶性蛋白含量和總黃酮含量最高；S10（北京平谷）酸棗果實(shí)氨基酸含量最高；S1（山西呂梁）酸棗果實(shí)的總酚含量最高，在進(jìn)行各成分提取時(shí)可予以優(yōu)先考慮。

表4 不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)品質(zhì)的綜合評價(jià)Table 4 Comprehensive evaluation of fruit quality of wild jujube from different origins

對供試材料酸棗仁皂苷A和皂苷B含量進(jìn)行隸屬函數(shù)值計(jì)算，隸屬函數(shù)值越高，酸棗仁品質(zhì)越好。不同產(chǎn)地酸棗仁品質(zhì)綜合評價(jià)如表5所示，隸屬函數(shù)值從高到低及酸棗仁品質(zhì)從高到低依次為：S10（北京平谷）、S1（山西呂梁）、S4（遼寧朝陽）、S9（河北承德）、S7（河北邢臺）、S3（河北唐山）、S8（陜西榆林）、S5（新疆喀什）、S6（寧夏中衛(wèi)）、S2（山西長治）。

表5 不同產(chǎn)地酸棗種仁生物活性成分綜合評價(jià)Table 5 Preliminary comprehensive evaluation on the quality of wild jujube kernel from different origins

3 討論

酸棗種質(zhì)資源作為一種寶貴的基因庫，是發(fā)現(xiàn)優(yōu)良基因和選擇育種的基礎(chǔ)，在我國北方地區(qū)分布廣泛，隨著近年來酸棗野生資源的有效開發(fā)利用，酸棗中豐富的營養(yǎng)成分和藥用成分也得到廣泛的關(guān)注[26]。

本研究對不同產(chǎn)地酸棗果實(shí)營養(yǎng)成分、生物活性成分進(jìn)行了測定。營養(yǎng)成分中可滴定酸是影響果實(shí)風(fēng)味的一項(xiàng)重要指標(biāo)，消費(fèi)者中有不少占比的人群偏愛酸味，其有滋陰潤肺、加強(qiáng)肝功能保護(hù)的醫(yī)療保健效果[26]?？扇苄蕴悄芡ㄟ^糖代謝合成很多保護(hù)性物質(zhì)，為正常的生命代謝過程供能，維持細(xì)胞的滲透勢和膨壓，從而維持細(xì)胞正常生命狀態(tài)[27]。本研究中測定的可滴定酸含量略低于孫亞強(qiáng)等[28]的研究結(jié)果，可溶性糖的含量與朗杰等[29]的研究結(jié)果存在差異，可能是由于供試材料來源不同，且前期處理不一樣，本研究中酸棗果實(shí)進(jìn)行了干燥然后才進(jìn)行測定。酸棗果實(shí)中含有豐富的生物活性成分，如總多糖、維生素C和黃酮類物質(zhì)等[29-31]，本研究中維生素C和黃酮含量與武媛林[32]的研究結(jié)果基本一致，果實(shí)總多糖的含量與武媛林[32]的結(jié)果存在差異。蛋白質(zhì)和氨基酸是食物中營養(yǎng)成分的重要組成，是食品營養(yǎng)價(jià)值的重要評價(jià)指標(biāo)[33-34]，酚類物質(zhì)具有消炎抑菌、抗氧化、抗腫瘤等生理作用[35]，本研究表明酸棗果實(shí)中存在豐富的氨基酸和總酚類物質(zhì)。造成不同供試材料果實(shí)中營養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)不同的原因可能是不同產(chǎn)地的地理環(huán)境和氣候條件不同，也可能是各產(chǎn)地之間的供試材料存在一定差異，還需要進(jìn)一步研究。

前人對酸棗仁的化學(xué)成分和藥理作用進(jìn)行過大量研究[36]，認(rèn)為酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B是酸棗仁的主要活性成分[37]。武延生等[38]、閆艷等[39]、周賽男等[40]曾對不同產(chǎn)區(qū)酸棗仁皂苷含量進(jìn)行測定，結(jié)果均表明不同產(chǎn)地間酸棗仁皂苷含量有或大或小的差異，地理環(huán)境、氣候條件對酸棗仁質(zhì)量產(chǎn)生較大影響，環(huán)境對酸棗仁質(zhì)量影響較大。毛怡寧[41]利用基于UHPLC-LTQ-Orbitrap MS的代謝組學(xué)技術(shù)有效區(qū)分了來自10個(gè)產(chǎn)地的酸棗仁樣品，不同產(chǎn)區(qū)的酸棗仁樣品之間均有良好的區(qū)分，認(rèn)為不同產(chǎn)地間溫度、光照、降水、土壤等環(huán)境因子對酸棗仁化學(xué)組成影響顯著。

隸屬函數(shù)法可以對不同性狀指標(biāo)進(jìn)行綜合分析[42]，本研究中供試酸棗的果實(shí)品質(zhì)的綜合評價(jià)從高到低依次為：S6（寧夏中衛(wèi)）、S8（陜西榆林）、S1（山西呂梁）、S5（新疆喀什）、S4（遼寧朝陽）、S2（山西長治）、S3（河北唐山）、S10（北京平谷）、S7（河北邢臺）、S9（河北承德）；酸棗仁品質(zhì)從高到低依次為：S10（北京平谷）、S1（山西呂梁）、S4（遼寧朝陽）、S9（河北承德）、S7（河北邢臺）、S3（河北唐山）、S8（陜西榆林）、S5（新疆喀什）、S6（寧夏中衛(wèi)）、S2（山西長治）?？梢姡呓Y(jié)果并不一致，如果想獲得質(zhì)量較好的酸棗果實(shí)可以從寧夏中衛(wèi)、山西榆林、山西呂梁等地進(jìn)行選擇，如果想獲得質(zhì)量較好的酸棗仁，可以考慮北京平谷、山西呂梁、遼寧朝陽等地。