陶西雨，程曉羽，魏真真，周菁楊，敖 雷，張小平，韓 豐，鄭永霞*，詹淑玉*

白芍總苷中4個活性成分在正常和四氯化碳誘導的急性肝損傷大鼠體內(nèi)藥動學比較研究

陶西雨1，程曉羽1，魏真真1，周菁楊1，敖 雷1，張小平2，韓 豐2，鄭永霞1*，詹淑玉1*

1. 嘉興學院醫(yī)學院，浙江 嘉興 314001 2. 嘉興學院附屬醫(yī)院，浙江 嘉興 314001

研究白芍總苷中4個活性成分（芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、沒食子酰芍藥苷和苯甲酰芍藥苷）在正常和四氯化碳（carbon tetrachloride，CCl4）誘導急性肝損傷大鼠體內(nèi)的藥動學過程，并比較其差異。參照臨床給藥劑量給SD大鼠ig白芍總苷后，采集不同時間點大鼠血清，建立LC-MS方法測定血藥濃度，采用WinNonlin5.3藥動學軟件計算各成分藥動學參數(shù)，并進行統(tǒng)計學分析。沒食子酰芍藥苷和苯甲酰芍藥苷的入血濃度較低，可能大部分迅速代謝為中間產(chǎn)物芍藥苷。肝損傷使主要成分芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷在大鼠體內(nèi)的半衰期（1/2）和平均滯留時間（MRT）顯著延長（＜0.05、0.01），藥時曲線下面積（AUC）顯著增加（＜0.05、0.01），清除率（CL/F）顯著降低（＜0.05、0.01）；沒食子酰芍藥苷在2組大鼠體內(nèi)的藥動學參數(shù)無顯著性差異，但其在肝損傷大鼠體內(nèi)的藥-時曲線出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象；苯甲酰芍藥苷在2組大鼠體內(nèi)的1/2和MRT0～∞無顯著變化，但肝損傷使其AUC顯著增加（＜0.01）。為進一步探究白芍總苷多成分協(xié)同的保肝作用機制提供實驗基礎(chǔ)，同時為該中藥的臨床合理用藥提供指導參考。

白芍總苷；肝損傷；藥動學；芍藥苷；芍藥內(nèi)酯苷；沒食子酰芍藥苷；苯甲酰芍藥苷

白芍總苷（total glucosides of peony，TGP）為白芍的有效部位，主要含芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、羥基芍藥苷等單萜糖苷類化合物，為白芍的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)[1-3]?，F(xiàn)代藥理學研究證明，TGP具有抗炎、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、保肝等多種藥理活性[4]，其中成藥制劑TGP膠囊（商品名帕夫林）在臨床上已廣泛用于類風濕性關(guān)節(jié)炎等的輔助治療，療效確切[5]。但是目前對TGP多成分、多靶點、整合作用的機制及體內(nèi)過程研究還較薄弱。

中藥多成分藥動學研究主要揭示中藥多種有效成分的體內(nèi)過程，對幫助闡釋中藥整合調(diào)節(jié)作用機制及指導臨床合理用藥等都具有重要作用。目前，以含量較高的活性成分芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷為藥動學標志物的TGP體內(nèi)藥動學過程已有較多研究[6-8]，但對部分含量較低的單萜糖苷類活性成分如苯甲酰芍藥苷、沒食子酰芍藥苷等的體內(nèi)藥動學特征還少見報道。機體疾病狀態(tài)可能影響藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄等藥動學過程，闡明藥物在正常生理和病理狀況下的藥動學差異，對于幫助臨床合理制定給藥方案具有重要意義。對各種類型肝損傷的保護作用是TGP的主要臨床療效之一[9-11]，因此探討肝損傷對TGP多種活性成分藥動學特征的影響，可以幫助較全面揭示TGP保肝作用的藥理機制及體內(nèi)過程。本研究前期發(fā)現(xiàn)，TGP入血成分除了主要的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷外，還可監(jiān)測到少量的沒食子酰芍藥苷和苯甲酰芍藥苷，且其藥時變化過程具備規(guī)律性。因此，本研究以TGP中4個活性成分芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、沒食子酰芍藥苷和苯甲酰芍藥苷為藥動學標志物，基于LC-MS技術(shù)對比分析TGP在正常和四氯化碳（carbon tetrachloride，CCl4）誘導急性肝損傷大鼠體內(nèi)的藥動學差異，以期幫助全面闡明TGP多成分的體內(nèi)過程特征，為TGP保肝作用的機制研究及臨床用藥的合理指導提供參考依據(jù)。

1 材料

1.1 動物

SPF級雄性SD大鼠，體質(zhì)量260～280 g，由浙江維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，動物許可證號SCXK（浙）2019-0001。大鼠飼養(yǎng)于嘉興學院實驗動物中心，飼養(yǎng)環(huán)境12 h光照黑暗循環(huán)，正常飲食飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d，實驗前禁食12 h。動物實驗經(jīng)嘉興學院實驗動物倫理委員會審核（批準號JUMC2022-055），實驗過程符合各項倫理要求。

1.2 藥品與試劑

對照品芍藥苷（批號M28GB143089）、芍藥內(nèi)酯苷（批號O31GB166251）、沒食子酰芍藥苷（批號M20H182502）購自上海源葉生物科技有限公司，質(zhì)量分數(shù)均≥98%；對照品苯甲酰芍藥苷（批號170526，質(zhì)量分數(shù)＞98%）、龍膽苦苷（批號200908，質(zhì)量分數(shù)＞98%）購自上海融禾醫(yī)藥科技有限公司；TGP膠囊（批號210813）由寧波立華制藥有限公司生產(chǎn)，經(jīng)含量測定分別含芍藥苷360.2 mg/g、芍藥內(nèi)酯苷108.6 mg/g、沒食子酰芍藥苷7.9 mg/g和苯甲酰芍藥苷6.0 mg/g；質(zhì)譜級乙腈、甲醇均購自上海泰坦科技股份有限公司；質(zhì)譜級甲酸購自上海麥克林生化科技股份有限公司；色譜級醋酸乙酯購自杭州青辰化學試劑廠；色譜級CCl4購自江蘇強盛功能化學股份有限公司；注射用生理鹽水購自杭州民生藥業(yè)股份有限公司；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）試劑盒（批號20210819）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）試劑盒（批號20210818）、總膽汁酸（total bile acid，TBA）試劑盒（批號20210819）均購自南京建成生物工程研究所；超純水為Milli-Q超純化系統(tǒng)自制。

1.3 儀器

超高效液相-ISQ EC單四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國Thermo Fisher Scientific公司）；XS105 DualRange型十萬分之一電子天平（瑞士METTLER TOLEDO公司）；VXR basic Vibrax?型振蕩器（德國IKA公司）；5301型快速真空濃縮機、5424R型高速離心機（德國Eppendorf公司）；Milli-Q超純水處理裝置（美國Millipore公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 給藥與樣品采集

2.1.1 正常大鼠給藥與樣品采集 隨機取正常SD大鼠8只，參照TGP膠囊最高臨床給藥劑量，折算成大鼠給藥量（567 mg/kg）后正常大鼠ig TGP生理鹽水溶液，換算成各成分的給藥量分別為芍藥苷204.2 mg/kg、芍藥內(nèi)酯苷61.6 mg/kg、沒食子酰芍藥苷4.5 mg/kg和苯甲酰芍藥苷3.4 mg/kg。各大鼠分別于給藥后5、10、20、30 min及1、1.5、2、3、4、6、8、12 h經(jīng)眼眶靜脈取全血約0.5 mL，全血在室溫放置1～1.5 h后，4 ℃、14 000 r/min離心10 min，取上層血清凍存于?20 ℃待測。

2.1.2 肝損傷大鼠模型建立、給藥與樣品采集 隨機取正常SD大鼠8只，采用一次性ip 40% CCl4溶液（2 mL/kg）誘導建立急性肝損傷模型。造模24 h后，檢測正常組和模型組血清肝功能指標（ALT、AST、TBA），結(jié)果見圖1，經(jīng)雙側(cè)檢驗分析模型組大鼠血清中各項指標均較正常組顯著升高（＜0.05、0.01），表明造模成功。各模型組大鼠同正常組給藥量ig TGP生理鹽水溶液后，按“2.1.1”項下方法采集血清樣品。

與正常組比較：*P＜0.05 **P＜0.01

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品及內(nèi)標儲備液的制備 各精密稱取對照品芍藥內(nèi)酯苷3.6 mg、芍藥苷5.2 mg、沒食子酰芍藥苷5.0 mg、苯甲酰芍藥苷0.8 mg和內(nèi)標龍膽苦苷2.5 mg，分別采用甲醇溶解，并定容至1 mL，得質(zhì)量濃度分別為3.6、5.2、5.0、0.8、2.5 mg/mL的對照品及內(nèi)標儲備液，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2.2 高、中、低質(zhì)量濃度質(zhì)控樣品的制備 精密量取各對照品儲備液適量混合，用甲醇定容配制成高、中、低3種質(zhì)量濃度的質(zhì)控標準溶液，其中芍藥內(nèi)酯苷質(zhì)量濃度分別為500、125、25 ng/mL，芍藥苷質(zhì)量濃度分別為2000、500、100 ng/mL，沒食子酰芍藥苷質(zhì)量濃度分別為10、2.5、0.5 ng/mL，苯甲酰芍藥苷質(zhì)量濃度分別為5、1.25、0.25 ng/mL，標準溶液于4 ℃保存。使用時，分別精密量取各質(zhì)量濃度質(zhì)控標準溶液250 μL于2 mL聚丙烯管中，45 ℃離心濃縮蒸干溶劑后，殘渣加入空白大鼠血清250 μL，渦旋振蕩5 min溶解后作為質(zhì)控樣品。

2.3 血清樣品處理

吸取大鼠血清樣品250 μL，加入含內(nèi)標（5 ng/mL）的醋酸乙酯萃取液1 mL，1500 r/min渦旋震蕩萃取5 min，10 000 r/min離心5 min，轉(zhuǎn)移上清液850 μL于2 mL聚丙烯管中，在殘留沉淀中再加入含內(nèi)標（5 ng/mL）的醋酸乙酯萃取液1 mL，1500 r/min渦旋震蕩萃取5 min，10 000 r/min離心5 min，取上清液950 μL與前面的850 μL上清液合并，于45 ℃離心濃縮蒸干溶劑，殘渣加入50 μL 80%甲醇，渦旋振蕩5 min溶解，14 000 r/min離心5 min，取上清液進樣分析。

2.4 測定條件

2.4.1 色譜條件 XBridge C18色譜柱（75 mm×4.6 mm，2.5 μm）；流動相為0.02%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脫：0～3.0 min，92% A；3.0～8.0 min，92%～65% A；8.0～10.0 min，65%～58% A；10.0～12.0 min，58%～30% A；12.0～13.0 min，30%～92% A；13.0～18.0 min，92% A。體積流量0.5 mL/min；柱溫30 ℃；進樣量10 μL。

2.4.2 質(zhì)譜條件 離子源為電噴霧離子源（ESI）；離子傳輸管溫度300 ℃；氣化溫度282 ℃；噴霧電壓?2.0 kV；載氣為氮氣；鞘氣壓49.9 psi（1 psi＝6.895 kPa）；輔助氣壓5.7 psi；吹掃氣壓0.5 psi。采用選擇負離子掃描模式，待測成分及內(nèi)標化合物的離子信息分別為芍藥內(nèi)酯苷[M＋HCOO]?525.25、芍藥苷[M＋HCOO]?525.24、沒食子酰芍藥苷[M－H]?631.27、苯甲酰芍藥苷[M＋HCOO]?629.28和龍膽苦苷[M＋HCOO]?401.11。

2.5 方法學考察

2.5.1 專屬性 分別取大鼠空白血清、加入混合對照品溶液的空白血清和大鼠ig TGP后的血清樣品，按照“2.3”項下的血清樣品方法處理后，按“2.4”項下測定條件進樣分析，記錄色譜圖，見圖2。各成分分離度良好，芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、沒食子酰芍藥苷、苯甲酰芍藥苷和內(nèi)標龍膽苦苷的保留時間分別為9.09、9.41、10.14、12.71、8.79 min，血清內(nèi)源性物質(zhì)對待測成分及內(nèi)標均無干擾。

2.5.2 定量限和線性范圍 精密吸取各對照品溶液適量，混勻后采用甲醇定容得一定質(zhì)量濃度的混合對照品溶液，再用甲醇逐級稀釋成一系列不同質(zhì)量濃度的混合對照品溶液。分別取不同質(zhì)量濃度的各混合對照品溶液各250 μL，于45 ℃離心濃縮蒸干溶劑，再分別加入250 μL空白血清渦旋振蕩5 min混勻，得到一系列不同質(zhì)量濃度的血清標準溶液，按“2.3”項下的血清樣品方法處理后，按“2.4”項下方法測定。以各待測物信噪比為10確定各成分的定量下限。采用內(nèi)標法，以血清中各待測物的濃度為橫坐標（），各待測物與內(nèi)標的峰面積比值為縱坐標（），求算各待測物的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)。各待測物的回歸方程、線性范圍、相關(guān)系數(shù)（2）及定量限見表1。

2.5.3 準確度和精密度 取高、中、低3個質(zhì)量濃度的質(zhì)控樣品各6份，按“2.3”項下方法處理后，按“2.4”項下方法進樣分析，計算各待測物高、中、低質(zhì)量濃度血清標準樣品的日內(nèi)準確度和精密度。分別在6 d中配制6份高、中、低3個質(zhì)量濃度的血清質(zhì)控樣品，按“2.3”項下方法處理后，按“2.4”項下方法進樣分析，計算各待測物高、中、低質(zhì)量濃度血清標準樣品的日間準確度和精密度。結(jié)果見表2，方法的準確度和精密度良好。

A-空白血清 B-質(zhì)控樣品 C-給藥后血清樣品

表1 各待測物的線性范圍、回歸方程、R2及定量限

2.5.4 提取回收率和基質(zhì)效應(yīng) 取高、中、低3個質(zhì)量濃度的質(zhì)控樣品各6份，按“2.3”項下方法處理后，按“2.4”項下方法進樣分析，記錄各成分峰面積為A；另取250 μL大鼠空白血清，按“2.3”項下方法處理后，殘渣分別加入250 μL高、中、低質(zhì)量濃度的質(zhì)控混合對照品溶液，渦旋震蕩混勻5 min，于45 ℃離心濃縮蒸干溶劑，殘渣再加入50 μL 80%甲醇，渦旋震蕩5 min溶解，14 000 r/min離心5 min，取上清液進樣分析，記錄各成分峰面積為B，計算提取回收率（A/B）；另取250 μL高、中、低質(zhì)量濃度的質(zhì)控混合對照品溶液各6份，按“2.3”項下方法處理后，殘渣分別加入50 μL 80%甲醇，渦旋震蕩5 min溶解，14 000 r/min離心5 min，取上清液進樣分析，記錄各成分峰面積記為C，計算基質(zhì)效應(yīng)（B/C）。結(jié)果見表3，方法的提取回收率和基質(zhì)效應(yīng)符合生物樣本分析的要求。

2.5.5 穩(wěn)定性 取高、中、低3個質(zhì)量濃度的質(zhì)控樣品，分別考察3種情況下的穩(wěn)定性。①短期穩(wěn)定性：將質(zhì)控樣品處理后，在室溫下放置于進樣盤上24 h后進樣分析；②凍融穩(wěn)定性：將質(zhì)控樣品在?20 ℃冰箱中反復(fù)凍融3次后再處理分析；③長期穩(wěn)定性：將質(zhì)控樣品在?20 ℃冰箱凍存7 d后再處理分析。每種穩(wěn)定性考察情況下，每個質(zhì)量濃度各平行6份。結(jié)果見表4，3種情況下樣品穩(wěn)定性良好，符合生物樣本分析的要求。

表2 各待測物的日內(nèi)、日間準確度和精密度(, n = 6)

表3 各待測物的提取回收率和基質(zhì)效應(yīng)(, n = 6)

表4 各待測物的穩(wěn)定性(, n = 6)

2.6 藥動學研究

大鼠ig TGP后，按照上述所建立的方法測定各時間點血藥濃度，繪制平均血藥濃度-時間曲線，見圖3。采用WinNonlin 5.3藥動學軟件以非房室模型分析計算正常組和模型組各成分的藥動學參數(shù)，主要包括消除半衰期（1/2）、平均滯留時間（MRT0～∞）、血藥濃度-時間曲線下面積（AUC）、達峰濃度（max）、達峰時間（max）、表觀分布容積（Vd/F）和消除率（CL/F）。采用雙側(cè)檢驗對正常組和模型組各個藥動學參數(shù)進行顯著性差異分析。結(jié)果見表5，與正常組比較，芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷在肝損傷大鼠體內(nèi)的1/2和MRT0～∞均顯著延長（＜0.05、0.01），AUC顯著增加（＜0.05、0.01），CL/F顯著降低（＜0.05、0.01）；苯甲酰芍藥苷在肝損傷大鼠體內(nèi)的1/2和MRT0～∞無顯著變化，AUC顯著增加（＜0.01），Vd/F和CL/F顯著降低（＜0.05、0.01）；沒食子酰芍藥苷在正常組和模型組大鼠體內(nèi)的藥動學參數(shù)均無顯著性差異。說明CCl4誘導的急性肝損傷疾病狀態(tài)對TGP不同活性成分體內(nèi)藥動學過程的影響存在差異。

表5 TGP中4個成分在正常和肝損傷大鼠血清中的藥動學參數(shù)(, n = 8)

與正常組比較：*＜0.05**＜0.01

*< 0.05**< 0.01normal group

3 討論

芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷為TGP的主要藥效成分，其含量高、活性明確，因此多數(shù)有關(guān)TGP的作用機制、體內(nèi)過程及臨床療效評價均以這2個成分為代表展開，較少關(guān)注其他單萜糖苷類成分。本課題組在前期對TGP物質(zhì)組成的研究中發(fā)現(xiàn)，除了芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷外，TGP中還含有少量的沒食子酰芍藥苷、苯甲酰芍藥苷和羥基芍藥苷，進一步的入血成分研究發(fā)現(xiàn)沒食子酰芍藥苷和苯甲酰芍藥苷均可少量入血且存在規(guī)律性的藥-時變化關(guān)系。沒食子酰芍藥苷和苯甲酰芍藥苷均為芍藥苷的活性衍生物，近年來較多研究證明其具有抗炎、抗氧化和免疫調(diào)劑等藥理活性，對胃炎、骨質(zhì)疏松癥、非小細胞肺癌和敗血癥等具有潛在的治療功效[12-16]。因此，有必要同時探討TGP多種活性成分的體內(nèi)過程，為其多成分協(xié)同作用機制研究提供依據(jù)。本研究發(fā)現(xiàn)，在TGP的臨床給藥劑量下，可檢測到的主要入血成分仍為芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷，沒食子酰芍藥苷和苯甲酰芍藥苷的給藥量約為芍藥苷的1/50～1/100，但是其達峰濃度僅約為芍藥苷的1/1000，分析原因可能是這2個成分入血后大部分被迅速代謝為中間產(chǎn)物芍藥苷[17-18]，僅剩少量的入血原型藥物，因此提示在對TGP多成分協(xié)調(diào)作用的藥效評價時，應(yīng)充分考慮各成分量的差異。

研究發(fā)現(xiàn)在TGP臨床給藥劑量下，芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷在正常大鼠體內(nèi)的1/2和MRT分別為2～3 h和3～4 h，與多數(shù)已有研究相符[6]。CCl4誘導急性肝損傷可顯著延長芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷在大鼠體內(nèi)的1/2和MRT，并顯著增加AUC，降低CL/F，說明肝損傷疾病狀態(tài)使TGP主要成分代謝減慢、體內(nèi)滯留時間和暴露程度增加。劉恩荔等[19]也考察了CCl4誘導急性肝損傷對芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷在大鼠體內(nèi)藥動學的影響，同樣發(fā)現(xiàn)急性肝損傷使這2個成分的max、AUC0～t顯著增大，1/2延長；Jiang等[20]比較了正常和急性膽汁淤積型肝炎大鼠ig赤芍提取物后，芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷在2組大鼠體內(nèi)的藥動學差異，結(jié)果也顯示急性肝損傷可顯著增加2個成分的max和AUC0～t。綜合文獻報道及本研究結(jié)果說明急性肝損傷在某種程度上可能增強TGP的保肝藥效，也提示臨床上應(yīng)注意根據(jù)實際情況調(diào)整給藥方案。肝臟是藥物在體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化和代謝的最重要器官，肝損傷可能通過影響肝微粒體CYP450酶的活性從而影響藥物體內(nèi)代謝[21]，研究發(fā)現(xiàn)CCl4對5種P450酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4）均有顯著的抑制作用[22]；此外，肝損傷可能引起胃腸道菌群紊亂、抑制藥物腸道轉(zhuǎn)運從而影響體內(nèi)代謝[23-24]，因此，CCl4誘導急性肝損傷究竟通過哪些環(huán)節(jié)影響TGP體內(nèi)過程還需要深入探究。本研究發(fā)現(xiàn)沒食子酰芍藥苷在正常組和模型組大鼠體內(nèi)的藥動學參數(shù)差異無統(tǒng)計學意義，可能與大鼠組內(nèi)個體差異大、血藥濃度偏低等有關(guān)，另外，肝損傷使沒食子酰芍藥苷在大鼠體內(nèi)的藥-時曲線呈現(xiàn)較明顯的雙峰現(xiàn)象，說明肝損傷對其體內(nèi)過程的影響較為復(fù)雜，可能涉及腸肝循環(huán)、腎小管重吸收等過程。研究結(jié)果苯甲酰芍藥苷在正常和肝損傷大鼠體內(nèi)的1/2和MRT0～∞無顯著差異，但肝損傷使AUC顯著增加、Vd/F和CL/F顯著降低，分析原因可能肝損傷部分抑制了苯甲酰芍藥苷向芍藥苷的代謝轉(zhuǎn)化，使其原型成分的體內(nèi)暴露量增加，但具體原因還需要進一步深入研究。

本研究首次對TGP中4個活性單萜糖苷類成分芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、沒食子酰芍藥苷和苯甲酰芍藥苷同時開展了藥動學研究，并對比分析了4個成分在正常和CCl4誘導急性肝損傷大鼠體內(nèi)的藥動學差異，可為進一步探究TGP多成分協(xié)同的保肝作用機制提供實驗基礎(chǔ)，同時為該中藥的臨床合理用藥提供指導參考。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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A comparative pharmacokinetics study of four active ingredients of total glucosides of paeony in normal rats and carbon tetrachloride-induced acute hepatic injury rats

TAO Xi-yu1, CHENG Xiao-yu1, WEI Zhen-zhen1, ZHOU Jing-yang1, AO Lei1, ZHANG Xiao-ping2, HAN Feng2, ZHENG Yong-xia1, ZHAN Shu-yu1

1. Medical College, Jiaxing University, Jiaxing 314001, China 2. Affiliated Hospital of Jiaxing University, Jiaxing 314001, China

To study the pharmacokinetics of four active ingredients (paeoniflorin, albiflorin, galloylpaeoniflorin and benzoylpaeoniflorin) of total glucosides of paeony (TGP) in normal and carbon tetrachloride (CCl4)-induced acute hepatic injury rats, and then compare their differences in pharmacokinetic parameters.TGP was intragastrically administered to SD rats with the reference of its clinical dosage. After administration, serum of rats was collected in planed interval time points. LC-MS method was established to determine drug concentrations in serum. The pharmacokinetic parameters were calculated using WinNonlin 5.3 pharmacokinetic software, and their difference in normal and hepatic injury rats were statistically analyzed.The concentration of galloylpaeoniflorin and benzoylpaeoniflorin were relatively lower than paeoniflorin in blood because they might mainly be metabolized to the intermediate compound paeoniflorin. For the main ingredients of paeoniflorin and albiflorin, their half-life (1/2) and mean residence times (MRT) were significantly extended (< 0.05, 0.01), area under drug-time curve (AUC) were significantly increased (< 0.05, 0.01), and clearance (CL/F) were significantly reduced in hepatic injury rats when comparing with normal rats (< 0.05, 0.01). For galloylpaeoniflorin, there were no significant differences of pharmacokinetic parameters in two groups of rats, but it presented double peak of drug-time curve in hepatic injury rats. For benzoylpaeoniflorin, there were no significant differences of1/2and MRT0～∞in two groups of rats, but its AUCs were significantly increased in hepatic injury rats than in normal rats (< 0.01).This study would provide an experimental basis for further exploring the liver protective mechanism of the synergistic effect of TGP and provide guidance and reference for its clinical rational use.

total glucosides of paeony; hepatic injury; pharmacokinetics; paeoniflorin; albiflorin; galloylpaeoniflorin; benzoylpaeoniflorin

R285.61

A

0253 - 2670(2023)13 - 4224 - 09

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.13.015

2022-12-31

國家自然科學基金資助項目（81503338）；浙江省基礎(chǔ)公益研究計劃項目（LGF22H280004，LGD22H160004）；嘉興市科技計劃項目（2020AY10022）；嘉興學院重點SRT資助項目（8517221147）

陶西雨，本科，研究方向為中藥藥動學。E-mail: 203625310@qq.com

通信作者：詹淑玉，博士，教授，研究方向為中藥藥理學與中藥藥動學。E-mail: zhansy2000@163.com

鄭永霞，博士，副教授，研究方向為肝癌的發(fā)病機制研究。E-mail: zhengyongxia@163.com

[責任編輯 李亞楠]