劉 濤,王 瑞,王艷芳
信陽農(nóng)林學(xué)院,河南 信陽 464000
河南省是我國肉牛養(yǎng)殖大省,2021年牛肉產(chǎn)量為35.58萬t,位居全國第8位。作為農(nóng)業(yè)大省,秸稈和糟渣類飼料以其來源廣、價(jià)格低等優(yōu)勢成為該省肉牛養(yǎng)殖的主要粗飼料來源。據(jù)統(tǒng)計(jì),河南省的小麥、玉米、花生等主要作物年產(chǎn)可飼用秸稈約8 500萬t,豐富的粗飼料來源為肉牛產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。近年來河南省南部地區(qū)肉牛養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速,但受粗飼料及飼料原料收儲(chǔ)加工過程中霉菌毒素污染因素的影響,肉牛健康可受到不同程度損傷。為了解豫南地區(qū)肉牛場粗飼料及飼料原料中霉菌毒素污染程度,從該地區(qū)肉牛場中收集了40份樣品,采用快速熒光技術(shù)進(jìn)行玉米赤霉烯酮(ZEN)、嘔吐霉素(DON)、黃曲霉毒素(AF)檢測分析。
電子天平AE223C(舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司);粉碎機(jī)FW-100型(北京市永光明醫(yī)療器械有限公司),臺(tái)面恒溫振蕩器TH2-92C(常州躍琪醫(yī)療器械廠);干式免疫熒光分析儀(廣東悅洋生物技術(shù)有限公司)。玉米赤霉烯酮、嘔吐霉素、黃曲霉毒素B1熒光微球檢測試紙條V2.0(廣東悅洋生物技術(shù)有限公司)。
2021年12月—2022年4月共收集豫南地區(qū)肉牛養(yǎng)殖場樣品40份(信陽市19份、南陽市14份、駐馬店市7份),其中粗飼料33份、玉米4份、豆粕3份。
1.3.1 樣品前處理
1)按照GB/T 14699.1-2005《飼料采樣標(biāo)準(zhǔn)》制備樣品,并用粉碎機(jī)粉碎后過20 目標(biāo)準(zhǔn)篩備用。
2) 稱取處理后的樣品于50 mL離心管中,加入25 mL樣品提取液(1:5提取),振蕩提取8 min;待測樣品與樣品提取液可以同比例放大進(jìn)行提取,待測樣品吸水量過大不易提取時(shí),可采用1:10提取,檢測結(jié)果乘以2即為樣品的殘留濃度。
3)提取結(jié)束后,4 000 r/min離心2 min,取100 μL上清液,加入到500 μL樣品稀釋液中,混勻后備用。
1.3.2 檢測方法及結(jié)果判定
陰性(-):檢測結(jié)果 陽性(+):檢測結(jié)果≥cutoff值,結(jié)果為陽性。 無效:儀器讀數(shù)報(bào)錯(cuò),本次檢測結(jié)果無意義,需要重新檢測,具體標(biāo)準(zhǔn)如表1所示。 表1 判讀標(biāo)準(zhǔn) 40份樣品,粗飼料中黃曲霉毒素B1檢出率為48.48%,超標(biāo)率9.09%,最高值為66.96 μg/kg,玉米和豆粕樣本黃曲霉毒素B1未超標(biāo),具體如表2所示。 各地區(qū)樣品黃曲霉毒素B1平均含量從高到低依次為信陽(24.19 μg/kg)、南陽(11.18 μg/kg)、駐馬店(5.63 μg/kg)。信陽地區(qū)黃曲霉毒素B1檢出率為63.16%,駐馬店為14.29%。只有信陽地區(qū)存在超標(biāo),超標(biāo)率為15.79%,如表3所示。 表3 各地區(qū)樣品黃曲霉毒素B1檢測結(jié)果 40份樣品中,粗飼料嘔吐霉素檢出率為18.18%,超標(biāo)率為3.03%,平均含量為1 052.67 μg/kg。玉米和豆粕樣本中的嘔吐霉素未超標(biāo),如表4所示。 表4 各類樣品中嘔吐霉素的檢測結(jié)果 樣品中嘔吐霉素平均含量從高到低依次為南陽(1 522.03 μg/kg)、駐馬店(742.45 μg/kg)、信陽(693.74 μg/kg)。南陽地區(qū)嘔吐霉素檢出率最高為28.57%,駐馬店最低為14.28%。只有南陽地區(qū)存在超標(biāo),超標(biāo)率為7.14%,如表5所示。 表5 各地區(qū)嘔吐霉素檢測結(jié)果 40份樣品中,粗飼料中玉米赤霉烯酮平均含量為98.72 μg/kg,檢出率為27.27%,但未超標(biāo)。玉米和豆粕超標(biāo)率分別為25%和66.67%,如表6所示。 表6 各類樣品中玉米赤霉烯酮的檢測結(jié)果 樣品中玉米赤霉烯酮平均含量從高到低依次為駐馬店(369.611 μg/kg)、南陽(103.87 μg/kg)、信陽(94.23 μg/kg)。駐馬店地區(qū)玉米赤霉烯酮檢出率最高為85.71%。信陽最低為26.32%。只有駐馬店地區(qū)存在超標(biāo),超標(biāo)率為42.86%,如表7所示。 本次調(diào)查結(jié)果顯示,豫南地區(qū)肉牛場使用的粗飼料以及飼料原料中普遍存在霉菌毒素污染。檢出2種及2種以上的霉菌毒素污染的樣品占比為22.5%,與王國強(qiáng) 等[1]2019年相關(guān)研究、王娟 等[2]河南地區(qū)黃曲霉毒素污染較為嚴(yán)重結(jié)論相似。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)豫南地區(qū)中小規(guī)模肉牛場所使用的粗飼料主要來自稻草、麥秸、花生秧、玉米秸稈和粉碎的玉米芯。結(jié)果顯示,豫南地區(qū)肉牛養(yǎng)殖場粗飼料中AF污染最為嚴(yán)重,特別是信陽地區(qū)超標(biāo)率最高。南陽地區(qū)的粗飼料中DON超標(biāo)率最高。ZEN在玉米和豆粕中存在超標(biāo)情況,駐馬店地區(qū)超標(biāo)率最高。這些地區(qū)粗飼料及飼料原料的霉菌毒素超標(biāo),分析其原因主要有2個(gè)方面的因素。 黃曲霉素廣泛存在于自然界的土壤環(huán)境中,在適宜的環(huán)境條件下可大量生長繁殖。如果粗飼料長時(shí)間在潮濕、悶熱的環(huán)境中存放,庫存過多且不注意通風(fēng)干燥和衛(wèi)生清潔,則容易導(dǎo)致霉變。信陽地區(qū)是河南省水稻主要種植地區(qū),水稻種植面積達(dá)700多萬畝(1畝≈666.7 m2),占全省水稻總播種面積的70%,因此當(dāng)?shù)厝馀pB(yǎng)殖從業(yè)者大量使用稻草作為粗飼料。但由于水稻種植區(qū)在雨季極度潮濕,利于真菌繁殖與毒素產(chǎn)生。近幾年,信陽水稻收獲時(shí),恰逢初秋季節(jié),雨水豐沛,導(dǎo)致信陽地區(qū)稻草中黃曲毒素的污染情況較嚴(yán)重。 嘔吐毒素(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)屬于田間毒素,玉米穗腐病的發(fā)生,加劇了玉米污染DON和ZEN的風(fēng)險(xiǎn)[3]。南陽市地處河南省西南部,夏玉米是南陽市第二大作物,近幾年南陽市玉米生長季節(jié),高溫干旱、陰雨寡照、暴雨大風(fēng)等災(zāi)害性天氣頻發(fā);駐馬店降水量時(shí)空分布不均,降水大部分集中在6—9月,該季節(jié)時(shí)常出現(xiàn)暴雨洪澇災(zāi)害,而霉菌分生孢子借風(fēng)雨傳播,有利于玉米穗腐病發(fā)生。這一因素導(dǎo)致南陽地區(qū)的粗飼料中嘔吐毒素和駐馬店地區(qū)玉米赤霉烯酮污染較嚴(yán)重。 我國多數(shù)地區(qū)農(nóng)民在玉米收獲后采用晾干等慢干方式,且糧倉結(jié)構(gòu)簡單,儲(chǔ)藏條件不可控,玉米中真菌毒素的積累會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間而增加。因此,選擇優(yōu)良的干燥設(shè)備以及構(gòu)建結(jié)構(gòu)合理、條件可控的倉儲(chǔ)設(shè)施對(duì)減少玉米真菌毒素污染十分關(guān)鍵。在水稻種植地區(qū),許多肉牛養(yǎng)殖從業(yè)者,習(xí)慣將稻草堆積成垛,露天堆放,容易受到雨淋,通風(fēng)不良者容易發(fā)生霉變。 霉菌毒素引起的直接經(jīng)濟(jì)損失是動(dòng)物生產(chǎn)性能下降以及因霉菌毒素中毒引起的損失。在多數(shù)情況下,動(dòng)物生產(chǎn)性能下降可能是相當(dāng)普遍且不易被察覺的,在霉菌的感染水平較低或霉菌毒素的污染程度較輕時(shí)尤其如此[4]。只有肉牛養(yǎng)殖從業(yè)者對(duì)霉菌毒素的危害性認(rèn)知水平達(dá)到一定高度,才會(huì)從采購、儲(chǔ)藏、使用環(huán)節(jié)上對(duì)粗飼料、飼料原料質(zhì)量進(jìn)行把關(guān)。 嚴(yán)格控制好購買的玉米、豆粕等原料的水分,以免儲(chǔ)存過程中霉變。加強(qiáng)對(duì)原料和飼料成品的霉菌毒素檢測和品控,尤其是玉米和麩皮。同時(shí)保持儲(chǔ)倉內(nèi)通風(fēng)、干燥,因此宜選高且平的平燥處,垛底要高出地面30~50 cm,堆垛時(shí)要盡量壓緊,封頂,以防雨淋。定期檢查,變質(zhì)的剩料要清洗干凈,避免牛吃到霉變飼料。在生產(chǎn)中通過使用防霉劑、脫霉劑和解霉劑在一定程度上能緩解飼料霉變帶來的危害,但過度防控所帶來的成本也是不菲的,更應(yīng)重視原料的質(zhì)量和貯存[4]。 從霉菌毒素檢測結(jié)果來看,豫南地區(qū)肉牛養(yǎng)殖場粗飼料和飼料原料霉菌毒素污染問題不容樂觀,40份樣品中,粗飼料同時(shí)存在DON、AF污染,玉米同時(shí)存在ZEN與DON污染,豆粕ZEN的超標(biāo)率嚴(yán)重。目前豫南地區(qū)肉牛養(yǎng)殖業(yè)方興未艾,相對(duì)養(yǎng)殖技術(shù)更為成熟的家禽與生豬產(chǎn)業(yè)對(duì)霉菌毒素超標(biāo)的重視程度,肉牛養(yǎng)殖在這方面的意識(shí)還有待提高。在肉牛養(yǎng)殖過程中,應(yīng)加快從田間種植、收獲、儲(chǔ)藏到谷物加工等環(huán)節(jié)真菌毒素防控標(biāo)準(zhǔn)化體系的建設(shè),實(shí)現(xiàn)綠色、安全農(nóng)產(chǎn)品的統(tǒng)一規(guī)范化生產(chǎn)[5]。同時(shí)地方主管部門,應(yīng)面向農(nóng)戶開展以儲(chǔ)藏條件控制為重點(diǎn)的真菌毒素防控意識(shí)與技術(shù)培訓(xùn)。2 結(jié)果與分析
2.1 各類樣品中黃曲霉毒素B1的檢測結(jié)果
2.2 各地區(qū)樣品中黃曲霉毒素B1的檢測結(jié)果
2.3 各類樣品中嘔吐霉素檢測結(jié)果
2.4 各地區(qū)樣品中嘔吐霉素檢測結(jié)果
2.5 各類樣品中玉米赤霉烯酮檢測結(jié)果
2.6 各地區(qū)樣品中玉米赤霉烯酮檢測結(jié)果
3 討論
3.1 地域氣候條件
3.2 保存條件
3.3 從業(yè)者對(duì)霉菌毒素危害程度的認(rèn)知水平
4 建議
5 結(jié)論