王明月

中圖分類號：S856.9 文獻標(biāo)識碼：C文章編號：1673-1085（2023）06-0027-04

大腸桿菌病是家禽養(yǎng)殖中發(fā)病最多的一種細菌性傳染病，縱觀臨床上一些合并感染和繼發(fā)感染的病例，多數(shù)能從典型病變器官或組織中分離出大腸桿菌。大腸桿菌病一年四季均可發(fā)生，可感染任何日齡的蛋雞。大腸桿菌在自然環(huán)境和體內(nèi)普遍存在，當(dāng)?shù)半u受到環(huán)境衛(wèi)生差、飲水和飼料污染、換料、飼養(yǎng)密度過大、日糧營養(yǎng)不足、通風(fēng)不良以及天氣突變、免疫應(yīng)激等刺激，產(chǎn)生強烈的應(yīng)激反應(yīng)，增加蛋雞大腸桿菌病的發(fā)生率。

目前臨床上原發(fā)性大腸桿菌少見，多為蛋雞感染沙門氏菌、馬立克氏病、支原體、新城疫、禽流感、雞傳染性支氣管炎、慢性呼吸道病等疾病，導(dǎo)致機體抵抗力下降而出現(xiàn)繼發(fā)性大腸桿菌病。雞大腸桿菌病對蛋雞養(yǎng)殖危害較大，在產(chǎn)蛋階段發(fā)生大腸桿菌，輕則影響產(chǎn)蛋，重則致死；種雞影響種蛋孵化率、出雛率以及健雛率低，引起巨大經(jīng)濟損失，因此做好診治和預(yù)防工作非常重要。

1 癥狀

出生雛雞感染大腸桿菌會引起臍炎、敗血癥、腸炎等，臨床可見雛雞臍部閉合不全，發(fā)炎紅腫，有血痂，腹部大，精神差，一般會在7 d內(nèi)死亡；另一種以腹瀉為主，糞便較稀，顏色灰白，有的呈綠色，食欲下降；病重者食欲廢絕，腹部腫脹、糊肛，突然倒地死亡；有的呼吸困難，最后衰竭致死。

蛋雞育雛階段和育成階段感染大腸桿菌，以混合感染和繼發(fā)感染為主，多數(shù)情況下會因應(yīng)激和合并其它疾病引起敗血癥、心包炎、肝周炎、氣囊炎等。發(fā)病后精神狀態(tài)變差，羽毛雜亂無光澤，雞冠萎縮、蒼白無血色，食欲差，嚴重的食欲廢絕，不愿活動，體重減輕，排黃色或者白色的稀糞。

產(chǎn)蛋期的蛋雞很敏感，此階段感染大腸桿菌病，不僅引起產(chǎn)蛋性能下降，而且雞群死淘率增加，養(yǎng)殖戶損失重大。原因：一方面易受環(huán)境應(yīng)激和飼養(yǎng)管理粗放影響，大腸桿菌病以原發(fā)病為主；另一方面，一般是感染禽流感、新城疫等病毒性傳染病后繼發(fā)大腸桿菌，造成產(chǎn)蛋量不高，為60%～70%，產(chǎn)蛋高峰上不去、產(chǎn)蛋高峰維持時間短，產(chǎn)下的蛋大多為軟殼蛋、白皮蛋，癥狀嚴重的病雞在5 d內(nèi)死亡，死后腹部膨脹。

2 實驗室診斷

雞繼發(fā)性大腸桿菌的診斷比較復(fù)雜，需要根據(jù)臨床表現(xiàn)和病理特點篩出引起特征性癥狀的疾病有哪些，然后根據(jù)血清學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)一一排除，找出致病的主要病原。蛋雞大腸桿菌病的診斷鑒定，根據(jù)臨床癥狀、病理剖檢，往往要與實驗室技術(shù)相結(jié)合才能確診。實驗室診斷技術(shù)常用的有兩種，一種是最常見的細菌分離鑒定方法，另一種就是16S rRNA PCR鑒定方法，能夠快速診斷大腸桿菌。

2.1 細菌分離鑒定方法

2.1.1 細菌分離培養(yǎng) 確保取樣和接種過程在無菌條件下進行。先取出患病蛋雞的肝、腎、心、脾，用接種環(huán)分別從上述病料切口處插入2～3 cm勾取少量，劃線接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，做好標(biāo)記，在37℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h觀察結(jié)果。若在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上有菌落生長，且呈灰白色或淡黃色圓形、半透明、表面光滑，可初步判定符合大腸桿菌菌落特征。

2.1.2 鑒別培養(yǎng) 將上述分離菌選2～3個典型的接種于麥康凱培養(yǎng)基和伊紅美藍培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 h。在麥康凱培養(yǎng)基上生長圓形的桃紅色菌落，且菌落中心顏色較周圍顏色深；在伊紅美藍培養(yǎng)基上菌落為深紫色，帶有金屬光澤，可進一步增加分離菌是大腸桿菌的可能性。

2.1.3 涂片鏡檢 將2.1.1和2.1.2分離的菌落涂片、革蘭氏染色，在顯微鏡下觀察，為兩端粗短、中等大小的革蘭氏陰性桿菌，無莢膜或芽孢，符合大腸桿菌的形態(tài)特征。此時基本就可斷定分離菌為大腸桿菌。

2.1.4 生化鑒定 分離菌接種于蔗糖、葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇等糖發(fā)酵生化管、三糖鐵培養(yǎng)基、M.R試驗、V.P試驗等，37℃培養(yǎng)24～48 h。若發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、乳糖，且產(chǎn)酸；三糖鐵培養(yǎng)基底部變黃，有少量氣體；M.R試驗陽性，V.P試驗陰性。根據(jù)伯杰氏細菌鑒定手冊，生化特性符合大腸桿菌特征，可確診為大腸桿菌。

2.2 16S rRNA PCR鑒定方法

引物設(shè)計按照GenBank中公布的大腸桿菌16S rRNA通用引物設(shè)計，由專門的生物公司合成。使用試劑盒法提取細菌DNA，PCR擴增反應(yīng)體系和反應(yīng)條件可參考李蘊玉等[1]或徐睿等[2]的文章，擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠檢測目的條帶，將PCR產(chǎn)物進行序列測定，測序結(jié)果與GenBank數(shù)據(jù)庫中登錄基因序列進行同源性分析，當(dāng)同源性為99%以上時，從分子生物學(xué)角度即證實分離菌株為大腸桿菌。

3 治療方法

一般采用中西結(jié)合的方式對患病雞群進行藥物治療，治療同時要額外給病雞補充多種維生素，提高機體抵抗力，還要同步加強環(huán)境消毒和帶雞消毒強度，每天糞便一清，每隔3 d帶雞消毒一次，根據(jù)具體情況適時更換消毒藥。

3.1 抗生素治療

藥物仍是養(yǎng)雞生產(chǎn)上控制大腸桿菌的主要手段，但部分養(yǎng)殖戶用藥盲目，導(dǎo)致病情不見好轉(zhuǎn)。建議有條件的養(yǎng)殖場一定在治療前進行細菌培養(yǎng)和藥敏試驗，考慮本場飼養(yǎng)雞群日齡、經(jīng)濟條件、用藥史、發(fā)病程度，首選價廉質(zhì)優(yōu)、廣譜、高敏藥物進行治療。常用的治療抗生素藥物和用法：阿莫西林，每升水60 mg，飲水給藥；氨芐西林60 mL配水1 L，飲水給藥；氟苯尼考1 g拌料2.5 kg，混勻拌料飼喂；丁胺卡那霉素6 mg/kg體重肌注；鹽酸多西環(huán)素1 g拌料1 kg，混勻拌料飼喂。以上五種藥物可選擇其中兩種交替使用，需連續(xù)用藥4 d。為鞏固療效，可多用藥2 d。

3.2 中草藥治療

中醫(yī)認為蛋雞大腸桿菌病屬“疫疬”范疇，認為其是因疫毒內(nèi)侵、肺胃熱盛、血瘀氣滯所引發(fā)的，因此在治療時要遵循清熱解毒、活血行氣的原則和要求，進而達到清肺胃熱、涼血止痢的目的。蛋雞臨床上大部分都是繼發(fā)或混合感染，治療中要辨證施治。

治療時，可用加味三黃湯治療，取大黃20 g+黃芪30 g+黃連30 g，加入適量水煎熬成藥液去渣溫服，每只病雞服用10 mL，早晚各1次，連服3～5 d，治愈率高達95%以上。或主要成分為訶子、魚腥草、穿心蓮、黃芩、白頭翁、金銀花提取物等組成的康養(yǎng)寶，500 g兌水4 000 kg，全天飲水，連用4 d；后期每隔一月飲一次，可有效預(yù)防大腸桿菌。

3.3 治療提醒

如果蛋雞反復(fù)出現(xiàn)用藥就好、停藥即犯的情況，并且開產(chǎn)還有軟殼蛋和白殼蛋、采食略低的情況，剖解死雞腸系膜發(fā)黑，肌胃發(fā)黑。說明前期治療沒有找到主要的病因，或者沒有消除原發(fā)病，因此會導(dǎo)致大腸桿菌病頻繁復(fù)發(fā)。這時要注意原發(fā)病因素，如霉菌及其毒素、溫和型流感、非典型新城疫等的影響。

4 預(yù)防措施

4.1 優(yōu)質(zhì)種源是基礎(chǔ)

優(yōu)質(zhì)的種源是保證后期大腸桿菌病少發(fā)的一個基礎(chǔ)。母雞體內(nèi)攜帶大腸桿菌，會通過蛋直接傳給下一代雛雞。因此，不要貪圖便宜，應(yīng)優(yōu)先從質(zhì)量可靠、信譽高、大腸桿菌凈化較好的種雞場選苗，不然后期增加藥費和其它附帶的損失要遠遠高于少花的雞苗錢。

4.2 良好管理是核心

大腸桿菌是條件性致病菌，良好的飼養(yǎng)管理是保證該病少發(fā)的核心所在。采用全進全出的飼養(yǎng)方法，可有效避免交叉感染；盡可能采用封閉式管理，減少或杜絕雞群與大腸桿菌的污染物接觸。及時做好防寒保暖和避暑工作，避免冷熱應(yīng)激，給產(chǎn)蛋雞營造舒適的環(huán)境，保持最適舍內(nèi)溫度19～22℃、濕度65%左右。結(jié)合蛋雞日齡靈活調(diào)整密度，避免過度擁擠。保持圈舍安靜，減輕噪音應(yīng)激，確保蛋雞健康生長。定時清理雞糞，保持場地整潔，糞便統(tǒng)一堆放發(fā)酵處理；時刻保持雞舍通風(fēng)良好，防止氨氣濃度升高損傷雞呼吸道黏膜。定期對場區(qū)道路、雞舍內(nèi)、器具等進行徹底消毒，對種雞場孵化車間、設(shè)備、種蛋、水槽、料槽、墻面、地面等進行全面消毒，降低蛋雞大腸桿菌發(fā)病概率。污染嚴重或常發(fā)病雞場適當(dāng)增加消毒頻次， 一般3～5 d要進行一次徹底消毒。

4.3 均衡營養(yǎng)的日糧和潔凈的飲水是關(guān)鍵

均衡營養(yǎng)的日糧和潔凈的飲水是提高雞群體質(zhì)、保證大腸桿菌少發(fā)的關(guān)鍵措施。雞群采食劣質(zhì)、低水平、營養(yǎng)成分不平衡的日糧，抵抗力便會下降，尤其蛋雞采食受污染的飼料，感染大腸桿菌的患病率更高。因此，加強飼料的采購、貯存和加工等環(huán)節(jié)的衛(wèi)生管理，從源頭上防止飼料發(fā)霉、變質(zhì)，減少大腸桿菌的污染。結(jié)合蛋雞日齡，選優(yōu)質(zhì)預(yù)混料，合理配制日糧，保證營養(yǎng)均衡，滿足蛋雞生長和產(chǎn)蛋對多種營養(yǎng)物質(zhì)的需求，并提高蛋雞的體質(zhì)和抗病力。

飲水不潔是誘發(fā)蛋雞大腸桿菌病的另一重要因素，因此選擇自來水、深井水作為蛋雞飲用水源。定期監(jiān)測水質(zhì)，經(jīng)常清理水井、水塔和水箱等儲水設(shè)施以及輸水管道，用醛類、碘類等刺激性小的消毒劑適時消毒，尤其要注意除去水線里的生物膜。

4.4 投藥預(yù)防是難點

定期投藥是預(yù)防大腸桿菌一個不可缺少的有效措施，也是一個難點。要根據(jù)獸醫(yī)專家的建議，根據(jù)不同日齡、不同發(fā)病史和不同流行季節(jié)合理科學(xué)用藥，切不可濫用。冬季和春季是蛋雞大腸桿菌病的高發(fā)季節(jié)，養(yǎng)殖場戶應(yīng)在獸醫(yī)建議下結(jié)合飼養(yǎng)條件、發(fā)病情況制定可行的投藥預(yù)防計劃，定期給予高效價廉無殘留或低殘留的中西藥拌料或飲水預(yù)防細菌性疾病，同時每隔半個月給2～3 d的多種維生素，在飼料中長期拌入雙歧桿菌、酵母菌、乳酸菌等微生態(tài)制劑，維持和有效調(diào)節(jié)蛋雞腸道菌群平衡，提升蛋雞抵抗力。注意預(yù)防性用藥和治療性用藥的區(qū)別，避免耐藥性發(fā)生。

4.5 免疫接種是保障

大腸桿菌有多種血清型，目前市場在售的大腸桿菌疫苗還做不到涵蓋每一個血清型，因此了解本地區(qū)流行的大腸桿菌血清型，接種適合本場大腸桿菌血清型的疫苗，結(jié)合本場實際制定完善的免疫程序，并嚴格執(zhí)行，可實現(xiàn)對大腸桿菌病的有效防控。當(dāng)前常用疫苗包括大腸桿菌病滅活疫苗、大腸桿菌病多價蜂膠疫苗等，推薦使用大腸桿菌蜂膠二聯(lián)滅活疫苗，蛋雞在1～2月齡時首免，肌注0.5 mL；開產(chǎn)前復(fù)免，肌注0.5 mL。接種疫苗后1周內(nèi)產(chǎn)生抗體，免疫保護期為1年，確保整個產(chǎn)蛋周期內(nèi)均有較強的免疫力。對大腸桿菌已污染的雞場可以用本場分離的大腸桿菌菌株制作滅活菌苗進行免疫接種。同時加強其它疾病的預(yù)防接種，防止繼發(fā)大腸桿菌感染。

參考文獻：

[1] 李蘊玉，葛成，焦賀靜，等.秦皇島地區(qū)育成雞大腸桿菌血清型鑒定及耐藥性分析[J].中國獸醫(yī)雜志，2019，55 （08）：71-76.

[2] 徐睿，季芳，李夢龍.雞致病性大腸桿菌16S rRNA PCR鑒定方法的建立[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，2016（07）：1-5.