李佳穎 肖志鵬 張慎 蔡海林 滕凱 曾維愛 伍紹龍 周向平
摘 要: 菌藥復(fù)配可彌補(bǔ)各自的不足,為害蟲防治提供了新的思路。為明確球孢白僵菌SCAUJH19與甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽(甲維鹽)的相容性及其聯(lián)合毒力和復(fù)配制劑,本文測(cè)定了不同濃度甲維鹽和球孢白僵菌SCAUJH19混合后對(duì)菌株孢子萌發(fā)和菌落生長(zhǎng)的影響,測(cè)定了球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽聯(lián)合使用對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力,并根據(jù)最優(yōu)菌藥組合對(duì)復(fù)配制劑進(jìn)行了研究。結(jié)果表明:球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽有較好的相容性;0.5~20 mg/L甲維鹽處理的球孢白僵菌SCAUJH19在第3天時(shí)孢子萌發(fā)率為96.11%~98.01%;在第7天時(shí)0.5 mg/L、2.5 mg/L、5.0 mg/L甲維鹽處理球孢白僵菌SCAUJH19的菌落直徑分別為42.95 mm、44.50 mm、41.98 mm,與空白對(duì)照差異不顯著。 球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽組合1×108孢子/mL+1.5 mg/L、 1×108孢子/mL+0.5 mg/L和1×107孢子/mL+1.0 mg/L第7天時(shí)對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲校正死亡率分別為100%、95%和95%,高于其他菌藥組合和菌藥單劑,3種組合致死中時(shí)(LT50)也比單用球孢白僵菌SCAUJH19短。復(fù)配劑油懸浮劑第3天時(shí)對(duì)斜紋夜蛾2、3、4、5齡幼蟲的致死率最高均為100%。復(fù)配劑可濕性粉劑第3天時(shí)對(duì)斜紋夜蛾2、3、4、5齡幼蟲的致死率最高分別為96.39%、94.58%、83.33%、100%。復(fù)配劑油懸浮劑和可濕性粉劑對(duì)斜紋夜蛾幼蟲有明顯毒殺作用,油懸浮劑對(duì)高齡斜紋夜蛾幼蟲的致死力要優(yōu)于可濕性粉劑。
關(guān)鍵詞: 斜紋夜蛾;真菌;殺蟲劑;毒力測(cè)定;相容性
中圖分類號(hào):S476.12
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
文章編號(hào):1008-0457(2023)02-0008-09
國(guó)際DOI編碼:10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2023.02.002
斜紋夜蛾 Spodoptera litura 是一種雜食性的世界性農(nóng)業(yè)害蟲,在全國(guó)各地均有分布[1]。目前斜紋夜蛾的防治主要依賴于化學(xué)農(nóng)藥,由于近年來(lái)化學(xué)農(nóng)藥的大量、頻繁及不合理施用,斜紋夜蛾對(duì)防治藥劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性[2]。大量使用化學(xué)農(nóng)藥不僅造成害蟲抗藥性,也給生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的污染,因此尋找一種高效、安全、可持續(xù)的生物防治措施勢(shì)在必行。利用蟲生真菌進(jìn)行害蟲防治是生物防治的一種重要手段,具有環(huán)境友好、種類多、分布廣等優(yōu)勢(shì)[3]。球孢白僵菌寄主范圍廣泛,能夠感染超過700種宿主[4],在重要農(nóng)林害蟲防治中取得了較為明顯的效果[5-6]。周立等[7]研究發(fā)現(xiàn)從田間煙草土壤中分離的球孢白僵菌SCAUYZ16和SCAUJH19孢子懸浮液濃度為1×108孢子/mL時(shí)對(duì)斜紋夜蛾2齡致死率分別為70.71%和57.84%。郭亞力等[8]發(fā)現(xiàn)從田間菜青蟲 Hexian area 分離出的球孢白僵菌MZ050724在不同濃度的孢子懸浮液下對(duì)斜紋夜蛾2齡和3齡幼蟲的最高死亡率分別為87.46%和80.56%。但是與化學(xué)藥劑相比,白僵菌存在通過分生孢子等侵染體侵染害蟲,作用過程緩慢[9]、野外環(huán)境復(fù)雜多樣,防治效果不穩(wěn)定[10]、白僵菌不同施菌方法和方式對(duì)害蟲的致死效果影響較大[11]等不足。
甲維鹽是在阿維菌素基礎(chǔ)上添加其他基團(tuán)合成的一種新型高效綠色殺蟲劑,對(duì)鱗翅目昆蟲的致死效果高于阿維菌素[12-13]。高聰芬等[14]報(bào)道無(wú)論是用浸葉法還是噴霧法測(cè)定,甲維鹽對(duì)斜紋夜蛾均表現(xiàn)出較高的毒力。將白僵菌與殺蟲劑組合使用,既彌補(bǔ)了白僵菌作用效果慢的缺點(diǎn),又可以降低殺蟲劑的使用量,發(fā)揮殺蟲劑的速效作用,兩者相輔相成[15],但殺蟲劑會(huì)對(duì)白僵菌孢子萌發(fā)率、生長(zhǎng)發(fā)育、產(chǎn)孢量等方面產(chǎn)生影響,白僵菌與殺蟲劑的相容性是其組合應(yīng)用的前提[16]。Yadav等[17]基于白僵菌孢子形成、萌發(fā)和營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)評(píng)估了甲維鹽與白僵菌的的相互作用,發(fā)現(xiàn)甲維鹽與白僵菌高度相容。曹偉平等[18]研究得出5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽常規(guī)濃度5倍稀釋液對(duì)白僵菌HFW-05孢子萌發(fā)沒有顯著的抑制作用,對(duì)菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量有一定的抑制作用,并明確了在此濃度下與白僵菌HFW-05 1×106孢子/mL孢懸液聯(lián)合使用時(shí)對(duì)小菜蛾 Plutella xylostella 幼蟲表現(xiàn)出比單用白僵菌菌株更高的殺蟲效果。
可濕性粉劑具有加工簡(jiǎn)單、易使用、有效成分含量高,成本低等特點(diǎn),在真菌藥劑生產(chǎn)及推廣中具有極大優(yōu)勢(shì)[19-20],王海鴻等[21]通過對(duì)菌株的純化復(fù)壯、液-固雙相發(fā)酵的條件優(yōu)化和發(fā)酵工藝研究配方和劑型研發(fā)等多個(gè)環(huán)節(jié)生產(chǎn)出了150億孢子/g球孢白僵菌可濕性粉劑,用于西花薊馬 Frankliniella occidentalis 高效防治。將真菌做成油懸浮劑有利于孢子貯存、孢子侵染蟲體和提高孢子的抗逆能力,從而達(dá)到提高防治效果的作用[22-23],在LUBILOSA項(xiàng)目中將高效防蝗菌株金龜子綠僵菌IMI330189在大米或小米表面培養(yǎng)獲得孢子粉,在使用時(shí)將孢子粉配置成油懸浮劑[24]。可濕性粉劑和油懸浮劑是菌藥復(fù)配加工較為理想的劑型。
本研究以前期篩選出對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲高毒力菌株SCAUJH19為材料,研究球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽的相容性及協(xié)同增效作用,同時(shí)將球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽以最優(yōu)組合配制成復(fù)配劑型可濕性粉劑和油懸浮劑,評(píng)價(jià)了其對(duì)不同齡期斜紋夜蛾幼蟲的室內(nèi)毒力,以期研制出菌藥組合的最優(yōu)復(fù)配制劑。
1 ?材料與方法
1.1 ?試驗(yàn)材料
1.1.1 ?供試蟲源
斜紋夜蛾蟲卵及人工飼料購(gòu)于河南省濟(jì)源白云實(shí)業(yè)有限公司,于RXZ-500C型智能人工氣候箱(寧波江南儀器廠)中用人工飼料繼代培養(yǎng)。飼養(yǎng)條件為溫度27±1 ℃,光周期L14∶ D10,相對(duì)濕度(75±5)%。選取飼養(yǎng)三代后生長(zhǎng)一致的斜紋夜蛾不同齡期幼蟲進(jìn)行試驗(yàn)。
1.1.2 ?供試藥劑
76%甲維鹽原藥購(gòu)于江西仁恒藥業(yè)有限公司。
1.1.3 ?供試菌株
前期從湖南省永州市煙區(qū)土壤中分離,對(duì)斜紋夜蛾具高毒力球孢白僵菌SCAUJH19[25],保存于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物防治教育部工程研究中心。
1.2 ?甲維鹽對(duì)球孢白僵菌SCAUJH19孢子萌發(fā)率的影響
將供試菌株轉(zhuǎn)接到Potato Dextrose Agar medium(PDA)平板后在26±1 ℃培養(yǎng)10 d,待產(chǎn)生分生孢子后用0.05%吐溫-80無(wú)菌水洗脫孢子,配制成1.0×106 孢子/mL的孢子懸浮液備用。 將2 mL 1×104 孢子/mL 孢子懸浮液加入到甲維鹽終濃度為0.5 mg/L、2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L和20 mg/L的SDA液體培養(yǎng)基中,置于搖床180 rpm 25 ℃ 振蕩培養(yǎng)。分別在24 h、48 h和72 h用移液器取樣,在血球計(jì)數(shù)板上鏡檢各處理的孢子萌發(fā)情況,統(tǒng)計(jì)孢子萌發(fā)率。每處理重復(fù)3次,以加入0.05%吐溫-80無(wú)菌水的液體培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。
1.3 ?甲維鹽對(duì)球孢白僵菌SCAUJH19菌絲生長(zhǎng)的影響
將球孢白僵菌SCAUJH19菌株轉(zhuǎn)接到PDA培養(yǎng)基上26±1 ℃培養(yǎng)10 d作為供試菌,用直徑5 mm的打孔器打菌餅,將菌餅置于含藥PDA平板進(jìn)行接種,于26±1 ℃光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。用十字交叉法,分別于第3天、5天和7天測(cè)定菌落直徑,單位為mm。每個(gè)處理5個(gè)重復(fù),以加入無(wú)菌水的PDA培養(yǎng)基作為對(duì)照。
1.4 ?菌株SCAUJH19和甲維鹽組合對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力測(cè)定
按照表1對(duì)球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽進(jìn)行不同組合復(fù)配,用毛筆將2齡幼蟲挑入不同濃度菌藥組合液中浸漬5 s,放入直徑12 cm培養(yǎng)皿中,用保鮮膜封口并刺孔通氣后置于智能培養(yǎng)箱中飼養(yǎng),連續(xù)7天逐日定時(shí)觀察記錄。用已滅菌的0.1%的吐溫-80水作對(duì)照,每個(gè)處理3次重復(fù),每次處理20頭幼蟲。逐日檢查斜紋夜蛾的死亡情況并記錄死亡數(shù),計(jì)算幼蟲的校正死亡率:校正死亡率=[(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(1-對(duì)照組死亡率)]×100%。
1.5 ?菌株SCAUJH19與甲維鹽復(fù)配進(jìn)行可濕性粉劑的制備
復(fù)配劑型制備參考Sivasundaram等[26]的方法。將25 mL的球孢白僵菌孢子懸浮液(1×107 孢子/mL)加入到發(fā)酵培養(yǎng)基(復(fù)配制劑總重5 mL蜜糖、2.5 g蛋白胨、2.5 g酵母、215 mL無(wú)菌水)中,在25 ℃、180 r/min條件下振蕩培養(yǎng)72 h,接著取制劑總重的10 mL 吐溫-80、5 g纖維素、5 g分散劑NNO、2 g甲維鹽以及球孢白僵菌發(fā)酵液加入728 g滑石粉中,經(jīng)攪拌器充分?jǐn)嚢杈鶆?,干?2 h后,放入4 ℃恒溫冰箱保存。
1.6 ?菌株SCAUJH19與甲維鹽復(fù)配進(jìn)行油懸浮劑的制備
復(fù)配劑型制備參考Kim等[27]的方法。將20 mL ?1×107 孢子/mL球孢白僵菌孢子懸浮液接入 200 mL Sabouraud Dextrose Medium with Yeast Extract(SDY) 液體培養(yǎng)基中,25 ℃、120 r/min振蕩培養(yǎng)72 h。1000 g大米拌入5 mL豆油和1 g硝酸鉀后放入保鮮袋中濕熱滅菌,與上述培養(yǎng)菌液充分混合后25 ℃、12 L∶ 12 D光周期條件下培養(yǎng)10 d。將發(fā)酵物料置于32 ℃鼓風(fēng)干燥機(jī)下干燥5 d,用振動(dòng)篩粉機(jī)收獲孢子粉。5 g孢子粉添加到68 mL玉米油中使用磁力攪拌器攪拌30 min。乙氧基化蓖麻油和脫水山梨醇單油酸酯按7∶ 3(v/v)的比例配制10 mL乳化劑,添加到基于玉米油的孢子粉懸浮液中攪拌30 min。孢子粉懸浮液中加入2 g甲維鹽原藥、5 mL TDE-3和10 g海藻酸鈉鹽攪拌30 min后放入4 ℃恒溫冰箱保存。
1.7 ?不同劑型對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的毒力測(cè)定
參照上述配方制得的可濕性粉劑和油懸浮劑分別稀釋50倍、 100倍、250倍、500倍、1000倍后對(duì)斜紋夜蛾2至5齡幼蟲進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。毒力測(cè)定方法參照1.4。毒力測(cè)定數(shù)據(jù)采用Probit方法分析,求出毒力回歸方程,計(jì)算LT50。并計(jì)算幼蟲的死亡率(死亡率=試蟲死亡率/試蟲數(shù)×100%)。
1.8 ?數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
利用SPSS19.0軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理分析,采用單因素方差分析對(duì)斜紋夜蛾幼蟲死亡率進(jìn)行結(jié)果分析,并運(yùn)用Tukey檢驗(yàn)差異顯著性。用GraphPad Prism 8繪制圖表。白僵菌與甲維鹽協(xié)同交互作用類型的計(jì)算參照Huang等[28]的方法,具體公式如下:
Me=Ma+Mb×(1-Ma) ?(1)
χ2= (Mab-Me)×100×(Mab-Me) Me ??(2)
公式中,各項(xiàng)含義如下:
Ma:甲維鹽單獨(dú)對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲的實(shí)際校正死亡率;
Mb:高毒力菌株單獨(dú)對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲的實(shí)際校正死亡率;
Mab:菌藥復(fù)配劑對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲的實(shí)際校正死亡率;
將計(jì)算得出的χ2與χ2值進(jìn)行比較,在χ2表格中查找df=1對(duì)應(yīng)的P值為3.841。
當(dāng)χ2<3.841,則表示白僵菌和甲維鹽混用表現(xiàn)出拮抗作用;
當(dāng)χ2>3.841,則表示白僵菌和甲維鹽混用表現(xiàn)出協(xié)同增效作用。
2 ?結(jié)果與分析
2.1 ?甲維鹽對(duì)球孢白僵菌SCAUJH19孢子萌發(fā)率及菌絲生長(zhǎng)的影響
不同濃度的甲維鹽均不影響球孢白僵菌SCAUJH19的孢子萌發(fā)率(圖1)。經(jīng)0.5 mg/L、2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L和20 mg/L濃度的甲維鹽處理3 d后,球孢白僵菌SCAUJH19 孢子萌發(fā)率分別為97.04%、96.70%、96.11%、98.01%和97.26%。
甲維鹽在不同濃度下對(duì)球孢白僵菌SCAUJH19菌絲生長(zhǎng)的影響存在差異。由圖2可知,經(jīng)0.5 mg/L、2.5 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L甲維鹽處理7 d后的球孢白僵菌SCAUJH19菌落直徑分別為42.95 mm、 44.58 mm、41.98 mm、40.28 mm、33.18 mm。第7 天時(shí)球孢白僵菌SCAUJH19菌絲直徑隨著甲維鹽濃度的增加而減小。高濃度(10和20 mg/L)的甲維鹽對(duì)菌株SCAUJH19菌落生長(zhǎng)有顯著影響,但低濃度(5.0、2.5、0.5 mg/L)甲維鹽處理對(duì)菌株生長(zhǎng)無(wú)顯著影響。
2.2 ?球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽兩者組合對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力測(cè)定
由表2可知,在球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽聯(lián)合作用對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力測(cè)定中,組合T6(1×108 孢子/mL+1.5 mg/L)、T8(1×108 孢子/mL+0.5 mg/L)、T10(1×107 孢子/mL+1.0 mg/L)的復(fù)配劑處理7 d后,最高校正死亡率分別為100%、90%、95%,表現(xiàn)出協(xié)同增效作用。這3種復(fù)配組合均有較好的增效效果,其中1×108 孢子/mL 的球孢白僵菌SCAUJH19和1.5 mg/L的甲維鹽組合死亡率最高。同時(shí)各組合處理的致死中時(shí)間(LT50) 均低于各菌液?jiǎn)蝿┨幚?,且差異顯著(表3)。
2.3 ?不同劑型對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的生物測(cè)定
SCAUJH19與甲維鹽可濕性粉劑和油懸浮劑復(fù)配劑型對(duì)斜紋夜蛾不同齡期幼蟲均有較好的致死效果??蓾裥苑蹌┫♂?000、500、250、100、50倍對(duì)斜紋夜蛾2、3、4、5齡幼蟲處理3 d后的致死率分別為71.11%~96.39%、66.67%~94.58%、53.33%~83.33%、36.67%~100%(圖3)。第3天時(shí),油懸浮劑稀釋1000、500、250、100、50倍對(duì)2、3、4、5齡斜紋夜蛾幼蟲的致死率分別為83.33%~100%、93.95%~100%、93.33%~100%、100%~100%(圖4)。
3 ?結(jié)論與討論
白僵菌具有寄主范圍廣、致病性強(qiáng)、不易產(chǎn)生抗性和對(duì)環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn),但也存在作用效果慢、對(duì)田間環(huán)境要求高等缺點(diǎn)[29-30]。研究蟲生真菌與殺蟲劑的相容性是開發(fā)菌藥復(fù)配劑的前提,從而能更充分發(fā)揮真菌的殺蟲作用[31-32]。本文對(duì)球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽的相容性研究表明,0.5~20 mg/L甲維鹽對(duì)球孢白僵菌SCAUJH19 孢子萌發(fā)率無(wú)顯著影響,且低濃度甲維鹽(0.5~5 mg/L) 對(duì)球孢白僵菌SCAUJH19菌絲生長(zhǎng)也無(wú)影響。顧麗嬙等[33]研究發(fā)現(xiàn),甲維鹽在第5天時(shí)對(duì)球孢白僵菌ACCC30111菌落生長(zhǎng)的抑制率僅7.1%。Zhang等[34]對(duì)白僵菌SB063和甲維鹽的相容性進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)0.3125~2.5 mg/L甲維鹽對(duì)白僵菌SB063的孢子萌發(fā)率影響較小,但0.625~5 mg/L甲維鹽對(duì)白僵菌SB063的菌落生長(zhǎng)有顯著抑制作用。上述研究與本文研究中甲維鹽對(duì)球孢白僵菌SCAUJH19孢子萌發(fā)率無(wú)顯著影響的結(jié)果一致,但甲維鹽處理對(duì)白僵菌SB063的菌落生長(zhǎng)有顯著抑制作用,卻對(duì)球孢白僵菌ACCC30111和SCAUJH19無(wú)顯著抑制作用。黃志等[35]研究發(fā)現(xiàn),5種化學(xué)農(nóng)藥對(duì)綠僵菌菌株MA4和JF-813的相容性因菌株不同而不同,猜測(cè)甲維鹽對(duì)白僵菌SB063、球孢白僵菌ACCC30111和SCAUJH19菌絲生長(zhǎng)抑制作用不同可能與白僵菌菌株有關(guān)。
白僵菌往往與殺蟲劑混合施用,一方面既可延緩害蟲對(duì)殺蟲劑的抗性,另一方面也彌補(bǔ)了白僵菌自身的不足[36]。本研究在測(cè)定菌株SCAUJH19和甲維鹽不同組合對(duì)斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力中,組合T6(1×108 孢子/mL+1.5 mg/L)、T8(1×108 孢子/mL+0.5 mg/L)、T10(1×107 孢子/mL+1.0 mg/L)的復(fù)配劑在處理7 d時(shí)最高校正死亡率分別達(dá)100%、90%和95%,表現(xiàn)出協(xié)同增效作用,且3個(gè)組合的LT50明顯短于球孢白僵菌SCAUJH19單用濃度的LT50。李春香等[37]研究發(fā)現(xiàn)甲維鹽亞致死劑量和濃度為1×107 孢子/mL的白僵菌孢子懸浮液復(fù)配后第10天對(duì)甜菜夜蛾 Spodoptera exigua 防效為90.7%,高于菌液對(duì)照的防效。王勝華等[38]研究發(fā)現(xiàn),甲維鹽與白僵菌或蘇云金桿菌混用,均具有延長(zhǎng)藥劑持效性、延緩抗藥性發(fā)展、節(jié)約一次施藥用工成本等優(yōu)點(diǎn)。這些結(jié)果都與本文研究中球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽表現(xiàn)出的協(xié)同增效作用一致。王峰等[39]研究發(fā)現(xiàn)藥菌混用處理的LT50顯著縮短,1/10推薦濃度的吡蟲啉與2×106 孢子/mL的中等濃度白僵菌孢子混用殺蚜速率最快,LT50縮短了近30 h,與本文研究球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽聯(lián)用比球孢白僵菌菌株單用的LT50縮短的結(jié)果一致,低劑量化學(xué)農(nóng)藥可能抑制了害蟲生理和免疫活性,使原來(lái)對(duì)病原菌不敏感的寄主成為易感類群[37],復(fù)配劑能縮短對(duì)斜紋夜蛾的致死時(shí)間,從而彌補(bǔ)了球孢白僵菌SCAUJH19前期致死效果不佳的缺點(diǎn)。
可濕性粉劑是含有原藥(孢子粉)、載體、填料、表面活性劑、輔助劑并粉碎得很細(xì)的農(nóng)藥制劑[40]。真菌油懸浮劑是將分生孢子懸浮在油中而制成油懸液的一種制劑產(chǎn)品,有延長(zhǎng)孢子的貯存期、耐雨水沖刷能力強(qiáng)和使用方便等優(yōu)點(diǎn)[41-43]。本文采用不同劑型配方完成了對(duì)復(fù)配劑劑型的研發(fā),獲得了可濕性粉劑和油懸浮劑兩種復(fù)配劑型,且對(duì)不同齡期的斜紋夜蛾幼蟲進(jìn)行了室內(nèi)毒力測(cè)定。兩種復(fù)配劑型對(duì)不同齡期的斜紋夜蛾幼蟲均有較好的致死效果,致死率最高均可達(dá)100%。油懸浮劑對(duì)高齡斜紋夜蛾幼蟲的致死力要優(yōu)于可濕性粉劑。據(jù)報(bào)道,通過使用油性昆蟲病原真菌制劑來(lái)控制相比于使用水性制劑具有更好的防治效果。例如,Cazorla等[44]利用13種球孢白僵菌菌株的水基制劑和油基制劑對(duì)長(zhǎng)紅錐蝽 Rhodnius Prolixus (Triatomine)的4齡幼蟲進(jìn)行防治,結(jié)果顯示,油基分生孢子懸浮液相比于水基分生孢子懸浮液能顯著提高菌株對(duì)長(zhǎng)紅錐蝽的死亡率和藥效,同時(shí)降低菌株的致死中時(shí)間(LT50)。因此,針對(duì)防治對(duì)象選擇合適的劑型,對(duì)于田間的推廣應(yīng)用具有重要的意義。
(責(zé)任編輯:胡吉鳳)
參 考 文 獻(xiàn):
[1] ??蘇湘寧,劉偉玲,王萌,等.生防菌爪哇棒束孢對(duì)斜紋夜蛾的防效與安全性評(píng)價(jià)[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2021,52(4):995-1001.
[2] ?劉佳,周勇,朱航,等.斜紋夜蛾抗藥性監(jiān)測(cè)及茚蟲威對(duì)其解毒代謝酶的影響[J].昆蟲學(xué)報(bào),2016,59(11):1254-1262.
[3] ?高紅,張冉,萬(wàn)永繼.白僵菌的分類研究進(jìn)展[J].蠶業(yè)科學(xué),2011,37(4):730-736.
[4] ?Zimmermann G.Review on safety of the entomopathogenic fungi ?Beauveria bassiana ?and ?Beauveria brongniartii [J].Biocontrol Science & Technology,2007,17(6):553-596.
[5] ?季香云,楊長(zhǎng)舉.白僵菌的致病性與應(yīng)用[J].中國(guó)生物防治,2003,19(2):82-85.
[6] ?闕生全,喻愛林,劉亞軍,等.白僵菌應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中國(guó)森林病蟲,2019,38(2):29-35.
[7] ?周立,張慎,陳琳,等.斜紋夜蛾高致病力菌株的篩選及四種殺蟲劑的毒力測(cè)定[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué),2022,45(4):44-50.
[8] ?郭亞力,田學(xué)軍,羅思,等.球孢白僵菌對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的致病性研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(2):100-101.
[9] ?宋龍騰,于洪春,王雨薇,等.卵孢白僵菌與農(nóng)藥混用對(duì)蠐螬防治效果研究[J].北方園藝,2013,37(1):131-134.
[10] ?Magwenya T,Svotwa E,Katsaruware R D.Evaluating the efficacy of garlic (Allium sativum) as a bio-pesticide for controlling cotton aphid ( Aphis gossypii )[J].Scientia Agriculturae,2016,16(2):54-60.
[11] 諶金吾,王正文,黃勝先,等.白僵菌對(duì)藍(lán)莓蠐螬不同毒殺方法效果分析[J].耕作與栽培,2017,37(1):1-3.
[12] 王圣印,周仙紅,張安盛,等.甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽研究進(jìn)展[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,24(12):123-126.
[13] 王龍龍,劉鈺,崔蕊蕊,等.甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽研究開發(fā)現(xiàn)狀與展望[J].農(nóng)藥,2015,54(6):394-399.
[14] 高聰芬,賈變桃,沈晉良.甲維鹽等幾種殺蟲劑對(duì)斜紋夜蛾的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2005,33(6):63-65.
[15] 姜靈,洪波,王新譜,等.常用殺蟲劑與球孢白僵菌的相容性及對(duì)溫室白粉虱的協(xié)同防效[J].植物保護(hù),2018,44(1):199-204.
[16] 陳嘉恒,吳國(guó)杰,陳宗發(fā),等.白僵菌及其在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用[J].仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院學(xué)報(bào),2012,25(4):66-69.
[17] Yadav D S,Ranade Y,Mhaske S,et al.Compatibility of insecticides with ?Metarhizium brunneum ?(Petch) and ?Beauveria bassiana ?(Bals.) for bio-intensive management of pink mealybug, Maconellicoccus hirsutus ?(Green) in grapes[J].Journal of Biological Control,2019,33(3):253-263.
[18] 曹偉平,宋健,馮書亮,等.球孢白僵菌與低劑量化學(xué)殺蟲劑對(duì)小菜蛾的協(xié)同增效作用[J].中國(guó)生物防治學(xué)報(bào),2018,34(3):370-376.
[19] 蔡經(jīng)聲.可濕性粉劑[J].安徽化工,1982,8(3):51-63.
[20] 凌世海.農(nóng)藥劑型加工工業(yè)現(xiàn)狀和發(fā)展建議[J].安徽化工,2002,28(4):2-6.
[21] 王海鴻,劉勝,王帥宇,等.150億孢子/g球孢白僵菌可濕性粉劑的研發(fā)及對(duì)西花薊馬的防治應(yīng)用[J].中國(guó)生物防治學(xué)報(bào),2020,36(6):858-861.
[22] Mochi D A,Monteiro A C,Pietro R C L R,et al.Compatibility of ?Metarhizium anisopliae ?with liposoluble photoprotectants and protective effect evaluation against solar radiation[J].Bioscience Journal,2017,33(4):1028-1037.
[23] Oliveira D G P D,Lopes R B,Rezende J M,et al.Increased tolerance of ?Beauveria bassiana ?and ?Metarhizium anisopliae ?conidia to high temperature provided by oil-based formulations[J].Journal of Invertebrate Pathology,2018,151:151-157.
[24] Lomer C J,Prior C.Biological control of Locusts and Grasshoppers[M].UK:CAB International,1992.
[25] 周立,張慎,陳琳,等.斜紋夜蛾高致病力菌株的篩選及四種殺蟲劑的毒力測(cè)定[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué),2022,45(4):44-50.
[26] Sivasundaram V,Rajendran L,Muthumeena K,et al.Effect of talc-formulated entomopathogenic fungus ?Beauveria ?against leaffolder ( Cnaphalocrosis medinalis ) in rice[J].World Journal of Microbiology and Biotechnology,2008,24(7):1123-1132.
[27] Kim J S,Je Y H,Skinner M,et al.An oil-based formulation of ?Isaria fumosorosea ?blastospores for management of greenhouse whitefly ?Trialeurodes vaporariorum ?(Homoptera:Aleyrodidae)[J].Pest Management Science,2013,69(5):576-81.
[28] Huang Z,Ali S,Ren S.Insecticidal activity influence of beta-cypermethrin on the pathogenicity of ?Beauveria bassiana ?against ?Aleurodicus disperses [J].Crop Protection,2013,45(3):104-108.
[29] 田佳,汝冰璐,王穎,等.一株對(duì)桃蚜有高致病性球孢白僵菌的分離、篩選與鑒定[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào),2018,45(3):606-613.
[30] 關(guān)朝陽(yáng),周國(guó)英,李聰,等.球孢白僵菌與苦參堿混用對(duì)雙線卷裙夜蛾的協(xié)同增效作用[J].中國(guó)生物防治學(xué)報(bào),2022,38(3):573-579.
[31] Marit F,Knols B,Thomas M B,et al.Synergy in efficacy of fungal entomopathogens and permethrin against west african insecticide-resistant ?Anopheles gambiae ?mosquitoes[J].PLoS One,2010,5(8):e12081.
[32] 谷祖敏,李璐,紀(jì)明山,等.6種常用農(nóng)藥與球孢白僵菌和蠟蚧輪枝菌的相容性[J].農(nóng)藥,2006,49(5):325-326.
[33] 顧麗嬙,李春香,張淑紅.球孢白僵菌和布氏白僵菌對(duì)甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(3):118-120.
[34] Zhang Y D,Zhang X C,Tian Q G,et al.Toxicological and biochemical description of synergism of Beauveria bassiana and emamectin benzoate against Megalurothrips usitatus (Bagrall)[J].Journal of Fungi,2022,8(9):916.
[35] 黃志,梁昌聰,楊臘英,等.綠僵菌農(nóng)藥助劑的篩選及混配防治荔枝蝽蟓的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(24):11619-11621.
[36] 姜靈,洪波,王新譜,等.常用殺蟲劑與球孢白僵菌的相容性及對(duì)溫室白粉虱的協(xié)同防效[J].植物保護(hù),2018,44(1):199-204.
[37] 李春香,崔也平,張英英.卵孢白僵菌與農(nóng)藥的復(fù)配劑對(duì)甜菜夜蛾的毒力測(cè)定[J].北方園藝,2009,33(7):75-78.
[38] 王勝華,馬長(zhǎng)山,孟憲科,等.1%甲維鹽微乳劑與微生物農(nóng)藥混用防治甘藍(lán)小菜蛾藥效研究[J].農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備,2015,21(1):76,117.
[39] 王峰,鄭鵬飛,農(nóng)向群,等.球孢白僵菌與三種農(nóng)藥對(duì)蘿卜蚜的協(xié)同防治效果[J].中國(guó)生物防治學(xué)報(bào),2017,33(6):752-759.
[40] 凌世海.農(nóng)藥劑型加工技術(shù)叢書-固體制劑(第3版)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2003.
[41] 明亮,孫以文,劉程程,等.農(nóng)藥油懸浮劑研究進(jìn)展[J].農(nóng)藥,2014,53(5):313-315.
[42] Inyang E N,Mccartney H A,Oyejola B,et al.Effect of formulation,application and rain on the persistence of the entomogenous fungus ?Metarhizium anisopliae ?on oilseed rape[J].Mycological Research,2000,104(6):653-661.
[43] 余建波,周學(xué)強(qiáng),何鵬輝,等.25%氟啶蟲酰胺·呋蟲胺可分散油懸浮劑的配方研制[J].世界農(nóng)藥,2022,44(8):34-38,47.
[44] Perfetti D C,Moreno P M.Efecto de formulaciones acuosas y aceitosas de 13 aislamientos nativos de ?Beauveria bassiana ?(Ascomycota) sobre ?Rhodnius prolixus ?(Triatominae) bajo condiciones experimentales[J].Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú,2016,27(4):771-782.
Synergistic Interaction Between the Entomopathogenic Fungus Beauveria bassiana SCAUJH19 and Emamectin Benzoate Against Spodoptera litura
Li Jiaying1,Xiao Zhipeng2,Zhang Shen1,Cai hailin3,Teng Kai4,Zeng Weiai3,Wu Shaolong5,Zhou Xiangping1*
(1.Yongzhou Tobacco Company of Hunan Province,Yongzhou,Hunan 425000,China; 2.Hengyang Tobacco Company of Hunan Province,Hengyang,Hunan 421200,China; 3.Changsha Tobacco Company of Hunan Province,Changsha,Hunan 410000,China; 4.Xiangxi Tobacco Company of Hunan Province,Xiangxi,Hunan 416000,China;5.Hunan Province Tobacco Company,Changsha,Hunan 410000,China)
Abstract:
The combination of entomogenous fungi and pesticides could make up for their shortcomings and provide new strategies for pest control.In order to determine the compatibility of ?Beauveria bassiana ?SCAUJH19 with emamectin benzoate and their joint toxicity and compound preparation against ?Spodoptera litura ,this study determined the effects of different concentrations of emamectin benzoate mixed with ?B.bassiana ?SCAUJH19 on conidia germination and colony growth of the strain,the toxicity of the combination of ?B.bassiana ?SCAUJH19 and emamectin benzoate to ?S.litura ?2nd instar larvae,and conducted the compound preparation according to the optimal combination of fungi and pesticides.The results showed that ?B.bassiana ?SCAUJH19 had good compatibility with emamectin benzoate.The minimum conidia germination rate of ?B.bassiana ?SCAUJH19 treated with 0.5 mg/L-20 mg/L emamectin benzoate was 96.11%-98.01% after 3 days of inoculation.On the 7th day,the colony diameters of ?B.bassiana ?SCAUJH19 treated with 0.5 mg/L,2.5 mg/L and 5.0 mg/L emamectin benzoate were 42.95 mm,44.5 mm and 41.98 mm,respectively,which had no significant difference compared with the control.Different combinations of ?B.bassiana ?SCAUJH19 and emamectin benzoate 1×108 conidia/mL+1.5 mg/L,1×108 conidia/mL+0.5 mg/L and 1×107 conidia/mL+1.0 mg/L induced 100%,95% and 95% corrected mortality rates of instar larvae of ?S.litura ?after 7 days of application,which were significantly higher than mortality rates observed for individual treatments of ?B.bassiana ?SCAUJH19 or emamectin benzoate.The median lethal time (LT50) values observed for three combinations were also lower than those observed for individual treatments of ?B.bassiana ?SCAUJH19 or emamectin benzoate.The oil-based emamectin benzoate+ B.bassiana ?formulation caused 100% mortality of 2nd,3rd,4th,and 5th instar larvae after 3 days of treatment.The highest mortality rates of ?S.litura ?2nd,3rd,4th,and 5th instar larvae induced by wettable powder were 96.39%,94.58%,83.33%,and 100% after 3 days of treatment.The compound oil-based suspension concentrates and wettable powder showed considerable efficacy against ?S.litura ?larvae,
and the lethality of oil suspension concentrate on S.litura ?mature larvae was better than that of wettable powder.
Keywords:
Spodoptera litura ; entomopathogenic fungi; insecticides; compatibility; virulence