吳 瑤，王再花，葉廣英，楊 意，劉厚誠(chéng)，周 榮

（1.佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院，廣東 佛山 528000；2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境園藝研究所/廣東省園林花卉種質(zhì)創(chuàng)新綜合利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510640；3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)電子工程學(xué)院，廣東 廣州 510642；4.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，廣東 廣州 510642）

【研究意義】‘迷你’秋石斛（DendrobiumMiniRed）和‘口袋情人’春石斛（D.Angel Baby‘Love Pocket’）屬于中小型觀賞石斛，其花色雅致，精巧迷人且花期長(zhǎng)，是當(dāng)前市場(chǎng)上暢銷的秋石斛和春石斛品種，但由于上述兩種石斛增殖速率較低，生長(zhǎng)周期長(zhǎng)。在組培過(guò)程中主要依靠調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑來(lái)實(shí)現(xiàn)芽的克隆和繁殖，一旦植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑用量過(guò)高或繼代次數(shù)過(guò)多，則容易出現(xiàn)變異，從而影響種苗出苗質(zhì)量，導(dǎo)致產(chǎn)業(yè)化程度不高。本文主要通過(guò)LED光質(zhì)組合處理，篩選適宜石斛克隆苗增殖和生根壯苗的最佳光質(zhì)組合，提升種苗質(zhì)量，加快組培生產(chǎn)進(jìn)程，對(duì)促進(jìn)石斛種苗的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)具有重要意義。【前人研究進(jìn)展】光是植物生長(zhǎng)最重要的環(huán)境因子之一，影響其生長(zhǎng)發(fā)育全程。LED 燈具有壽命長(zhǎng)、節(jié)能效果好、可控制、具全光譜光質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)［1］，在植物組培快繁實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)過(guò)程中運(yùn)用較為廣泛。LED 光質(zhì)在蔬菜、花卉、藥用植物等多種作物繁殖中應(yīng)用并取得了良好效果［2-8］。特別是在粗肋草、菊花、白掌、紅掌、白及等花卉園藝作物中應(yīng)用廣泛，且篩選出了適宜組培的光質(zhì)組合，如‘如意皇后’粗肋草在R7 ∶B3 光質(zhì)下增殖效果最好；白掌、菊花和甘蔗在R1 ∶B1 ∶Y1 光質(zhì)下增殖效果最好［9-14］。而LED 光質(zhì)在石斛組培中也有應(yīng)用，如鐵皮石斛、霍山石斛、金釵石斛等。前人報(bào)道指出，鐵皮石斛經(jīng)單紅光45 d 處理后轉(zhuǎn)入R2 ∶B3 光質(zhì)下，其多糖含量最高；金釵石斛在R1 ∶B2 光質(zhì)培養(yǎng)下多糖和生物堿含量分別較對(duì)照增加66.1%、42.1%［15-18］。不同作物品種對(duì)光質(zhì)的需求存在一定差異，但紅、藍(lán)、綠光質(zhì)組合更有利于其組培生長(zhǎng)和次生代謝物質(zhì)積累［19-20］。最近研究表明，LED 復(fù)合光質(zhì)3R1B1G、4R1B1G 培養(yǎng)的藍(lán)莓組培苗增殖倍數(shù)較對(duì)照分別提高28.50%、27.54%。綠光能參與并影響植物光合作用，比紅、藍(lán)光更能深入植物冠層，有利于光合作用，因此，在紅藍(lán)光中適當(dāng)增加綠光，可進(jìn)一步提高種苗葉片的光合色素含量、可溶性糖含量、根系活性等［21］。此外，為保證種苗質(zhì)量，研究者和生產(chǎn)者一般通過(guò)種苗分級(jí)來(lái)實(shí)現(xiàn)，可以根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)要求人為分級(jí)或PCA 聚類分級(jí)。在生產(chǎn)上越來(lái)越多的人在試管苗出苗時(shí)開(kāi)始進(jìn)行分級(jí)，剔除長(zhǎng)勢(shì)不佳、成活率低的種苗，篩選出優(yōu)質(zhì)種苗，以保證植物后期生產(chǎn)的質(zhì)量和產(chǎn)量。石斛種苗分級(jí)相關(guān)的報(bào)道主要為藥用石斛如鐵皮石斛、金釵石斛等［22-26］，有關(guān)觀賞石斛的種苗分級(jí)鮮見(jiàn)報(bào)道?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】已有文獻(xiàn)報(bào)道，LED 光質(zhì)對(duì)多種植物組培生長(zhǎng)有明顯的促進(jìn)作用，常用于組培的LED 光質(zhì)包括紅光、藍(lán)光、黃光、白光和綠光等。紅光有利于光合產(chǎn)物的積累、減緩植物細(xì)胞內(nèi)的膜脂過(guò)氧化作用明顯，提高抗逆性；藍(lán)光對(duì)莖的伸長(zhǎng)有明顯促進(jìn)作用；一般情況下單一光質(zhì)不利于植物的組培生長(zhǎng)，而紅藍(lán)光的組合報(bào)道較為常見(jiàn)，與大部分植物光合作用所需要的光譜相似；近年來(lái)，綠光在植物中的重要性被逐漸認(rèn)可，其對(duì)植物光合作用具有一定的積極作用。伍潔等［27］發(fā)現(xiàn)紅藍(lán)R6 ∶B4 處理中，加入綠光，植物可溶性糖的含量顯著提高；樊小雪等［28］發(fā)現(xiàn)綠光照射下蕃茄幼苗IAA 含量最高。不同光質(zhì)可以影響植株的生理過(guò)程與形態(tài)特征，但有關(guān)LED 光質(zhì)對(duì)觀賞石斛的組培快繁和種苗分級(jí)的影響報(bào)道比較少見(jiàn)?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】本文采用紅、藍(lán)、綠3 種LED 光源，以組合光R3B6G0、R3B6G1、R3B6G3、R6B3G0、R6B3G1、R6B3G3、R3B3G3和白光（W）共8 種不同光質(zhì)配比，研究其對(duì)兩種觀賞石斛組培苗增殖、生根壯苗和生長(zhǎng)的效果，并結(jié)合PCA 主成分分析等輔助方法進(jìn)行種苗分級(jí)，以掌握優(yōu)質(zhì)石斛種苗組培的光質(zhì)條件，為石斛的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境園藝研究所繁殖的‘迷你’秋石斛（D.Mini Red）和‘口袋情人’春石斛（D.Angel Baby ‘Love Pocket’）為材料，選取大小接近的組培苗進(jìn)行LED 光質(zhì)處理。于2021 年1 月—2022 年8 月在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院白云基地組培室和溫室大棚開(kāi)展試驗(yàn)。

本試驗(yàn)的LED 單顆燈珠1.5 W，RBG 各0.5 W，一條燈功率24 W。使用紅光、藍(lán)光、綠光進(jìn)行組合，形成R6B3G0、R6B3G1、R6B3G3、R3B6G3、R3B6G1、R3B6G0、R3B3G3（字母后數(shù)字表示紅、藍(lán)、綠光照強(qiáng)度比例）光質(zhì)，W（白光）為對(duì)照，共8 種光質(zhì)組合。R 表示波長(zhǎng)為620 nm的純紅光；B 表示波長(zhǎng)為460 nm 的純藍(lán)光；G 表示波長(zhǎng)為520 nm 的純綠光；W 表示白色熒光燈（400～750 nm）。LED 燈管由仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院精準(zhǔn)農(nóng)業(yè)智能裝備實(shí)驗(yàn)室提供；采用光譜儀（型號(hào)為群智ALP-01）測(cè)定其光照強(qiáng)度。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 增殖和生根壯苗培養(yǎng) 增殖培養(yǎng)：切取石斛克隆苗2 節(jié)莖段接種到增殖培養(yǎng)基上，每瓶接種15 個(gè)莖段，每個(gè)處理4 次重復(fù)，共32 瓶，隨機(jī)置于8 組不同光質(zhì)的LED 燈下培養(yǎng)45 d，石斛增殖培養(yǎng)基為改良的MS+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L+香蕉50 g/L+活性炭0.1 g/L+NAA0.05 mg/L+6-BA 3.0 mg/L。

生根壯苗培養(yǎng)：將增殖后長(zhǎng)勢(shì)相似的單芽接種至生根培養(yǎng)基，每瓶接種15 個(gè)單芽，每個(gè)處理4 次重復(fù)，共32 瓶，隨機(jī)置于8 組不同光質(zhì)的LED 光下培養(yǎng)45 d，石斛生根壯苗培養(yǎng)基為改良1/2 MS+NAA0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L+香蕉50 g/L+活性炭0.1 g/L。各處理除光源不同外，其他條件一致。光強(qiáng)為20 μmol/m2·s，每天光照時(shí)間12 h，培養(yǎng)溫度為24（±2）℃。

1.2.2 形態(tài)指標(biāo)測(cè)定和種苗分級(jí) 增殖系數(shù)為重復(fù)測(cè)定每瓶組培苗15 個(gè)莖段萌芽的數(shù)量（4 次重復(fù)），增殖系數(shù)=新芽總數(shù)/接種莖段數(shù)。莖段鮮重、干重（70 ℃烘干48 h 至恒重）為每瓶組培苗15 株植株的干重和鮮重（4 次重復(fù)）。

生根壯苗統(tǒng)計(jì)每瓶組培苗15 株植株根數(shù)、平均根長(zhǎng)、莖粗、新芽數(shù)、株高、葉數(shù)（4 次重復(fù)）。將石斛生根壯苗統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)采用ORIGIN—PCA主因子成分分析，然后將該階段的苗結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際進(jìn)行人為分級(jí)處理。

1.2.3 石斛分級(jí)種苗馴化及生長(zhǎng)勢(shì)統(tǒng)計(jì) 石斛種苗出瓶后，用水草種植于直徑5 cm 營(yíng)養(yǎng)杯中，置于水簾溫室中培養(yǎng)。每個(gè)分級(jí)苗種植30 株，3 次重復(fù)，各90 株。出瓶栽培180 d，統(tǒng)計(jì)每個(gè)等級(jí)苗的成活率、株高和莖粗。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用SAS8.0 軟件Duncan 方法檢驗(yàn)不同處理間的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同LED 光質(zhì)對(duì)兩種石斛增殖的影響

不同LED 光質(zhì)條件下，‘迷你’秋石斛和‘口袋情人’春石斛的增殖系數(shù)、干鮮重和干物質(zhì)含量見(jiàn)表1～表2、圖1～圖2。‘迷你’秋石斛在R6B3G0 光質(zhì)下增殖效果最好，培養(yǎng)45 d 后增殖系數(shù)比對(duì)照提高29.8 %，達(dá)2.35 個(gè)/株，鮮重、干重和干物質(zhì)含量分別為3.941、0.273 g/株和7.06%。其次為R3B6G3、R3B6G1 處理，3 種光質(zhì)處理間增殖系數(shù)差異不顯著，但明顯高于其他處理和對(duì)照，R6B3G1 和R6B3G3 處理的效果最差。紅藍(lán)光比例為6 ∶3 時(shí)，隨著綠光增加，增殖系數(shù)下降，但干物質(zhì)含量有明顯增加，在R6B3G3 光質(zhì)下，干物質(zhì)含量達(dá)到8.61%；而紅藍(lán)光比例為3 ∶6 時(shí)，隨著綠光的增加，增殖系數(shù)上升，干物質(zhì)含量呈現(xiàn)先下降又上升的現(xiàn)象?！诖槿恕菏赗3B6G0 光質(zhì)組合增殖效果最好，增殖系數(shù)達(dá)到3.11 個(gè)/株，明顯高于其他處理，比對(duì)照提高76.7%，鮮重、干重和干物質(zhì)含量分別為0.258、0.022 g/株和8.58%，其次為R3B3G3，而R6B3G0、R3B6G3 效果較差。紅、藍(lán)光比例為6 ∶3 時(shí)，隨著綠光增加，增殖系數(shù)上升；而紅、藍(lán)光比例在3 ∶6 時(shí)，隨著綠光增加，增殖系數(shù)下降，與‘迷你’秋石斛的增殖效果相反；但該種石斛在紅藍(lán)光比例6 ∶3 或3 ∶6 時(shí)，補(bǔ)充一定綠光，也可明顯增加干物質(zhì)含量，與‘迷你’秋石斛結(jié)果類似。

圖1 不同LED 光質(zhì)下的‘迷你’秋石斛增殖表型Fig.1 Effects of different LED light qualities on proliferation of Dendrobium ‘Mini’ Red

圖2 不同LED 光質(zhì)下的‘口袋情人’春石斛增殖表型Fig.2 Effects of different LED light qualities on proliferation of Dendrobium Angel Baby ‘Love Pocket’

表1 不同LED 光質(zhì)對(duì)‘迷你’秋石斛增殖的影響Table 1 Effects of different LED light quality treatments on the proliferation of Dendrobium Mini Red

表2 不同LED 光質(zhì)對(duì)‘口袋情人’春石斛增殖的影響Table 2 Effects of different LED light quality treatments on the proliferation of Dendrobium Angel Baby ‘Love Pocket’

2.2 不同LED 光質(zhì)對(duì)兩種石斛生根壯苗的影響

從表3、表4 可以看出，不同LED 光質(zhì)組合處理對(duì)兩種石斛的生根壯苗存在一定差異?！阅恪锸赗6B3G3 組合光質(zhì)處理下效果最佳，根數(shù)和平均根長(zhǎng)分別為14.20 根/株和2.81 cm，分別比對(duì)照提高63.4%和18.6%；處理效果較好的為R3B6G1 和R3B6G3，與前者無(wú)顯著差異。在紅、藍(lán)光比例為6 ∶3 情況下，隨著綠光增加，根數(shù)也增加；紅、藍(lán)光比例為3 ∶6 時(shí)，增加適當(dāng)綠光，根數(shù)增加；而對(duì)照和R6B3G0 生根壯苗效果最差（圖3）?！诖槿恕菏赗6B3G0 組合光質(zhì)處理下生根壯苗效果最好，根數(shù)高達(dá)10.98 根/株，比對(duì)照提高1.2 倍，其次為R6B3G3，且兩種光質(zhì)處理效果無(wú)顯著差異，再次為R3B3G3 組合，莖粗和葉數(shù)顯著低于上述兩種光質(zhì)，其他指標(biāo)無(wú)顯著差異。在紅、藍(lán)光比例為6 ∶3 或3 ∶3 時(shí)，增加與藍(lán)光比例相同的綠光將會(huì)促進(jìn)根數(shù)增加；在紅、藍(lán)光比例為3 ∶6時(shí)，增加適量的綠光會(huì)增加根數(shù)，但綠光過(guò)強(qiáng)的R3B6G3 光質(zhì)下該石斛的根數(shù)明顯減少，與對(duì)照根數(shù)差異不明顯，不利于該石斛的生根壯苗（圖4）。

圖3 不同LED 光質(zhì)下的‘迷你’秋石斛生根壯苗表型Fig.3 Rooting and strengthening seedlings of Dendrobium Mini Red under different light quality LEDs

圖4 不同LED 光質(zhì)下的‘口袋情人’春石斛生根壯苗表型Fig.4 Effects of different LED light qualities on rooting and seedlings strengthening of Dendrobium Angel Baby ‘Love Pocket

表3 不同LED 光質(zhì)對(duì)‘迷你’秋石斛生根壯苗的影響Table 3 Effects of different LED light qualities on rooting and shoot strengthening of Dendrobium Mini Red

表4 不同LED 光質(zhì)對(duì)‘口袋情人’春石斛生根壯苗的影響Table 4 Effects of different LED light qualities on rooting and shoot strengthening of Dendrobium Angel Baby 'Love Pocket'

2.3 不同LED 光質(zhì)的石斛試管苗分級(jí)

生根壯苗階段的石斛試管苗直接影響出瓶苗的質(zhì)量和產(chǎn)量，運(yùn)用科學(xué)的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)不同LED光質(zhì)培養(yǎng)的石斛生根苗進(jìn)行分級(jí)分析，對(duì)于其種苗的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)非常必要。如表5 所示，‘迷你’秋石斛前4 個(gè)特征值累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到84.06%，表明前4 個(gè)主要成分包含絕大部分信息，在PC1中根數(shù)、莖粗、葉數(shù)指標(biāo)的系數(shù)最大，起主要作用，為‘迷你’秋石斛的試管苗分級(jí)的主要指標(biāo)?！诖槿恕菏? 個(gè)特征值累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到85.31%，說(shuō)明前4 個(gè)主要成分包含絕大信息，在PC1 中根數(shù)、新芽數(shù)、葉數(shù)指標(biāo)的系數(shù)最大，起主要作用，為該石斛試管苗分級(jí)的主要指標(biāo)（表6）。

表5 ‘迷你’秋石斛試管苗主要成分分析特征根、積累方差貢獻(xiàn)率及特征向量Table 5 Principal component analysis of eigenroot,cumulative variance contribution rates and eigenvectors of test-tube seedlings of Dendrobium Mini Red

表6 ‘口袋情人’春石斛試管苗主要成分分析特征根、積累方差貢獻(xiàn)率及特征向量Table 6 Principal component analysis of eigenroot,cumulative variance contribution rates and eigenvectors of test-tube seedlings of Dendrobium Angel Baby ‘Love Pocket’

根據(jù)多種石斛［11-25］以及植物［22,29］分級(jí)文獻(xiàn)，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際要求，確定‘迷你’秋石斛和‘口袋情人’春石斛試管苗的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（表7）?！阅恪锸嚬苊绶旨?jí)標(biāo)準(zhǔn)為，一級(jí)苗：根數(shù)＞13 根、莖粗＞0.6 cm、葉數(shù)＞6 片；二級(jí)苗：根數(shù)9～13 根、莖粗0.3～0.6 cm、葉數(shù)4～6 片；三級(jí)苗：根數(shù)＜9根、莖粗＜0.3 cm、葉數(shù)＜4 片；‘口袋情人’春石斛試管苗分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為，一級(jí)苗：根數(shù)＞8 根、芽數(shù)＞3 個(gè)、葉數(shù)＞5 片；二級(jí)苗：根數(shù)3～8 根、芽數(shù)2～3 個(gè)、葉數(shù)2～5 片；三級(jí)苗：根數(shù)＜3 根、芽數(shù)＜2 個(gè)、葉數(shù)＜2 片。

表7 ‘迷你’秋石斛和‘口袋情人’春石斛組培苗形態(tài)指標(biāo)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)Table 7 Grading Standard for morphological indexes of tissue culture seedlings of Dendrobium Mini Red and Dendrobium Angel Baby ‘Love Pocket’

根據(jù)試管苗的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)不同LED 光質(zhì)培養(yǎng)下的‘迷你’秋石斛進(jìn)行分級(jí)，結(jié)果如表8 所示，光質(zhì)R3B6G1、R3B3G3、R3B6G3 處理的一級(jí)苗，占比分別為53.3%、46.8%和43.3%；R6B3G1、R6B3G3、R3B6G0、R3B3G3、W 光質(zhì)處理的三級(jí)苗，占比為50%～76.8%；三級(jí)苗為R6B3G0 光質(zhì)處理的苗，占比為56.7%。對(duì)‘口袋情人’春石斛進(jìn)行分級(jí)，R6B3G0 光質(zhì)處理的一級(jí)苗，占比為53.3%；R6B3G1、R6B3G3、R3B6G0、R3B6G1、R3B3G3 光質(zhì)處理的二級(jí)苗，占比為46.7%～66.8%；R3B6G3、W 光質(zhì)處理的三級(jí)苗占比最高（表8）。種植180 d 后，對(duì)各等級(jí)石斛苗進(jìn)行成活率和生長(zhǎng)勢(shì)的統(tǒng)計(jì)，‘迷你’秋石斛一級(jí)苗成活率為100%、顯著高于二、三級(jí)苗，其中株高分別比二、三級(jí)苗高35.8%和50.2%，莖粗比三級(jí)苗高47.4%?！诖槿恕菏患?jí)苗成活率100%，其中成活率、株高顯著高于二、三級(jí)苗，分別比三級(jí)苗高25.4%和49.7%，莖粗比三級(jí)苗高45.5%（表9）。

表8 LED 光質(zhì)下‘迷你’秋石斛和‘口袋情人’春石斛試管苗的分級(jí)Table 8 Grading of test-tube seedlings of Dendrobium Mini Red and Dendrobium Angel Baby ‘Love Pocket’ under LED light quality

表9 ‘迷你’秋石斛和‘口袋情人’春石斛不同等級(jí)苗生長(zhǎng)統(tǒng)計(jì)Table 9 Statistics of survival rates after grading of Dendrobium Mini Red and Dendrobium Angel Baby ‘Love Pocket’

綜上所述，適當(dāng)比例的紅、藍(lán)、綠LED 光質(zhì)組合促進(jìn)石斛生根壯苗和優(yōu)質(zhì)種苗生產(chǎn)，‘迷你’秋石斛在R3B3G3、R3B6G1、R3B6G3 光質(zhì)下可培育更多優(yōu)質(zhì)的一級(jí)試管苗，在R6B3G3 光質(zhì)下可培育更多的二級(jí)以上優(yōu)質(zhì)苗；‘口袋情人’春石斛在R6B3G0 光質(zhì)下可培育更多優(yōu)質(zhì)的一級(jí)試管苗，與生根壯苗的結(jié)果基本一致。可見(jiàn)，通過(guò)光質(zhì)組合處理，兩種石斛的增殖和生長(zhǎng)效果遠(yuǎn)好于對(duì)照，且能保證石斛的成活率和生長(zhǎng)長(zhǎng)勢(shì)，種苗繁殖速度加快，種苗質(zhì)量提升，從而降低生產(chǎn)成本。

3 討論

3.1 不同LED 光質(zhì)對(duì)觀賞石斛增殖的效果

前人已有不少關(guān)于LED 光質(zhì)促進(jìn)植物組培增殖的報(bào)道，李林山等［14］研究表明，使用紅、藍(lán)光7 ∶3 對(duì)粗肋草的增殖效果最好；劉慧雯［30］發(fā)現(xiàn)紅、藍(lán)光比例3 ∶1 時(shí)，鐵皮石斛原球莖增殖效果最好；李夏媛等［31］發(fā)現(xiàn)在R6B1W1 培養(yǎng)下蘭花‘霞光’的增殖效果最好；伍潔［27］研究表明，增加綠光提高生菜品質(zhì)，在R36 ∶B24 ∶G40 時(shí)生物量含量最高。說(shuō)明不同紅藍(lán)比例的組合光質(zhì)會(huì)根據(jù)植物種類不同，增殖效果不同，且綠光能增加植物的干物質(zhì)含量，這和本試驗(yàn)結(jié)果研究一致?！阅恪锸汀诖槿恕菏谠鲋吃囼?yàn)中相同紅藍(lán)光比例的試驗(yàn)結(jié)果差異顯著，這與品種特性有關(guān)，但結(jié)果均表明增加一定量的綠光會(huì)增加干物質(zhì)的含量。據(jù)推測(cè)適當(dāng)?shù)木G光能增加‘迷你’秋石斛的代謝產(chǎn)物，紅、藍(lán)光和綠光組合也會(huì)增加干物質(zhì)的含量，但最為理想的光質(zhì)比例及其影響的石斛干物質(zhì)積累效果還有待進(jìn)一步探究。

3.2 不同LED 光質(zhì)對(duì)觀賞石斛生根壯苗的影響

前人對(duì)LED 光質(zhì)在多種植物生根壯苗的應(yīng)用已有報(bào)道，余義強(qiáng)［32］研究表明，藍(lán)光有利于粉蕉生根壯苗的整體綜合指標(biāo)提升；王智杰［33］報(bào)道指出，藍(lán)光抑制金線蓮根系生長(zhǎng)，綠光抑制根系數(shù)量增加，紅光促進(jìn)根系伸長(zhǎng)，B3R1 最有利于根系數(shù)量的增加，促進(jìn)根系干重鮮重的積累；梁娟等［34］發(fā)現(xiàn)R2W3 促進(jìn)‘藍(lán)鼠耳’玉簪生根，達(dá)17.54 根/株，且有效促進(jìn)根系的伸長(zhǎng)?？梢?jiàn)，光質(zhì)對(duì)不同植物生根壯苗的效果差異顯著。在不同紅藍(lán)光質(zhì)比例下，綠光增加會(huì)增加生根壯苗的效果，且不同光質(zhì)下，綠光增加的臨界點(diǎn)不同。本研究發(fā)現(xiàn)，紅、藍(lán)、綠3 種光質(zhì)進(jìn)行組合后，在紅藍(lán)光質(zhì)中加入不同比例的綠色光質(zhì)，都會(huì)增加‘迷你’秋石斛和‘口袋情人’春石斛生根壯苗的效果，但具體的作用機(jī)制還不明晰，特別是這些光質(zhì)組合處理對(duì)石斛活性成分及次生代謝物的積累還不明確，下一步我們將繼續(xù)深入研究。

3.3 不同LED 光質(zhì)對(duì)觀賞石斛試管苗分級(jí)

前人對(duì)種苗的主成分分析及分級(jí)已有報(bào)道，化海霞等［24］為測(cè)定鐵皮石斛不同生長(zhǎng)時(shí)期試管苗及移栽苗的生長(zhǎng)指標(biāo)，建立了分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)；唐玲等［25］制定了金釵石斛種苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)?？梢?jiàn)，在試管苗階段進(jìn)行分級(jí)對(duì)其種苗田間生產(chǎn)起關(guān)鍵作用。本試驗(yàn)試管苗分級(jí)是對(duì)生根壯苗階段結(jié)果的一種分析，據(jù)試驗(yàn)后期石斛一、二、三級(jí)苗的成活率和生長(zhǎng)情況可知，主成分測(cè)定的分級(jí)法能有效地了解這兩種石斛生根壯苗階段的最適LED 光質(zhì)組合，從而獲得更多優(yōu)質(zhì)種苗，為石斛種苗的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)提供參考依據(jù)。

4 結(jié)論

不同紅、藍(lán)、綠LED 光質(zhì)組合對(duì)‘迷你’秋石斛和‘口袋情人’春石斛克隆苗的增殖和生根壯苗有著不同效果?！阅恪锸赗6B3G0光質(zhì)組合增殖效果最好，增殖系數(shù)比對(duì)照提高29.8%；在R6B3G3、R3B6G1(G3)光質(zhì)組合生根壯苗效果最好，根數(shù)比對(duì)照提高62.8%～63.4%；‘口袋情人’春石斛在R3B6G0 組合光質(zhì)下增殖效果好，增殖系數(shù)比對(duì)照提高76.7%；在R6B3G0(G3)和R3B3G3 光質(zhì)組合下生根壯苗效果最好，根數(shù)比對(duì)照提高81.5%～120.0%，在此光質(zhì)培養(yǎng)下‘迷你’秋石斛和‘口袋情人’春石斛種苗分別有91.1%、82.3%達(dá)到一、二級(jí)苗標(biāo)準(zhǔn)，生長(zhǎng)長(zhǎng)勢(shì)和成活率明顯提高?？梢?jiàn)，適宜的紅藍(lán)綠LED 光質(zhì)組合培養(yǎng)可大大提高這兩種石斛的增殖效率和生根效果，從而促進(jìn)優(yōu)質(zhì)種苗的生產(chǎn)。