常曉英，沈豪飛，于瀟，張學紅

環(huán)境內分泌干擾物（environmental endocrine disruptors，EED）是一類可通過不同途徑干擾或模擬生物體內自身激素的合成、釋放、結合及代謝的外源性化學物質[1]。EED常用于增塑劑、農藥和阻燃劑等有機化合物，經降解后釋放入水、空氣、土壤等環(huán)境介質中。人類主要通過呼吸道吸入、消化道攝入、皮膚接觸等途徑吸收此類物質，長期暴露會引起肝腎毒性、神經毒性、生殖毒性、自身免疫缺陷甚至惡性腫瘤[2]。雙酚A（bisphenol A，BPA）是目前生產量最大、分布和使用最廣的一類EED，簡稱二酚基丙烷，分子式C15H16O2，是由苯酚和丙酮在酸性介質中縮合而成。BPA是制備環(huán)氧樹脂（約占65%）和聚碳酸酯（約占35%）的主要化工原料，常用于食品包裝、廚具、牙科密封劑和罐裝食品容器的內涂層等日用產品，是人們普遍接觸的一種低毒性化學物質。研究發(fā)現，在人體血清、尿液、汗液、卵泡液、母乳、羊水及胎盤組織中均可檢測到BPA[2-3]。美國一項薈萃分析發(fā)現成人尿液中BPA的檢出率高達90%[4]；國內有研究報道中國成人尿液中BPA的檢出率達84%，且存在性別差異，在女性人群尿液中BPA的檢出濃度明顯高于男性[5]。BPA在人體內的半衰期小于6 h，但存在累積效應，可發(fā)揮類雌激素活性，與受體結合引起生物學效應。研究顯示，女性長期暴露于BPA與發(fā)生肥胖、胰島素抵抗、多囊卵巢綜合征、卵巢儲備功能下降、子宮內膜異位癥及女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的風險增加密切相關[2，6]。概述BPA對女性生殖功能的損傷作用，討論抗氧化劑、益生菌、維生素及中藥治療對BPA誘導的生殖毒性的改善作用。

1 BPA對女性生殖功能的損傷

BPA可發(fā)揮類雌激素效應，通過改變下丘腦-垂體-卵巢軸的調節(jié)影響卵巢類固醇激素的合成，干擾卵泡的生長發(fā)育，還可改變子宮形態(tài)，降低子宮內膜容受性，干擾胚胎植入，甚至引起不孕。BPA在多囊卵巢綜合征的發(fā)病機制中起著重要作用，由BPA等環(huán)境毒素導致的激素穩(wěn)態(tài)失衡可引起肥胖、胰島素抵抗及高胰島素血癥的發(fā)生，加劇多囊卵巢綜合征的表型特征[7]。

許多研究已證實BPA對卵巢功能有損傷作用。在接受體外受精/卵細胞質內單精子注射-胚胎移植（in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injectionembryo transfer，IVF/ICSI-ET）助孕的不孕癥女性中發(fā)現，尿液中BPA濃度較高者的卵母細胞獲取率、成熟率及胚胎植入率明顯下降；動物實驗發(fā)現，經BPA處理的小鼠卵巢組織出現卵泡囊性擴張，顆粒細胞數量明顯減少，并證明BPA暴露引起此種損傷的機制與其激活AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）/哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）/Unc-51樣激酶1（Unc-51-like kinase 1，ULK1）信號通路，加劇顆粒細胞自噬與凋亡有關，從而導致卵巢功能異常[8]。

子宮內膜容受性是影響胚胎植入的關鍵因素。Yuan等[9]報道BPA（100μg·kg-1·d-1）可通過降低糖皮質激素調節(jié)激酶1的表達水平、下調子宮內膜上皮細胞中鈉離子通道α亞單位蛋白的表達，減少子宮內膜胚胎著床部位的數量、減輕子宮的體積和質量，損傷小鼠子宮內膜容受性，導致胚胎植入失敗。

BPA暴露與子宮內膜異位癥的發(fā)生有關。研究表明，BPA暴露是導致腹膜子宮內膜異位癥發(fā)生的危險因素之一，與健康女性相比，腹膜子宮內膜異位癥患者尿液中BPA濃度與血清基質金屬蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）和MMP-9的表達水平顯著升高[10]。潛在的機制可能是BPA通過G蛋白耦聯(lián)的雌激素受體介導的絲裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）/細胞外信號調控的蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）信號通路上調MMP-2和MMP-9的表達，增強子宮內膜基質細胞的侵襲、增殖，從而導致子宮內膜異位癥。García-Pe?arrubia等[11]研究發(fā)現，產前暴露于較高水平的雌激素和BPA與新生兒肛門生殖器距離縮短密切相關，這可導致糞便微生物頻繁污染外陰及陰道，引起宮頸、陰道微生物群失調，而微生物感染引起的炎癥反應可增加子宮內膜異位癥的發(fā)病風險。

妊娠期接觸BPA還可增加不良產科結局的發(fā)生風險。Zhang等[12]納入386例不孕癥女性的前瞻性隊列研究顯示，與足月生產的產婦相比，妊娠＜37周的產婦在整個妊娠期尿液BPA濃度均較高；妊娠中晚期BPA濃度與早產的發(fā)生率呈正相關，且此種關聯(lián)在懷有女性胎兒的孕婦中更加顯著，表明妊娠中晚期可能是BPA暴露導致早產發(fā)生的一個關鍵窗口期，但其中潛在的關聯(lián)及發(fā)生機制仍需要更多研究證實。

2 改善BPA誘發(fā)生殖毒性的藥物

2.1 抗氧化劑活性氧（reactive oxygen species，ROS）和抗氧化劑的平衡可維持細胞內氧化還原狀態(tài)的穩(wěn)定，當這種平衡被破壞，可導致線粒體功能障礙，加劇細胞凋亡，引起細胞損傷。研究表明，氧化應激是導致卵母細胞老化的始動因素，可導致卵母細胞異常閉鎖、減數分裂異常、受精率降低及胚胎發(fā)育遲緩等不良影響[13]。BPA與卵巢雌激素受體結合可誘發(fā)氧化應激和炎癥反應，通過破壞卵母細胞的減數分裂和受精能力來影響卵母細胞的質量，而口服褪黑素（30 mg/kg，持續(xù)7 d）可降低小鼠卵母細胞內的ROS水平和抑制細胞凋亡，緩解由BPA誘發(fā)的生殖毒性[14]。Park等[15]對豬卵母細胞進行的體外實驗發(fā)現，褪黑素可恢復由BPA暴露導致的卵丘卵母細胞復合體的減數分裂異常，減少和抑制顆粒細胞的囊性擴張與線粒體凋亡蛋白的表達，從而促進豬卵母細胞的成熟。孕早期宮內暴露BPA（500 mg/kg，連續(xù)7 d）不僅使子代小鼠的死亡率增加，還可導致雌性子代小鼠卵巢組織中凋亡因子的表達失調，類固醇激素水平紊亂，而番茄紅素可有效減輕這些損傷，穩(wěn)定卵巢組織中的凋亡調控，保護小鼠的生育功能[16]。蝦青素也可有效緩解BPA誘導的氧化應激，降低卵泡中的ROS水平，改善卵泡發(fā)育，促進卵母細胞的成熟[17]。氧化應激是BPA誘發(fā)生殖細胞損傷的機制之一，因此抗氧化劑的應用在減輕BPA所致的生殖毒性作用方面具有潛在的應用價值，并已得到多項研究證實，未來還需更多的研究驗證其在臨床的應用效果。

2.2 益生菌腸道菌群又被稱為人類“第二基因”，在正常生理情況下，各菌群按一定比例存在，維持腸道微生態(tài)的平衡。腸道菌群失調可通過抑制機體免疫功能，調節(jié)中樞神經遞質的釋放以及直接或間接參與性激素的調控，參與女性生殖系統(tǒng)疾病的發(fā)生[18]。研究發(fā)現，圍生期暴露于BPA（50μg·kg-1·d-1）的小鼠在成年早期就出現與腸道菌群失調有關的免疫平衡紊亂以及肥胖、胰島素抵抗等代謝紊亂[19]。植物乳桿菌可通過吸附和降解來緩解BPA導致的毒性反應[20]。Giommi等[21]發(fā)現BPA暴露可通過干擾斑馬魚體內肝臟卵黃蛋白原的合成來影響其對下丘腦-垂體-性腺軸的調節(jié)，進而影響卵巢的正常功能，而補充益生菌可有效拮抗BPA的類雌激素效應，使參與卵泡生長和成熟的相關基因（如卵泡雌激素受體、黃體生成素受體）水平達到基礎狀態(tài)，緩解BPA引起的生殖毒性。目前，已證明多種菌株可促進特定環(huán)境污染物的降解，減輕EED對機體的毒性作用，因而補充益生菌有望在未來成為改善女性生育力的新方向。

2.3 維生素維生素是人體必需的微量元素，參與機體新陳代謝的調控，在女性生殖系統(tǒng)中的作用備受關注。BPA可導致體內氧化還原穩(wěn)態(tài)的失衡以及線粒體功能的破壞，而1，25-二羥維生素D3（0.1 μmol/L）可降低此種毒性反應，緩解因BPA引起的線粒體DNA片段缺失[22]，恢復卵巢的線粒體功能，從而提高卵母細胞的質量。Liu等[23]證明補充輔酶Q10可修復由BPA暴露引起的線粒體蛋白的表達失調和溶酶體功能的破壞，降低細胞的損傷程度。此外，輔酶Q10（100μg/mL）通過清除ROS和降低氧自由基水平，抵消BPA在秀麗隱桿線蟲（Caenorhabditis elegans）體內產生的生殖毒性，減少由BPA誘導的DNA雙鏈斷裂，同時還可降低胚胎發(fā)生非整倍體的風險，減少秀麗隱桿線蟲卵母細胞第二次減數分裂時染色體缺陷的發(fā)生[24]。在BPA暴露期間，口服α-硫辛酸（100 mg/kg，連續(xù)30 d）可預防脂質過氧化，減輕卵巢組織的氧化損傷程度，在與維生素E（20 mg/kg）聯(lián)合使用時療效更顯著。全反式維甲酸可抑制雌激素誘導的乳腺癌細胞的增殖，Koda等[25]報道，給切除卵巢的大鼠補充全反式維甲酸（5 mg/kg）可顯著抑制BPA誘導的子宮質量增加和BPA的雌激素活性。葉酸作為甲基供體可能與BPA存在相互作用。Mínguez-Alarcón等[26]前瞻性研究顯示，在食物葉酸攝入量＜400μg/d的不孕癥女性中，尿液BPA濃度與較低的胚胎種植率和臨床妊娠率相關，但在攝入量＞400μg/d的女性中，尿液BPA濃度有所降低，且胚胎種植率提高21%。葉酸對BPA毒性作用的改善在動物實驗中也有所證實。孕期母豬暴露于BPA會加重其自身及后代體內的氧化應激狀態(tài)，而膳食中補給葉酸可抵消BPA引起的胎盤氧化應激損傷，增強作用于胎盤滋養(yǎng)細胞和臍帶血的抗氧化酶活性，使母豬及仔豬體內的氧化還原達到平衡[27]。鑒于以上維生素可拮抗BPA的生殖毒性作用，建議維生素缺乏者或長期暴露于BPA的女性應及時補充維生素，但具體劑量、療程及作用機制仍需更多研究驗證。

2.4 中藥中藥治療在逆轉BPA所致的生殖損傷中已取得一定療效。BPA可通過誘導卵母細胞凋亡，增加卵巢DNA甲基轉移酶的表達，破壞卵巢的正常結構和功能，菟絲子黃酮可抑制小鼠卵巢中B淋巴細胞瘤2相關X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）、胱天蛋白酶7（caspase-7）和caspase-9蛋白的表達，上調Bcl-2基因表達，減輕BPA對卵母細胞的損傷[28]。同時，菟絲子黃酮可通過下調DNA甲基轉移酶的表達，抑制竇卵泡生長和類固醇生成調節(jié)因子H19/胰島素樣生長因子2（insulin like growth factor 2，IGF2）的表達，減少卵母細胞凋亡，改善雌性小鼠的生殖功能。姜黃素可通過抗氧化、抗炎及抑制相關信號通路，減弱由BPA誘導的胰島素抵抗和LO2肝細胞中炎癥細胞因子的表達[29]。BPA暴露還可導致卵巢雌激素分泌受損，擾亂小鼠的動情周期。白藜蘆醇是從花生、虎杖等植物性食物或藥物中提取的天然多酚類物質，可通過減少卵巢組織中ROS的積累抑制卵母細胞的凋亡和自噬，恢復小鼠的動情周期，緩解卵巢組織的損傷[30]。傳統(tǒng)中藥改善BPA導致的生殖毒性作用對豐富中藥學研究、促進中藥現代化有著積極作用，未來應挖掘更多藥物的治療作用，更好地保護和改善女性的生殖功能。

3 結語

BPA普遍存在于人們的日常生活中，可通過多種途徑損害女性生殖系統(tǒng)，與女性不孕癥相關?？寡趸瘎┛赡孓DBPA引起的氧化應激狀態(tài)，提高機體的抗氧化能力，減少組織細胞的損傷；腸道菌群失調是誘發(fā)女性生殖系統(tǒng)疾病的危險因素，而益生菌可通過靶向干預或重建菌群平衡減輕BPA引起的生殖毒性；補充合適劑量的維生素不僅可以維持機體代謝平衡，還可通過抗炎、抗氧化等作用來消除BPA對女性生殖內環(huán)境的干擾作用；中藥治療在拮抗BPA所致的毒性方面起到了重要作用，可發(fā)揮類雌激素效應，改善女性的生殖功能。盡管這幾類藥物在緩解由BPA導致的女性生殖功能損傷中的作用已取得初步成效，研究報道也較多，但實際應用的效果、劑量、時機、療程及安全性等方面仍需大樣本、多中心的研究支持。因此，在尚未取得循證醫(yī)學證據之前，不應鼓勵這些藥物用于臨床上對BPA生殖功能損傷的預防與治療。