熊旭東，于安民，孫 蕊，李 萍，劉愛忠

（西南林業(yè)大學(xué) 林學(xué)院，云南 昆明 650224）

蒜頭果（Malania oleiferaChun et S.Lee，MOC）是我國(guó)特有的鐵青樹科蒜頭果單種屬喬木，一般10～15m高［1-2］。蒜頭果果實(shí)有豐富的可食用油脂，種仁中神經(jīng)酸含量高達(dá)67%［3-6］。神經(jīng)酸是治療神經(jīng)類疾病的重要物質(zhì)，傳統(tǒng)從海洋動(dòng)物中獲取神經(jīng)酸含量有限且已被禁止。蒜頭果等富含神經(jīng)酸的植物已成為替代動(dòng)物源神經(jīng)酸的重要可持續(xù)性來源。然而目前蒜頭果種質(zhì)資源有限，野生蒜頭果僅在我國(guó)云南文山州的富寧縣和廣南縣以及廣西西部的石灰?guī)r地區(qū)有分布［7］。如何擴(kuò)大蒜頭果種植范圍及人工栽培蒜頭果是對(duì)其進(jìn)行開發(fā)利用首要解決的問題。該文章綜合蒜頭果資源現(xiàn)狀、基因組與遺傳多樣性研究、及人工繁殖、栽培、保護(hù)的研究進(jìn)展，提出目前存在的問題及展望。

1 蒜頭果的資源現(xiàn)狀與生物學(xué)特性

蒜頭果分布區(qū)域狹窄，僅分布于云南省富寧縣、廣南縣及廣西的樂業(yè)、巴馬、隆安、田林、凌云等海拔300～1 640 m區(qū)域，分布地域?yàn)槲覈?guó)典型的喀斯特地貌區(qū)，且分布地植株稀少（多為單株或幾株不等）［8］。對(duì)于蒜頭果自然分布地域狹窄且集中在喀斯特地區(qū)原因，一般認(rèn)為土壤pH值（中性或微堿性）是限制蒜頭果自然分布的重要原因［9-10］。特別是蒜頭果屬于半寄生植物，在苗木生長(zhǎng)初期蒜頭果通過生成探針樣結(jié)構(gòu)侵入其他植物木質(zhì)部，形成大量薄壁組織，具有半寄生植物的特性［11-14］；且蒜頭果對(duì)寄主植物有較大的依賴，在與吊蘭共生時(shí)，其形成大量吸器的同時(shí)苗木生物量顯著提升［15］。

除了蒜頭果的生境條件及與共生植物互作因素外，蒜頭果本身的生長(zhǎng)習(xí)性也是限制其擴(kuò)大生長(zhǎng)繁殖的主要原因。蒜頭果主要依賴蟲媒進(jìn)行異花授粉，開花期（一般為4～5月）遇生長(zhǎng)繁殖地雨季會(huì)大大降低其傳粉效率［16］；此外，蒜頭果一般5月上旬掛果，10月上旬陸續(xù)成熟，其長(zhǎng)結(jié)實(shí)期中互作生物和非生物因素也是限制其產(chǎn)量的重要原因［2］。縮短蒜頭果開花結(jié)實(shí)時(shí)間并輔以人工協(xié)助可適當(dāng)緩解蒜頭果因自身繁殖特性引發(fā)的產(chǎn)量損失。蒜頭果栽培繁育中另一個(gè)影響因素是其幼苗成活率，除半寄生特性的共生植物栽種外，使用適當(dāng)?shù)纳锱c化學(xué)制劑可以有效防治蒜頭果幼苗的葉斑病和膏藥?。?7］。除花期及生物病害問題外，蒜頭果生長(zhǎng)過程中的生殖特性也是限制其繁殖的主要原因。吳彥瓊等［18］發(fā)現(xiàn)蒜頭果花為兩性花，雖傳粉環(huán)節(jié)無障礙，但花粉活力低，低花粉萌發(fā)率導(dǎo)致其生殖障礙最終無法成果。除此之外，提升蒜頭果單果大小是提升其產(chǎn)量的有效手段，但目前蒜頭果中的研究發(fā)現(xiàn)通識(shí)的果核與果實(shí)大小的關(guān)聯(lián)在蒜頭果中并未呈現(xiàn)直接關(guān)聯(lián)，對(duì)于蒜頭果果實(shí)大小調(diào)控機(jī)制還有待進(jìn)一步探索［19］，人工重點(diǎn)培養(yǎng)的果皮薄、果核重的調(diào)控機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。蒜頭果生物學(xué)及生態(tài)學(xué)特性研究為選擇優(yōu)良種質(zhì)資源，實(shí)現(xiàn)蒜頭果產(chǎn)業(yè)良種化發(fā)展，縮短結(jié)實(shí)期，保證產(chǎn)量，提高栽培效益奠定了基礎(chǔ)。

蒜頭果種子富含油脂，其種仁含有高達(dá)51.85%～67.0%的油脂，其中脂肪酸含量占67%，以棕櫚酸、油酸、硬脂酸和神經(jīng)酸為主，神經(jīng)酸含量為62.5%［20］，是目前已知的含神經(jīng)酸最高的植物［21-22］。對(duì)于不同生境地收獲的蒜頭果有效成分及含量的研究是蒜頭果推廣應(yīng)用及品種選育的基礎(chǔ)。Wang等［23］對(duì)采自廣南和阜寧的53棵蒜頭果成熟種子進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)單個(gè)樹木之間形態(tài)特征差異比在不同地理區(qū)域之間更為顯著，表明了蒜頭果的個(gè)體差異性；對(duì)蒜頭果種子油濃度及脂肪酸組成分析發(fā)現(xiàn)，差異個(gè)體中主要組成成分是均為神經(jīng)酸（38.93%～47.24%）、十八碳烯酸（26.79%～32.08%）、二十二烯酸（10.94%～17.24%），但取自云南的蒜頭果中神經(jīng)酸含量（40.92%）低于廣西樂業(yè)（47.16%）和巴馬（46.55%）［24］。這些研究一方面表明了蒜頭果的個(gè)體差異性，同時(shí)可推測(cè)出神經(jīng)酸含量可能受氣溫影響，這對(duì)選擇優(yōu)良蒜頭果開展栽培及推廣提供了參考。

除神經(jīng)酸及脂肪酸外，蒜頭果含有豐富的營(yíng)養(yǎng)及有益人體健康的物質(zhì)。張磊等［25］測(cè)定了蒜頭果果仁中主要的7種金屬元素（Al、Ca、Fe、K、Mg、Mn、Zn）的含量，其中以K、Mg、Ca含量最高且高于光核桃種仁中的含量［26］，可以推廣為營(yíng)養(yǎng)保健食品。2021年，蘇霽玲等［27］分析蒜頭果種仁的營(yíng)養(yǎng)成分，指出蒜頭果種仁中含6種飽和脂肪酸和13種不飽和脂肪酸，不飽和脂肪酸含量在96%以上，同時(shí)發(fā)現(xiàn)蒜頭果油粕中的氨基酸有17種，含量在0.08%～1.47%；其中人體必須氨基酸占氨基酸總量的41%，必需氨基酸與非必須氨基酸的比值高于世界衛(wèi)生組織和聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織在1973年提出人體必須氨基酸含量40%和60%的理想蛋白質(zhì)，研究還采用ICP-MS檢測(cè)方法證明蒜頭果油粕中含有22種礦物質(zhì)元素，為蒜頭果開發(fā)為高鉀低鈣的飼料或食品提供了理論支持，同時(shí)極大的發(fā)掘了蒜頭果的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。

2 蒜頭果的基因組與遺傳多樣性研究

蒜頭果初期基因組研究主要基于DNA穩(wěn)定提取技術(shù)及RAPD類分子標(biāo)記對(duì)其基因組遺傳多樣性的宏觀研究［28］。2019年，Xu等［29］利用Pacific Biosciences測(cè)序平臺(tái)10×單分子實(shí)時(shí)測(cè)序技術(shù)進(jìn)行了蒜頭果測(cè)序，獲得了51 Gb和135 Gb的原始數(shù)據(jù)，基于測(cè)序平臺(tái)的PacBio長(zhǎng)片段組裝后，確認(rèn)蒜頭果基因組大小為1.5 Gb（N50：4.65 Mb），分析發(fā)現(xiàn)其基因組包含約82%的重復(fù)率，預(yù)測(cè)蛋白編碼基因24 064個(gè)，具有低雜合性。該研究首次組裝了蒜頭果的基因組，將為蒜頭果的功能基因組學(xué)、遺傳多樣性及物種進(jìn)化研究奠定基礎(chǔ)。除全基因組外，遺傳性細(xì)胞器的研究也為蒜頭果的遺傳多樣性研究奠定了基礎(chǔ)。Luo等［30］對(duì)蒜頭果線粒體基因組測(cè)序發(fā)現(xiàn)其基因組大小為527 575 bp，GC含量為45.65%，包括1個(gè)假基因、38個(gè)蛋白質(zhì)編碼基因、32個(gè)tRNA基因、3個(gè)rRNA基因，對(duì)其進(jìn)行進(jìn)化樹構(gòu)建發(fā)現(xiàn)其與薔薇科及菊科植物分屬同一分支，這為蒜頭果的基因功能及物種進(jìn)化研究奠定了基礎(chǔ)。原曉龍等［31］以蒜頭果葉綠體基因組的高通量測(cè)序結(jié)果為基礎(chǔ)，通過中性繪圖、ENC-plot及PR2-plot方法分析了葉綠體基因組密碼子偏好性并確立了最優(yōu)密碼子，為進(jìn)行蒜頭果的系統(tǒng)進(jìn)化、遺傳多樣性分析提供了參考?；谒忸^果基因組開展的功能基因探索也逐步開展。Yang等［32］探究了蒜頭果種子在四個(gè)發(fā)育時(shí)期的油脂含量變化，使用高通量測(cè)序技術(shù)進(jìn)行了四個(gè)時(shí)期的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序后，獲得了55 843個(gè)基因，其中22 833個(gè)基因在油脂快速累積時(shí)期的表達(dá)量表現(xiàn)出了較初期至少兩倍的增加，作者鑒定出與特殊油脂累積相關(guān)的基因198個(gè)，神經(jīng)酸合成相關(guān)的核心基因（β-酮脂酰-CoA合酶、β-酮脂酰-CoA還原酶、β-羥脂酰-CoA脫氫酶和反式烯脂酰-CoA還原酶）也被鑒定和驗(yàn)證，神經(jīng)酸合成及油脂合成路徑的提出為蒜頭果的應(yīng)用及神經(jīng)酸合成生物工程研究奠定了基礎(chǔ)?；谒忸^果基因組數(shù)據(jù)及轉(zhuǎn)錄組中發(fā)現(xiàn)的油脂、神經(jīng)酸合成路徑，亞油酸合成關(guān)鍵酶、蒜頭果3-酮酯酰-CoA合酶等基因已經(jīng)被成功克隆并完成了信息及表達(dá)量分析，這為進(jìn)一步開展蒜頭果特殊脂肪酸及神經(jīng)酸體外合成及基因工程研究提供了參考［33-34］。

3 蒜頭果的人工繁殖研究進(jìn)展

蒜頭果具有重要的藥用價(jià)值及經(jīng)濟(jì)價(jià)值，其基因組及轉(zhuǎn)錄組的研究確認(rèn)其價(jià)值的同時(shí)，為其開發(fā)利用提供了參考，但其開發(fā)利用首要解決的是繁殖問題。植物繁殖主要的方式是無性繁殖和有性繁殖，目前蒜頭果自然生長(zhǎng)繁殖主要是通過種子繁殖（有性繁殖）的方式來進(jìn)行，但其繁殖過程存在開花結(jié)實(shí)期長(zhǎng)、成活率低等問題。利用無性繁殖的方法可以縮減植物繁殖周期，蒜頭果的無性繁殖目前已經(jīng)在單細(xì)胞懸浮培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、嫁接、扦插等方面開展。

3.1 種子育苗

早在1970年的廣西巴馬就有蒜頭果種子育苗實(shí)驗(yàn)，且發(fā)芽率在80%以上。目前蒜頭果種子育苗的研究主要集中在不同處理方式、儲(chǔ)存方式等對(duì)蒜頭果育苗的影響方面。潘曉芳［35］對(duì)蒜頭果進(jìn)行了苗圃育苗和容器育苗，發(fā)現(xiàn)經(jīng)沙藏催芽后的蒜頭果種子發(fā)芽率可達(dá)到85%以上，而直播的發(fā)芽率卻只有4%，為后期蒜頭果種子儲(chǔ)存和提升萌發(fā)率提供了參考。對(duì)于蒜頭果為何存在不同處理方式的種子萌發(fā)力差異，丁俊峰等［36］通過蒜頭果果實(shí)不同部位甲醇提取物對(duì)白菜種子發(fā)芽進(jìn)行測(cè)試，證實(shí)了蒜頭果果皮、種皮、胚乳中含有多種抑制發(fā)芽的物質(zhì)，進(jìn)一步詮釋了未儲(chǔ)藏及處理蒜頭果種子發(fā)苗率低的原因。除了蒜頭果種子的處理與儲(chǔ)存方式外，不同成熟度的種子也會(huì)影響蒜頭果萌發(fā)率，張國(guó)革等［37］發(fā)現(xiàn)不同成熟度的種子發(fā)芽率差異極顯著，可以優(yōu)先選擇在果實(shí)成熟未脫落前搜集種子，結(jié)合適當(dāng)?shù)奶幚砑按鎯?chǔ)方式提升蒜頭果種子萌發(fā)率。余慧嶸等［38］在皖南引種蒜頭果，指出對(duì)種子進(jìn)行沙藏、消毒、多菌靈處理后結(jié)合適當(dāng)?shù)拿缙诠芾砑夹g(shù)可使蒜頭果苗圃發(fā)芽率穩(wěn)定在65%左右，進(jìn)一步證明把握存儲(chǔ)及播種條件對(duì)蒜頭果種子育苗至關(guān)重要。

在種子育苗方面很多研究都獲得了較高的發(fā)芽率，同時(shí)在種子育苗時(shí)的貯藏方式、種子消毒、催芽、土壤類型等方面也獲得了大量可參考數(shù)據(jù)［39］。種子育苗是目前蒜頭果培育最佳且應(yīng)用最廣泛的一種繁殖方式。云南林業(yè)科學(xué)院油茶研究所開展了多次蒜頭果種子育苗嘗試，收集當(dāng)年成熟未落的蒜頭果種子，采用沙藏催芽，控制沙子的濕度和大棚溫度以及遮蔭度，得到的蒜頭果發(fā)芽率為92%，于次年4月份移栽種植后成活率達(dá)到90%以上［40］。但從育苗時(shí)間及植物生長(zhǎng)速率方面，種子育苗方式需求時(shí)間長(zhǎng)、生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，利用無性繁殖開展蒜頭果育種成為快繁育種的趨勢(shì)。

3.2 嫁接

嫁接是傳統(tǒng)無性繁殖技術(shù)，能保證植物的優(yōu)良特性不會(huì)改變，且快速進(jìn)入結(jié)果期，提高植物的抗逆性和產(chǎn)量［41］。嫁接在果蔬、藥用植物、觀賞植物等很多植物中都有應(yīng)用［42-43］。在種質(zhì)資源稀少的情況下，采用嫁接育苗能更快擴(kuò)大蒜頭果的植株數(shù)量，提升蒜頭果的品質(zhì)。1998年，潘曉芳［35］用蒜頭果實(shí)生苗切接法嫁接，將露出的切口和接穗用地膜封口，得到的蒜頭果嫁接苗成活率達(dá)90%，首次證明了嫁接的可行性。卯吉華等［44］對(duì)蒜頭果嫁接時(shí)間、方法、部位、高度和包扎方式等九個(gè)因素進(jìn)行了芽苗砧嫁接實(shí)驗(yàn)，獲得的蒜頭果嫁接存活率在90%以上并確定了最佳嫁接條件（半木質(zhì)化的接穗留半葉，用嫁接膜包扎并對(duì)頂部切口封口，在芽砧5～6 cm處嫁接），使嫁接方式開展蒜頭果的培育及優(yōu)良性狀研究更具穩(wěn)定性。但嫁接繁殖方式需要有足夠數(shù)量的砧木和穗木，蒜頭果繁殖主要存在的問題是種質(zhì)資源不足，生長(zhǎng)繁殖周期長(zhǎng)，更多的無性繁殖方式有待探索。

3.3 扦插育苗

扦插也是較傳統(tǒng)的一種無性繁殖技術(shù)，具有成本低、操作簡(jiǎn)單、易產(chǎn)業(yè)化和易推廣的特點(diǎn)，被廣泛運(yùn)用于各類植物的生產(chǎn)實(shí)踐中［45］。扦插可以在一棵植株上找到若干枝條，保證植株在短時(shí)間內(nèi)獲得大量繁殖體。在蒜頭果培育中，耿云芬等在蒜頭果扦插繁殖專利中對(duì)蒜頭果插穗類型、基質(zhì)篩選、培養(yǎng)光照、溫度、水分等做了測(cè)試，雖其生根率和成活率較低，但扦插苗的獲得突破了蒜頭果扦插繁殖的技術(shù)難題，突破了蒜頭果無性繁殖的又一瓶頸［46］。2002年，吳彥瓊的碩士論文中也提及了蒜頭果的扦插技術(shù)，指出可使用上一年生已木質(zhì)化枝條或者當(dāng)年生半木質(zhì)化枝條適當(dāng)裁剪后用不同激素處理輔助苗床管理可促使愈傷組織形成，但不定根分化受限，對(duì)蒜頭果根原基發(fā)育技術(shù)有待進(jìn)一步研究［47-48］。目前關(guān)于蒜頭果扦插的報(bào)道極少，扦插的可行性及提升扦插成活率的技術(shù)研究還需要不斷突破。此外，除了傳統(tǒng)的無性繁殖（嫁接、扦插等）方式，很多新興的無性繁殖手段也在蒜頭果中開展。

3.4 蒜頭果單細(xì)胞懸浮培養(yǎng)研究進(jìn)展

2004年，賴家業(yè)等［49］采用蒜頭果新鮮種子胚乳在不同濃度激素的培養(yǎng)基上成功誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，同時(shí)發(fā)現(xiàn)6-芐氨基嘌呤（6-BA）與二氯苯氧乙酸（2，4-D）比值降低有利于蒜頭果懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)，得出MS+0.2 mg/L 6-BA+2.5 mg/L 2，4-D+3%蔗糖的最佳誘導(dǎo)蒜頭果愈傷組織形成的培養(yǎng)基。2005年，蘭?。?0］設(shè)計(jì)了不同轉(zhuǎn)速及培養(yǎng)基的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)100 r/min轉(zhuǎn)速最適合蒜頭果細(xì)胞懸浮培養(yǎng)，同時(shí)指出蒜頭果懸浮培養(yǎng)中懸浮物的生長(zhǎng)量和懸浮液的pH值呈負(fù)相關(guān)，提高了懸浮細(xì)胞培養(yǎng)成功率。2007年，蘇樹權(quán)［51］綜合考慮pH值、蔗糖、轉(zhuǎn)速、接種量等因素得出蒜頭果愈傷組織懸浮培養(yǎng)的最佳條件：MS基本培養(yǎng)基，加入40g/L蔗糖，pH值6.0，按照6 g/200 mL的接種量接種，搖床轉(zhuǎn)速110 r/min。同年，尹承穎［52］提出在28℃溫度條件下進(jìn)行愈傷組織懸浮培養(yǎng)可以進(jìn)一步提高懸浮細(xì)胞培養(yǎng)成功率。隨著細(xì)胞懸浮培養(yǎng)研究的開展，蒜頭果的組培技術(shù)正在逐步完善，但懸浮細(xì)胞誘導(dǎo)分化成植株的研究尚無突破，這一問題限制了懸浮細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用，利用其他無性繁殖方式培養(yǎng)蒜頭果的研究逐漸增多。

3.5 蒜頭果組織培養(yǎng)技術(shù)研究

蘭?。?0］通過蒜頭果離體胚和帶胚乳的胚為無菌誘導(dǎo)材料進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)帶適量胚乳的胚有助于無菌苗正常生長(zhǎng)，同時(shí)成功獲得了蒜頭果無菌苗，證明了蒜頭果組織培養(yǎng)的可行性。后期研究者對(duì)組織培養(yǎng)基及體系進(jìn)行了不斷的優(yōu)化，賴家業(yè)［53］研究發(fā)現(xiàn)高濃度的2，4-D與低濃度的6-BA在胚乳愈傷組織誘導(dǎo)時(shí)具有協(xié)同作用，同時(shí)提出蒜頭果無菌芽苗繼代增殖最佳培養(yǎng)基組合為：MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。尹承穎［52］利用種胚開展蒜頭果無菌苗誘導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)以種胚為原材料時(shí)IBA、6-BA、KT對(duì)蒜頭果無菌苗出苗率無顯著影響，獲得蒜頭果種胚無菌苗最佳組合培養(yǎng)基MS+0.2 mg/L NAA；同時(shí)發(fā)現(xiàn)蒜頭果種胚無菌苗各部位（無頂芽莖段、帶子葉腋芽莖段及下胚軸）都能直接誘導(dǎo)出芽；對(duì)誘導(dǎo)獲得的無菌苗進(jìn)行移栽實(shí)驗(yàn)確定移栽基質(zhì)為河沙時(shí)存活率可達(dá)到80%，進(jìn)一步驗(yàn)證了利用組織培養(yǎng)方式獲得無菌苗的可行性。

對(duì)于蒜頭果的無菌苗培養(yǎng)，蘇樹權(quán)［51］進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，蒜頭果種胚無菌苗愈傷組織，繼代分化2～3代后生長(zhǎng)停滯死亡，說明蒜頭果組織培養(yǎng)體系尚不穩(wěn)定。而褐化是植物無性繁殖的主要限制之一［54］，解決蒜頭果外植體褐化問題，有助于蒜頭果無性繁殖的穩(wěn)定開展。2018年，陶俊鋒等［55］以不同消毒方式、外植體、抗氧化劑和培養(yǎng)基設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)確定外植體的類型是影響蒜頭果褐化的主要因素，采用當(dāng)年生半木質(zhì)化外植體可以極大的減少褐化情況出現(xiàn)。2021年，王瓊等［56］也做了相似的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)使用氯化汞和次氯酸鈉混合液消毒，采用含PVP的1/2 WPM培養(yǎng)基培養(yǎng)，可以將蒜頭果的褐化率控制到最低。褐化問題的解決將進(jìn)一步增加蒜頭果組織培養(yǎng)獲得無菌苗的成功率及穩(wěn)定性。

4 蒜頭果的人工栽培與保護(hù)

4.1 蒜頭果的人工栽培

蒜頭果在實(shí)驗(yàn)階段種子萌芽率高、培育存活率高，利用無性繁殖方式也能獲得較高成活率的無菌材料，但是在移栽及實(shí)地栽培中蒜頭果存活率較低。早在1981年，劉釗權(quán)［2］對(duì)野生蒜頭果的生境、生長(zhǎng)習(xí)性、栽培技術(shù)等做了調(diào)查，認(rèn)為蒜頭果幼苗具有喜陰特性，造林應(yīng)選擇陰濕灌叢的石灰?guī)r山地或砂巖、頁(yè)巖發(fā)育起來的山地黃壤，采用直播和植樹方法進(jìn)行，指出了蒜頭果人工栽培中的注意事項(xiàng)。之后，劉釗權(quán)［57］在廣南縣進(jìn)行了栽培測(cè)試，獲得了成功成活植株，雖成活率較低，但證明了蒜頭果石山栽培的可行性。肖來云等［58］多次將蒜頭果引種到氣候相似的地區(qū)，尚未獲得成功，一方面可能是未考慮蒜頭果的生境依賴特性，另一方面蒜頭果本身成活率也值得探究。2001年，陳強(qiáng)等［59］在云南中南巖溶山區(qū)用種子繁育營(yíng)養(yǎng)袋育苗栽培，但因霜凍問題未獲得成活植株。呂仕洪等［60］在廣西田林巖溶山區(qū)用沙藏催芽后的蒜頭果栽培，發(fā)芽率為35%左右，袋裝苗定植兩年后的幼苗長(zhǎng)勢(shì)良好，為蒜頭果人工栽培提供了參考。2016年，呂仕洪［61］等在廣西西南巖溶山區(qū)的裸地、草叢、灌叢、疏林四種林地類型上進(jìn)行蒜頭果直播培育，發(fā)芽率為35%～53%，定植一年后幼苗存活率在80%以上，兩年存活率在50%以上，其中以灌叢和疏林最高裸地存活率最低。蒜頭果栽培存活率低，且隨生長(zhǎng)年限存活率降低，可能與以上研究未考慮蒜頭果的根半寄生特性有關(guān)，可在后期研究中考慮進(jìn)行共生植物的栽種。就目前報(bào)道來看，蒜頭果的引種還存在一定的難度，其成功率有待提高，除蒜頭果本身幼苗成活率外，生境依賴性及其半寄生特性都應(yīng)加入蒜頭果人工栽培的考慮因素當(dāng)中。

4.2 蒜頭果種質(zhì)資源的保護(hù)

蒜頭果是高度優(yōu)先保護(hù)的極小種群物種，現(xiàn)存野生植株稀少，被列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物［62］。目前研究報(bào)道中導(dǎo)致蒜頭果瀕危的主要原因總結(jié)如下：（1）蒜頭果的半寄生特性：蒜頭果種仁中的養(yǎng)分能滿足幼苗生長(zhǎng)期的需要，隨著樹齡增長(zhǎng)自身提供養(yǎng)分不能滿足生長(zhǎng)需要，需要通過根部吸器從周邊植物汲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以滿足自身生長(zhǎng)需要，但由于對(duì)造林地植被的清理及與其他植株的競(jìng)爭(zhēng)，部分蒜頭果無法獲取足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而逐漸凋零；（2）花粉活性低且缺乏專性的傳粉者［16］：蒜頭果花粉活性低，導(dǎo)致了其較低的得果率，專性傳粉者的缺乏致使傳粉不成功，導(dǎo)致大量落花落果；（3）近親繁殖：野生蒜頭果植株多以單株或幾株孤懸野外，近親繁殖導(dǎo)致其后代的衰退［63］，自交產(chǎn)生大量的純合體后代，使植株在到達(dá)生殖年齡前死亡，出現(xiàn)近交衰退現(xiàn)象［64］；（4）野生蒜頭果幼苗成活率低：由于蒜頭果幼苗喜陰濕環(huán)境，長(zhǎng)大后亦喜陰，這一特性使其在滇東南和桂西北巖溶地區(qū)的幼苗易因暴曬死亡；（5）發(fā)芽率低：蒜頭果種皮中有抑制種子萌芽和苗木生長(zhǎng)的化學(xué)物質(zhì)，導(dǎo)致幼苗發(fā)芽率極低，子葉柄和子葉片無法斷離導(dǎo)致的幼苗的死亡，自然生長(zhǎng)及更新困難，是蒜頭果種質(zhì)資源匱乏的主要原因之一［6］?；谒忸^果的現(xiàn)狀，該文章總結(jié)提升蒜頭果成活率及保護(hù)的應(yīng)對(duì)策略：（1）引入蒜頭果寄生偏好性植物，保證其正常養(yǎng)分需求；（2）開展蒜頭果花粉長(zhǎng)期離體保存，為雜交育種做好前期準(zhǔn)備；（3）開展蒜頭果雜交育種研究，目前僅賴家業(yè)等［16］在巴馬縣對(duì)蒜頭果進(jìn)行過雜交育種實(shí)驗(yàn)，已證實(shí)蒜頭果具有自交親和性，并確定了其雜交可育的傳粉模式，可利用雜交進(jìn)行蒜頭果育種嘗試；（4）利用已報(bào)道的無性繁殖成功的方法開展蒜頭果無性繁殖實(shí)驗(yàn)，把理論試驗(yàn)階段延伸到推廣應(yīng)用階段。

5 展望

神經(jīng)酸在藥品和保健領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用空間，可用于治療和預(yù)防神經(jīng)疾病和類似病癥，如腎上腺腦白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良、腦肝腎綜合征、老年癡呆癥等［65-67］；然而從海洋動(dòng)物中獲取的神經(jīng)酸有限，已經(jīng)不能滿足市場(chǎng)需要；同時(shí)倫理道德及法律層面動(dòng)物提取神經(jīng)酸的方式已被禁止。神經(jīng)酸急需尋求植物類的可持續(xù)來源。高神經(jīng)酸蒜頭果為神經(jīng)酸提供了可觀的植物源來源。隨著蒜頭果價(jià)值的發(fā)現(xiàn)，越來越多的人開始投入到這個(gè)被長(zhǎng)期被忽視的高價(jià)值樹種的研究當(dāng)中。與此同時(shí)，各地方政府也發(fā)現(xiàn)蒜頭果的創(chuàng)收效果；投資者們也利用這個(gè)高神經(jīng)酸含量的種子開發(fā)了一系列保健品，如：神經(jīng)酸凝膠糖果、神經(jīng)酸壓力糖果等均已獲批上市。開展政府引導(dǎo)，民間自發(fā)保護(hù)，科研機(jī)構(gòu)研究及企業(yè)產(chǎn)品開發(fā)等完整保護(hù)鏈及產(chǎn)業(yè)鏈可以促進(jìn)蒜頭果的種、產(chǎn)、研、用的一體化發(fā)展。這一產(chǎn)業(yè)鏈的形成，不僅可以解決蒜頭果瀕危問題還能實(shí)現(xiàn)鄉(xiāng)村振興及促進(jìn)地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展。蒜頭果的價(jià)值開發(fā)已經(jīng)使其完成從食用油到保健藥品及醫(yī)藥產(chǎn)品的轉(zhuǎn)變，但目前供給不足、收益周期長(zhǎng)等瓶頸仍需要不斷突破。

結(jié)合現(xiàn)有研究進(jìn)展，目前蒜頭果分布地域有限，人工栽培困難等問題，可以結(jié)合其半寄生特性及生境依賴性特點(diǎn)改善其栽培模式及栽培環(huán)境，提升蒜頭果栽培存活率。蒜頭果8年左右的開花結(jié)實(shí)期限制了其大規(guī)模利用，開展蒜頭果無性繁殖及快繁技術(shù)研究，可以保證蒜頭果苗木的供給，對(duì)進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)蒜頭果產(chǎn)業(yè)化、規(guī)?；N植，縮短開花結(jié)實(shí)期，提高經(jīng)濟(jì)效益有極大裨益。解決蒜頭果繁殖、栽培的問題后，未來蒜頭果種植可以向矮化育種等方向發(fā)展，便于密植、采收的同時(shí)進(jìn)一步提升土地資源利用率及蒜頭果產(chǎn)量?；蚪M與遺傳多樣性的研究對(duì)于我們了解蒜頭果并開展遺傳改良等奠定了基礎(chǔ)，結(jié)合基因組及神經(jīng)酸合成路徑進(jìn)行育種是培育優(yōu)良種質(zhì)的可行方式，同時(shí)也可以在今后蒜頭果遺傳改良甚至神經(jīng)酸植物工廠研究中得以應(yīng)用。對(duì)與蒜頭果的研究還有很多未知之處，蒜頭果的價(jià)值也還需要更多的探索，比如在蒜頭果中發(fā)現(xiàn)具有非常大毒性的植物蛋白Malanin有何作用等仍有待更多更深入的研究。

總之，蒜頭果具有藥用價(jià)值，同時(shí)也是良好的山地綠化植物，將蒜頭果應(yīng)用于植樹造林、美化環(huán)境，符合“綠水青山，就是金山銀山”理念，在獲得其經(jīng)濟(jì)價(jià)值的同時(shí)也為我們的子孫后代留下一片綠蔭。