高繼偉，卜 歆，黃啟科，趙華棟

(1空軍軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院普通外科，陜西 西安 710038；2空軍軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室，陜西 西安 710032；3解放軍第31681部隊(duì)保障部，甘肅 天水 741022)

循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cell，CTC)是指由腫瘤灶脫落進(jìn)入血液循環(huán)的腫瘤細(xì)胞，被認(rèn)為是腫瘤血道轉(zhuǎn)移的根源。目前，CTC數(shù)目主要應(yīng)用于預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)移性腫瘤患者預(yù)后，且已被部分指南推薦?；颊唧w內(nèi)CTC數(shù)目可通過(guò)抽取外周血進(jìn)行檢測(cè)獲得，但應(yīng)用此方法有兩個(gè)默認(rèn)前提，即CTC數(shù)目在短時(shí)間內(nèi)不變且在外周血中充分混勻。然而，近年來(lái)有研究[1-6]發(fā)現(xiàn)CTC存在短期動(dòng)態(tài)，既往絕大多數(shù)CTC研究在設(shè)計(jì)上并未考慮這一因素，抽血時(shí)間點(diǎn)較為寬泛，研究結(jié)果可能出現(xiàn)偏差?；诖?，針對(duì)CTC短期動(dòng)態(tài)的研究十分必要，本文主要從CTC基本特性、CTC短期動(dòng)態(tài)模式以及CTC短期動(dòng)態(tài)的相關(guān)問(wèn)題三方面展開論述。

1 CTC基本特性

1.1 CTC的半衰期

CTC在體內(nèi)的半衰期是CTC動(dòng)態(tài)研究的基礎(chǔ)問(wèn)題，對(duì)這一問(wèn)題的討論有助于了解CTC在體內(nèi)的穩(wěn)定時(shí)間。MENG等[7]于2004年發(fā)表了關(guān)于乳腺癌患者體內(nèi)CTC半衰期的臨床研究，通過(guò)流式細(xì)胞儀，在術(shù)前、術(shù)后即刻、手術(shù)一段時(shí)間后分別對(duì)5名無(wú)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者進(jìn)行CTC檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)通過(guò)采用兩種不同模型計(jì)算得出的患者CTC半衰期分別為1 h和2.4 h。由于臨床研究受倫理制約，難以短時(shí)間從患者體內(nèi)多次抽血進(jìn)行研究，故此類研究多在動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行。FITZGERALD等[8]利用活體漫反射流式細(xì)胞儀(diffuseinvivoflow cytometry，DiFC)研究了外源性Lewis肺癌細(xì)胞在小鼠血液循環(huán)中存在時(shí)間，發(fā)現(xiàn)其CTC半衰期約為1 h。由于在小鼠體內(nèi)循環(huán)的腫瘤細(xì)胞是外源性的，故這種實(shí)驗(yàn)方法得出的結(jié)果可能有別于真實(shí)情況。同年，該團(tuán)隊(duì)在另一篇相關(guān)研究中對(duì)CTC的半衰期進(jìn)行了總結(jié)：在臨床研究方面，患者CTC半衰期為6 min～2.4 h；在動(dòng)物研究中，根據(jù)不同腫瘤類型和小鼠品系，CTC半衰期為10～60 min[1]。因此，不論是臨床患者還是小鼠，CTC半衰期范圍從數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)不等，這可能受研究對(duì)象體內(nèi)物理和生理兩方面因素影響。在物理方面，CTC可能在循環(huán)過(guò)程中受阻于體內(nèi)微小血管，有人稱其為“首過(guò)效應(yīng)”[9]；在生理方面，免疫等因素可能導(dǎo)致CTC凋亡。

1.2 CTC的分布

通過(guò)外周血進(jìn)行CTC檢測(cè)的另一默認(rèn)前提是：CTC在血液系統(tǒng)中充分混勻，即抽取的血液可以代表整個(gè)血液循環(huán)。然而，“首過(guò)效應(yīng)”可能導(dǎo)致CTC在體內(nèi)分布不均勻。針對(duì)此問(wèn)題，JIAO等[10]在2009年發(fā)表的臨床研究主要對(duì)比CTC在體循環(huán)和門體循環(huán)中的分布差異。該研究納入11名進(jìn)行開放直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶切除術(shù)的患者，在移除腫瘤前收集其血液樣本，采集位點(diǎn)為外周靜脈、外周動(dòng)脈、門靜脈、肝右靜脈，并通過(guò)CellSearch系統(tǒng)檢測(cè)CTC數(shù)目，CTC中位數(shù)范圍依次為：1(0～3)，1(0～6)，87(0～500)，187(0～500)。由此可知，患者體循環(huán)中CTC數(shù)目顯著少于門體循環(huán)。門靜脈和肝靜脈中的CTC在進(jìn)入外周動(dòng)、靜脈之前，多數(shù)CTC可能被阻滯于肝和肺中。2014年，F(xiàn)ANG等[11]發(fā)表的臨床研究主要對(duì)比CTC在外周靜脈與右心房?jī)?nèi)的分布差異。該研究納入了42名肝細(xì)胞肝癌患者，在手術(shù)前3 min，分別從患者右心房和患者右肘正中靜脈取血7.5 mL進(jìn)行CTC檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)右心房的CTC陽(yáng)性率和數(shù)目均高于外周靜脈。TERAI等[12]于2015年發(fā)表的研究對(duì)比了CTC在患者外周靜脈和外周動(dòng)脈間的分布差異。該研究納入了17名轉(zhuǎn)移性葡萄膜黑色素瘤患者，從肘前靜脈和股動(dòng)脈采血并用CellSearch檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)CTC在外周動(dòng)脈中的檢出率和數(shù)目顯著高于外周靜脈。

綜合上述研究，CTC在體內(nèi)分布不均勻。CTC在通過(guò)微小循環(huán)后數(shù)目會(huì)大幅減少，符合血液在血管中的流動(dòng)規(guī)律。除物理阻滯之外，CTC還可能通過(guò)血管內(nèi)皮與其表面配體結(jié)合導(dǎo)致CTC的停留[13]。目前絕大多數(shù)檢測(cè)方法從患者外周靜脈取血，但其CTC數(shù)目較少。故臨床醫(yī)生在應(yīng)用CTC檢測(cè)時(shí)需要權(quán)衡患者創(chuàng)傷和CTC檢出率。不同腫瘤類型根據(jù)其臨床特點(diǎn)，最適宜的取血位置和檢測(cè)方法可能不同。

2 CTC短期動(dòng)態(tài)模式

根據(jù)上文對(duì)CTC半衰期和分布的論述，我們發(fā)現(xiàn)通過(guò)外周血進(jìn)行CTC檢測(cè)的兩個(gè)默認(rèn)前提均不準(zhǔn)確，推測(cè)CTC在體內(nèi)很可能不穩(wěn)定。接下來(lái)我們總結(jié)了CTC短期動(dòng)態(tài)的相關(guān)研究。目前還沒有對(duì)CTC短期動(dòng)態(tài)的定義，為方便下文敘述，本文將24 h內(nèi)的CTC動(dòng)態(tài)稱為“日”間動(dòng)態(tài)，將數(shù)小時(shí)內(nèi)的CTC動(dòng)態(tài)稱為“時(shí)”間動(dòng)態(tài)?！叭铡遍g動(dòng)態(tài)和“時(shí)”間動(dòng)態(tài)統(tǒng)稱為短期動(dòng)態(tài)。

2.1 CTC的“日”間動(dòng)態(tài)

主要討論CTC在1 d內(nèi)的動(dòng)態(tài)情況，但對(duì)其是否存在節(jié)律還沒有一致結(jié)論。

2.1.1 CTC的“日”間動(dòng)態(tài)無(wú)節(jié)律 2006年GARCA-SENZ等[2]對(duì)CTC的晝夜節(jié)律進(jìn)行了臨床研究。該研究納入了23名多處轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者，在同一日08∶00和20∶00抽血檢測(cè)患者CTC數(shù)目。CTC檢測(cè)采用CellSearch系統(tǒng)，規(guī)定“CTC數(shù)目相差<5個(gè)或<30%”為無(wú)差異。結(jié)果顯示：23名患者中，8人早晚檢測(cè)結(jié)果有差異，13人無(wú)差異，2人檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。由此得出結(jié)論：未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者體內(nèi)CTC晝夜節(jié)律。該研究存在明顯缺陷：①檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)過(guò)少且無(wú)重復(fù)，無(wú)法得出與晝夜節(jié)律相關(guān)的結(jié)論；②對(duì)CTC差異的規(guī)定沒有依據(jù)。故該研究結(jié)果的可信性較低，但其是首篇對(duì)CTC日間規(guī)律進(jìn)行的前瞻性臨床研究，具有開創(chuàng)性。2009年，該研究組繼續(xù)之前的研究并將樣本量增至51例，同樣未發(fā)現(xiàn)CTC的晝夜節(jié)律。他們認(rèn)為同一日早晚CTC檢測(cè)不會(huì)對(duì)結(jié)果帶來(lái)影響[3]。

WILLIAMS等[1]于2020年發(fā)表了小鼠體內(nèi)CTC日間變化情況的研究，利用DiFC系統(tǒng)對(duì)14只負(fù)荷多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的重癥聯(lián)合免疫缺陷小鼠進(jìn)行血管內(nèi)CTC檢測(cè)，在24 h內(nèi)每間隔6 h檢測(cè)1次，單次檢測(cè)持續(xù)50 min。該研究未觀察到任何特定的晝夜節(jié)律模式，CTC數(shù)目似乎在1 d中不同的時(shí)間隨機(jī)升高或降低。

2.1.2 CTC的“日”間動(dòng)態(tài)有節(jié)律 PAIVA等[4]在2013年發(fā)表的臨床研究通過(guò)檢測(cè)6名多發(fā)性骨髓瘤患者體內(nèi)CTC情況來(lái)判斷是否存在節(jié)律。所有檢測(cè)從16∶00開始，每隔4 h檢測(cè)1次，直至第2日12∶00。他們?cè)?名患者中觀察到了CTC的晝夜變化，并推測(cè)對(duì)于多發(fā)性骨髓瘤患者，CTC可能會(huì)在患者休息期間進(jìn)入外周血以轉(zhuǎn)移到骨髓中的其他位置。然而該研究存在缺陷：①樣本量少；②該研究在CTC隨時(shí)間變化圖中通過(guò)重復(fù)首日16∶00的CTC數(shù)據(jù)來(lái)輔助讀者觀察節(jié)律，而沒有實(shí)際檢測(cè)，這很可能存在誤導(dǎo)。但該研究也有一定價(jià)值：文中圖示可以明確看出患者體內(nèi)CTC數(shù)目在1 d中有很大波動(dòng)。

2021年3月，ZHU等[5]發(fā)表了前列腺癌荷瘤小鼠體內(nèi)CTC晝夜節(jié)律的研究。他們將BALB/c裸鼠分為4組：12/12 LD(正常周期：12 h明+12 h暗)、12/12 DL(反向周期：12 h暗+12 h明)、DD(持續(xù)黑暗，24 h暗)、16/8 LD(16 h明+8 h暗)。從首日08∶00到次日凌晨04∶00，每隔4 h用活體熒光流式細(xì)胞儀對(duì)小鼠耳部靜脈進(jìn)行30 min的體內(nèi)CTC檢測(cè)。結(jié)果如下：①12/12 LD組和DD組有相同的CTC動(dòng)態(tài)周期，這說(shuō)明小鼠CTC動(dòng)態(tài)是內(nèi)源性的。②12/12 DL組與12/12 LD組出現(xiàn)了完全相反的CTC動(dòng)態(tài)周期；16/8 LD組與12/12 LD組相比，CTC動(dòng)態(tài)周期恰好存在約4 h的移位。這一研究不僅發(fā)現(xiàn)了小鼠CTC的晝夜節(jié)律，還證明了光照是其關(guān)鍵影響因素。筆者從兩方面對(duì)此進(jìn)行解釋：①物理方面，當(dāng)小鼠在夜晚活動(dòng)增強(qiáng)，可能會(huì)對(duì)腫瘤有更多的擠壓，導(dǎo)致CTC數(shù)目上升。②生理方面，小鼠體內(nèi)免疫隨晝夜節(jié)律變化。小鼠休息時(shí)，體內(nèi)自然殺傷細(xì)胞數(shù)目上升，可能導(dǎo)致CTC數(shù)目下降。

該研究結(jié)果與WILLIAMS等[1]的研究結(jié)果不一致。之后，兩研究團(tuán)隊(duì)以刊發(fā)評(píng)論的方式對(duì)研究結(jié)果的差異進(jìn)行了討論。WILLIAMS等[14]提出：兩個(gè)研究團(tuán)隊(duì)在實(shí)驗(yàn)方法上近似，但其團(tuán)隊(duì)未發(fā)現(xiàn)任何CTC節(jié)律。對(duì)此ZHU等[15]表示研究結(jié)果差異可能由兩方面原因造成：①腫瘤類型不同。WILLIAMS等研究多發(fā)性骨髓瘤，是血液系統(tǒng)腫瘤，而ZHU等研究前列腺癌腫瘤，是實(shí)體瘤，這兩種腫瘤類型在腫瘤微環(huán)境方面有很多差異；②小鼠類型不同。WILLIAMS等使用的是聯(lián)合免疫缺陷小鼠，ZHU等使用的是T細(xì)胞免疫缺陷小鼠。眾所周知，骨髓中免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子表現(xiàn)出顯著的晝夜節(jié)律。推測(cè)WILLIAMS等使用的小鼠可能缺失了這種免疫相關(guān)的晝夜節(jié)律。若此推測(cè)成立，免疫功能在CTC動(dòng)態(tài)中的地位將十分重要。

綜上所述，不論是臨床試驗(yàn)還是動(dòng)物研究，均發(fā)現(xiàn)CTC的確存在“日”間動(dòng)態(tài)，但是否存在節(jié)律仍無(wú)定論。目前，在動(dòng)物研究層面，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和實(shí)施比較完善，但也有難以克服的缺陷：①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫都存在不同程度的缺陷；②研究的腫瘤類型各異。而臨床試驗(yàn)的共同缺陷是：①患者樣本量過(guò)少；②腫瘤類型不一致；③日間抽血次數(shù)不能滿足研究需求。目前還未發(fā)現(xiàn)研究設(shè)計(jì)完善的臨床試驗(yàn)，故無(wú)法在臨床層面得出患者CTC是否存在節(jié)律性變化的結(jié)論。

2.2 CTC的“時(shí)”間動(dòng)態(tài)

為了研究CTC更短時(shí)間段內(nèi)的動(dòng)態(tài)情況，我們將CTC研究的時(shí)間段從“日”細(xì)化到“時(shí)”。針對(duì)這一問(wèn)題的研究多采用活體CTC持續(xù)檢測(cè)的方法，這種方法在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中較為成熟，但目前可用于臨床的CTC活體檢測(cè)方法極少。

JURATLI等[6]在2014年的研究納入了7例 Ⅳ 期黑色素瘤患者，用同1只注射器連續(xù)采血9 mL，并等分成3份3 mL血液樣本，使用磁性細(xì)胞分選進(jìn)行CTC檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)每份樣本檢測(cè)出的CTC數(shù)目均不同，有的患者甚至只在3份樣本中的1份樣本中檢測(cè)到CTC。按照人體血容量(5 L)換算，晚期黑色素瘤患者體內(nèi)最多0.12%血容量(peripheral blood volume，PBV)的外周血中無(wú)CTC的存在。該團(tuán)隊(duì)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)了荷瘤小鼠血液中存在無(wú)法檢測(cè)到CTC的時(shí)間段[6]。研究人員通過(guò)熒光流式細(xì)胞儀連續(xù)檢測(cè)乳腺癌荷瘤裸鼠耳部血管內(nèi)CTC情況。在小鼠荷瘤2周時(shí)，血液中CTC數(shù)目較少。在連續(xù)150 min的檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)無(wú)CTC的最長(zhǎng)時(shí)間為25 min。根據(jù)換算，約為0.45% PBV。在小鼠荷瘤5周時(shí)，血液中CTC數(shù)目是荷瘤2周時(shí)的近20倍。此時(shí)在連續(xù)檢測(cè)中仍能發(fā)現(xiàn)約0.09% PBV中無(wú)法檢測(cè)到CTC。WILLIAMS等[1]在2020年發(fā)表的文章也對(duì)此問(wèn)題進(jìn)行了研究。該團(tuán)隊(duì)使用DiFC技術(shù)對(duì)多發(fā)性骨髓瘤小鼠模型血管進(jìn)行35 min的連續(xù)檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與35 min檢測(cè)的平均值相比，檢測(cè)時(shí)間越短，CTC的準(zhǔn)確性越低。

綜上所述，我們?cè)俅卧谂R床研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中得出了相同的結(jié)論：在數(shù)分鐘或數(shù)小時(shí)的時(shí)間段內(nèi)，CTC仍會(huì)出現(xiàn)動(dòng)態(tài)波動(dòng)，這種動(dòng)態(tài)存在于腫瘤各階段。筆者認(rèn)為，研究CTC動(dòng)態(tài)的時(shí)間范圍越短，CTC動(dòng)態(tài)越可以運(yùn)用流體物理學(xué)(血管直徑、血流速度等)解釋；所研究的時(shí)間范圍越長(zhǎng)，生物生理學(xué)因素(腫瘤生物學(xué)行為、機(jī)體免疫清除功能等)的影響越大，這兩方面因素共同對(duì)CTC短期動(dòng)態(tài)變化作出解釋。

3 CTC短期動(dòng)態(tài)相關(guān)問(wèn)題

3.1 CTC短期動(dòng)態(tài)與長(zhǎng)期變化的關(guān)系

通過(guò)前文的論述，我們基本可以確定不論是動(dòng)物還是臨床患者，體內(nèi)均存在CTC短期動(dòng)態(tài)。其是否會(huì)影響CTC檢測(cè)在預(yù)后預(yù)測(cè)中的效力是我們需要考慮的問(wèn)題。

腫瘤的生長(zhǎng)是一個(gè)較為長(zhǎng)期的過(guò)程，即使在荷瘤小鼠體內(nèi)，腫瘤進(jìn)展也不適宜以“日”為單位記錄。有研究發(fā)現(xiàn)，小鼠體內(nèi)CTC數(shù)目與腫瘤體積和腫瘤灶中血管密度呈正相關(guān)[16]。因此，即使CTC存在短期動(dòng)態(tài)，這種動(dòng)態(tài)仍受限于腫瘤灶。此外，CTC的短期動(dòng)態(tài)可能與物理壓迫和生理節(jié)律有關(guān)，均為短期因素；而腫瘤生長(zhǎng)是腫瘤與機(jī)體緩慢形成新平衡的過(guò)程，它們的影響因素也不一致。綜上所述，雖然CTC在體內(nèi)存在短期動(dòng)態(tài)，但這種動(dòng)態(tài)仍受限于腫瘤灶實(shí)體。CTC的短期動(dòng)態(tài)不會(huì)從根本上影響疾病進(jìn)展過(guò)程中的CTC數(shù)目趨勢(shì)。在以往的研究中，CTC短期動(dòng)態(tài)可能在大樣本研究中被稀釋。針對(duì)CTC短期動(dòng)態(tài)的研究是為了更準(zhǔn)確地研究CTC在人體中的情況，為CTC臨床應(yīng)用提供理論支持。

3.2 CTC單次檢測(cè)的可信性

WILLIAMS等[1]在動(dòng)物研究中發(fā)現(xiàn)：?jiǎn)未纬Ｒ?guī)樣本量CTC檢測(cè)結(jié)果不能很好地代表當(dāng)日CTC動(dòng)態(tài)的均值。ACETO[17]在2019年發(fā)表的評(píng)論中對(duì)臨床CTC陰性結(jié)果的意義進(jìn)行了探討。該評(píng)論提出，患者1次CTC檢測(cè)為陰性不能完全認(rèn)為其體內(nèi)無(wú)CTC，原因是：①CTC的釋放可能是間歇的而不是持續(xù)的；②腫瘤灶釋放的CTC因首過(guò)效應(yīng)而在外周血中缺失；③即使存在轉(zhuǎn)移，也不清楚轉(zhuǎn)移灶釋放CTC的能力。此外，JURATLI等[6]在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)：腫瘤早期CTC數(shù)目較少，且無(wú)CTC血流時(shí)間較腫瘤晚期更長(zhǎng)。綜上，我們認(rèn)為單次CTC檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性可能不夠理想。同時(shí)，臨床醫(yī)生對(duì)CTC陰性結(jié)果的解讀需格外謹(jǐn)慎。

3.3 提高CTC檢測(cè)準(zhǔn)確性的方法

由于CTC存在短期動(dòng)態(tài)，可能出現(xiàn)CTC短暫缺失和數(shù)目波動(dòng)較大的情況。故提高CTC檢測(cè)的準(zhǔn)確性十分必要，我們建議通過(guò)以下兩種方法提高CTC檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

3.3.1 增加采血量 在腫瘤早期，實(shí)際觀察到無(wú)CTC的PBV可達(dá)1.40%。在腫瘤晚期，無(wú)CTC的PBV也達(dá)到0.09%[6]。CellSearch檢測(cè)系統(tǒng)需要的7.5 mL外周血僅占0.15% PBV，現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)所需的采血量更少。由此可以推測(cè)采血量不足可能是導(dǎo)致CTC檢測(cè)不準(zhǔn)確的重要原因。

LALMAHOMED等[18]在2010年提出的“The more，the better”理論，目前仍有借鑒意義。他們對(duì)比了同批患者7.5 mL和30.0 mL血液樣本檢測(cè)到的CTC數(shù)目，提出了較為激進(jìn)的建議：對(duì)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者抽取30.0 mL外周血可能會(huì)為其帶來(lái)更多潛在受益。

當(dāng)前，根據(jù)指南在臨床上應(yīng)用CTC檢測(cè)，獲益的患者群體很局限。研究者在早期腫瘤患者中也發(fā)現(xiàn)了CTC的預(yù)后預(yù)測(cè)能力[19-22]，但這又會(huì)面臨CTC數(shù)目較少的情況。研究人員可結(jié)合患者腫瘤類型及腫瘤階段挑選有效的CTC檢測(cè)方法，在平衡抽血量對(duì)患者的損傷與患者獲益后，逐步摸索出合適的抽血量。筆者認(rèn)為，目前研究人員不應(yīng)執(zhí)著于降低患者抽血量而犧牲CTC檢測(cè)的準(zhǔn)確性，這一做法反而可能會(huì)對(duì)患者預(yù)后不利。

3.3.2 間隔多次采樣 增大單次采血量可以減少CTC短暫缺失帶來(lái)的偏差，但無(wú)法改善CTC“日”間動(dòng)態(tài)帶來(lái)的偏差，是否存在其他可行的方式是接下來(lái)討論的重點(diǎn)。

WILLIAMS等[1]在2020年發(fā)表的研究對(duì)比了單次不同PBV和間隔多次采樣對(duì)CTC檢測(cè)結(jié)果的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在24 h內(nèi)，多個(gè)小樣本的平均值比單個(gè)大樣本CTC檢測(cè)準(zhǔn)確性更高。ZHU等[5]在2021年發(fā)表的文章與上文的研究方法類似，只是PBV的選擇方式不同，但同樣發(fā)現(xiàn)通過(guò)更多的血液樣本和多次取樣均可以提高CTC檢測(cè)的準(zhǔn)確性。以上兩個(gè)研究為臨床研究提供了“間隔多次取樣”以提升CTC檢測(cè)準(zhǔn)確性的策略。但以上研究均為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，能否直接應(yīng)用于臨床還需要驗(yàn)證。

4 結(jié)語(yǔ)

盡管CTC的臨床應(yīng)用還處于早期階段，但其對(duì)于腫瘤預(yù)后預(yù)測(cè)和輔助治療的價(jià)值不可否認(rèn)。CTC檢測(cè)若能廣泛應(yīng)用于腫瘤患者，會(huì)為腫瘤治療帶來(lái)新的突破。例如，腫瘤術(shù)后患者CTC監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)異常，可以在轉(zhuǎn)移灶不可見時(shí)通過(guò)新型輔助治療策略進(jìn)行干預(yù)，提高患者生存期?；蛘?，用CTC結(jié)果替代現(xiàn)有的臨床觀察終點(diǎn)，縮短較長(zhǎng)的隨訪時(shí)間、減少臨床試驗(yàn)的巨大成本[23]。

另外，通過(guò)外周血的CTC檢測(cè)技術(shù)在檢出率等方面已接近上限，很難再有突破。結(jié)合患者CTC的短期動(dòng)態(tài)，可應(yīng)用于臨床的活體CTC檢測(cè)技術(shù)可能是一個(gè)有前景的領(lǐng)域。針對(duì)動(dòng)物研究已有很成熟的CTC活體檢測(cè)方法，原理多是在體外透過(guò)血管檢測(cè)帶有熒光標(biāo)記的外源性腫瘤細(xì)胞，但這一原理不適用于臨床。目前已有針對(duì)黑色素瘤患者的活體CTC檢測(cè)平臺(tái)Cytophone[24]，但其利用的是黑色素的物理特性，不能滿足其他類型腫瘤患者的CTC檢測(cè)需求。若能出現(xiàn)技術(shù)突破，“CTC透析”等抗CTC治療可能成為新的治療方式。CTC的短期動(dòng)態(tài)是對(duì)現(xiàn)有CTC理論的補(bǔ)充，對(duì)此問(wèn)題的研究不僅有助于規(guī)范CTC的臨床應(yīng)用，還能夠?yàn)橹笙嚓P(guān)研究提供理論依據(jù)。