李丹,陳亮,蘭世捷,苗艷,沈思思,馮萬宇,張蕾,黃寶銀,于晨龍,張鵬宇(黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院,黑龍江 齊齊哈爾 161000)
雞傳染性支氣管炎(Infectious bronchitis,IB)是一種高度接觸性的傳染病,由雞傳染性支氣管炎病毒 (IBV)引起,是養(yǎng)殖業(yè)中較為常見的一種重要禽類傳染病,發(fā)病后會(huì)嚴(yán)重影響患病雞的生長(zhǎng)發(fā)育及產(chǎn)蛋性能,給養(yǎng)殖戶帶來了巨大損失。本文從該病的流行病學(xué)特點(diǎn)、與相似疾病的鑒別性診斷以及防治措施等方面進(jìn)行了歸納總結(jié),以期為有效防治雞傳染性支氣管炎病提供更多方法及思路。
雞傳染性支氣管炎病毒屬于冠狀病毒屬成員,為單股正鏈的RNA病毒[1]。雞傳染性支氣管炎病毒粒子基因組全長(zhǎng)約為27.5~28 kb[2],主要有四種結(jié)構(gòu)蛋白,分別為表面纖突蛋白(S)、膜蛋白(M)、核衣殼蛋白(N)和小膜蛋白(E)。其中S蛋白位于病毒最外一層,是構(gòu)成冠狀病毒最表層纖突的主要成分,也是雞傳染性支氣管炎病毒主要變異部位[3]。S蛋白含有抗原決定簇,可以誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答,產(chǎn)生中和抗體,因?yàn)镾蛋白只與特定靶細(xì)胞膜上的受體發(fā)生特異性結(jié)合,所以決定了病毒具有感染定向性。M蛋白又稱膜蛋白,是跨膜蛋白,是一種基質(zhì)蛋白,可與N蛋白相互作用在病毒的出芽和裝配過程中起到重要作用,同時(shí)其還可能刺激機(jī)體產(chǎn)生α-IFN。N蛋白為核衣殼蛋白,可與基因組結(jié)合形成核衣殼,同時(shí)還可以特異性結(jié)合到mRNA上,參與病毒的轉(zhuǎn)錄、翻譯、合成。E蛋白又稱小膜蛋白,可刺激機(jī)體產(chǎn)生黏膜免疫,同時(shí)在病毒感染的細(xì)胞中可發(fā)現(xiàn)大量E蛋白的存在,但它在病毒本身中的含量并不高,所以E蛋白還可能與感染病毒細(xì)胞的凋亡有關(guān)。
雞是傳染性支氣管炎病毒主要自然宿主,任何品種、任何發(fā)育階段的雞均可感染該病毒而引起發(fā)病,但雛雞相對(duì)于成雞更易感,病癥也更為嚴(yán)重。該病一年四季均可發(fā)生,但以冬春兩季較為常見,發(fā)病率顯著上升[4]。主要傳染源為帶毒雞,包括患病雞和隱性發(fā)病雞。該病可通過空氣中的飛沫進(jìn)行呼吸道傳播,也可通過排泄物或被其污染過的飲食、用具進(jìn)行消化道傳播。健康雞感染后,生長(zhǎng)受阻,產(chǎn)能下降,死亡率升高。
發(fā)病初期病雞主要表現(xiàn)為咳嗽、打噴嚏、甩頭。隨著病情的進(jìn)一步發(fā)展,表現(xiàn)流淚、呼吸困難、張嘴伸頸等癥狀,病雞的鼻腔內(nèi)會(huì)流出漿液。由于呼吸道中存在粘液,病雞會(huì)發(fā)出異常的呼吸音,在夜間尤為明顯。呼吸型傳染性支氣管炎對(duì)雛雞的危害性較成年雞更大,死亡率更高。成年雞在感染該類型傳染性支氣管炎時(shí)會(huì)導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降,產(chǎn)蛋量降低,產(chǎn)蛋質(zhì)量降低,軟皮蛋、畸形蛋增多。
患有該類型的傳染性支氣管炎的病雞,發(fā)病初期伴有輕微的呼吸道癥狀,同時(shí)伴有精神萎靡、食欲不振、被毛雜亂、畏寒等癥狀。隨著病情的發(fā)展,出現(xiàn)下痢癥狀,糞便因混有尿酸鹽而呈現(xiàn)白色。下痢可導(dǎo)致病雞脫水,這也是病雞致死的主要原因之一。
患病雞主要表現(xiàn)為采食量下降,精神萎靡,常處于呆立狀,糞便呈白綠色,患病雞日漸消瘦,嚴(yán)重影響雞群的生產(chǎn)性能。
病變位置主要集中于呼吸道,剖檢可見病雞咽喉、氣管、支氣管黏膜增厚、腫脹并伴有充血,呼吸道內(nèi)可見半透明的漿液或黏液,甚至膿性滲出物。隨著病程的發(fā)展,有些還會(huì)在呼吸道中形成白色的干酪樣物質(zhì)。氣囊增厚,渾濁,有時(shí)還會(huì)看到滲出的干酷樣物質(zhì);剖檢可見卵泡有充血、出血、變形等情況,輸卵管增粗或壞死,有些成熟的卵子會(huì)滑落到腹腔內(nèi)引起腹膜炎。雛雞感染本病后會(huì)造成輸卵管受損、發(fā)育不良,形成管腔狹窄,甚至閉塞,導(dǎo)致成年后失去產(chǎn)蛋能力。
外觀可見腎臟形態(tài)腫脹,顏色灰白,小葉突出,剖解腎臟時(shí)可聽到摩擦音并有不規(guī)則白色物質(zhì)滲出,輸尿管以及腎小管擴(kuò)張明顯,管內(nèi)有大量白色尿酸鹽,呈白線網(wǎng)狀,形成“花斑腎”。病情嚴(yán)重時(shí),其它臟器上也可見尿酸鹽沉積。
解剖可見病雞腺胃腫大,呈球狀,腺胃壁增厚,腺胃乳頭有充血、出血等癥狀,甚至出現(xiàn)潰瘍。
根據(jù)臨床癥狀和剖檢變化可對(duì)該病進(jìn)行初步診斷,但臨床有些疾病與其具有相似癥狀,在進(jìn)行診斷時(shí)應(yīng)注意鑒別。
雞感染傳染性支氣管炎與新城疫均表現(xiàn)呼吸困難、下痢、氣囊渾濁、腺胃乳頭出血等臨床及剖檢癥狀,但傳染性支氣管炎較新城疫的病程相對(duì)發(fā)展緩慢,病雞逐漸消瘦;新城疫多發(fā)病急,腦部有水腫及炎癥等癥狀,同時(shí)伴有神經(jīng)癥狀。
雞感染傳染性支氣管炎與傳染性鼻炎都有流淚、打噴嚏、身體消瘦、產(chǎn)蛋量下降等臨床特征,但傳染性鼻炎患病雞會(huì)有頭部腫脹、眼瞼水腫等癥狀,同時(shí)眼部還有結(jié)膜炎等癥狀。
傳染性支氣管炎與傳染性喉氣管炎呼吸道癥狀較為相似,剖檢時(shí)兩者的氣管內(nèi)也都會(huì)有黏液,患傳染性支氣管炎病雞氣管中的黏液多為透明狀,但患傳染性喉氣管炎病雞的氣管黏液中會(huì)滲有血液。從患病雞的年齡上區(qū)分,傳染性喉氣管炎主要感染成年雞,其中以育成雞最易感 ;另外,傳染性喉氣管炎患病雞在呼吸時(shí)喉部會(huì)發(fā)出特殊聲音[5]。
感染傳染性支氣管炎與傳染性法氏囊的病雞,都表現(xiàn)腹瀉、食欲減退等相似臨床癥狀,剖檢時(shí)也都可見“花斑腎”、法氏囊腫大等特征。但傳染性法氏囊感染的病雞解剖時(shí)可見法氏囊腫大更明顯,腺胃與肌胃交界處黏膜有條狀出血帶,傳染性支氣管炎患病雞解剖腺胃時(shí)多見針狀出血點(diǎn)。
5.2.1 病毒分離 可對(duì)患病雞采取拭子采樣法及組織臟器采樣法,拭子采樣分為氣管拭子和泄殖腔拭子,組織臟器可采取肺臟、腎臟或輸卵管等典型病變部位的新鮮組織。將所采取的樣品制成病毒懸液,接種到9~11日齡的SPF雞胚進(jìn)行病毒增殖,一般需要盲傳3~4代才可以觀察到病變,表現(xiàn)為胚胎萎縮、蜷曲。
5.2.2 氣管環(huán)培養(yǎng) 取20日齡SPF雞胚氣管組織,將其切成0.5 mm厚度置于含有2%~3%犢牛血清DMEM培養(yǎng)基[6]的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)48 h后,選取具有活躍纖毛運(yùn)動(dòng)的氣管環(huán)用于接種待檢病毒。氣管環(huán)感染傳染性支氣管炎病毒后,病變氣管的纖毛會(huì)停止運(yùn)動(dòng),但有時(shí)也會(huì)有假陽性的發(fā)生。
5.2.3 血清學(xué)診斷 血清學(xué)檢測(cè)主要包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)、病毒中和試驗(yàn)(VNT)和血凝試驗(yàn)(HA)。
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)具有快捷、靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),適用于大量樣品的檢測(cè),在診斷中應(yīng)用比較廣泛。在上個(gè)世紀(jì)80年代即已開始應(yīng)用,隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,將單克隆抗體技術(shù)應(yīng)用到ELISA中,增強(qiáng)了ELISA方法鑒定分型的特異性。
瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)即可以用來檢測(cè)抗原也可以檢測(cè)抗體,具有操作簡(jiǎn)單、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。其原理是抗原、抗體在瓊脂中擴(kuò)散,當(dāng)比例合適時(shí)會(huì)結(jié)合形成一條肉眼可見的界線,以此來判定陰陽性。
病毒中和試驗(yàn)(VNT)是比較傳統(tǒng)的鑒定方法,可對(duì)病毒的血清型進(jìn)行分型鑒定,但因?yàn)椴僮鲝?fù)雜、成本高等原因限制了其應(yīng)用范圍。
血凝試驗(yàn)(HA):傳染性支氣管炎本身不會(huì)使紅細(xì)胞發(fā)生凝集,但經(jīng)過磷脂酶C或胰蛋白酶處理后,可使雞紅細(xì)胞發(fā)生凝集,可見血凝現(xiàn)象。
目前,無針對(duì)傳染性支氣管炎病毒的化學(xué)特效藥,但可以選擇一些抗病毒藥來阻止或破壞病毒的感染途徑,如利巴韋林等。雞在感染傳染性支氣管炎病毒發(fā)病后一般還會(huì)引發(fā)細(xì)菌性的繼發(fā)性感染,所以進(jìn)行抗菌治療也是必不可少的一步,在治療時(shí)可以在飼料或飲用水中加入抗生素,如頭孢類,羅紅霉素、慶大毒素等,但治療時(shí)需要注意休藥期,以免產(chǎn)生藥物殘留問題。為了避免藥物殘留問題的發(fā)生,在治療時(shí)可以選擇中草藥進(jìn)行治療,如使用板藍(lán)根,大青葉等中草藥合劑,對(duì)雞傳染性支氣管炎的治愈率可達(dá)65%以上[7]。在發(fā)病初期,對(duì)患病雞可以選用血清或卵黃抗體進(jìn)行針對(duì)性治療。
目前,對(duì)該病的預(yù)防主要以疫苗接種為主。從生產(chǎn)實(shí)際應(yīng)用出發(fā),該病的預(yù)防成本要遠(yuǎn)小于治療成本,所以疫苗免疫在養(yǎng)殖過程中至關(guān)重要。免疫效果的好壞是需要在諸多條件下才能實(shí)現(xiàn),主要與疫苗質(zhì)量、毒株類型、接種方式以及免疫程序是否合理制定有關(guān)。疫苗應(yīng)首選由獲批準(zhǔn)的廠家生產(chǎn),且疫苗類型與養(yǎng)殖場(chǎng)當(dāng)前流行的疾病類型一致,并能正確使用疫苗,還要免疫后及時(shí)跟蹤檢測(cè)雞群抗體水平,從而及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)免,才可以取得較好的保護(hù)效果。以呼吸型傳染性支氣管炎疫苗為例,免疫程序:一般3~7日齡進(jìn)行噴霧、點(diǎn)眼、滴鼻活苗免疫,25~45日齡進(jìn)行飲水二次免疫,120~140日齡的種雞還需要進(jìn)行一次滅活苗肌注免疫,以便對(duì)雛雞產(chǎn)生母源抗體保護(hù),也可以根據(jù)購買具體疫苗的產(chǎn)品說明書進(jìn)行免疫程序接種。
在養(yǎng)殖過程中要注意加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,提升雞群的健康水平,防止雞群免疫力下降。給雞群提供搭配合理、營養(yǎng)充分的全價(jià)優(yōu)質(zhì)飼料,不要隨意在飼料中添加影響免疫功能的抗菌藥物,可添加微生態(tài)制劑、中草藥組方及其提取物等綠色添加劑;還可適當(dāng)使用電解多維、維生素A、維生素E以及維生素C等藥物預(yù)防和減少雞群應(yīng)激的發(fā)生。此外,注意雞舍環(huán)境問題,保持雞舍干凈衛(wèi)生,保證良好的通風(fēng)、適宜的溫度。
總之,良好的飼養(yǎng)環(huán)境、較強(qiáng)的生物安全防護(hù)狀態(tài)以及科學(xué)的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件結(jié)合,可確保雞群健康。所以,采取綜合性預(yù)防措施對(duì)雞群傳染性支氣管炎才能起到良好的防控作用。