劉婷婷，李鳳玲，黃 鑫，劉峻池

（南京市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇南京 210012）

枯草芽袍桿菌（Bacillus subtilis，BS）具有維護(hù)畜禽腸道微生態(tài)平衡、調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)代謝、維護(hù)腸道黏膜屏障完整性和增強(qiáng)機(jī)體免疫力等功能[1]。目前市面上含枯草芽孢桿菌的微生態(tài)制劑種類繁多，含量也各不相同。本研究主要通過(guò)對(duì)比不同添加量對(duì)產(chǎn)蛋期蛋雞各項(xiàng)性能的影響，為蛋雞養(yǎng)殖過(guò)程中枯草芽孢桿菌的添加量提供科學(xué)依據(jù)。

1 試驗(yàn)方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選擇216 只產(chǎn)蛋中期海蘭褐殼蛋雞，分為3 組，每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12 只雞。第1 組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧營(yíng)養(yǎng)水平參照海蘭褐殼蛋雞生產(chǎn)性能標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)；第2 組基礎(chǔ)日糧中添加濃度為1×1013CFU/t 的枯草芽孢桿菌生物制劑；第3 組基礎(chǔ)日糧中添加濃度為1×1012CFU/t 的枯草芽孢桿菌生物制劑。換料過(guò)渡期7 d，試驗(yàn)期56 d。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)蛋雞采用全封閉雞舍4 層H 型籠養(yǎng)。每日定時(shí)飼喂3 次（06:00、12:00、18:00），自由采食和飲水。恒定光照時(shí)間為16 h/d，舍內(nèi)溫濕度相對(duì)穩(wěn)定，溫度在（20±2）℃，相對(duì)濕度在（60±5）%。

1.3 指標(biāo)測(cè)定及方法

1.3.1 糞便形態(tài)評(píng)價(jià)

試驗(yàn)期間，每周觀察并記錄1 次每組蛋雞的糞便形態(tài)。

1.3.2 血清學(xué)評(píng)價(jià)

試驗(yàn)第14、28 和56 天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)挑選5只雞采集血清，采用平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行雞白痢抗體檢測(cè)，另將第56 天血清加做理化指標(biāo)檢測(cè)。

1.3.3 生產(chǎn)性能

以重復(fù)為單位每天記錄產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、投料量、剩余料量、存欄雞數(shù)。計(jì)算產(chǎn)蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比。

1.3.4 蛋品質(zhì)評(píng)價(jià)

試驗(yàn)第56 天，每個(gè)重復(fù)采集4 枚新鮮雞蛋用于測(cè)定蛋品質(zhì)。用物性結(jié)構(gòu)分析儀測(cè)定蛋殼強(qiáng)度；用螺旋測(cè)微器測(cè)量雞蛋中間、銳端及鈍端3 個(gè)位置的蛋殼厚度，并計(jì)算蛋殼厚度的平均值；用EMT-5200 型多功能蛋品測(cè)定儀檢測(cè)蛋黃顏色、蛋白高度和哈夫單位。

1.3.5 腸道形態(tài)評(píng)價(jià)

試驗(yàn)第56 天,每重復(fù)分別選3 只雞解剖，解剖后取十二指腸、空腸及回腸中段2～3 cm，用4%多聚甲醛固定。設(shè)置不同乙醇濃度對(duì)腸道樣品進(jìn)行脫水，再用二甲苯清洗，制作石蠟切片，觀察腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)。通過(guò)Case Viewer 軟件測(cè)量腸絨毛高度（villus height，VH)、隱窩深度（crypt depth，CD），計(jì)算絨毛高度隱窩深度（VH/CD）。

1.4 數(shù)據(jù)處理

血清理化指標(biāo)、生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和腸道形態(tài)數(shù)據(jù)采用SPSS Statistics 26 統(tǒng)計(jì)軟件ANOVA 檢驗(yàn)程序進(jìn)行單因素方差分析，P ＜0.05 為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 糞便形態(tài)評(píng)價(jià)

由表1 可知，試驗(yàn)初始，試驗(yàn)組和對(duì)照組糞便形態(tài)并無(wú)明顯差別，軟硬適中、色澤正常，偶見(jiàn)稀糞。2 周后，對(duì)照組個(gè)別雞籠出現(xiàn)稀糞，糞便不成形，甚至呈水樣，稀糞出現(xiàn)比例在1%～2%。試驗(yàn)后期，對(duì)照組雞群的糞便狀態(tài)依然不穩(wěn)定，呈現(xiàn)時(shí)好時(shí)壞的狀態(tài)，有的雞籠糞便形態(tài)良好，有的雞籠出現(xiàn)水便；而添加枯草芽孢桿菌的2 個(gè)試驗(yàn)組，糞便始終能保持軟硬適中，形態(tài)穩(wěn)定，整體均勻度較好。

表1 添加枯草芽孢桿菌后蛋雞糞便形態(tài)的觀察記錄

2.2 血清學(xué)評(píng)價(jià)

2.2.1 雞白痢抗體檢測(cè)結(jié)果

由表2 可知，14 d 時(shí)，試驗(yàn)組和對(duì)照組雞白痢抗體陽(yáng)性率無(wú)顯著差異；28 d 和56 d，試驗(yàn)組的雞白痢抗體陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組。

表2 雞白痢抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2.2 血清理化指標(biāo)測(cè)定

由表3 可知，與對(duì)照組相比，第2 組雞血清中的白蛋白含量顯著提高（P ＜0.05），其他指標(biāo)差異不顯著（P ＞0.05）。

表3 添加枯草芽孢桿菌56 d 對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

2.3 生產(chǎn)性能評(píng)價(jià)

由表4 可知，與第1 組相比，第2 組產(chǎn)蛋率雖提高了2.96 個(gè)百分點(diǎn)，但差異不顯著（P ＞0.05）；平均蛋重、日采食量和料蛋比也無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表4 添加枯草芽孢桿菌56 d 對(duì)生產(chǎn)性能的影響

2.4 蛋品質(zhì)評(píng)價(jià)

由表5 可知，與對(duì)照組相比，飼糧中添加枯草芽孢桿菌可使蛋白高度和哈氏單位顯著提高（P＜0.05）；其他指標(biāo)略有差異，但是差異不顯著（P ＞0.05）。

表5 添加枯草芽孢桿菌56 d 對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

2.5 腸道形態(tài)評(píng)價(jià)

由表6 可知，與第1 組相比，第2 組可空腸絨毛高度顯著提高（P ＜0.05）；十二指腸絨毛高度也有所增長(zhǎng)，但差異不顯著（P ＞0.05）。

表6 添加枯草芽孢桿菌對(duì)蛋雞腸道形態(tài)的影響

圖1 第1 組空腸和十二指腸腸道形態(tài)

圖2 第2 組空腸和十二指腸腸道形態(tài)

圖3 第3 組空腸和十二指腸腸道形態(tài)

3 分析與討論

3.1 糞便形態(tài)分析

枯草芽孢桿菌能明顯改善雞糞形態(tài)。這表明枯草芽孢桿菌對(duì)蛋雞腸道有一定的調(diào)理作用，保持雞群整體狀態(tài)良好，尤其是可以為弱雞或免疫力低下的雞提供良好的腸道保護(hù)[2]。基礎(chǔ)日糧中按1×1013CFU/t 添加枯草桿菌飼喂，與按1×1012CFU/t 添加相比較，在改善糞便形態(tài)方面沒(méi)有明顯差異。

3.2 血清學(xué)結(jié)果分析

枯草芽孢桿菌短時(shí)間內(nèi)很難達(dá)到調(diào)控雞群腸道健康，抑制沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)的效果。只有長(zhǎng)期在飼料中添加枯草芽孢桿菌才可有效抑制沙門(mén)氏菌在腸道內(nèi)的繁殖。因?yàn)榭莶菅挎邨U菌在腸道中能夠產(chǎn)生乙酸、丙酸和丁酸等揮發(fā)性脂肪酸，降低腸道pH[3]，促進(jìn)乳酸桿菌增殖的同時(shí)，間接抑制了腸道中沙門(mén)氏菌等病原微生物的繁殖[4]。同時(shí)，血清中白蛋白的含量顯著增加，可能有益于提高雞蛋的蛋白質(zhì)量?；A(chǔ)日糧中按1×1013CFU/t 添加枯草桿菌飼喂，與按1×1012CFU/t 添加相比較，對(duì)沙門(mén)氏菌的抑制效果差異不顯著，1×1013CFU/t 對(duì)血清中白蛋白含量的影響比較明顯。

3.3 生產(chǎn)性能

枯草芽孢桿菌可以通過(guò)刺激腸道蠕動(dòng)加強(qiáng)蛋雞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高飼料的利用率和轉(zhuǎn)化率[5]，從而降低料蛋比，提高產(chǎn)蛋率?；A(chǔ)日糧中按1×1013CFU/t 添加枯草桿菌飼喂，與按1×1012CFU/t 添加相比較，1×1013CFU/t 的添加濃度更有利于提高蛋雞的產(chǎn)蛋率。

3.4 蛋品質(zhì)分析

試驗(yàn)組的蛋白高度和哈氏單位，較于對(duì)照組均有升高的趨勢(shì)。哈氏單位是用來(lái)評(píng)定蛋白品質(zhì)，表示濃厚蛋白稀薄化程度的單位，它可以度量蛋白的穩(wěn)固性，哈氏單位越低，蛋白越稀。試驗(yàn)結(jié)果表明枯草芽孢桿菌對(duì)提升蛋白質(zhì)量、改善雞蛋品質(zhì)具有一定的作用[6]?；A(chǔ)日糧中按1×1013CFU/t 添加枯草桿菌飼喂，與按1×1012CFU/t 添加相比較，改善蛋殼顏色、蛋殼質(zhì)量、蛋雞的產(chǎn)蛋率、降低料蛋比方面差異不大。

3.5 腸道形態(tài)分析

添加枯草芽孢桿菌可有效增加十二指腸和空腸的絨毛高度，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[7],促進(jìn)腸上皮細(xì)胞的成熟，增強(qiáng)對(duì)腸道營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的能力，同時(shí)也能減少有害微生物對(duì)腸道的損傷，從而維護(hù)腸道健康[8]?？莶菅挎邨U菌還可以誘導(dǎo)腸道黏膜免疫應(yīng)答[9],產(chǎn)生免疫蛋白和各種免疫因子，增強(qiáng)畜禽腸道免疫能力[10]?；A(chǔ)日糧中按1×1013CFU/t 添加枯草桿菌飼喂，與按1×1012CFU/t 添加相比較，按1×1013CFU/t 添加效果更顯著。

3.6 結(jié)論

我國(guó)已要求蛋雞產(chǎn)蛋期全期禁止使用飼用抗生素，無(wú)抗養(yǎng)殖未來(lái)必然是全球畜牧業(yè)的發(fā)展趨勢(shì)。枯草芽孢桿菌作為一類無(wú)毒、無(wú)殘留和無(wú)抗藥性的益生菌，在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用也越來(lái)越廣泛[11]。它不僅能通過(guò)調(diào)控腸道微生態(tài)菌群、調(diào)節(jié)腸道營(yíng)養(yǎng)代謝以及腸道吸收來(lái)改善蛋雞的腸道健康，還能提高蛋雞的生產(chǎn)性能、改善雞蛋品質(zhì)、預(yù)防腹瀉和增強(qiáng)免疫力，還能達(dá)到替代部分抗生素的效果[12]。但是，我們?cè)谔砑雍莶菅挎邨U菌的微生態(tài)制劑時(shí)，一定要對(duì)添加濃度進(jìn)行嚴(yán)格把控，不同時(shí)期的蛋雞，飼料中添加枯草芽孢桿菌的量不同。本試驗(yàn)研究是針對(duì)產(chǎn)蛋期蛋雞開(kāi)展的，研究結(jié)果表明，對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞而言，飼料濃度為1×1013CFU/t 的添加效果優(yōu)于1×1012CFU/t 的添加效果。

4 結(jié)束語(yǔ)

本試驗(yàn)中所選雞場(chǎng)是一家自動(dòng)化規(guī)模雞場(chǎng)，管理水平和生產(chǎn)能力也很高，再配合枯草芽孢桿菌的添加效果就會(huì)比較明顯。但是在實(shí)際蛋雞生產(chǎn)中，如果把蛋雞腸道健康完全寄托于微生態(tài)制劑的添加上可能會(huì)杯水車(chē)薪，徒增養(yǎng)殖成本。全面的綜合防控措施才是蛋雞健康養(yǎng)殖的良藥，提升蛋雞場(chǎng)的飼養(yǎng)管理水平，嚴(yán)格種源管理、提高育雛水平、做好飼料防霉、提升飲水質(zhì)量、減少應(yīng)激反應(yīng)，再配合益生菌進(jìn)行腸道調(diào)理，就會(huì)起到錦上添花的效果，有效實(shí)現(xiàn)蛋雞群的健康養(yǎng)殖。