熊彬欣

(云南省蒙自市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南 蒙自 661100)

0 引言

在我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)現(xiàn)代化規(guī)模和發(fā)展的過(guò)程中，羊作為一種主要的養(yǎng)殖群體，傳染病的發(fā)病概率顯著提高，羊腸毒血癥是羊群感染了D型魏氏梭菌所引發(fā)的急性傳染病，易感群體以綿羊?yàn)橹?。D型魏氏梭菌通過(guò)羊只腸道進(jìn)行大量繁殖，釋放出大量的毒素?；疾∩窖蛟谂R床中會(huì)出現(xiàn)腎臟軟化、腹瀉、麻痹等一系列的癥狀。羊腸毒血癥病發(fā)帶有明顯的季節(jié)性特點(diǎn)，對(duì)我國(guó)養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展造成了嚴(yán)重的威脅。本文通過(guò)探討羊腸毒血癥的流行病學(xué)特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)室診斷和防控措施，以便為今后我國(guó)羊腸毒血癥的診斷治療以及防控提供參考。

1 羊腸毒血癥的病原體特征及病發(fā)機(jī)理分析

1.1 病原體特征

魏氏梭菌在生物學(xué)上被稱(chēng)為產(chǎn)氣莢膜梭菌，本質(zhì)上是一種厭氧性質(zhì)的革蘭陽(yáng)性粗短大桿菌[1]。動(dòng)物感染魏氏梭菌之后，可以在機(jī)體內(nèi)形成莢膜，且病菌的芽孢位于菌體的中央位置。結(jié)合魏氏梭菌在動(dòng)物體內(nèi)繁殖過(guò)程中產(chǎn)生的外毒素類(lèi)型的差異，可以將魏氏梭菌劃分為A、B、C、D、E 5個(gè)類(lèi)型。引發(fā)羊腸毒血癥的魏氏梭菌是D型魏氏梭菌，這種致病菌可以在羊只的腸道內(nèi)形成芽孢，并且消化道是病菌的主要傳播途徑。各類(lèi)較為常用的消毒劑對(duì)于D型魏氏梭菌均具備良好的殺菌效果，但在芽孢形成之后的D型魏氏梭菌，因其抗逆性得到了明顯增強(qiáng)，需要在90℃的環(huán)境下進(jìn)行150 min的滅菌處理，而繁殖體內(nèi)的病菌則需要在60℃的環(huán)境條件下進(jìn)行15 min的消殺處理。

1.2 病發(fā)機(jī)理

D型魏氏梭菌在水源、土壤中分布較為廣泛，并且能在飼養(yǎng)的草料、健康生羊的消化道和分泌物中存活。在羊群免疫水平相對(duì)較高的情況下，D型魏氏梭菌在進(jìn)入腸道之后，病原菌被胃內(nèi)的胃酸殺死，只有很少的一部分會(huì)進(jìn)入腸道，但這些病原菌在繁殖過(guò)程中產(chǎn)生的毒素?cái)?shù)量十分有限，并不會(huì)對(duì)羊只的健康產(chǎn)生影響，最終會(huì)以腸內(nèi)容物的形式排放到自然環(huán)境中。但在羊群飼養(yǎng)草料突然變更，尤其是從之前的干草料轉(zhuǎn)變?yōu)榍嗑G多汁草料，或者是草料的蛋白質(zhì)含量較高時(shí)，則會(huì)導(dǎo)致羊群瘤胃內(nèi)的酸堿度數(shù)值有所下降，絕大部分尚未經(jīng)過(guò)消化的淀粉顆粒會(huì)進(jìn)入小腸。在這種情況下，腸道內(nèi)部的D型魏氏梭菌就會(huì)快速繁殖并產(chǎn)生大量的毒素，在進(jìn)入血液之后會(huì)引發(fā)羊只腸道的溶血、壞死，最終會(huì)出現(xiàn)休克、死亡的現(xiàn)象。

2 羊腸毒血癥的流行病學(xué)分析

羊腸毒血癥常見(jiàn)于成年階段的羊群，并且綿羊是其中的重要發(fā)病群體。D型魏氏梭菌能夠在動(dòng)物的腸道以及生活和工業(yè)污水中長(zhǎng)時(shí)間存在[2]。羊只在食用這些含有病原菌的食物或者是污水之后，則會(huì)順著消化系統(tǒng)進(jìn)入到腸道的內(nèi)部，在破壞原有的消化機(jī)能的同時(shí)，出現(xiàn)病菌快速繁殖并分泌出數(shù)量較多的各類(lèi)毒素。羊腸毒血癥具有明顯的群發(fā)性和散發(fā)性并存的特點(diǎn)，D型魏氏梭菌可以在羊群體內(nèi)持續(xù)存活30～50 d。近些年，我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)的病原菌污染水平有所提升，羊腸毒血癥可能發(fā)生在任何年齡階段的健康羊只身上，尤其是以6～24月齡的羊只感染之后死亡率最高[3]。羊腸毒血癥在春秋季節(jié)較為流行，尤其是在氣候驟變的潮濕地區(qū)發(fā)病率更高。羊腸毒血癥的顯著特點(diǎn)之一便是與羊圈的突然更換有著較為緊密的關(guān)聯(lián)。

3 羊腸毒血癥的臨床癥狀表現(xiàn)

羊腸毒血癥病發(fā)時(shí)間相對(duì)較快、病程較短，在臨床治療中部分病羊甚至在未出現(xiàn)任何臨床癥狀的情況下，便會(huì)迅速死亡。在病發(fā)之后，患病羊只會(huì)出現(xiàn)獨(dú)自離群、奔跑、臥地不起等癥狀，并且在臨死之前出現(xiàn)腹瀉，糞便呈現(xiàn)出水樣的黃褐色稀糞狀[4]。此外，部分患病羊只也會(huì)出現(xiàn)頭部后仰、磨牙、全身顫抖，隨后陷入休克并死亡。結(jié)合病羊在發(fā)病之后的癥狀差異，可以將羊腸毒血癥的臨床癥狀劃分為抽搐型和昏厥型，這也是由患病山羊體內(nèi)產(chǎn)生毒素的數(shù)量決定的。出現(xiàn)抽搐性臨床癥狀表現(xiàn)的山羊通常會(huì)因?yàn)楦共棵浲炊霈F(xiàn)全身性的顫抖、磨牙、口流白沫，隨后頭部和頸部會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的抽搐現(xiàn)象，會(huì)在病發(fā)3 d左右死亡?；柝市团R床癥狀的發(fā)病羊只主要的臨床癥狀表現(xiàn)就是流口水，走路時(shí)明顯呈現(xiàn)出體力不支的狀態(tài)，并且羊的眼角膜反射會(huì)消失，部分患病羊只會(huì)出現(xiàn)腹瀉癥狀。在針對(duì)患病死亡的羊只進(jìn)行剖檢時(shí)發(fā)現(xiàn)，即便其營(yíng)養(yǎng)狀況良好的昏厥型臨床癥狀的山羊，死后的尸體也會(huì)迅速膨脹并快速腐敗。

4 羊腸毒血癥的實(shí)驗(yàn)室診斷分析

4.1 觸片鏡檢

在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)無(wú)菌環(huán)境的條件下，可以適當(dāng)取樣患病山羊的腎臟、心臟和肝臟組織直接進(jìn)行觸片鏡檢，隨后經(jīng)過(guò)革蘭氏染色以及顯微鏡檢查之后，可以發(fā)現(xiàn)數(shù)量較多的粗大桿菌，細(xì)菌的兩端呈現(xiàn)出鈍圓狀態(tài)并帶有莢膜。

4.2 分離培養(yǎng)檢測(cè)

在實(shí)驗(yàn)室的無(wú)菌環(huán)境下，檢測(cè)人員需要使用接種環(huán)將患病山羊的肝臟、腎臟適當(dāng)進(jìn)行取樣，隨后分別在肝片肉湯和葡萄糖血液瓊脂平板上進(jìn)行接種，并將其放入37°的恒溫箱環(huán)境下進(jìn)行8～24 h的厭氧培養(yǎng)操作，最后觀察培養(yǎng)出的細(xì)菌特性。肝片肉湯培養(yǎng)基在經(jīng)過(guò)8 h的培養(yǎng)之后，會(huì)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榛鞚釥顟B(tài)，并產(chǎn)生一定數(shù)量的氣泡。在經(jīng)過(guò)24 h培養(yǎng)之后，底部會(huì)出現(xiàn)明顯的白色沉淀物。葡萄糖血液瓊脂平板的培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)8 h培養(yǎng)之后，會(huì)長(zhǎng)出呈現(xiàn)淺灰色的圓形或者是圓盤(pán)型的菌落，且菌落的中間部位會(huì)逐漸凸起，并最終形成溶血環(huán)或者是雙溶血環(huán)[5]。在挑去菌落的培養(yǎng)物進(jìn)行涂片、染色、顯微鏡檢查之后可以發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽(yáng)性大桿菌，且這類(lèi)細(xì)菌的形態(tài)與之前羊只病料組織直接涂片檢測(cè)所發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌完全相同。

4.3 生化實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)

在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)D型魏氏梭菌的過(guò)程中，生化實(shí)驗(yàn)方式可以利用葡萄糖、蔗糖、乳糖、麥芽糖等材料，隨后便可以生成硫化氫氣體，經(jīng)過(guò)甲基紅實(shí)驗(yàn)、尿素試驗(yàn)之后便可得出是否患病的結(jié)論，需要注意的是，枸椽酸鹽無(wú)法應(yīng)用到D型魏氏梭菌的生化檢驗(yàn)中。

4.4 腸毒素檢查

在實(shí)驗(yàn)室檢查病羊腸毒素的過(guò)程中，需要取50 mL病死羊只的回腸內(nèi)容物，并向其中添加150 mL的滅菌生理水進(jìn)行稀釋?zhuān)诮?jīng)過(guò)均勻混合之后，需要以3 000 r/min的速度進(jìn)行10 min的離心處理，隨后取離心液上清液針對(duì)健康家兔進(jìn)行接種，并同時(shí)針對(duì)健康的家兔進(jìn)行同等數(shù)量的滅菌生理水注射。在經(jīng)過(guò)一段時(shí)間之后可以發(fā)現(xiàn)，注射病死羊回腸內(nèi)容物稀釋上清液的家兔出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，而注射滅菌生理鹽水的家兔依舊存活，這也證明病死羊只的腸道內(nèi)確實(shí)出現(xiàn)了數(shù)量較多的腸毒素。

4.5 毒素的測(cè)定

在確定腸道內(nèi)存在著大量毒素之后，需要取經(jīng)過(guò)稀釋的病死羊回腸內(nèi)容物稀釋上清液1.5 mL，分別與滅菌生理鹽水、C型和D型的產(chǎn)氣莢膜梭菌抗毒血清，分別取0.5 mL進(jìn)行全面混合，之后放置在37℃環(huán)境條件下進(jìn)行40 min的綜合處理，分別針對(duì)家兔進(jìn)行注射。經(jīng)過(guò)12 h之后可以發(fā)現(xiàn)，注射C型抗毒血清以及病死羊回腸內(nèi)容稀釋上清液的家兔先后死亡，其余的注射滅菌生理鹽水、D型抗毒血清、回腸內(nèi)容物稀釋上清液混合液的家兔全部存活，由此也不難看出回腸的內(nèi)容稀釋物的上清液中確實(shí)含有D型魏氏梭菌在繁殖過(guò)程中分泌的毒素。

5 羊腸毒血癥的防治策略

5.1 病羊的治療措施

在羊只出現(xiàn)羊腸毒血癥臨床癥狀表現(xiàn)之后，如果病羊的病程發(fā)展進(jìn)程相對(duì)較為緩慢，可以使用80萬(wàn)～160萬(wàn)IU的青霉素進(jìn)行肌肉注射治療，2次/d。同時(shí)也需要針對(duì)患病羊只進(jìn)行8～12 g磺胺脒的配合內(nèi)服，第1天的藥物服用治療需要使用一次性的灌服，在第2天之后則可以將之分為2次進(jìn)行灌服[6]。養(yǎng)殖人員也可以向患病山羊體內(nèi)灌服濃度為10%的石灰水，石灰水的具體用量需要結(jié)合患病羊只的體重進(jìn)行變更。羔羊的石灰水用量維持在50～80 mL，成年羊只的用量則需要提高到200 mL，連續(xù)治療1～2次。在對(duì)病程進(jìn)展緩慢的羊只進(jìn)行臨床治療的過(guò)程中，需要結(jié)合其臨床表現(xiàn)針對(duì)性地采取鎮(zhèn)靜、強(qiáng)心、補(bǔ)液等輔助治療方式。

在患病羊只臨床癥狀表現(xiàn)和發(fā)病較為嚴(yán)重的情況下，需要進(jìn)一步采取對(duì)癥治療的方法。通常而言，需要使用500 mL的生理鹽水、10 mL的VC、20萬(wàn)IU的青霉素8～10支、4萬(wàn)IU的慶大霉素4～6只以及1支20 mL氰化可的松所組成的藥液進(jìn)行靜脈注射，2次/d。在羊只同時(shí)伴隨有酸中毒癥狀的情況下，需要使用500 mL 5%碳酸氫鈉溶液進(jìn)行靜脈注射治療，并配合適當(dāng)數(shù)量鏈霉素的口服治療，通常需要連續(xù)治療3～5 d。

因?yàn)檠蚰c毒血癥的病發(fā)相對(duì)較快，并且?guī)в袠O強(qiáng)的傳染性。在養(yǎng)殖人員發(fā)現(xiàn)羊只患病之后，需要立即進(jìn)行隔離處理，并對(duì)羊舍內(nèi)的其他羊只進(jìn)行隔離排查，可有效防止疾病的快速擴(kuò)散。對(duì)于確認(rèn)狀態(tài)健康的羊群需要立即進(jìn)行羊圈的更換，并進(jìn)行緊急的預(yù)防疫苗接種措施。

5.2 預(yù)防措施

1)在預(yù)防羊群感染羊腸毒血癥時(shí)，養(yǎng)殖場(chǎng)管理人員要對(duì)病羊糞便污染的區(qū)域進(jìn)行統(tǒng)一清掃再消毒，避免各種垃圾、雜物影響到消毒效果，可以使用2%的火堿溶液進(jìn)行噴灑消毒。在日常的羊群養(yǎng)殖管理中，養(yǎng)殖人員要在降溫之前為羊群提供保暖措施。冬季氣溫過(guò)低的情況下，需要在地面上鋪上墊草，確保羊群在臥地時(shí)不會(huì)與地面直接接觸。另外，羊群感染羊腸毒血癥的主要病因還有應(yīng)激使機(jī)體免疫力下降，管理人員需要做好防應(yīng)激工作，部分羔羊在斷乳之后需要長(zhǎng)途運(yùn)輸進(jìn)行售賣(mài)，在這之前需要保障羊只擁有充足的飲水，并在水中加入電解多維和礦物微量元素，可有效避免應(yīng)激反應(yīng)。平日羊群放牧?xí)r，養(yǎng)殖人員需要避開(kāi)地勢(shì)低洼的潮區(qū)以及沼澤地帶，選擇干燥、向陽(yáng)的高地進(jìn)行放牧。

2)養(yǎng)殖人員可以使用微生態(tài)制劑進(jìn)行該病的預(yù)防。目前益生菌和益生元的飼料添加劑是應(yīng)用較為廣泛的微生態(tài)制劑。從功能上看，益生菌能夠和D型魏氏梭菌進(jìn)行空間以及營(yíng)養(yǎng)的競(jìng)爭(zhēng)，對(duì)其繁殖進(jìn)行有效抑制，確保羊只胃腸道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境的平衡。給羊只服用益生元可有效利用有害菌無(wú)法利用的物質(zhì)，在羊只口服之后促進(jìn)其體內(nèi)益生菌的繁殖，確保在微環(huán)境競(jìng)爭(zhēng)過(guò)程中始終處于優(yōu)勢(shì)地位，在促進(jìn)羊只健康生長(zhǎng)的同時(shí)，降低羊腸毒血癥的發(fā)病概率。

3)在預(yù)防健康羊群感染羊腸毒血癥的過(guò)程中，疫苗接種是最為有效的方法，養(yǎng)殖人員需要定期針對(duì)健康的羊群進(jìn)行羊腸毒血癥疫苗的接種。在接種疫苗之后的1～2周之內(nèi)就能夠產(chǎn)生抗體，3周之后抗體的含量達(dá)到高峰，能夠有效抵抗各種病菌的感染。需要注意的是，在進(jìn)行免疫接種的過(guò)程中，養(yǎng)殖管理人員要在接種前后的7 d內(nèi)停止使用免疫抑制藥物，如糖皮質(zhì)激素、解熱鎮(zhèn)痛消炎類(lèi)的藥物，避免對(duì)疫苗接種時(shí)抗體的生成產(chǎn)生不良影響。

6 結(jié)語(yǔ)

羊腸毒血癥有著較高的發(fā)病率以及致死率，對(duì)我國(guó)羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展產(chǎn)生十分不利的影響。D型魏氏梭菌能夠廣泛地存在于自然界的生活以及工業(yè)廢水中，并且能夠在健康羊只的腸道內(nèi)存活30～50 d。病發(fā)之后的臨床癥狀表現(xiàn)可以分為抽搐性和昏厥型，最終都會(huì)導(dǎo)致死亡。飼養(yǎng)管理人員在發(fā)現(xiàn)羊只感染羊腸毒血癥之后，需要及時(shí)進(jìn)行隔離處理，并針對(duì)健康的羊只進(jìn)行免疫接種。同時(shí)對(duì)患病羊采取針對(duì)性治療，提高患病羊只的存活率。在平日的飼養(yǎng)管理過(guò)程中，飼養(yǎng)人員需要定期進(jìn)行羊舍的殺菌消毒處理，并要定期針對(duì)健康羊群進(jìn)行疫苗接種，配合微生態(tài)制劑加入飼料中，能夠顯著提高羊只對(duì)羊腸毒血癥的抵抗力。