陳余海,黃道彬
(1.廣東海洋大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院,廣東 湛江 524000;2.珠海市香洲愛寵動(dòng)物診所,廣東 珠海 519000)
該病的病原為產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌,在自然環(huán)境中可存活數(shù)月,并能夠正常越冬。該菌的酸堿耐受性較強(qiáng),在pH 5.0以下的酸性環(huán)境和pH 9.0以上的堿性環(huán)境下致病性減弱,但不會(huì)死亡。此外,該菌還具有較強(qiáng)的耐熱特性,常規(guī)巴氏消毒法無(wú)法殺滅,加熱至70℃后需要30 min才能將其殺滅。該病菌可導(dǎo)致禽、畜、野生動(dòng)物、人發(fā)病。目前已知有43種哺乳動(dòng)物、22種禽類以及若干種魚類、甲殼類生物都會(huì)感染該病。其中,鼠類易感性最強(qiáng),同時(shí)也是李氏桿菌的貯存宿主。不同品種、不同年齡的豬,都有易感性,并且仔豬和妊娠母豬的易感性特別高。該病的發(fā)生無(wú)明顯季節(jié)性,以散發(fā)為主。病豬的分泌物和排泄物都可攜帶病菌,其他健康豬接觸病菌后容易被傳染。除了攜帶病菌的蚊、蠅、鼠可以成為豬李氏桿菌病的傳播媒介外,被污染的水、飼料甚至土壤,也能成為傳播媒介。
豬李氏桿菌病發(fā)病突然,病豬發(fā)病后體溫會(huì)快速升高,并維持在40℃以上,部分病豬的體溫會(huì)達(dá)到42℃。仔豬患病后停止吮乳,成年豬發(fā)病后進(jìn)食也會(huì)明顯減少,并且多伴隨有呼吸急促、困難的情況。排尿比平時(shí)明顯減少,糞便干燥或有腹瀉癥狀,在腹部、四肢等處的皮膚有發(fā)紅、發(fā)紫的情況。高溫持續(xù)1~2 d,體溫會(huì)逐漸下降,但是仍然有發(fā)燒現(xiàn)象[1]。絕大部分病豬會(huì)表現(xiàn)出腦炎癥狀,由于出現(xiàn)意識(shí)障礙,發(fā)病初期會(huì)有異??簥^的表現(xiàn),會(huì)無(wú)目的地轉(zhuǎn)圈,或是不自主地后退、突然前躍等。發(fā)病后期,病豬會(huì)出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)障礙,表現(xiàn)為喜臥厭立,個(gè)別運(yùn)動(dòng)障礙嚴(yán)重的病豬長(zhǎng)臥不起,倒地后出現(xiàn)抽搐現(xiàn)象,口、鼻分泌物明顯增多。病豬的病程長(zhǎng)短不一,短則1~2 d,長(zhǎng)則5~7 d,偶有病豬病程達(dá)到14 d左右。妊娠母豬感染豬李氏桿菌病后,有較大概率引起流產(chǎn)或者產(chǎn)出死胎。順利成活的仔豬體內(nèi)帶毒,有較大概率在30 d內(nèi)發(fā)病。
將患有豬李氏桿菌病的病死豬進(jìn)行解剖、檢查,可以發(fā)現(xiàn)病死豬的皮膚蒼白,局部皮膚變?yōu)樽虾稚?。腸系膜淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié),以及腎、肝、脾等臟器均有一定程度的腫大情況。肺臟膨大,用手按壓后會(huì)滲出少量半凝固狀的紅黑色液體。在心臟冠狀溝處可見數(shù)量較多的針狀出血點(diǎn)。腦膜處有輕度水腫現(xiàn)象。剪開腦膜后,可以發(fā)現(xiàn)腦回溝處殘存少量的腦髓液,用手觸摸腦橋、腦髓質(zhì)可以發(fā)現(xiàn)明顯變軟。
分別取病死豬的淋巴結(jié)、肝臟、脾臟、腎臟、心臟、腦等組織器官,將其置于10%福爾馬林中浸泡24 h,然后取出進(jìn)行常規(guī)石蠟切片。使用H.E染色后將切片置于顯微鏡下進(jìn)行病理組織學(xué)觀察??梢园l(fā)現(xiàn),在腦膜、腦橋、腦脊髓等位置的血管有不同程度的充血、擴(kuò)張現(xiàn)象,同時(shí)觀察到腦膜下浸潤(rùn)有少量的單核細(xì)胞。進(jìn)一步觀察發(fā)現(xiàn),該細(xì)胞為中性粒細(xì)胞,無(wú)莢膜,呈單個(gè)分散或2個(gè)“V”形排列,通過上述表現(xiàn)基本上可以確認(rèn)為豬李氏桿菌。同樣的,在心外膜間皮細(xì)胞中也觀察到了腫脹現(xiàn)象,以及有大量類似的單核細(xì)胞。肝細(xì)胞有腫大情況,肺臟有小葉性肺炎病變,脾臟有局部壞死。
將患豬李氏桿菌病死亡的病豬解剖,分別從腸淋巴結(jié)、心包液、心臟、肝臟、脾臟、腎臟以及腦等部位刮取少量組織制作成涂片,然后使用革蘭氏染色和瑞氏染色后放于電子顯微鏡下鏡檢。可以觀察到圖片中存在數(shù)量不等的革蘭氏陽(yáng)性桿菌。菌體為單個(gè)存在。其中,腸淋巴結(jié)、心臟、肝臟、脾臟、腎臟涂片中,菌體數(shù)量較多;而心包液、腦組織涂片中菌體數(shù)量相對(duì)較少。
在無(wú)菌環(huán)境下分別從病死豬的腸淋巴結(jié)、心臟、肝臟、脾臟和腦5個(gè)部位取少量組織,然后將其分別放置到營(yíng)養(yǎng)肉湯、普通瓊脂、鮮血瓊脂、巧克力瓊脂、麥康凱瓊脂5種培養(yǎng)基上進(jìn)行接種培養(yǎng)。將培養(yǎng)基放置于37℃環(huán)境下,連續(xù)培養(yǎng)24 h之后取出觀察培養(yǎng)基的變化情況。觀察發(fā)現(xiàn),原本比較清澈的營(yíng)養(yǎng)肉湯變得渾濁,對(duì)光觀察能夠發(fā)現(xiàn)肉湯內(nèi)懸浮著大量菌體。普通瓊脂培養(yǎng)基上雖然長(zhǎng)出了菌體,但是菌落數(shù)量較少,菌落規(guī)模不大,經(jīng)測(cè)量直徑多為0.2~1.0 mm。觀察可以發(fā)現(xiàn)菌落邊緣較為整齊,為灰色透明狀。鮮血瓊脂培養(yǎng)基上形成的菌體數(shù)量較多,直徑大小不一,小的僅有0.5 mm,大的可以達(dá)到2.0 mm,表面光滑,并且菌落周邊有β溶血環(huán)[2]。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上出現(xiàn)針尖大小的菌落,數(shù)量較少。巧克力瓊脂培養(yǎng)基上有體積較大的菌落,直徑通常在1~2 mm,為無(wú)色透明狀,邊緣整齊。從每個(gè)培養(yǎng)基上挑選1個(gè)菌落,將其染色后進(jìn)行鏡檢,可以觀察到革蘭陽(yáng)性短桿菌,呈單體散列存在,與圖片鏡檢結(jié)果一致。
從營(yíng)養(yǎng)肉湯中提取菌落,并進(jìn)行糖發(fā)酵試驗(yàn)、靛基質(zhì)試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、V-P試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明,豬李氏桿菌能夠?qū)⑵咸烟恰⑹罄钐?、果糖、水楊苷分解,分解后的產(chǎn)物為酸性,并且水解過程中沒有氣體產(chǎn)生。同時(shí)還發(fā)現(xiàn),該病菌不能將木糖、甘露醇分解。靛基質(zhì)試驗(yàn)結(jié)果呈陰性,V-P試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性。
從實(shí)驗(yàn)室取10只實(shí)驗(yàn)白鼠,將其隨機(jī)分為數(shù)量相等的2組,進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)。對(duì)照組的5只實(shí)驗(yàn)小鼠,分別采取腹腔注射的方式,注射0.5 mL的生理鹽水;試驗(yàn)組的5只實(shí)驗(yàn)小鼠,則采取同樣方法、同樣用量,注射帶有菌體的肉湯。然后將10只實(shí)驗(yàn)小鼠在相同環(huán)境下飼養(yǎng)48 h。觀察發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組的5只實(shí)驗(yàn)小鼠均已死亡,并且癥狀表現(xiàn)與上文介紹的病豬癥狀基本一致,而對(duì)照組的5只實(shí)驗(yàn)小鼠正常存活。將試驗(yàn)組死亡的5只實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行剖檢,發(fā)現(xiàn)肝臟、脾臟有不同程度的腫大現(xiàn)象,心臟成紫褐色,邊緣處有壞死,內(nèi)部淤血,充血情況嚴(yán)重,腦部有充血情況。分別從5只實(shí)驗(yàn)小鼠的腦組織、心臟、肝臟、脾臟處取少量組織進(jìn)行鏡檢和細(xì)菌分離培養(yǎng),也發(fā)現(xiàn)了相同的革蘭氏陽(yáng)性桿菌。
豬李氏桿菌病與豬瘟、豬乙型腦炎等常見疾病在癥狀上有一定的相似之處,如果出現(xiàn)誤判或用藥錯(cuò)誤,不僅會(huì)因?yàn)檠诱`治療時(shí)機(jī)導(dǎo)致病豬的病情加重,死亡率上升,還會(huì)因?yàn)椴∏榈穆?、擴(kuò)散,造成更大范圍的傳染,使得養(yǎng)殖損失成倍增加。因此,需要了解豬李氏桿菌病與其他豬常見病的癥狀差異,做到準(zhǔn)確鑒別,在此基礎(chǔ)上對(duì)癥用藥,才能提高疫病防控效果。
1月齡的仔豬患有豬瘟后,除了表現(xiàn)出體溫升高且用藥后不退熱的癥狀外,還會(huì)伴隨有無(wú)目的的轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng),但是運(yùn)動(dòng)機(jī)能并無(wú)減退。而仔豬患有李氏桿菌病后,則表現(xiàn)出明顯的運(yùn)動(dòng)障礙,仔豬跛行且喜臥厭立,病情嚴(yán)重者無(wú)法站立。另外,仔豬雖然也有體溫升高情況,但是使用抗菌和退燒藥物后,體溫會(huì)明顯下降,有一定的治療效果[3]。從病死豬的剖檢方面來(lái)看,感染豬瘟的病死豬,全身淋巴結(jié)均有不同程度的腫脹現(xiàn)象,并且在脾、胃等臟器的外表上可見密度不同的出血點(diǎn),切面呈大理石樣。顱腔內(nèi)有明顯的腦膜出血,腦膜下有淡黃色不明滲出液。而感染豬李氏桿菌病的病死豬剖檢后并不存在上述現(xiàn)象。根據(jù)上述病癥差異可以對(duì)豬李氏桿菌病和豬瘟進(jìn)行鑒別診斷。
哺乳期仔豬對(duì)偽狂犬病和李氏桿菌病均有較強(qiáng)的易感性,并且患病后的癥狀表現(xiàn)有諸多相似之處,容易誤判。例如兩者均會(huì)導(dǎo)致仔豬出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)障礙,發(fā)病后期均會(huì)出現(xiàn)異??簥^的狀況并伴有大聲尖叫的情況。但是兩種病癥也有一些細(xì)微的不同,可以作為鑒別診斷的依據(jù)。
1)在發(fā)病后的癥狀表現(xiàn)上,患有偽狂犬病的仔豬,主要表現(xiàn)為后肢運(yùn)動(dòng)障礙,走路時(shí)出現(xiàn)搖擺不定、站立不穩(wěn)的情況。而患有豬李氏桿菌病的仔豬,則多表現(xiàn)為前肢運(yùn)動(dòng)障礙,并且病豬不愛走動(dòng),長(zhǎng)時(shí)間臥地不起。
2)在剖檢變化上,患偽狂犬病致死的仔豬,可以發(fā)現(xiàn)多處組織器官有明顯水腫,打開顱腔后可以發(fā)現(xiàn)腦組織出血水腫,剪開腦膜后可以發(fā)現(xiàn)腦回平整發(fā)亮,并伴有少量滲出物。患豬李氏桿菌病死亡的仔豬,顱腔內(nèi)有輕微水腫,病變部位集中在小腸與臟器。剖檢可發(fā)現(xiàn)腸黏膜潮紅,小腸有充血、淤血情況,腸系膜淋巴結(jié)腫大呈繩索狀。
仔豬水腫病又稱為豬腸胃水腫,其病癥主要表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)共濟(jì)失調(diào)、驚厥、水腫。病豬的四肢均會(huì)出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)障礙,并且有的病豬還會(huì)伴隨有圓圈運(yùn)動(dòng)、盲目沖撞等情況,與豬李氏桿菌病的病癥有較多的相似之處。在仔豬水腫病和豬李氏桿菌病的鑒別診斷中,可重點(diǎn)把握以下幾點(diǎn)。
1)發(fā)病季節(jié)不同。仔豬水腫病多見于春秋兩季,而豬李氏桿菌病全年均可發(fā)病,沒有明顯的季節(jié)差別。
2)傳染性不同。仔豬水腫病是一種急性病,病程短、發(fā)病急、致死率高,但是傳染性較弱。而豬李氏桿菌病雖然也是突然發(fā)病,但是病程短則2~3 d,長(zhǎng)則5~7 d,甚至個(gè)別病豬的病程可以達(dá)到15 d以上,病程較長(zhǎng),及時(shí)治療后病死率相對(duì)較低[4]。
3)剖檢變化不同?;加凶胸i水腫病的病死豬主要在頭部、眼部出現(xiàn)水腫,而患有豬李氏桿菌病的病死豬在頭、眼處無(wú)水腫現(xiàn)象。
由于豬李氏桿菌病在各個(gè)品種、各個(gè)年齡段的豬群中均可發(fā)病,特別是仔豬、妊娠母豬發(fā)病率較高,因此一旦發(fā)病將會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。鑒于此,防治豬李氏桿菌病必須明確“預(yù)防為主,防治結(jié)合”的原則,在了解該病的致病原因、傳播途徑以及癥狀表現(xiàn),在生豬養(yǎng)殖過程中需要采取針對(duì)性的預(yù)防措施,才能有效降低豬李氏桿菌病的發(fā)生和傳播。
由于豬李氏桿菌病具有較強(qiáng)的傳染性,因此養(yǎng)殖期間一旦發(fā)現(xiàn)病豬,需要盡快將其隔離。同時(shí),對(duì)病豬所在的豬舍進(jìn)行全面消毒,包括地面、墻角以及槽具等。其他在同一豬舍飼養(yǎng)的豬,也要密切關(guān)注,如果表現(xiàn)出病癥也要及時(shí)用藥治療,避免疫病在養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)蔓延。對(duì)于病死豬或流產(chǎn)胎兒,均需要做無(wú)害化處理,徹底殺滅病源。哺乳期仔豬患病后,要及時(shí)與哺乳母豬分開飼養(yǎng),防止疾病傳播。
6.2.1 保證養(yǎng)殖環(huán)境干凈衛(wèi)生
由于蚊、蠅、鼠等都可以攜帶豬李氏桿菌病的病菌,因此必須做好養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)的衛(wèi)生清潔工作。夏季,豬舍內(nèi)的糞便等污物要做到1次/d清掃,至少使用清水沖刷2次/周豬舍,保證豬舍環(huán)境清潔。冬季,在做好防寒保暖工作的同時(shí),可以選擇在晴朗天氣的正午及午后,豬舍進(jìn)行晾曬、通風(fēng)。通過這些措施,既可以切斷病菌傳播途徑,又能提高生豬免疫力,能有效預(yù)防豬李氏桿菌病的發(fā)生。
6.2.2 加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)管理
在仔豬斷奶階段,極有可能因?yàn)閼?yīng)激刺激、營(yíng)養(yǎng)跟不上導(dǎo)致仔豬機(jī)體免疫力下降,這時(shí)也是豬李氏桿菌病高發(fā)期。因此,在仔豬斷奶前應(yīng)當(dāng)提前配置好適口性好的飼料,并且按照哺乳與飼喂相結(jié)合的方式,逐步讓仔豬斷奶,最大程度減少斷奶的應(yīng)激刺激。同時(shí),還可以在飼料中添加維生素等營(yíng)養(yǎng)元素,提高機(jī)體免疫力,對(duì)降低仔豬發(fā)病率也有一定效果。
6.2.3 加大宣傳力度和防疫力度
李氏桿菌病作為一種人畜共患病,一旦病豬流入市場(chǎng),也有可能導(dǎo)致人患病。為了確保公共衛(wèi)生安全,除了養(yǎng)殖場(chǎng)的相關(guān)人員要加強(qiáng)日常管理、預(yù)防該病,地方政府及畜牧獸醫(yī)站等也要采取相應(yīng)措施,例如加大宣傳力度和防疫力度,基層獸醫(yī)工作人員可以到本地的各大養(yǎng)殖場(chǎng)開展豬李氏桿菌病的防治指導(dǎo),幫助養(yǎng)殖戶熟悉豬常見疾病的診斷鑒別方法與預(yù)防治療措施。通過做好群防群控工作,最大程度降低該病的危害。
患有豬李氏桿菌病的病豬,如果能夠做到早發(fā)現(xiàn)、早治療,可以大幅度降低病死率,對(duì)減少養(yǎng)殖損失有積極作用。目前常用的藥物治療是以西藥為主,在病情得到控制后,可以配合中藥幫助病豬加快恢復(fù)。西藥方面可以選擇四環(huán)素,采用肌肉注射或靜脈滴注均可,用量為30~40 mg/(kg體重),2次/d上午、下午各1次,連續(xù)使用3 d可以見效?;蛘呤褂昧蛩徭溍顾?,用法為肌肉注射,用量為10~15 mg/(kg體重),同樣是用藥2次/d,連續(xù)5 d左右可以見效。如果病豬的發(fā)病急、病情重,可使用增效磺胺嘧啶鈉注射液進(jìn)行肌肉注射,用量為0.1 mL/(kg體重),用藥1次/d,連用4~5 d。對(duì)于有神經(jīng)病狀的豬,在使用上述藥物的基礎(chǔ)上,每日可額外注射苯巴比妥鈉,成年豬注射量為1 mL,仔豬減半。妊娠母豬發(fā)病后,可使用氨節(jié)青霉素,采用肌肉注射的方法,按照5~10 g/(kg體重)的用量聯(lián)用2~3 d,在緩解癥狀的同時(shí),還能有效排毒,避免胎兒帶毒的情況[5]。對(duì)于病情較緩或者發(fā)病較急,但是已經(jīng)使用西藥讓病情得到控制的,可以配合使用中藥進(jìn)行治療,中藥組方為金銀花10 g、山梔子10 g、野菊花8 g、鉤藤根5 g、車前草5 g,煎水灌服,或者將湯劑與飼料攪拌飼喂,連用3 d,對(duì)減緩豬李氏桿菌病的癥狀,幫助病豬恢復(fù)健康有顯著效果。
在產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整背景下,牲畜規(guī)?;B(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)得以快速發(fā)展。隨著越來(lái)越多的年輕農(nóng)民加入到生豬養(yǎng)殖隊(duì)伍中,如何做好生豬常見疾病的預(yù)防、診斷和治療,成為決定養(yǎng)殖效益的關(guān)鍵因素,對(duì)當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展也有深遠(yuǎn)影響。豬李氏桿菌病是生豬養(yǎng)殖中常見的疫病之一,同時(shí)具有人畜共患的特征,對(duì)防控工作提出了更高的要求。只有了解其傳染特性、癥狀表現(xiàn),準(zhǔn)確鑒別與仔豬水腫病、豬瘟、豬偽狂犬病的異同點(diǎn),在此基礎(chǔ)上采取行之有效的防控措施,才能將豬李氏桿菌病的發(fā)生率降至最低,切實(shí)維護(hù)養(yǎng)殖戶的效益。