唐 林 鹿愛(ài)娟王璐 肖望重 張水寒楊磊?王相

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院， 湖南 長(zhǎng)沙410007； 2.湖南省中醫(yī)藥研究院， 湖南 長(zhǎng)沙410208）

止癢潤(rùn)膚乳源于湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院皮膚科席建元教授臨床經(jīng)驗(yàn)方，由當(dāng)歸、制何首烏、生地黃、瓜蔞霜、苦參、地膚子等藥材組成，功效養(yǎng)血潤(rùn)燥、祛風(fēng)止癢，臨床用于治療血虛風(fēng)燥型濕瘡、白疕、風(fēng)瘙癢等皮膚病，歷史悠久，療效顯著，無(wú)明顯不良反應(yīng)，治愈后復(fù)發(fā)率低［1?2］，具有明顯抑制角質(zhì)形成細(xì)胞增殖，減少血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子分泌的作用［3］，但其劑型為外用湯劑，煎煮費(fèi)時(shí)，貯存不便，從而大大限制了進(jìn)一步應(yīng)用。O／W 型乳膏劑能將中藥提取液溶解于乳膏劑的水相基質(zhì)中，而且易涂布，無(wú)油膩性，藥物釋放穿透較快，易儲(chǔ)存和清除［4］，故選擇其作為止癢潤(rùn)膚乳劑型。

D?最優(yōu)混料設(shè)計(jì)法針對(duì)多因素多水平工藝合理地選擇少量實(shí)驗(yàn)點(diǎn)，快速獲得盡可能全面的處方配比，了解特征指標(biāo)與處方配比之間的因果關(guān)系，預(yù)測(cè)參數(shù)更加精確，近年來(lái)在藥劑工藝研究中廣泛應(yīng)用［5?6］。為了確定止癢潤(rùn)膚乳合理的制劑工藝參數(shù)，保證其臨床療效，本實(shí)驗(yàn)采用層次分析法?熵權(quán)法確定權(quán)重系數(shù)，D?最優(yōu)混料設(shè)計(jì)優(yōu)化該制劑成型工藝，以期為其后續(xù)研發(fā)生產(chǎn)提供依據(jù)。

1 材料

DF?101B 數(shù)顯集熱式磁力攪拌器（金壇市大地自動(dòng)化儀器廠）；RY101 電子天平（長(zhǎng)沙百思得電子科技有限公司）；SevenExcellence 多參數(shù)測(cè)試儀［梅特勒?托利多儀器（上海）有限公司］；TG16?WS 臺(tái)式高速離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司）；DZF?6020 真空干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；THR300?28 高速數(shù)顯乳化機(jī)（拓赫機(jī)電科技上海有限公司）。

硬脂酸（批號(hào)104820210901）、輕質(zhì)液狀石蠟（批號(hào)101520210801）、甘油（批號(hào)000120210801）、單雙硬脂酸甘油酯（批號(hào)105620201001）、聚山梨酯?80（批號(hào)101720210501）（湖南爾康制藥股份有限公司）；十二烷基硫酸鈉（SDS，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20210427）；白凡士林（南昌白云藥業(yè)有限公司，批號(hào)20210607）。

當(dāng)歸、制何首烏、生地黃等10 味藥材飲片均購(gòu)自湖南南國(guó)藥都有限公司，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院制劑中心張?jiān)Ｃ窠淌阼b定為正品，均符合2020 年版《中國(guó)藥典》要求。

2 方法與結(jié)果

2.1 藥液制備 稱(chēng)取處方量飲片，加水煎煮2次，第1 次加10 倍量水，浸泡1 h 后煎煮1.5 h；第2 次加8 倍量水，煎煮1 h，濾過(guò)，合并濾液，即得，濃縮至相對(duì)密度為1.15～1.20（60 ℃）。

2.2 止癢潤(rùn)膚乳制備 取油相（硬脂酸、白凡士林、輕質(zhì)液狀石蠟、薄荷腦）、水相（三乙醇胺、甘油、蒸餾水、藥液、吐溫?80）適量，分別水浴加熱至80 ℃，將水相緩慢加到油相中，邊加邊攪拌至完全乳化，冷卻至室溫，即得。

2.3 指標(biāo)評(píng)價(jià) 參考文獻(xiàn)［7］ 報(bào)道，以外觀性狀、涂展性、離心穩(wěn)定性、耐熱穩(wěn)定性為指標(biāo)，并進(jìn)行評(píng)分。其中，外觀性狀為肉眼觀察是否色澤均勻、是否細(xì)膩、是否有粗顆粒、軟硬度是否適中；涂展性為取適量樣品涂抹于手部皮膚，觀察是否能迅速涂抹均勻，油膩感是否明顯；離心穩(wěn)定性為6 000 r／min 離心20 min，觀察是否有油水分層，性狀是否改變；耐熱穩(wěn)定性為將樣品置于80 ℃烘箱中放置4 h，觀察是否有油水分層現(xiàn)象，具體見(jiàn)表1。

表1 各指標(biāo)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

2.4 單因素試驗(yàn)

2.4.1 乳化劑 在文獻(xiàn)查閱及預(yù)試驗(yàn)基礎(chǔ)上，選擇液狀石蠟2.5 g、白凡士林6.5 g、硬脂酸20 g 作為油相，甘油17.5 g、蒸餾水48 g、藥液12 g 作為水相，SDS、三乙醇胺、氫氧化鉀、單雙硬脂酸甘油酯、三乙醇胺＋吐溫?80 作為乳化劑，按“2.2”項(xiàng)下方法制備乳化劑，按“2.3”項(xiàng)下方法評(píng)價(jià)，結(jié)果見(jiàn)表2。由此可知，氫氧化鉀耐熱穩(wěn)定性較差，而將三乙醇胺＋吐溫?80 與單雙硬脂酸甘油酯混合時(shí)各指標(biāo)理想。

表2 乳化劑種類(lèi)對(duì)各指標(biāo)評(píng)分的影響（n＝3）

再分別對(duì)三乙醇胺（0.5、1.5、2.5、3.5 g）、吐溫?80（1、1.5、2、2.5 g）、單雙硬脂酸甘油酯（0、1、2、4 g）用量進(jìn)行考察，結(jié)果見(jiàn)圖1。由此可知，隨著三乙醇胺用量增加，各指標(biāo)均有所改善，但不宜超過(guò)3.5 g，否則制劑pH 過(guò)大會(huì)對(duì)皮膚存在刺激性；隨著吐溫?80 用量增加，離心穩(wěn)定性、涂展性顯著改善，在2.5 g 時(shí)最明顯；隨著單雙硬脂酸甘油酯用量增加，離心穩(wěn)定性顯著改善，但大于2 g時(shí)乳膏較硬，油膩感明顯，故以1 g 為佳。

圖1 乳化劑用量對(duì)各指標(biāo)評(píng)分的影響（n＝3）

2.4.2 油相基質(zhì) 固定三乙醇胺用量為3 g，單雙硬脂酸甘油酯用量為1 g，吐溫?80 用量為2.5 g，油相中液狀石蠟用量為2.5 g，白凡士林用量為6.5 g，以17.5 g 甘油、48 g蒸餾水、12 g 藥液為水相，對(duì)硬脂酸用量（10、20、30、40 g）進(jìn)行考察，結(jié)果見(jiàn)圖2A。由此可知，硬脂酸用量對(duì)乳膏成型性影響較大，當(dāng)超過(guò)40 g 時(shí)膏體較硬，外觀性狀、穩(wěn)定性均不符合要求，而小于10 g 時(shí)膏體耐熱穩(wěn)定性較差。

固定油相中白凡士林用量為6.5 g，硬脂酸用量為20 g，對(duì)液狀石蠟用量（2、3、4、5 g）進(jìn)行考察，結(jié)果見(jiàn)圖2B。由此可知，液狀石蠟用量對(duì)乳膏耐熱穩(wěn)定性、外觀性狀影響較大，當(dāng)大于5 g 時(shí)乳膏偏軟，而小于2 g 時(shí)乳膏較硬，涂展性、外觀性狀不符合要求。

固定油相中液狀石蠟用量為2.5 g，硬脂酸用量為20 g，對(duì)白凡士林用量（3.5、6.5、9.5、12.5 g）進(jìn)行考察，結(jié)果見(jiàn)圖2C。由此可知，白凡士林用量對(duì)乳膏涂展性、耐熱穩(wěn)定性影響較大，當(dāng)大于12.5 g 時(shí)不易涂抹，油膩感明顯，而小于3.5 g 時(shí)膏體加熱出現(xiàn)油水分離現(xiàn)象。

圖2 油相基質(zhì)用量對(duì)各指標(biāo)評(píng)分的影響（n＝3）

2.4.3 水相基質(zhì) 固定三乙醇胺用量為3 g，單雙硬脂酸甘油酯用量為1 g，吐溫?80 用量為2.5 g，以6.5 g 白凡士林、20 g 硬脂酸、2.5 g 液狀石蠟為油相。再固定水相中蒸餾水用量為48 g，藥液用量為12 g，對(duì)甘油用量（7.5、12.5、17.5、22.5 g）進(jìn)行考察；固定甘油用量為17.5 g，藥液用量為12 g，對(duì)蒸餾水用量（38、48、58、68 g）進(jìn)行考察，結(jié)果分別見(jiàn)圖3A～3B。由此可知，甘油用量對(duì)乳膏涂展性、外觀性狀影響較大，而對(duì)穩(wěn)定性無(wú)明顯影響，當(dāng)?shù)陀?.5 g 時(shí)顆粒感嚴(yán)重，涂展性油膩感明顯；當(dāng)蒸餾水用量大于68 g 時(shí)易出現(xiàn)油水分離現(xiàn)象，導(dǎo)致穩(wěn)定性變差。

2.5 載藥量篩選 固定三乙醇胺用量為3 g，單雙硬脂酸甘油酯用量為1 g，吐溫?80 用量為2.5 g，以6.5 g 白凡士林、20 g 硬脂酸、2.5 g 液狀石蠟為油相，17.5 g 甘油、48 g蒸餾水為水相，分別加入5、12、15、20 g 藥液后進(jìn)行考察，結(jié)果見(jiàn)圖3C。由此可知，載藥量為12 g 時(shí)各指標(biāo)評(píng)分均較高。

圖3 水相基質(zhì)用量、載藥量對(duì)各指標(biāo)評(píng)分的影響（n＝3）

2.6 D?最優(yōu)混料設(shè)計(jì)

2.6.1 設(shè)計(jì)方案 在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，得到各主要基質(zhì)用量范圍，分別為液狀石蠟（A）3～5 g，硬脂酸（B）10～30 g，白凡士林（C）4～10 g，甘油（D）7～17 g，三乙醇胺（E）1～3 g，水與藥液（F）50～70 g，載藥量為水與藥液總量的20%，固定基質(zhì)總量為105 g，計(jì)算綜合評(píng)分，公式為綜合評(píng)分＝0.11W＋0.11X＋0.49Y＋0.29Z，其中W、X、Y、Z分別為外觀性狀、涂展性、離心穩(wěn)定性、耐熱穩(wěn)定性的標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)｛ ［（實(shí)測(cè)值－最小值）／（最大值－最小值）］ ×100｝，再采用Design?Expert 13.0 軟件進(jìn)行D?最優(yōu)混料設(shè)計(jì)，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

2.6.2 指標(biāo)權(quán)重確立

2.6.2.1 層次分析法 參考文獻(xiàn)［8］ 報(bào)道，將離心穩(wěn)定性、耐熱穩(wěn)定性、外觀性狀、涂展性這4 個(gè)指標(biāo)分為3 個(gè)層次，并確定優(yōu)先順序?yàn)殡x心穩(wěn)定性＞耐熱穩(wěn)定性＞外觀性狀＝涂展性，構(gòu)建成對(duì)比較的判斷優(yōu)先矩陣（表4）并進(jìn)行歸一化處理，測(cè)得權(quán)重系數(shù)（）分 別0.48、0.30、0.11、0.11，最大特征根（λ）為4.02，一致性指標(biāo)（CI）為0.006 7，由矩陣階數(shù)為4 得到隨機(jī)一致性指標(biāo)（RI）為0.9，一致性比率（CR）為0.007 4（＜0.1），表明矩陣通過(guò)一致性檢驗(yàn)，權(quán)重系數(shù)有效。

表4 各指標(biāo)成對(duì)比較的判斷優(yōu)先矩陣

2.6.2.2 熵權(quán)法 參考文獻(xiàn)［8］ 報(bào)道，現(xiàn)有m個(gè)樣本，n個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)，建立原始數(shù)據(jù)矩陣（X）＝（Xij）m×n，根據(jù)公式1 將原始矩陣轉(zhuǎn)換為概率矩陣（P），公式2 計(jì)算信息熵（Hj），公式3 計(jì)算第i項(xiàng)指標(biāo)的權(quán)重系數(shù)（）。

2.6.2.3 層次分析法?熵權(quán)法 參考文獻(xiàn)［8］ 報(bào)道，分別采用層次分析法、熵權(quán)法計(jì)算相關(guān)權(quán)重系數(shù)，按公式4 計(jì)算復(fù)合權(quán)重（Wj），結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 各指標(biāo)復(fù)合權(quán)重

2.6.3 模型擬合 采用Design?Expert 13.0 軟件對(duì)表3 數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，得方程為綜合評(píng)分＝647.60A－5.19B－61.77C－5.34D＋293.89E－0.86F－6.53AB－8.56AE－6.57AF＋0.82BC＋0.14BD－ 3.11BE＋0.12BF＋0.53CD－ 0.25CE＋0.70CF－2.73DE＋0.12DF－2.66EF（R2＝0.98），方差分析見(jiàn)表6。由此可知，模型具有高度顯著性（P＜0.01）；失擬項(xiàng)P＞0.05，表明模型擬合度良好，可用于預(yù)測(cè)。

表6 方差分析

2.7 驗(yàn)證試驗(yàn) 以綜合評(píng)分最高值為優(yōu)化目標(biāo)，采用Design?Expert 13.0 軟件優(yōu)化成型工藝，得最優(yōu)工藝為液狀石蠟用量3 g，硬脂酸用量14 g，白凡士林用量5 g，三乙醇胺用量3 g，甘油用量17 g，水與藥液總量63 g，綜合評(píng)分為101.13 分。按上述優(yōu)化工藝進(jìn)行3 批驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表7，可知該工藝合理、穩(wěn)定、可行。

表7 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果（n＝3）

3 討論

D?最優(yōu)混料設(shè)計(jì)考察因素水平范圍的選擇對(duì)順利獲得最優(yōu)試驗(yàn)方案（或工藝條件）具有重要意義，一般需先通過(guò)單因素試驗(yàn)對(duì)考察因素及水平進(jìn)行篩選，得到具有顯著影響的因素及合理的因素水平范圍［9］。本實(shí)驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)對(duì)影響乳膏劑成型的乳化劑、油相基質(zhì)、水相基質(zhì)進(jìn)行考察，從而篩選出對(duì)止癢潤(rùn)膚乳影響較大的基質(zhì)及用量，其中輔助乳化劑吐溫?80、單雙硬脂酸甘油酯因其用量較小，可通過(guò)該方法直接確定其用量，故未納入D?最優(yōu)混料設(shè)計(jì)。

乳膏劑的評(píng)價(jià)指標(biāo)需要結(jié)合外觀性狀、涂展性、耐寒穩(wěn)定性、耐熱穩(wěn)定性等進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)［10］，課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，止癢潤(rùn)膚乳耐寒穩(wěn)定性好，不受各因素水平的影響，因此本實(shí)驗(yàn)未將其列入評(píng)價(jià)指標(biāo)，并且由于涉及多個(gè)指標(biāo)，故確定權(quán)重系數(shù)尤為重要。目前，計(jì)算權(quán)重系數(shù)的方法主要包括客觀賦權(quán)法、主觀賦權(quán)法，前者中的熵權(quán)法基于對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的充分分析，減少了主觀因素對(duì)結(jié)果的干擾，但忽略了評(píng)價(jià)指標(biāo)的輕重關(guān)系［11?12］；后者中的層次分析法可避免冗長(zhǎng)的信息交流和反饋修正過(guò)程，實(shí)現(xiàn)將復(fù)雜的問(wèn)題系統(tǒng)化、層次化，但具有一定的主觀性［13?14］。本實(shí)驗(yàn)將層次分析法與熵權(quán)法聯(lián)合使用，可實(shí)現(xiàn)兩者各自?xún)?yōu)點(diǎn)的最大化，增強(qiáng)總體評(píng)價(jià)結(jié)果的科學(xué)性和合理性，可為其他中藥復(fù)方制劑處方篩選提供參考。