范亞楠 王維 陳靜 周迎春 鄭舉 王立

（安徽省動物疫病預(yù)防與控制中心，安徽合肥 230091）

動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室包括畜牧獸醫(yī)系統(tǒng)、高等院校、科研院所、海關(guān)、林草、獸用生物制品生產(chǎn)企業(yè)、大型養(yǎng)殖企業(yè)、動物診療機(jī)構(gòu)等單位相關(guān)實(shí)驗(yàn)室。其實(shí)驗(yàn)活動涉及動物病原微生物科學(xué)研究、動物疫病檢測與監(jiān)測、疫苗研發(fā)、疫病診斷等。動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室及其實(shí)驗(yàn)活動的生物安全監(jiān)督工作由國務(wù)院獸醫(yī)主管部門主管，其生物安全管理的關(guān)鍵是做好病原微生物控制，從而避免實(shí)驗(yàn)室獲得性感染及環(huán)境污染。

2003 年SARS 病毒實(shí)驗(yàn)室外泄致人感染事件及2011 年東北農(nóng)業(yè)大學(xué)在解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)課上剖殺未檢疫羊?qū)е?8 名師生感染布魯氏菌事件等生物安全事故的發(fā)生，足以表明加強(qiáng)動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理，對動物疫病防控及人畜共患病防控至關(guān)重要[1]。2021 年9 月，中共中央政治局就我國生物安全建設(shè)進(jìn)行第三十三次集體學(xué)習(xí)，習(xí)近平總書記強(qiáng)調(diào)要加強(qiáng)生物安全風(fēng)險(xiǎn)防控，提高國家生物安全治理體系和治理能力，在政治層面上提高了對生物安全的重視。此外，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部高度重視動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理，自2016 年起開始組織開展全國動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專項(xiàng)檢查。法律制度層面，2021 年《中華人民共和國生物安全法》 及《中華人民共和國動物防疫法》 的實(shí)施修訂，從法律法規(guī)上提高了對動物病原微生物管理的重視。國家全方位重視病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全，在動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理中善于發(fā)現(xiàn)問題，細(xì)化各項(xiàng)管理措施，落實(shí)各項(xiàng)管理制度，提升相關(guān)人員生物安全政治意識和法律意識，可以有效防范化解實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)。

1 目前動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理存在的問題

我國生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)起步較晚，20 世紀(jì)中國生物安全實(shí)驗(yàn)室沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，生物安全實(shí)驗(yàn)活動也沒有統(tǒng)一的管理。自2004 年發(fā)布國家生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)規(guī)劃，2008 年發(fā)布并施行《動物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動生物安全要求細(xì)則》，動物病原微生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)穩(wěn)步推進(jìn)，但仍存在些許問題[2-4]。在生物安全管理制度體系方面：生物安全管理體系不完善，更新不及時(shí)，對一些新標(biāo)準(zhǔn)、新規(guī)范、新要求未及時(shí)納入生物安全管理體系文件中，管理制度不能覆蓋實(shí)驗(yàn)室各方面和環(huán)節(jié)，有的實(shí)驗(yàn)室沒有制定生物安全應(yīng)急預(yù)案等。生物安全警示標(biāo)識不完整、不規(guī)范，缺少儀器設(shè)備定期檢測與維護(hù)記錄等。在生物安全活動管理和從業(yè)人員管理方面：存在新錄用人員培訓(xùn)不足，實(shí)驗(yàn)室生物安全意識不足，實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員對相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、操作規(guī)范不夠熟悉，缺乏定期培訓(xùn)，生物安全應(yīng)急演練不足等。實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理不規(guī)范，記錄不完整等。多種問題的存在對我國動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理提出更大的挑戰(zhàn)，需要更加細(xì)致規(guī)范的管理要求。

2 健全動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室管理制度

2.1 確立實(shí)驗(yàn)室生物安全管理責(zé)任制

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立層級管理責(zé)任制，做到任務(wù)清、責(zé)任明。明確實(shí)驗(yàn)室生物安全管理第一責(zé)任人，對實(shí)驗(yàn)室生物安全負(fù)主要責(zé)任。各個(gè)崗位應(yīng)配有生物安全管理負(fù)責(zé)人，統(tǒng)籌制定實(shí)驗(yàn)室生物安全管理制度，做好日常實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備檢查維護(hù)及實(shí)驗(yàn)活動安全監(jiān)督。定期安排實(shí)驗(yàn)室生物安全自查，發(fā)現(xiàn)或發(fā)生任何異常情況，立即通知生物安全負(fù)責(zé)人，采取有效的應(yīng)急措施。

2.2 實(shí)驗(yàn)室安全準(zhǔn)入

在動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室開展的實(shí)驗(yàn)，除面臨常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)因素外，還要面對看不見、摸不著的生物安全風(fēng)險(xiǎn)，更要強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室安全準(zhǔn)入制度的執(zhí)行，將有關(guān)要求落地、落實(shí)、落細(xì)，確保動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全[5]。動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室為生物安全嚴(yán)格控制區(qū)域，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)有門禁系統(tǒng)，嚴(yán)禁外來人員、動物進(jìn)入，實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室進(jìn)出程序，必須配備個(gè)體防護(hù)用品（防護(hù)帽、護(hù)目鏡、口罩、工作服、手套等）。高等級動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格控制進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室人員數(shù)量，嚴(yán)禁將門禁密碼透露給他人。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測時(shí)不應(yīng)受到無關(guān)人員打擾。

2.3 做好儀器設(shè)備和生物材料保存管理

實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備、容器、耗材、試劑等應(yīng)粘貼有相應(yīng)的生物安全標(biāo)識，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備專用和有警示標(biāo)識的危險(xiǎn)廢棄物容器，有存放針頭等尖銳廢棄物的利器盒。實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備應(yīng)粘貼操作步驟，如在運(yùn)行中出現(xiàn)異常狀況，應(yīng)立即停止使用，并及時(shí)向儀器設(shè)備保管員匯報(bào)，盡快聯(lián)系維修。實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備應(yīng)做好用后消毒及使用登記，定期做好儀器設(shè)備檢查維護(hù)。

動物樣本中攜帶的病原微生物具有生物安全風(fēng)險(xiǎn)，動物病原微生物相關(guān)材料的管理和儲存至關(guān)重要，其存放容器或包裝材料應(yīng)具備密封性、防水性、耐磨損、耐高(低) 溫、耐高壓等特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備相應(yīng)的檔案記錄本或者登記系統(tǒng)，并由專人負(fù)責(zé)，做好樣本接收、登記和存放，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備低溫、冷凍樣品儲存設(shè)備，定期對存儲的菌（毒）種和樣本進(jìn)行整理和檢查，確保存儲安全。

2.4 做好個(gè)人防護(hù)

動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室人員防護(hù)要根據(jù)生物安全級別進(jìn)行，穿著相應(yīng)工作服、佩戴合適的手套、口罩等，危險(xiǎn)級別高的佩戴相應(yīng)的護(hù)目鏡和面罩等。選擇和使用合適的個(gè)人防護(hù)設(shè)備是避免動物病原微生物感染的關(guān)鍵。手套摘除前要先消毒，工作結(jié)束后要洗手，嚴(yán)禁將工作服帶出實(shí)驗(yàn)區(qū)，在實(shí)驗(yàn)工作區(qū)禁止飲食、吸煙、化妝、處理隱形眼鏡等。

2.5 做好實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)評估

風(fēng)險(xiǎn)評估是評估風(fēng)險(xiǎn)大小及風(fēng)險(xiǎn)是否可以接受的全過程，包括風(fēng)險(xiǎn)識別、風(fēng)險(xiǎn)分析和風(fēng)險(xiǎn)控制[6]。動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室需要對實(shí)驗(yàn)室所有的實(shí)驗(yàn)活動進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)識別和分析評估，盡可能全面地找出影響實(shí)驗(yàn)室安全目標(biāo)實(shí)現(xiàn)的因素，評估影響因素的危害范圍、原因及后果，從而更好地確保實(shí)驗(yàn)過程的生物安全。動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)來源大致分為實(shí)驗(yàn)操作程序（操作步驟中潛在的暴露風(fēng)險(xiǎn)）、生物因子（實(shí)驗(yàn)活動中生物材料的危險(xiǎn)級別、感染途徑、傳播模式、穩(wěn)定性及預(yù)防控制措施等）、防護(hù)屏障（實(shí)驗(yàn)室設(shè)施結(jié)構(gòu)屏障、防護(hù)設(shè)備、人員防護(hù)裝備等）、人員管理（實(shí)驗(yàn)室生物安全意識、實(shí)驗(yàn)技能等）、運(yùn)輸管理（樣品的接送與包裝儲存）、信息管理（樣品保存、實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)安全等）等。風(fēng)險(xiǎn)評估的基本流程包括明確情況、明確風(fēng)險(xiǎn)、描述風(fēng)險(xiǎn)、評估風(fēng)險(xiǎn)、規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)5 個(gè)步驟，即明確實(shí)驗(yàn)活動內(nèi)容及實(shí)驗(yàn)室工作中哪些地方可能出現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)，描述風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生的可能性和可能引發(fā)的后果，進(jìn)行生物安全評估，確定風(fēng)險(xiǎn)是否可以接受，對不可接受的風(fēng)險(xiǎn)實(shí)施風(fēng)險(xiǎn)緩解措施，以盡可能確保所有實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)可以接受[6-7]。

2.6 制定動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急預(yù)案

動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急預(yù)案的編制應(yīng)堅(jiān)持預(yù)防為主，并具備科學(xué)合理性、針對性和時(shí)效性，每年定時(shí)開展應(yīng)急預(yù)警演練。日常實(shí)驗(yàn)工作中要對各種可能發(fā)生的實(shí)驗(yàn)室生物安全事件進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析，對容易發(fā)生和可以預(yù)測的實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)進(jìn)行預(yù)警，并制定針對性科學(xué)可行的解決方案，加強(qiáng)日常應(yīng)急準(zhǔn)備，做好應(yīng)急預(yù)警演練。預(yù)警信息包括實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)的類別、預(yù)警級別、警示事項(xiàng)、可能發(fā)生時(shí)間、影響范圍、可行的應(yīng)對措施等。發(fā)生病原微生物感染、污染等事件時(shí)，應(yīng)及時(shí)采取封鎖隔離、流調(diào)分析、消毒滅源、觀察治療等控制措施。

3 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)活動管理

3.1 規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作

實(shí)驗(yàn)工作應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)規(guī)章制度和標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，避免操作過程中造成污染，并做好實(shí)驗(yàn)記錄和實(shí)驗(yàn)材料的存放。

3.2 實(shí)驗(yàn)室廢棄物分類及處理

實(shí)驗(yàn)室廢棄物分類：實(shí)驗(yàn)工作中會產(chǎn)生大量廢棄物，大概可歸類為感染性廢棄物、病理性廢棄物、損傷性廢棄物和化學(xué)或藥物性廢棄物。感染性廢棄物包括接觸過或潛在接觸過的實(shí)驗(yàn)動物、實(shí)驗(yàn)標(biāo)本和樣本，用過的一次性實(shí)驗(yàn)用品及實(shí)驗(yàn)器械等攜帶或可能攜病原微生物的實(shí)驗(yàn)廢棄物；病理性廢棄物包括細(xì)胞、單克隆抗體、質(zhì)粒、臨床組織樣本、動物組織及尸體；損傷性廢棄物包括針頭、解剖及手術(shù)器械，實(shí)驗(yàn)相關(guān)玻璃器具等能刺傷或割傷人體的廢棄的實(shí)驗(yàn)利（銳）器；化學(xué)或藥物性廢棄物包括過期、淘汰、變質(zhì)或者被污染的診斷試劑、疫苗和血液制品等。

實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理：實(shí)驗(yàn)活動結(jié)束后及時(shí)分類收集實(shí)驗(yàn)廢棄物，廢棄物放置于防滲專用包裝容器（袋）或者利器盒內(nèi)。感染性實(shí)驗(yàn)廢棄物應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌或放入消毒劑中浸泡24h，不同類型的廢棄物高壓滅菌程度不同，選擇的高壓滅菌程序也不一樣，高壓滅菌前要裝入專用的高壓滅菌袋，扎口但不密封，有研究表明，高壓袋的密封會影響高壓滅菌的效果[8]。高壓滅菌效果檢驗(yàn)合格后，方可交由當(dāng)?shù)赜匈Y質(zhì)的醫(yī)療廢物處理公司處理。實(shí)驗(yàn)室無法處理的廢棄物，按照規(guī)定交由特定的處理部門進(jìn)行處理。

4 提升實(shí)驗(yàn)室從業(yè)人員生物安全意識和技能

4.1 做好實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)

動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)做好崗前培訓(xùn)及日常培訓(xùn)，采取理論與實(shí)踐相結(jié)合的培訓(xùn)方式，做到熟悉生物安全相關(guān)法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)及本實(shí)驗(yàn)室生物安全管理制度，掌握實(shí)驗(yàn)室安全原理、生物安全操作和防護(hù)技能，熟悉掌握專業(yè)相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)，掌握實(shí)驗(yàn)室裝備、技術(shù)參數(shù)和操作規(guī)范，了解應(yīng)急事件的處置流程、熟悉本實(shí)驗(yàn)室的危險(xiǎn)源，采取正確應(yīng)對措施[5]。

4.2 強(qiáng)化動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室監(jiān)督檢查和備案管理

強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室監(jiān)督檢查，旨在從管理層面提升實(shí)驗(yàn)室工作者的生物安全意識和實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)。動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)開展生物安全自查與外部檢查相結(jié)合，對實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行情況進(jìn)行監(jiān)督檢查，從實(shí)驗(yàn)室軟件、硬件、人員管理、廢棄物處理、應(yīng)急預(yù)案演練情況等進(jìn)行全面監(jiān)督檢查，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室規(guī)范管理，防止生物安全事故發(fā)生。

完善實(shí)驗(yàn)室備案管理工作：各地要依照相關(guān)法律法規(guī)要求，做好新建、改建或者擴(kuò)建一級、二級實(shí)驗(yàn)室和通過實(shí)驗(yàn)室國家認(rèn)可的三級、四級實(shí)驗(yàn)室在內(nèi)的動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室的備案管理。各地結(jié)合實(shí)際情況，探索實(shí)驗(yàn)室備案管理網(wǎng)絡(luò)模式，使實(shí)驗(yàn)室備案信息系統(tǒng)化、規(guī)范化。

5 小結(jié)

目前新發(fā)動物疫病、境外輸入動物疫病時(shí)有出現(xiàn)，對動物疫病科研、監(jiān)測、流行病學(xué)調(diào)查等要求更高、任務(wù)更重，做好動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全工作至關(guān)重要，需要上下級通力合作，完善各項(xiàng)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、文件，強(qiáng)化生物安全政治意識和法律意識，建立健全科學(xué)規(guī)范的管理措施，落實(shí)管理責(zé)任。