徐 燕 ?？》?陳利軍 王世強(qiáng) 董忠民,2 王喆之

（1西北瀕危藥材資源開(kāi)發(fā)國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室，710119，中國(guó)陜西西安；2圣瑪麗大學(xué)生物系，B3H3C3，加拿大新斯科舍哈利法克斯）

蒼術(shù)為菊科多年生植物，分為茅蒼術(shù)[Atractylodes lancea(Thunb.)DC.]和北蒼術(shù)[Atraetylodes chinensis(DC.)Koidz.]，主要分布于我國(guó)東北、華北及安徽、江蘇、河南、陜西和湖北等地。蒼術(shù)的干燥根莖可入藥，具有燥濕健脾和祛風(fēng)散寒的功效，臨床上用于治療脘腹脹滿、濕阻中焦、風(fēng)寒感冒、風(fēng)濕痹痛和眼目昏澀等癥。多地地方植物志對(duì)其均有收錄，《中華人民共和國(guó)藥典》[1]也將其收入書中。

隨著自然環(huán)境的破環(huán)，野生蒼術(shù)資源越來(lái)越少，人工種植蒼術(shù)成為發(fā)展趨勢(shì)[2]。而目前人工種植蒼術(shù)仍存在一定的技術(shù)問(wèn)題。在獲得成熟的根莖入藥之前，蒼術(shù)需要較長(zhǎng)的生長(zhǎng)年限，種植過(guò)程中病蟲(chóng)害頻發(fā)和藥材質(zhì)量下降已成為影響蒼術(shù)人工種植的主要問(wèn)題。研究[3]發(fā)現(xiàn)，隨著蒼術(shù)種植年限的增加，病害逐漸增多，影響產(chǎn)量和質(zhì)量。已有研究[4]表明，長(zhǎng)期種植同一作物會(huì)改變微生物的群落結(jié)構(gòu)以及土壤理化性質(zhì)，使得土壤傳染性病蟲(chóng)害加重，出現(xiàn)藥用植物化感自毒作用等現(xiàn)象。土壤微生物能夠分解土壤中的有機(jī)質(zhì)，釋放各種營(yíng)養(yǎng)元素，從而給作物提供較好的土壤環(huán)境，通常土壤質(zhì)量的好壞可由土壤微生物的數(shù)量、功能和結(jié)構(gòu)來(lái)反映，土壤微生物的變化也揭示了土壤質(zhì)量的變化。蒼術(shù)栽培多年后病害通常會(huì)增加，但病害菌的來(lái)源尚不清楚。據(jù)報(bào)道[5]，蒼術(shù)的一些病害是由病害孢子在入冬時(shí)埋藏于土壤，第2年入侵植株從而引發(fā)病害，比如蒼術(shù)葉斑病。

微生物數(shù)量龐大，結(jié)構(gòu)復(fù)雜多樣，在傳統(tǒng)的土壤微生物研究方法中，較常用到的是平板培養(yǎng)法、生物化學(xué)方法、生物標(biāo)記法和分子生物學(xué)方法[6-7]。但因鑒定出的微生物種類不全且操作復(fù)雜，以上研究方法并不能很好地對(duì)微生物進(jìn)行研究。相較于傳統(tǒng)的研究方法，高通量測(cè)序因具有高覆蓋度、高靈敏度和高準(zhǔn)確性的特點(diǎn)而在各領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用[8]。利用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)栽培3年后的蒼術(shù)根際土壤微生物進(jìn)行研究，初步確定蒼術(shù)種植前后根際土壤微生物的變化情況，探討蒼術(shù)根際土壤微生物的變化與蒼術(shù)病害間的關(guān)系，為種植中的病害頻發(fā)問(wèn)題的解決提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

于2019年8月在陜西省柞水縣下梁鎮(zhèn)北蒼術(shù)基地（109°10'52.57"E，33°39'52.704"N）采集試驗(yàn)材料?；啬昃邓?42mm，年日照時(shí)數(shù)1860.2h，采集地人工起壟，排水性能良好，土壤濕度適中，田間管理主要是定期進(jìn)行人工除草，在7-8月高濕高溫季節(jié)，基地的蒼術(shù)時(shí)有病害發(fā)生。土壤材料為同一地塊內(nèi)以“S”形方法分別采集5份土壤（深10～30cm）進(jìn)行混合，裝入無(wú)菌自封袋中，低溫避光條件下帶回實(shí)驗(yàn)室。種植蒼術(shù)3年的根際土壤標(biāo)記為ZX3，未種植土壤標(biāo)記為ZXCK，每個(gè)處理組進(jìn)行3次生物學(xué)重復(fù)，ZX3.1、ZX3.2、ZX3.3為樣品 ZX3的 3個(gè)重復(fù)，ZXCK1.1、ZXCK1.2、ZXCK1.3為樣品ZXCK的3個(gè)重復(fù)，所有土壤過(guò)2mm篩后保存于-80℃冰箱備用。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 土壤基因組DNA的提取和純化 采用天根生化科技（北京）有限公司的土壤基因組DNA提取試劑盒，參照說(shuō)明書提取土壤微生物的DNA。使用天根生化科技（北京）有限公司的DNA回收試劑盒對(duì)電泳產(chǎn)物（25V，8h）進(jìn)行回收。使用Nordrop 2000測(cè)定DNA濃度，OD260/OD280值應(yīng)在1.7～1.9，檢測(cè)合格后于-20℃保存。

1.2.2 PCR擴(kuò)增 取適量各樣品DNA，然后稀釋至1ng/μL，并以此為模板，使用帶Barcode的特異引物擴(kuò)增rRNA和ITS rRNA的基因序列。16SV4區(qū)引物為515F-806R，ITS1區(qū)引物為ITS1F-ITS2，ITS2區(qū)引物為ITS2-3F-ITS2-4R。

PCR反應(yīng)體系為 30μL：15μL Mix，2μL引物，10μL DNA，補(bǔ)ddH2O 至30μL。PCR 程序：98℃預(yù)變性1min；98℃變性10s，50℃退火30s，72℃延伸30s，共30個(gè)循環(huán)；最后72°C保持5min。

對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化并使用2%濃度的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測(cè)，剪切回收目標(biāo)條帶。

1.2.3 文庫(kù)構(gòu)建與測(cè)序 使用賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司的Ion Plus Fragment Library Kit 48 rxns建庫(kù)試劑盒進(jìn)行文庫(kù)的構(gòu)建，使用賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司的Ion S5TMXL進(jìn)行上機(jī)測(cè)序。16S與ITS區(qū)域擴(kuò)增子測(cè)序工作在北京諾禾致源科技股份有限公司完成。

1.3 數(shù)據(jù)處理

測(cè)序數(shù)據(jù)處理：首先使用Cutadapt[9]對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行低質(zhì)量部分剪切，再根據(jù)Barcode從得到的數(shù)據(jù)中拆分出各樣品數(shù)據(jù)，截去Barcode和引物序列初步質(zhì)控得到原始數(shù)據(jù)（raw reads），對(duì)上述數(shù)據(jù)進(jìn)行去除嵌合體序列的處理，數(shù)據(jù)序列通過(guò)https://github.com/torognes/vsearch/[10]與物種注釋數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)檢測(cè)嵌合體序列，并最終去除其中的嵌合體序列，得到最終的有效數(shù)據(jù)（clean reads）。

OTU聚類和物種注釋：使用Uparse軟件[11]對(duì)所有樣品的全部Clean read進(jìn)行聚類，以＞97%的一致性（identity）系數(shù)將序列聚類成為OTU，同時(shí)選取OTU的代表性序列，依據(jù)其算法原則，篩選OTU中出現(xiàn)頻數(shù)最高的序列作為OTU的代表序列。再對(duì)OTU序列進(jìn)行物種注釋，用Mothur方法與SILVA132[12]的SSUrRNA數(shù)據(jù)庫(kù)[13]進(jìn)行物種注釋分析（設(shè)定閾值為0.8～1.0），獲得分類學(xué)信息，并分別在各分類水平上統(tǒng)計(jì)各樣本的群落組成。使用MUSCLE軟件[14]（Version 3.8.31）進(jìn)行多序列比對(duì)，再以各樣品中數(shù)據(jù)量最少的為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行均一化處理，用于后續(xù)樣本的多樣性分析（Alpha和Beta）。

使用Qiime軟件（Version 1.9.1）計(jì)算香農(nóng)指數(shù)（Shannon），使用R軟件（Version 2.15.3）進(jìn)行Alpha多樣性指數(shù)組間差異分析，分別進(jìn)行有參數(shù)檢驗(yàn)和非參數(shù)檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌及真菌的OTU變化

稀釋曲線用于檢測(cè)測(cè)序量是否充足，圖1顯示了樣品ZX3和ZXCK的3個(gè)重復(fù)樣品的細(xì)菌和真菌稀釋曲線。以抽取數(shù)據(jù)量序列數(shù)目為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的細(xì)菌和真菌物種數(shù)OTU為縱坐標(biāo)構(gòu)建曲線。隨著測(cè)序數(shù)目的增加，曲線趨于平坦，說(shuō)明增加更多的測(cè)序量只會(huì)出現(xiàn)少量的新物種（OTU）；隨著蒼術(shù)根際土壤樣本細(xì)菌和真菌序列數(shù)目的增多，稀釋曲線逐漸呈現(xiàn)平緩的趨勢(shì)，測(cè)序結(jié)果已基本覆蓋到樣品中所有的物種信息。

圖1 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌及真菌的稀釋曲線Fig.1 The dilution curves of bacteria and fungi in soil before and after planting A.lancea

韋恩圖可以直觀地體現(xiàn)2個(gè)樣本土壤細(xì)菌群落OTU組成的差異性及重疊情況，共有的OTU越多，說(shuō)明二者的相似性越大。從圖2a可知，ZX3獨(dú)有的OTU數(shù)量為765個(gè)，ZXCK獨(dú)有的數(shù)量為950個(gè)，樣本ZX3和ZXCK共有的數(shù)目為2528個(gè)，共有的OTU占據(jù)總量的59.58%。從圖2b可知，ZX3獨(dú)有的OTU為1050個(gè)，ZXCK獨(dú)有的為912個(gè)，樣本ZX3和ZXCK共有的數(shù)目為1185個(gè)，共有的OTU占據(jù)總量的37.65%。從連作后樣本ZX3和ZXCK中細(xì)菌及真菌共有的OTU可知，連作后細(xì)菌和真菌的結(jié)構(gòu)均發(fā)生了變化，且真菌的變化較細(xì)菌更大。

圖2 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌及真菌的韋恩圖Fig.2 The venn diagrams of bacteria and fungi before and after planting A.lancea

2.2 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌及真菌的Alpha多樣性分析

Alpha多樣性可反映微生物群落的豐度和多樣性。從表1可知，細(xì)菌多樣性中試驗(yàn)組ZX3的Chao1指數(shù)為2103.02，Ace指數(shù)為2135.13，均比ZXCK低；ZX3的Shannon和辛普森指數(shù)均比ZXCK低。真菌多樣性指數(shù)顯示，ZX3組的Chao1和Ace指數(shù)比ZXCK組低，說(shuō)明真菌群落豐富度ZX3組較低，連作后真菌的豐富度降低，而ZX3組的Shannon和辛普森指數(shù)比ZXCK組高，說(shuō)明ZX3組真菌群落多樣性比ZXCK組高。連作后細(xì)菌群落多樣性和豐富度下降，真菌群落多樣性下降、豐富度上升，且細(xì)菌較真菌具有更高的穩(wěn)定性。

表1 細(xì)菌和真菌的Alpha多樣性指數(shù)表Table 1 The diversity index of bacteria and fungi

2.3 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌及真菌門水平的相對(duì)豐度分析

對(duì)細(xì)菌的物種豐度在門分類水平上進(jìn)行了分析，圖3顯示了細(xì)菌物種相對(duì)豐度排名前10的物種，分別為變形菌門（Proteobacteria）、放線菌門（Actinobacteria）、酸桿菌門（Acidobacteria）、芽單胞菌門（Gemmatimonadetes）、綠彎菌門（Chloroflexi）、擬桿菌門（Bacteroidetes）、疣微菌門（Verrucomicrobia）、硬壁菌門（Firmicutes）、奇古菌門（Thaumarchaeota）和匿桿菌門（Latescibacteri）。其中變形菌門在ZX3和ZXCK組中的相對(duì)豐度分別為38.139%和38.715%；放線菌門在ZX3和ZXCK組中的相對(duì)豐度分別為18.020%和21.085%；酸桿菌門在ZX3和ZXCK組中的相對(duì)豐度分別為20.196%和22.334%；ZX3和ZXCK組相比，變形菌門和放線菌門的豐度下降，而酸桿菌門的相對(duì)豐度上升。

圖3 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌物種門分布Fig.3 Distribution of soil bacteria phyla before and after planting A.lancea

在門分類水平上對(duì)真菌的物種豐度進(jìn)行分析，圖4顯示細(xì)菌物種相對(duì)豐度排名前10的物種，分別為子囊菌門（Ascomycota）、被孢霉門（Mortierellomycota）、擔(dān)子菌門（Basidiomycota）、毛霉亞門（Mucoromycota）、壺菌門（Chytridiomycota）、捕蟲(chóng)霉門（Zoopagomycota）、羅茲菌門（Rozellomycota）、球囊菌門（Glomeromycota）、隱孢子菌（Aphelidiomycota）和新美鞭菌門（Neocallimastigomycota）。子囊菌門在ZX3和ZXCK組中的相對(duì)豐度分別為29.602%和41.530%；被孢霉門在ZX3和ZXCK組中的相對(duì)豐度分別為37.170%和21.669%；擔(dān)子菌門在ZX3和ZXCK組中的相對(duì)豐度分別為2.704%和18.893%；與ZXCK組相比，ZX3組中子囊菌門和擔(dān)子菌門的相對(duì)豐度下降，被孢霉門相對(duì)豐度上升。三者的相對(duì)豐度在ZX3和ZXCK組中差異較大。

圖4 種植蒼術(shù)前后土壤真菌物種門分布Fig.4 Distribution of soil fungal phyla before and after planting A.lancea

2.4 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌及真菌屬水平的差異物種分析

細(xì)菌物種差異分析（圖5）顯示，慢生根瘤菌屬（Bradyrhizobium）和節(jié)桿菌屬（Arthrobacter）在2組樣品中物種差異最為顯著，在ZX3組中，其中慢生根瘤菌屬具有非常顯著的差異。節(jié)桿菌屬在2組樣品中有差異，但沒(méi)達(dá)顯著性。

圖5 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌物種差異分析Fig.5 Analysis of different species of soil bacteria before and after planting A.lancea

如圖6所示，Dactylonectria、曲霉屬（Aspergillus）、腐質(zhì)霉屬（Humicola）和Striaticonidium在2組樣品中均具有顯著性差異，其中Dactylonectria和Striaticonidium具有極顯著差異。

圖6 種植蒼術(shù)前后土壤真菌差異物種分析Fig.6 Analysis of different species of soil fungi before and after planting A.lancea

選擇ZX3和ZXCK組中細(xì)菌豐度前10的細(xì)菌從屬水平上進(jìn)行分析，如圖7所示，這10個(gè)屬的細(xì)菌總豐度占所有檢測(cè)到的屬水平的細(xì)菌物種的73.2%和76.2%，涵蓋了大部分的物種。由圖7可知，鞘氨醇單胞菌屬（Sphingomonas）、念珠菌屬（Solibacter）、羅丹桿菌屬（Rhodanobacter）、桿菌屬（Bryobacter）和Haliangium的豐富度在ZX3組中有下降趨勢(shì)，Burkholderiaceae、節(jié)桿菌屬（Arthrobacter）、γ-變形菌（Gammaproteobacteria）、慢生根瘤菌屬（Bradyrhizobium）和鏈霉菌屬（Streptomyces）的豐度有所增加。其中鞘氨醇單胞菌屬在ZX3和ZXCK組所占的比例分別為4.6%和5.7%，Burkholderiaceae為6.3%和1.0%，羅丹桿菌屬為2.1%和3.0%，節(jié)桿菌屬為4.5%和1.7%。4個(gè)屬在2組樣本間的差異明顯。

圖7 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌優(yōu)勢(shì)屬分析Fig.7Analysis of dominant genes of soil bacteria before and after planting A.lancea

根據(jù)細(xì)菌優(yōu)勢(shì)屬聚類熱圖（圖8）可知，同一樣品中不同組的物種存在一定差異，但ZX3和ZXCK組間差異更為明顯，其中鏈霉菌屬的豐度在樣品ZX3中較高，而羅丹桿菌屬在樣品ZXCK中豐度較高。

圖8 種植蒼術(shù)前后土壤細(xì)菌優(yōu)勢(shì)屬的聚類熱圖Fig.8 Cluster heat map of the dominant genera of soil bacteria before and after planting A.lancea

選擇ZX3和ZXCK組中真菌豐度為前10的真菌從屬水平上進(jìn)行分析（圖9），10個(gè)屬的真菌總豐度占所有檢測(cè)到的屬水平的真菌物種的67.1%和50.4%。由圖9可知，被孢霉屬（Mortierella）和假單胞菌屬（Pseudogymnoascus）在樣品ZXCK中的豐度有所降低，其中Scleroderma、鐮刀菌屬（Fusarium）、青霉菌屬（Penicillium）、綠僵菌屬（Metarhizium）、曲霉屬、毛囊菌屬（Trichocladium）和府球菌屬（Epicoccum）豐度增加。其中Scleroderma在ZX3和ZXCK組中所占的比例分別為0.001%和14.2%，被孢霉屬為14.2%和4.0%，青霉菌屬為1.9%和6.7%。3個(gè)屬的真菌在2組樣品間的差異較為顯著。由此推測(cè)，蒼術(shù)的連作與Scleroderma、被孢霉屬和青霉菌屬有著較為密切的關(guān)系。

圖9 種植蒼術(shù)前后土壤真菌優(yōu)勢(shì)屬分析Fig.9 Analysis of the dominant genera of soil fungi before and after planting A.lancea

根據(jù)真菌優(yōu)勢(shì)屬聚類熱圖（圖10）可知，假裸囊菌屬和被孢霉屬在樣品ZX3中豐度較高，府球菌屬和Scleroderma在ZXCK中豐度更高。

圖10 種植蒼術(shù)前后土壤真菌優(yōu)勢(shì)屬的聚類熱圖Fig.10 Cluster heat map of the dominant genus of soil fungi before and after planting A.lancea

3 討論

研究[15]表明，長(zhǎng)期單一栽培方式會(huì)降低作物產(chǎn)量并對(duì)品質(zhì)產(chǎn)生不利影響。大多數(shù)以根莖入藥的植物都存在此問(wèn)題，如三七、人參和白術(shù)[16]。土壤微生物結(jié)構(gòu)的改變、作物病害蟲(chóng)的加重和藥用植物的自毒現(xiàn)象都是作物長(zhǎng)期連續(xù)栽種中容易出現(xiàn)的問(wèn)題[17-18]。其中，土壤微生物結(jié)構(gòu)的改變對(duì)作物生長(zhǎng)產(chǎn)生較大的影響。土壤微生物可調(diào)節(jié)土壤環(huán)境，疾病的發(fā)生通常與微生物異常有關(guān)，土壤中的病害菌可導(dǎo)致作物病害的發(fā)生，有益菌可增強(qiáng)作物的抗逆性和整體適應(yīng)性[19]，微生物多樣性被認(rèn)為是預(yù)防疾病的關(guān)鍵因素[20]。不同類型的土壤和植被可產(chǎn)生不同的生物區(qū)系，這與土壤微生物相互作用的復(fù)雜性有關(guān)，包括微生物與土壤和植物的相互作用[21]。

本研究發(fā)現(xiàn)，蒼術(shù)栽培3年后呈現(xiàn)出細(xì)菌群落多樣性和豐富度降低而真菌群落豐富度降低、多樣性升高的現(xiàn)象。郭蘭萍等[22]對(duì)種植蒼術(shù)的土壤微生物研究結(jié)果顯示，栽培2年的蒼術(shù)根際土壤細(xì)菌和真菌的微生物群落結(jié)構(gòu)均低于1年生樣品，與本研究結(jié)果相似，即栽培蒼術(shù)前后根際土壤的微生物結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，栽培蒼術(shù)后根際土壤微生物呈有益菌下降、有害菌增長(zhǎng)的趨勢(shì)，部分重要微生物的結(jié)構(gòu)失衡。其中有益菌變形菌門、放線菌門、子囊菌門、擔(dān)子菌門和羅丹桿菌屬等的豐度下降。研究[22]表明，變形菌和放線菌與疾病抑制有關(guān)，放線菌能夠促進(jìn)植株的生長(zhǎng)和病害的防治，是植株根際重要的有益菌。子囊菌門和擔(dān)子菌門是土壤中重要的分解者，大多數(shù)的子囊菌門為腐生菌，可以分解很多難降解的有機(jī)質(zhì)，在養(yǎng)分的循環(huán)中起著重要作用[23]。連作后子囊菌門和擔(dān)子菌門豐度下降，根際土壤養(yǎng)分循環(huán)受影響，可能會(huì)導(dǎo)致蒼術(shù)藥材品質(zhì)下降。羅丹桿菌屬有助于作物的生長(zhǎng)，其可拮抗根腐菌，對(duì)作物來(lái)說(shuō)是有益菌。有害菌被孢霉門、青霉菌屬和Dactylonectria相對(duì)豐度上升，多數(shù)被孢霉門可在土壤中進(jìn)行腐生，少數(shù)是樹(shù)木的菌根菌，在發(fā)病的土壤中被孢霉門的豐度通常會(huì)偏高，在大豆的連作障礙研究中發(fā)現(xiàn)，青霉菌屬中的紫青霉菌分泌的毒素會(huì)抑制大豆的生長(zhǎng)[24]，青霉菌屬的部分物種還可導(dǎo)致果實(shí)的腐爛，部分菌屬與生物碳復(fù)合，降低土壤中有效砷的含量，改變土壤中的微生物環(huán)境[25-26]。Dactylonectria真菌大多與植物病害發(fā)生有關(guān)[27-30]。慢生根瘤菌屬、關(guān)節(jié)細(xì)菌屬、酸桿菌門、鞘氨醇單胞菌屬、伯克式菌屬（Burkholderiaceae）、節(jié)桿菌屬、硬皮馬勃屬（Scleroderma）和被孢霉屬等菌群連作前后發(fā)生變化。酸桿菌門的平衡與作物的生長(zhǎng)也有著密切的關(guān)系[31]。慢生根瘤菌屬是變形菌門α變形菌綱的一種根瘤菌[32]，可變換大氣中游離氮形式，從而利于寄主生物充分利用，例如氨（NH3）或銨（NH4+）[33]，兩者均與植株的生長(zhǎng)有關(guān)聯(lián)。鞘氨醇單胞菌屬可降解纖維素，其通過(guò)吸收利用葡萄糖可解除葡萄糖對(duì)纖維素酶的抑制作用[34]。栽種蒼術(shù)后，以上菌群發(fā)生改變。

有研究[35]顯示，隨栽培年限的增加，植株根際分泌物增加，此往往會(huì)促進(jìn)某一類或幾類微生物數(shù)量的增加或減少，影響微生物結(jié)構(gòu)，同時(shí)土壤本身的理化性質(zhì)以及作物的田間管理也會(huì)影響到土壤微生物的結(jié)構(gòu)以及作物的生長(zhǎng)狀況。研究[36-38]表明，選用高抗品種，實(shí)行合理的輪作間作、施用有機(jī)肥和菌肥，對(duì)土壤進(jìn)行定期的消毒，連作后進(jìn)行深耕等可以緩解連作帶來(lái)的不良影響。因此，建議在種植蒼術(shù)時(shí)可與玉米和花生等作物進(jìn)行間作或輪種，施用石灰和有機(jī)肥對(duì)土壤進(jìn)行處理等，綜合利用多種措施改善蒼術(shù)的種植條件，減少病蟲(chóng)害的發(fā)生，提高人工栽培的蒼術(shù)品質(zhì)。

4 結(jié)論

栽培3年后的蒼術(shù)根際土壤與未種植過(guò)蒼術(shù)的根際土壤相比，土壤細(xì)菌和真菌結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，細(xì)菌群落多樣性和豐富度下降，真菌群落多樣性下降、豐富度上升。其中有益菌相對(duì)豐度下降，有害菌相對(duì)豐度增加，一些重要菌群失衡。說(shuō)明蒼術(shù)的多年栽培引起了根際土壤菌群的改變，這些改變可能使得土壤的養(yǎng)分循環(huán)和理化性質(zhì)等受到影響，進(jìn)而引起蒼術(shù)病害的發(fā)生，造成藥材品質(zhì)的下降。因此維持蒼術(shù)根際土壤微生物菌群的平衡是防治蒼術(shù)病害發(fā)生和提高藥材品質(zhì)的有效途徑之一。