寧利佳，任曉紅

(1.楊凌示范區(qū)醫(yī)院兒科，陜西 楊凌 712100；2.寶雞市婦幼保健院兒童呼吸科，陜西 寶雞 721000)

哮喘是兒童常見(jiàn)呼吸道疾病之一，其本質(zhì)是多種細(xì)胞及其組分參與的慢性非特異性炎癥性疾病。呼吸道病毒感染是以噴嚏、咽痛、發(fā)熱、鼻塞、流涕等為主要臨床表現(xiàn)的外感疾病，是兒科發(fā)病率最高的疾病之一，可通過(guò)含有病原體的飛沫等進(jìn)行傳播[1-2]。哮喘急性發(fā)作合并呼吸道病毒感染患兒在臨床上比較常見(jiàn)，其病情進(jìn)展迅速，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡，更需及早防治[3]。研究表明哮喘是一種免疫失衡性疾病，其發(fā)病的關(guān)鍵機(jī)制普遍認(rèn)為是輔助性T淋巴細(xì)胞(Th1/Th2)平衡失調(diào)，外周血CD4+輔助性T細(xì)胞可調(diào)控淋巴細(xì)胞發(fā)揮免疫作用，反映人體免疫系統(tǒng)功能狀態(tài)[4-5]。超敏C-反應(yīng)蛋白(Hight-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)是一種主要由肝臟合成的蛋白質(zhì)，正常條件下處于極低水平，而炎癥、感染以及創(chuàng)傷等發(fā)生可導(dǎo)致其水平劇增[6]。IgE是機(jī)體免疫反應(yīng)中重要因子，可作為臨床檢測(cè)標(biāo)志物，可輔助判斷患兒的病情與預(yù)測(cè)預(yù)后[7-8]。本文具體探討了CD4+輔助性T細(xì)胞、hs-CRP和IgE在哮喘急性發(fā)作合并呼吸道病毒感染患兒中的診斷價(jià)值及預(yù)后價(jià)值，以明確單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)與多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的價(jià)值，促進(jìn)哮喘急性發(fā)作合并呼吸道病毒感染的早期檢出。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017—2020年接診的72例哮喘急性發(fā)作合并呼吸道病毒感染患兒(合并組)，同期選擇72例單純哮喘急性發(fā)作患兒(對(duì)照組)。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡4～10歲；②均確診為哮喘急性發(fā)作和(或)呼吸道病毒感染患兒；③患兒家屬均知情同意且經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①?lài)?yán)重并發(fā)癥(心力衰竭、呼吸衰竭等)患兒；②家族特異性疾病史患兒；③免疫功能低下或嚴(yán)重佝僂病等患兒；④慢性肺疾病、先天性氣道畸形患兒。兩組一般資料比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05)，具有可比性。見(jiàn)表1。本研究患者及家屬簽署知情同意書(shū)且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

表1 兩組患兒一般資料比較

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 CD4+輔助性T細(xì)胞檢測(cè)：采集患兒空腹靜脈血3～5 ml，抗凝管中保存。分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，陰性分選CD4+輔助性T細(xì)胞。將100 μl CD4+輔助性T細(xì)胞加入流式細(xì)胞管，加入1 μl抗人CD28抗體，避光孵育30 min，采用PBS洗滌后進(jìn)行重懸，采用流式分析儀檢測(cè)CD4+輔助性T細(xì)胞占比。

1.2.2 血清hs-CRP和IgE檢測(cè):取1.2.1中的血液學(xué)樣本，不抗凝，常規(guī)分離血清，采用超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)測(cè)定試劑盒(膠乳增強(qiáng)免疫比濁法)(北京百奧泰康有限公司)檢測(cè)血清中hs-CRP含量，IMMAGE 800特種蛋白分析儀及配套試劑[貝克曼庫(kù)爾特(美國(guó))股份有限公司]檢測(cè)血清IgE含量。

2 結(jié) 果

2.1 兩組CD4+輔助性T細(xì)胞比例、血清hs-CRP和IgE含量比較 合并組的CD4+輔助性T細(xì)胞比例、IgE含量低于對(duì)照組(P<0.05)，血清hs-CRP含量高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組CD4+輔助性T細(xì)胞比例、血清hs-CRP和IgE含量比較

2.2 相關(guān)性分析 兩組患兒中，Pearson分析顯示CD4+輔助性T細(xì)胞比例、hs-CRP、IgE含量與呼吸道病毒感染存在相關(guān)性(均P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 CD4+輔助性T細(xì)胞比例、hs-CRP、IgE含量與哮喘急性發(fā)作合并呼吸道病毒感染的相關(guān)性(n=144)

2.3 預(yù)測(cè)效能 ROC曲線顯示CD4+輔助性T細(xì)胞比例、hs-CRP、IgE與聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的曲線下總面積為0.742、0.766、0.797、0.876，見(jiàn)表4。

表4 三者單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)哮喘急性發(fā)作合并呼吸道病毒感染的預(yù)測(cè)效能

3 討 論

哮喘是一種以肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為主的慢性反復(fù)發(fā)作性疾病，伴有巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等參與的氣道慢性炎癥性疾病。呼吸道病毒感染是常見(jiàn)的外感疾病，氣候驟變及冬春季節(jié)發(fā)病率較高。該病多為自限性疾病，如防治不及時(shí)，很多患兒可伴隨有疾病惡化，部分患兒也可病情變化迅速，導(dǎo)致嚴(yán)重的預(yù)后，為此加強(qiáng)早期診治具有的價(jià)值[9-10]。本研究顯示合并組的CD4+輔助性T細(xì)胞比例、血清IgE含量低于對(duì)照組，血清hs-CRP含量高于對(duì)照組(均P<0.05)。輔助性T細(xì)胞具免疫調(diào)節(jié)功能，可維持機(jī)體的免疫穩(wěn)態(tài)和控制自身免疫病進(jìn)展[11]。CD4+輔助性T細(xì)胞具有細(xì)胞毒性T細(xì)胞效應(yīng)，可調(diào)控免疫應(yīng)答及免疫耐受[12]。hs-CRP是由肝臟、肺泡巨噬細(xì)胞以及腎臟等器官合成或誘導(dǎo)表達(dá)的一種急性期反應(yīng)物。hs-CRP可通過(guò)與凋亡細(xì)胞膜磷脂或炎癥因子結(jié)合，發(fā)揮激活補(bǔ)體以及調(diào)理吞噬等功能。相關(guān)研究顯示：hs-CRP在呼吸道病毒感染發(fā)病初期其水平顯著升高，而隨著病情好轉(zhuǎn)，其水平可快速恢復(fù)至正常水平[13]。

臨床上哮喘與呼吸道病毒感染是常見(jiàn)的聯(lián)合病，流行病學(xué)調(diào)查證實(shí)50%左右的哮喘患兒伴有呼吸道感染[14]。本研究顯示，Pearson分析顯示CD4+輔助性T細(xì)胞比例、hs-CRP、IgE含量與呼吸道病毒感染存在相關(guān)性(P<0.05)。從機(jī)制上分析，CD4+占比下降，可導(dǎo)致T細(xì)胞平衡及調(diào)控功能異常，從而影響機(jī)體正常免疫功能，可誘發(fā)呼吸道病毒感染的發(fā)生[15]。hs-CRP可增強(qiáng)機(jī)體吞噬細(xì)胞的吞噬作用，對(duì)中性粒細(xì)胞具有調(diào)節(jié)作用，并誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞促炎因子的表達(dá)。IgE含量下降可誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞的增殖與激活，能降低Th2淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的特異性免疫反應(yīng)，從而加重患兒的病情[16]。現(xiàn)代研究表明哮喘是一種慢性氣道炎癥疾病，其發(fā)病與呼吸道病毒感染、遺傳、過(guò)敏性體質(zhì)、環(huán)境因素等存在相關(guān)性。特別是學(xué)齡前兒童的哮喘發(fā)作與呼吸道病毒感染有關(guān)，呼吸道合胞病毒是呼吸道感染常見(jiàn)的病毒之一，也是兒童、老年人和免疫功能低下患者患病和死亡的重要誘因之一。特別是在空調(diào)環(huán)境下，室內(nèi)各種致病原、空氣不流通可使得一些呼吸道病毒被患兒吸入呼吸道，造成呼吸道感染，導(dǎo)致氣道反應(yīng)性增高，誘發(fā)哮喘。鼻病毒是當(dāng)前比較常見(jiàn)的呼吸道病原體，可導(dǎo)致上呼吸道感染與下呼吸道感染的發(fā)生，并引起喘息、哮喘加重和肺炎的發(fā)生，也是導(dǎo)致兒童出現(xiàn)哮喘急性發(fā)作。盡管呼吸道的核心溫度為37.0 ℃，但是鼻病毒在33.0～35.0 ℃時(shí)復(fù)制效果最佳，尤其下呼吸道可為鼻病毒繁殖發(fā)展提供了理想的環(huán)境。尤其是在鼻病毒感染過(guò)程中，病毒會(huì)在15 min內(nèi)黏附到呼吸道的細(xì)胞表面受體，從而誘發(fā)呼吸道感染的發(fā)生，最終誘發(fā)哮喘的發(fā)生[17]。

呼吸道病毒感染是哮喘患兒的常見(jiàn)合并疾病，若發(fā)病患兒在早期診治不當(dāng)，可導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)心肌炎、支氣管炎、肺炎等嚴(yán)重并發(fā)癥[18]。由于該病進(jìn)展迅速且缺乏特異性的臨床特征，因此血清學(xué)檢測(cè)對(duì)該疾病診斷及預(yù)后評(píng)估具有重要意義[19-20]。本研究ROC曲線顯示CD4+輔助性T細(xì)胞比例、hs-CRP、IgE與聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的曲線下總面積為0.742、0.766、0.797、0.876，表明CD4+輔助性T細(xì)胞比例、hs-CRP、IgE與聯(lián)合檢測(cè)在哮喘急性發(fā)作合并呼吸道病毒感染患兒中的診斷具有很好的價(jià)值。本研究的不足之處在于所納入樣本數(shù)量較少，且本單位開(kāi)展檢測(cè)的該疾病血清特異性指標(biāo)有限，未能對(duì)所研究指標(biāo)在哮喘急性發(fā)作合并呼吸道病毒感染患兒中的變化機(jī)制進(jìn)行探討，將在后續(xù)研究中延長(zhǎng)納入樣本年限擴(kuò)大樣本量，并對(duì)其他相關(guān)指標(biāo)展開(kāi)深入分析。

總之，CD4+輔助性T細(xì)胞、hs-CRP和IgE在哮喘急性發(fā)作合并呼吸道病毒感染患兒中呈現(xiàn)異常表達(dá)情況，與呼吸道病毒感染的發(fā)生顯著相關(guān)。