湯肖瑋， 劉 晨， 邵和平， 仰小東， 張寧寧

(1.江蘇丘陵地區(qū)南京農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，江蘇南京 210046； 2.江蘇開(kāi)放大學(xué)，江蘇南京 210036)

朱頂紅()為石蒜科朱頂紅屬多年生花卉，花型、花色張揚(yáng)大方，近年出現(xiàn)在各大花事活動(dòng)上。不斷擴(kuò)大的需求促使朱頂紅行業(yè)快速發(fā)展，我國(guó)朱頂紅行業(yè)發(fā)展的“卡脖子”問(wèn)題是自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)品種匱乏。我國(guó)朱頂紅育種研究起步較晚，加之育種周期長(zhǎng)，使我國(guó)朱頂紅產(chǎn)業(yè)落后于荷蘭等花卉大國(guó)。所以，促進(jìn)朱頂紅育種效率的提升、縮短育種周期是第一要?jiǎng)?wù)，將主基因+多基因混合遺傳模型理論方法結(jié)合雜交育種手段培育朱頂紅新種質(zhì)是較高效的途徑之一，該方法能夠有效地分析出目標(biāo)性狀主基因和多基因的數(shù)量，以及估計(jì)基因效應(yīng)等相關(guān)遺傳參數(shù)。在作物有關(guān)研究中，大豆耐鹽性、甜玉米植株及穗部性狀、水稻產(chǎn)量及穗部性狀等已廣泛運(yùn)用此方法。在觀賞植物的遺傳分析中，該方法也備受青睞。Ye等分別利用此方法研究了紫薇植株結(jié)構(gòu)、牡丹表型性狀、月季花色以及菊花雜交群體花部性狀的遺傳規(guī)律。閆芳等對(duì)朱頂紅若干觀賞性狀進(jìn)行了遺傳特性分析，但尚未通過(guò)數(shù)量性狀主基因+多基因混合遺傳模型分析其遺傳機(jī)制。

目前，科研人員對(duì)于朱頂紅的探索熱衷于組培、基因功能分析和遺傳多樣性等方面。國(guó)內(nèi)關(guān)于朱頂紅雜交育種以及觀賞性狀方面已開(kāi)展了相關(guān)研究，張寧寧等記錄了24個(gè)朱頂紅品種花期等觀賞相關(guān)性狀的差異。耿楠等發(fā)現(xiàn)朱頂紅不同品種之間花莖、株高和冠幅等觀賞性狀變異性較大，且性狀間具有不同程度的相關(guān)性，其中花莖高與株高、冠幅具有較高相關(guān)性。楊柳燕等通過(guò)設(shè)計(jì)34對(duì)朱頂紅雜交組合，發(fā)現(xiàn)“圣誕快樂(lè)”作為母本時(shí)具有較高雜交結(jié)實(shí)率。花部性狀作為朱頂紅最主要的觀賞性狀，進(jìn)一步探索其遺傳機(jī)制是必要的。

本研究將花瓣數(shù)性狀差異較大的朱頂紅品種“粉色驚奇”和“火焰孔雀”進(jìn)行人工雜交構(gòu)建群體，分析其雜交后代花部相關(guān)性狀的遺傳分離情況。運(yùn)用主基因+多基因的混合遺傳理論模型，探索朱頂紅雜交組合F代群體5個(gè)花部相關(guān)性狀遺傳規(guī)律，估算主基因的遺傳率，掌握朱頂紅5個(gè)花部性狀的最適遺傳模型和基因效應(yīng)，以期為進(jìn)一步提高朱頂紅觀賞價(jià)值、新種質(zhì)的選育及后期基因定位等分子育種相關(guān)研究提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

2017年3月下旬，以江蘇丘陵地區(qū)南京農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所保存的朱頂紅品種“粉色驚奇”(單瓣)為母本，“火焰孔雀”(重瓣)為父本進(jìn)行人工雜交。盛花期采集“火焰孔雀”的花粉均勻涂在“粉色驚奇”的柱頭上，3 d后第2次授粉。果莢變黃變干后于2017年5月上旬采收，置于陰處晾干至開(kāi)裂，將種子剝離，共獲267粒F雜交種子。于5月中旬穴盤點(diǎn)播，后定植于盆內(nèi)，同親本于玻璃溫室中統(tǒng)一管理。

1.2 田間性狀調(diào)查

在2020、2021年連續(xù)2年春季對(duì)F群體(共88株)的5個(gè)花部相關(guān)性狀進(jìn)行觀測(cè)，測(cè)定指標(biāo)為花瓣數(shù)、花梗長(zhǎng)、最大花被片長(zhǎng)、最大花被片寬和花徑，并計(jì)算2年性狀調(diào)查的平均值?；ò陻?shù)中單重瓣分類標(biāo)準(zhǔn)按照6片花瓣的為單瓣，大于6片花瓣的為重瓣。

1.3 雜種優(yōu)勢(shì)分析及顯著性檢驗(yàn)

雜種優(yōu)勢(shì)通過(guò)中親優(yōu)勢(shì)()和中親優(yōu)勢(shì)率()表示。=-；=(/)×100%。其中，為雜交F后代單個(gè)性狀的均值，(mid-parents value)為雙親單個(gè)性狀的均值。利用SPSS 25.0數(shù)據(jù)分析軟件的單樣本均值檢驗(yàn)分析F群體中親優(yōu)勢(shì)的顯著性。

1.4 主基因+多基因混合遺傳分析

2 結(jié)果與分析

2.1 朱頂紅F1代花部性狀表型特征及雜種優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)

親本“粉色驚奇”“火焰孔雀”和F群體中部分品種表型見(jiàn)圖1。在F后代群體中，花色以白色、白粉色、紅色為主，多呈雙親過(guò)渡型顏色，花瓣數(shù)遺傳變異范圍為6～23瓣。

由表1可知， 5個(gè)花部相關(guān)性狀在F代變異系數(shù)分別為46.99%、29.39%、8.35%、19.08%、13.37%，分離較廣泛。其中，花瓣數(shù)變異系數(shù)最大，說(shuō)明其離散程度最大，花徑的變異系數(shù)最小，其離散程度最小。

表1 朱頂紅“粉色驚奇”ד火焰孔雀”雜交F1代花部相關(guān)性狀表型特征值

從F群體各花部相關(guān)性狀的頻次分布(圖2)可知，花徑、花梗長(zhǎng)和最大花被片寬均呈連續(xù)性較好的正態(tài)分布。在統(tǒng)計(jì)的88份F群體中，按照花瓣數(shù)區(qū)分成單瓣和重瓣2類，其中單瓣共54個(gè)，占比為61.4%；重瓣26個(gè)，占比為29.5%，重瓣F代的花瓣數(shù)分析結(jié)果符合正態(tài)分布；另外有8株的2年數(shù)據(jù)瓣型相反，花瓣數(shù)不穩(wěn)定。

由表2可以看出，中親優(yōu)勢(shì)均達(dá)到極顯著水平，F(xiàn)群體中5個(gè)性狀中親優(yōu)勢(shì)為負(fù)值，說(shuō)明當(dāng)前F代存在衰退現(xiàn)象。F代群體5個(gè)性狀的值分別與親本相比，均存在小于低親或超過(guò)高親的個(gè)體，說(shuō)明F代普遍發(fā)生超親分離，F(xiàn)群體中各性狀的平均值均小于高值親本，其中花瓣數(shù)和花梗長(zhǎng)均值介于雙親之間，花徑、最大花瓣片長(zhǎng)和寬均值均低于低值親本。

表2 朱頂紅“粉色驚奇”ד火焰孔雀”雜交F1代花部相關(guān)性狀的雜種優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)

2.2 朱頂紅花部相關(guān)性狀的相關(guān)性分析

由表3可知，在10對(duì)花部性狀間共有4對(duì)性狀的相關(guān)性達(dá)到極顯著水平，3對(duì)性狀表現(xiàn)為顯著相關(guān)。其中，花梗長(zhǎng)與花徑、 花梗長(zhǎng)與花瓣數(shù)、最大花被片長(zhǎng)與最大花被片寬均呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.373、0.301、0.250；花瓣數(shù)與花徑、花徑與最大花被片長(zhǎng)、花梗長(zhǎng)與最大花被片寬呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.233、0.227、0.221；花瓣數(shù)與最大花被片寬呈極顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.363。

表3 F1代群體花部相關(guān)性狀的相關(guān)性分析

2.3 最優(yōu)遺傳模型選擇和適合性分析

利用朱頂紅雜交后代5個(gè)花部性狀2年數(shù)據(jù)均值，通過(guò)混合遺傳模型分離分析法分析出極大似然值和AIC值，選取AIC最小的3個(gè)值對(duì)應(yīng)的模型作為最適模型備選。如表4所示，A-0、A-2和B-2等3個(gè)模型花徑對(duì)應(yīng)的AIC值較小，分別為295.11、294.27和295.26。再通過(guò)適合性檢驗(yàn)(表5)，結(jié)合達(dá)到顯著統(tǒng)計(jì)量個(gè)數(shù)最少原則選出最適模型。各性狀篩選結(jié)果為：花梗長(zhǎng)最優(yōu)模型為A-0，無(wú)主基因控制；最大花被片長(zhǎng)符合A-1模型， 受表現(xiàn)為加性和部分顯性或超顯性的1對(duì)主基因控制；花徑最適模型為A-2模型，受表現(xiàn)為加性的1對(duì)主基因控制，說(shuō)明顯性效應(yīng)值為0；最大花被片寬符合B-1模型，受加性-顯性-上位性2對(duì)主基因控制；花瓣數(shù)的模型為B-2，受表現(xiàn)為加性-顯性2對(duì)主基因控制。

表4 朱頂紅“粉色驚奇”ד火焰孔雀”雜交F1代花部相關(guān)性狀分離分析的AIC值

表5 F1代群體花部相關(guān)性狀入選模型的適合性測(cè)驗(yàn)結(jié)果

2.4 相關(guān)遺傳參數(shù)

各性狀最優(yōu)模型的相關(guān)遺傳參數(shù)見(jiàn)表6，花瓣數(shù)的2對(duì)主基因的加性效應(yīng)值(、)均是正數(shù)，分別為4.35、3.56的正向增效，第1對(duì)主基因的加性效應(yīng)大于第2對(duì)，所以該性狀的加性效應(yīng)以第1對(duì)為主，2對(duì)主基因的顯性效應(yīng)值是分別為-6.12和 -2.11，且顯性效應(yīng)應(yīng)以第1對(duì)為主。受2對(duì)主基因影響的最大花被片寬的加性效應(yīng)值均為4.26，且顯性效應(yīng)值分別為-6.39、-4.26，均為負(fù)向，兩者之間的加性-加性效應(yīng)、加性-顯性效應(yīng)、顯性-加性效應(yīng)、顯性-顯性效應(yīng)值分別為4.26、-4.26、-2.13、6.39?；üｉL(zhǎng)和最大花被片長(zhǎng)主基因的顯性效應(yīng)值均為負(fù)，分別為-0.54、-0.69，其加性效應(yīng)均表現(xiàn)為正向效應(yīng)，分別為0.56、0.69。花瓣數(shù)和最大花被片長(zhǎng)的主基因遺傳率分別為96%、47%。

表6 F1代群體花部相關(guān)性狀在最優(yōu)模型下的遺傳參數(shù)估計(jì)值

3 討論與結(jié)論

朱頂紅易于在我國(guó)栽培，且近幾年市場(chǎng)需求日益擴(kuò)大。花部相關(guān)性狀是衡量朱頂紅觀賞價(jià)值的重要指標(biāo)，分析和利用其遺傳特性就顯得格外重要。本研究分析結(jié)果顯示，5個(gè)花部相關(guān)性狀在F群體的變異較大，變異系數(shù)為8.35%～46.99%，拓寬了其遺傳基礎(chǔ)。其中花瓣數(shù)變異系數(shù)最大，這是由于本研究選擇的“粉色驚奇”“火焰孔雀”雙親在花瓣數(shù)性狀上差異極大，導(dǎo)致該性狀分離明顯。此外，在本研究雜交群體中，比較5個(gè)花部性狀的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，花徑與最大花被片長(zhǎng)呈顯著性相關(guān)，與最大花被片寬相關(guān)性不顯著，這與王秀剛等關(guān)于百合雜交F代群體遺傳分析中，花冠直徑和外輪花被片長(zhǎng)具有極顯著的相關(guān)性，與外輪花被片寬無(wú)顯著相關(guān)性的結(jié)果一致。前人研究表明，不同性狀之間的關(guān)系可以運(yùn)用于育種，來(lái)預(yù)判某些相關(guān)性狀的表現(xiàn)，以提高育種效率。本研究的5個(gè)性狀均呈現(xiàn)負(fù)向的中親性狀，說(shuō)明這些性狀可能存在顯性遺傳效應(yīng)，或F后代可能暫未表現(xiàn)出明顯的超親優(yōu)勢(shì)。閆芳等在朱頂紅相關(guān)觀賞性狀遺傳分析的研究中發(fā)現(xiàn)F代表現(xiàn)出較明顯的衰退。

目前，已有較多觀賞植物花部性狀遺傳機(jī)制相關(guān)的研究，主要包括蘭花花部性狀形態(tài)性狀變異、分離和QTL定位的遺傳分析、荷花花瓣數(shù)和花色等表型性狀多樣性的分析、菊花花徑等園藝性狀的關(guān)聯(lián)分析、月季花徑和花瓣數(shù)等性狀的變異分析等。然而，目前關(guān)于朱頂紅花部相關(guān)性狀的遺傳研究并未深入，極大程度限制了朱頂紅花型育種進(jìn)程。本研究使用主基因+多基因混合遺傳分離分析法深入分析了朱頂紅花部相關(guān)性狀。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，朱頂紅的花梗長(zhǎng)符合無(wú)主基因控制的A-0模型，其原因或是被環(huán)境影響比較大的多基因所控，其遺傳規(guī)律可能較為復(fù)雜；花瓣數(shù)和最大花被片寬均受2對(duì)主基因控制，主基因表現(xiàn)分別為加性-顯性和加性-顯性-上位性；花徑由1對(duì)主基因控制，這與張飛等菊花花器性狀混合遺傳分析中結(jié)果相同；最大花被片寬性狀最適模型受2對(duì)主基因控制，二者之間存在上位性互作效應(yīng)，而雜種優(yōu)勢(shì)的來(lái)源之一就是上位性互作效應(yīng)，這為朱頂紅花部相關(guān)性狀的雜交育種奠定理論依據(jù)；花瓣數(shù)和最大花被片長(zhǎng)2者主基因遺傳效率分別為96%、47%，表明花瓣數(shù)屬于高度遺傳，即不易受環(huán)境影響，可為朱頂紅育種的早期世代選擇提供研究方向。

本研究初步分析了朱頂紅花部性狀的遺傳規(guī)律及主基因間互作效應(yīng)，有助于進(jìn)一步闡明其遺傳模式，為后續(xù)提高朱頂紅花部相關(guān)性狀育種效率奠定基礎(chǔ)。