華學(xué)峰

（安徽省蕪湖市繁昌區(qū)繁陽鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心畜牧獸醫(yī)站，安徽 蕪湖 241200）

0 引言

豬弓形蟲病大多數(shù)情況下呈隱性感染，沒有特別明顯的臨床癥狀，還特別容易和其他疾病混合感染，最后造成誤診。因此建立快速、準(zhǔn)確的診斷方法尤其重要。過去100年來，人們診斷弓形蟲病主要依靠直接鏡檢等病原學(xué)檢查方法，但是這些方法不僅耗時(shí)耗力，準(zhǔn)確性還不高。而這些年分子診斷技術(shù)的不斷發(fā)展和完善成熟，目前，弓形蟲病分子診斷方法主要包括DNA探針技術(shù)、PCR技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)及基因芯片技術(shù)。本病在我國主要是隱形感染，臨床癥狀不明顯而且易與豬瘟、豬肺疫等疫病混淆，所以臨床診斷比較困難，特別容易誤診為豬瘟，從而誤治。因此，建立高效、快速診斷弓形蟲病對預(yù)防和治療該病具有重要意義[1]。

2019年6月到8月在安徽省繁昌縣某豬場接診一起病例，仔豬精神不振，食欲減退，懷疑為豬弓形蟲病或者豬瘟、豬肺疫等病?；谝陨锨闆r，本文即以一例豬弓形蟲的診斷，以期為臨床正確診斷本病提供一些幫助。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病例來源

安徽繁昌某豬場發(fā)病病豬，收集發(fā)病仔豬的腹水和肝臟、肺臟、淋巴結(jié)內(nèi)臟器官。

1.1.2 試劑

姬姆薩染料：購自蘇州亞科科技有限公司。甲醇、二甲苯、95%乙醇等均為國產(chǎn)分析純級(jí)產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 流行病學(xué)調(diào)查

在筆者聯(lián)系該豬場3個(gè)月內(nèi)，通過現(xiàn)場觀察，調(diào)查檔案，了解到了豬場的飼養(yǎng)規(guī)模，發(fā)病及死亡情況等。

1.2.2 臨床癥狀觀察

對發(fā)病仔豬的表面皮膚、毛發(fā)、尿液還有精神與食欲狀況進(jìn)行觀察。

1.2.3 剖檢檢查

在豬場對其中的1例發(fā)病仔豬進(jìn)行剖檢，觀察其內(nèi)部肝肺等臟器病變情況。

1.2.4 病原學(xué)檢查

（1）細(xì)菌分離取發(fā)病仔豬的肝、肺、淋巴結(jié)等臟器，在無菌環(huán)境下保存，對剖檢的器官進(jìn)行細(xì)菌分離，用手術(shù)剪剪一小塊，在平板上輕微的蘸一下，接著用四區(qū)劃線法培養(yǎng)分離細(xì)菌。24 h后，用接種環(huán)挑取單個(gè)菌落接種至液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)24 h備用。如分離到細(xì)菌，通過革蘭氏染色方法鑒定。

（2）吉姆薩染色在無菌環(huán)境下，取發(fā)病仔豬的肝、肺、淋巴結(jié)制成觸片；取1滴發(fā)病仔豬的腹水，滴到載玻片上的左端，接著用蓋玻片推片，然后風(fēng)干制成涂片。再在玻片上滴2～3滴甲醇固定，最后用吉姆薩液染色1 h，清洗后干燥鏡檢[2]。

2 結(jié)果與分析

2.1 流行病學(xué)調(diào)查

該豬場是育肥豬場，飼養(yǎng)的都是長白豬，一共飼養(yǎng)母豬50頭。該豬場的產(chǎn)房剛剛轉(zhuǎn)入保育欄的一批小豬開始發(fā)病，共有152頭，1周內(nèi)共有19頭仔豬精神抑郁，食欲減退，耳鼻及四肢末端呈藍(lán)紫色。工作人員曾采用抗生素類治療無明顯效果，死亡5頭。

2.2 臨床癥狀觀察

發(fā)病初期仔豬存在發(fā)熱、腹瀉、無甚食欲、精神萎靡，呼吸困難、尿液發(fā)黃、形神俱枯等癥狀。后期身體多處出現(xiàn)紫紅色的瘢痕或者小紅點(diǎn)，同時(shí)，可見該病豬發(fā)生癲癇狀痙攣，后軀麻痹，運(yùn)動(dòng)障礙等神經(jīng)癥狀，見圖1。

圖1 臨床癥狀

2.3 剖檢檢查

小豬肌肉發(fā)白無血色，胸腹腔內(nèi)有滲出物，腹腔內(nèi)有透明積液，肝臟邊緣有淤血斑，顏色深淺不一，不均勻。肺臟有明顯的“實(shí)變”現(xiàn)象，肺部表面出血嚴(yán)重。淋巴結(jié)嚴(yán)重水腫，出血嚴(yán)重，呈紫紅色甚至黑紫色；脾臟邊緣較整齊，但有明顯的出血點(diǎn)和淤血斑，見圖2。

圖2 病理變化

2.4 病原學(xué)檢查

采用血平板分離細(xì)菌時(shí)未見到細(xì)菌。

吉姆薩染色鏡檢結(jié)果顯示可看到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)外明顯的一頭稍減一頭鈍圓的弓形蟲滋養(yǎng)體，還看到明顯的假包囊，直徑大小為10～15μm，內(nèi)含弓形蟲滋養(yǎng)體，白細(xì)胞核被擠向一邊，見圖3和圖4。

圖3 吉姆薩方法檢測弓形蟲滋養(yǎng)體

圖4 吉姆薩方法檢測假包囊

7月以后豬場開始發(fā)病，診斷初期懷疑方向不明確，無法確定是什么病因，并且用一些抗生素的治療效果不大。在7月底挑取一頭病豬準(zhǔn)備剖檢觀察。剖檢結(jié)果懷疑為豬弓形蟲病，8月初帶回病料（肝、肺、淋巴結(jié)、腹水）進(jìn)行檢測，最終通過病原學(xué)與PCR檢測確診為豬弓形蟲病。證明該豬場感染豬弓形蟲病。經(jīng)檢測顯示該豬場只有部分小豬感染此病，究其原因，主要和豬場的周圍環(huán)境和飼養(yǎng)管理密切相關(guān)。豬場位置比較偏僻，飼養(yǎng)條件不盡人意。此次疫病的發(fā)病原因分析可能是由于飼養(yǎng)員看護(hù)管理不善，導(dǎo)致野貓進(jìn)入產(chǎn)房，抓咬小豬導(dǎo)致。并且該弓形蟲的DNA傳染性很強(qiáng)，可短時(shí)間內(nèi)傳至別的仔豬帶蟲，在轉(zhuǎn)入保育欄時(shí)，仔豬的免疫力降低從而導(dǎo)致發(fā)病。豬弓形蟲病本身就缺少特異性的臨床癥狀迷惑了獸醫(yī)的判斷，使得治療方向錯(cuò)誤從而延誤治療時(shí)機(jī)，而導(dǎo)致了豬場的經(jīng)濟(jì)損失。對于后期用藥，則是以磺胺藥為主，并輔以增加抵抗力的保健藥品[3]。

3 結(jié)束語

豬弓形蟲病對養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展形成了巨大的威脅，建立有效的防治措施是決不可忽視的。目前來說，還沒有切實(shí)可行的從根本上完全控制和杜絕弓形蟲感染的方法。積極采取防治措施可以大大降低該病造成的傷害和損失。科學(xué)的封閉式飼養(yǎng)管理，盡量降低對動(dòng)物體的應(yīng)激；制立完善嚴(yán)格的檢疫制度，定期抽檢弓形蟲，檢測為陽性要及時(shí)淘汰；豬場工作人員要注意避免與貓接觸等，這些都是控制弓形蟲病的感染和傳播的有效措施。