陳超英， 劉靈芝， 楊 歡， 朱一喜， 王 明， 黃振夏， 何樹光

人鼻病毒（human rhinovirus， HRV）是引起人類普通感冒最常見的呼吸道病毒，易感群體主要是兒童和老人[1]。HRV屬于小RNA病毒科腸道病毒屬， 病毒直徑約28 nm，無包膜，核心為無折疊的單股正鏈RNA[2]?？梢鸺毙院粑栏腥荆Y狀在HRV感染后16 h左右發(fā)生，24～48 h為最重，一般持續(xù)7 d，大多具有自限性，但嚴重者可引發(fā)哮喘、支氣管擴張和充血性心力衰竭等并發(fā)癥[3-4]。2020年5月株洲地區(qū)首先在學校發(fā)現(xiàn)HRV感染暴發(fā)，首例5月8日發(fā)病，末例6月21日，經(jīng)過7 d最長潛伏期未發(fā)現(xiàn)新增病例，歷時51 d，在新型冠狀病毒肺炎防控期間對社會帶來較大影響。現(xiàn)對此次HRV感染狀況進行分析，為HRV的流行病學調(diào)查，預防暴發(fā)流行提供參考。

1 材料與方法

1.1 標本來源

2020年5月8日—6月21日，患者以發(fā)熱、咳嗽、流涕、頭暈或頭痛、咽痛、鼻塞等癥狀至湖南中醫(yī)藥高等?？茖W校附屬第一醫(yī)院就診。共收集患者咽拭子標本564份，置于專用的病毒保存液中，并立即送檢，24 h內(nèi)未能及時檢測的標本在－80℃保存，避免反復凍融。

1.2 流行病學調(diào)查

進行病例調(diào)查，收集患者一般情況、臨床特征、流行病學記錄、實驗室檢查結(jié)果等。

1.3 實驗室檢測

1.3.1 鼻病毒檢測 嚴格按照操作說明書，采用圣湘生物Natch S全自動核酸提取儀對咽拭子標本進行RNA提取，采用ABI 7500 PCR擴增儀進行反轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR。HRV核酸提取試劑由圣湘生物提供，擴增試劑由湖南康得生物提供。同批次擴增標本陰陽性對照符合要求，內(nèi)標分子Ct值在35以內(nèi)，且擴增曲線呈平滑S型，Ct值＜38判為陽性；Ct值≥40判為陰性；介于38～40之間，則重復一次，重復實驗的Ct值若≥40則為陰性，若＜40則判讀為陽性，根據(jù)標準曲線獲取病毒載量（拷貝數(shù)/mL），并轉(zhuǎn)換為相應的對數(shù)值（log10）表示。內(nèi)標分子、標準品及質(zhì)控品委托蘇州吉瑪基因股份有限公司合成，常規(guī)進行室內(nèi)質(zhì)控，且室間質(zhì)評均達到要求。

1.3.2 其他呼吸道病毒檢測 其他5項病毒核酸委托圣維爾醫(yī)學檢驗中心運用PCR進行定性檢測，包括呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus， RSV）、腺病毒（adenovirus， ADV）、甲型流感病毒（influenza A virus， IFA）、乙型流感病毒（influenza B virus， IFB）、肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae， MP）。

1.4 統(tǒng)計學分析

使用Excel軟件建立數(shù)據(jù)庫，采用SPSS 20.0進行統(tǒng)計描述和分析。計數(shù)資料以百分比（%）表示，組間比較采用卡方檢驗；不符合正態(tài)分布的計量資料以M（IQR）表示，組間比較采用 Mean-WhitneyU檢驗。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 基本資料分析

對564例患者采集咽拭子進行HRV核酸檢測，其中男性320例，陽性136例，女性244例，陽性106例，男女陽性率分別為42.50%和43.44%，差異無統(tǒng)計學意義（χ2＝0.050，P＝0.823）。見表 1。由于此次HRV疫情首發(fā)在學校，我們將年齡分段為學齡前（1～5歲）、小學學齡（6～12歲）及高于小學學齡（≥13歲）三個年齡段進行分析，三個不同年齡段感染分布情況見表2。不同年齡段陽性患者在各自年齡段人群中檢出率差異具有統(tǒng)計學意義（χ2＝8.971，P＝0.011），其中1～5歲陽性檢出率最高（51.28%），三個年齡段兩兩對比發(fā)現(xiàn)1～5歲與6～12歲的陽性率均高于13歲以上，且差異均有統(tǒng)計學意義（χ2＝5.720，P＝0.017；χ2＝7.801，P＝0.005）；6～12歲陽性患者人數(shù)最多，占陽性總數(shù)的80.17%。見圖1。

表2 不同年齡段感染分布情況Table 2 Prevalence of human rhinovirus infection in different age groups

表1 HRV男女患病情況Table 1 Prevalence of human rhinovirus in males and females

2.2 HRV感染臨床特征

HRV陽性患者首發(fā)癥狀調(diào)查見表3，病例大多以上呼吸道感染表現(xiàn)為主，首發(fā)癥狀主要是發(fā)熱、咳嗽、流涕、頭暈或頭痛、咽痛，以發(fā)熱為主，占比達78.10%，咳嗽次之，占比28.93%，其他癥狀間無明顯差異。且出現(xiàn)癥狀后2～3 d HRV病毒核酸陽性檢出率最高。

表3 HRV陽性患者的首發(fā)癥狀分析Table 3 Summary of the first onset symptoms in the patients positive for human rhinovirus

2.3 HRV合并其他呼吸道病毒感染情況

HRV感染后一般在人體上呼吸道寄居，表現(xiàn)為輕癥的上呼吸道感染，對HRV陽性患者進一步行常見的5項呼吸道感染病毒核酸定性檢測。結(jié)果提示患者合并呼吸道ADV感染居多，在合并感染患者中的占比達58.33%，其次為RSV，占比為26.19%，合并感染患者HRV載量明顯高于單獨感染者（Z＝－11.907，P＜0.001）。其中合并MP和RSV感染者HRV病毒載量較合并ADV感染者高（Z＝－2.243，P＝0.025和Z＝－2.332，P＝0.020），見表 4。

表4 HRV陽性患者合并其他呼吸道病毒感染情況Table 4 Coinfection with other respiratory pathogens in HRV-positive patients

2.4 防控方法分析

對個案進行面對面調(diào)查，結(jié)合家長及班主任的全面反映，分析新型冠狀病毒肺炎防控期間發(fā)生的HRV感染流行方式，發(fā)現(xiàn)此間孩童均采取了一系列防范措施，如戴醫(yī)用防護口罩、口面防護罩、勤洗手等，但是80%患者在近3個月內(nèi)戶外體育鍛煉明顯減少。小學生屬于特殊群體，預防傳染性呼吸道疾病傳播除了需要有效措施控制傳染源，切斷傳播途徑，更要督促增加體育鍛煉，加強身體素質(zhì)，提高免疫力。

3 討論

人類對HRV普遍易感[5]，尤其是免疫功能低下的兒童和老人，其傳播方式主要有飛沫傳播和接觸傳播，暴發(fā)流行容易發(fā)生在人群聚集的學校、公共場所、辦公區(qū)域等地方。兒童普通感冒中15%～30%是因為感染了HRV，大多數(shù)具有自限性，病程延續(xù)一周左右，但是對本身具有呼吸道基礎疾病的兒童可能留下后遺癥[6-7]；有研究表明，HRV感染的嬰幼兒易引起喘息性疾病，從而觸發(fā)哮喘的發(fā)生[8-10]，這都嚴重影響了少年兒童的身心健康，給社會和家庭帶來巨大影響。

HRV存在150多種血清型，由于各血清型之間可能發(fā)生的交叉反應，使其在感染人體后可產(chǎn)生部分交叉免疫，無可行的血清學檢測方法；而且眾多的血清型也使HRV的疫苗研制受到阻礙，目前國內(nèi)外尚無有效的疫苗制劑[11-12]。

本研究是首次以株洲地區(qū)HRV感染實驗室確認結(jié)果為依據(jù)的調(diào)查分析。我們分析發(fā)現(xiàn)此次HRV疫情1～5歲兒童中陽性檢出率最高，6～12歲兒童為此次疫情的主要感染群體，其陽性占比高達80.17%，表明此次疫情以在校小學生為主要感染群體，可能與此次疫情首次感染流行發(fā)生在學校及新型冠狀病毒肺炎疫情期間學生缺乏體育鍛煉相關(guān)。而合并感染情況與文獻報道不同[13]，以ADV占比最多，可能存在地域性差異，亦可能受病例數(shù)量的影響，有待后續(xù)進一步的研究，且合并其他呼吸道病毒感染時HRV病毒載量相對較高。新型冠狀病毒肺炎疫情防控期間兒童出現(xiàn)以發(fā)熱為主的HRV感染難免引起家長及社會的恐慌，因此研究新型冠狀病毒肺炎疫情期間HRV感染流行情況，為地區(qū)性HRV感染暴發(fā)提供詳細的分析，加深對HRV疫情的認識，為今后HRV疫情的防控提供參考和幫助。