李晶，董超，左巍，安文進(jìn)，張耀海，趙其陽，焦必寧

1(西南大學(xué)柑桔研究所，重慶，400712)2(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部柑桔及苗木質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心，重慶，400712) 3(國(guó)家柑桔工程技術(shù)研究中心，重慶，400712)

小青菜(BrassicacampestrisL.ssp.chinensis)是我國(guó)常見的葉菜類十字花科蔬菜，在我國(guó)的種植范圍廣，復(fù)種指數(shù)高。小菜蛾[Plutellaxylostella(L.)]是小青菜種植生長(zhǎng)過程中危害較為嚴(yán)重的一類害蟲，嚴(yán)重影響了蔬菜的產(chǎn)量和品質(zhì)。以丁蟲腈為代表的苯基吡唑類殺蟲劑是防治小菜蛾重要的農(nóng)藥品種之一，具有活性高、持效期長(zhǎng)等特點(diǎn)。丁蟲腈(丁烯氟蟲腈)由我國(guó)自主創(chuàng)制[1]，主要作用于昆蟲中的γ-氨基丁酸依賴性神經(jīng)傳遞系統(tǒng)[2]。相比其同類型殺蟲劑氟蟲腈而言，丁蟲腈對(duì)蔬菜等作物的上鱗翅目、鞘翅目等害蟲表現(xiàn)出同等甚至更高的活性，且大幅降低非靶標(biāo)生物毒性，因此被作為氟蟲腈的替代產(chǎn)品在我國(guó)各大蔬菜產(chǎn)區(qū)進(jìn)行使用[3-5]。農(nóng)藥在施用過程中，會(huì)通過漂移、沉降、淋溶等多種途徑進(jìn)入到土壤中，進(jìn)而造成土壤中農(nóng)藥殘留的持續(xù)積累。研究數(shù)據(jù)表明丁蟲腈在土壤中較為穩(wěn)定，丁蟲腈在江西紅壤、太湖水稻土及陜西潮土3種不同類型土壤中，室溫25 ℃條件下培養(yǎng)180 d后均未發(fā)生明顯降解，半衰期均大于364.8 d[6]。進(jìn)入土壤中的農(nóng)藥可通過直接或間接途徑被蔬菜吸收并在植株內(nèi)富集、轉(zhuǎn)化，造成蔬菜中農(nóng)藥殘留污染，最終影響蔬菜產(chǎn)品質(zhì)量[7]。鑒于此，本研究以小青菜為研究對(duì)象，建立土壤-小青菜系統(tǒng)中丁蟲腈及多種代謝物的高效快速殘留檢測(cè)方法，對(duì)于進(jìn)一步開展蔬菜對(duì)土壤中農(nóng)藥的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝研究，以及蔬菜食品全程質(zhì)量控制，保障蔬菜食品安全具有重要意義。

目前，關(guān)于蔬菜和土壤中丁蟲腈殘留方法的研究主要集中在丁蟲腈母體本身。趙玉華等[8]利用QuEChERS結(jié)合氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS/MS)建立了番茄，黃瓜和芹菜中丁蟲腈的分析方法；羅智強(qiáng)等[9]利用氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器(gas chromatography-electron capture detector，GC-ECD)建立了土壤中丁蟲腈的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法；丁立平等[10]采用改進(jìn)的QuEChERS-氣質(zhì)聯(lián)用法(GC-MS/MS)建立了蔬菜中丁蟲腈和氟蟲腈的測(cè)定方法。然而，丁蟲腈在進(jìn)入作物及環(huán)境中后，會(huì)通過多種途徑降解生成多種代謝產(chǎn)物，其中丁蟲腈砜、丁蟲腈硫醚、丁蟲腈酰胺及氟蟲腈等是丁蟲腈的幾種代表性代謝產(chǎn)物[11](圖1)，且這幾種代謝物對(duì)于某些非靶標(biāo)生物具有比母體更高的生物毒性。例如，代謝物丁蟲腈砜(EC50=9.2 mg/L)和氟蟲腈(EC50=3.5 mg/L)對(duì)蛋白核小球藻的48 h急性毒性分別為母體丁蟲腈的(EC50=17.9 mg/L)的1.9倍和5.1倍；氟蟲腈(LC50=0.11 mg/L)和丁蟲腈砜(LC50=0.01 mg/L)對(duì)于大型蚤的48 h急性毒性分別為母體丁蟲腈(LC50=0.60 mg/L)的5.5倍和60倍[11]。

圖1 丁蟲腈及其代謝物的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structural formula of flufiprole and its metabolites

目前關(guān)于同時(shí)檢測(cè)植物源樣品和環(huán)境介質(zhì)中丁蟲腈及其代謝物的方法報(bào)道較少。何建等[12]利用固相萃取結(jié)合GC-ECD檢測(cè)器建立了丁蟲腈及氟蟲腈代謝物在水稻植株、稻田水及稻田土壤樣品中的檢測(cè)方法。然而該方法的目標(biāo)檢測(cè)物僅包含了氟蟲腈的幾種典型代謝物MB46513，MB45950和MB46136等，而對(duì)于丁蟲腈在作物及環(huán)境中的幾種重要降解代謝產(chǎn)物如丁蟲腈砜，丁蟲腈硫醚和丁蟲腈酰胺等均未涉及；且上述方法前處理過程較為繁瑣，檢測(cè)耗時(shí)較長(zhǎng)(接近20 min)。此外，蔬菜樣品基質(zhì)較為復(fù)雜，含有多種干擾分析的成分(例如色素、甾醇等)，采用GC-ECD檢測(cè)，方法的選擇性和靈敏度難以滿足檢測(cè)要求。相比之下，QuEChERS前處理技術(shù)結(jié)合UPLC-MS/MS用于植物源和環(huán)境樣品中目標(biāo)物的檢測(cè)可以有效提高方法前處理效率、靈敏度和特異性[13-15]。

因此，本文通過利用QuEChERS結(jié)合UPLC-MS/MS建立了同時(shí)測(cè)定小青菜和土壤中的丁蟲腈及其多種代謝產(chǎn)物殘留量方法，并成功應(yīng)用于實(shí)際樣品的檢測(cè)，旨在為下一步開展土壤-小青菜系統(tǒng)中丁蟲腈的遷移、轉(zhuǎn)化、降解研究及殘留監(jiān)測(cè)提供方法參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

Shimadzu LC-30AD液相色譜儀，日本島津公司；AB SCIEX QTRAP 6500串聯(lián)質(zhì)譜儀，美國(guó) AB SCIEX 公司；Sigma 3-15K臺(tái)式冷凍離心機(jī)，德國(guó)Sigma公司；CK2000高通量組織研磨儀，北京托摩根公司。

Acquity UPLC HSS T3 色譜柱(100 mm×2.1 mm，1.8 μm)，簡(jiǎn)稱T3柱，美國(guó)Waters公司；Titank F5柱色譜柱(100 mm×2.1 mm，1.8 μm)，簡(jiǎn)稱F5柱；ACE Excel 2 C18 色譜柱(100 mm×2.1 mm，2 μm)，簡(jiǎn)稱C18柱，廣州菲羅門公司。

丁蟲腈、丁蟲腈砜、丁蟲腈硫醚、氟蟲腈、丁蟲腈酰胺(純度>99%)，上海丁百生物科技有限公司；甲醇、乙腈(色譜純)，德國(guó)Sigma-Aldrich公司；甲酸(質(zhì)譜純)，上海安譜科學(xué)儀器有限公司；乙二胺-N-丙基硅烷(primary secondary amine，PSA)、石墨化炭黑(graphitized carbon black，GCB)，上海安譜科學(xué)儀器有限公司；3種不同外徑規(guī)格(<8，10～20和20～30 nm)的多壁碳納米管(multi-walled carbon nanotube,MWCNTs)，中科院成都有機(jī)化學(xué)公司；超純水由Mill-Q試劑水設(shè)備(美國(guó)Millipore公司)制備；有機(jī)相濾膜(0.22 μm)，上海安譜科學(xué)儀器有限公司。

供試土壤及小青菜樣品均采自西南大學(xué)農(nóng)藥殘留檢測(cè)與安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)基地，土壤經(jīng)風(fēng)干、磨碎、過2 mm孔徑篩后備用，其基本理化性質(zhì)為:pH值6.73，有機(jī)質(zhì)11.35 g/kg。供試小青菜品種為蘇州青。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 儀器分析條件

色譜條件：采用F5柱，柱溫40 ℃，流速0.4 mL/min，進(jìn)樣量1 μL。流動(dòng)相為水(含體積分?jǐn)?shù)0.1%甲酸)(A相)和乙腈(B相)，梯度洗脫程序：0～5 min，10% B→90% B；5～7 min，90% B；7～9 min，90% B→10% B。

質(zhì)譜條件：采用電噴霧離子源(electrospray ionization，ESI)，掃描方式：正負(fù)離子同時(shí)掃描；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(multiple reaction monitoring，MRM)模式采集。碰撞氣壓力為Medium，氣簾氣為275.7 kPa，噴霧氣壓強(qiáng)和輔助加熱氣壓強(qiáng)均為344.7 kPa，離子源溫度為350 ℃，正離子模式離子化電壓為+5 500 V，負(fù)離子模式離子化電壓-4 500 V。丁蟲腈及4種代謝物的詳細(xì)質(zhì)譜參數(shù)見表1所示。

表1 丁蟲腈及其代謝物的質(zhì)譜參數(shù)Table 1 Mass spectrometry parameters for flufiprole and its metabolites

1.2.2 樣品提取與凈化

小青菜莖、葉和根：準(zhǔn)確稱取5.00 g樣品(根樣品準(zhǔn)確稱取2.00 g)于50 mL具塞離心管中，加入10 mL乙腈并垂直振蕩提取10 min，然后加入1 g NaCl并垂直振蕩1 min，于10 000 r/min離心5 min，取1.5 mL上清液加入含有20 mg MWCNTs(外徑為10～20 nm)的4 mL離心管中，渦旋1 min，于4 000 r/min離心3 min，取上清液過膜后上機(jī)。

土壤樣品：準(zhǔn)確稱取5.00 g樣品于50 mL具塞離心管中，加入5 mL超純水，再加入25 mL乙腈并垂直振蕩提取10 min，然后加入1 g NaCl并垂直振蕩1 min，于10 000 r/min離心5 min，取1.5 mL上清液加入含有20 mg MWCNTs(外徑為10～20 nm)的4 mL離心管中，渦旋1 min，于4 000 r/min離心3 min，取上清液過膜后上機(jī)。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

用乙腈分別溶解丁蟲腈，丁蟲腈砜，丁蟲腈硫醚，氟蟲腈及丁蟲腈酰胺標(biāo)準(zhǔn)品配制成質(zhì)量濃度為1 000 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，然后各吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)溶液配制質(zhì)量濃度為100 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，于-20 ℃避光保存，備用。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

稱取空白樣品，按1.2.2節(jié)的方法前處理后，獲得空白基質(zhì)提取液，分別配制質(zhì)量濃度為0.5、1、2.5、5、10、25、50和100 μg/L的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，通過UPLC-MS/MS檢測(cè)以獲得基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.5 添加回收試驗(yàn)

取空白樣品進(jìn)行4個(gè)不同水平(5、50、200和1 000 μg/kg)的添加回收試驗(yàn)，每個(gè)水平重復(fù)5次，于室溫下靜置0.5 h后按照1.2.2節(jié)的方法進(jìn)行前處理，獲得樣品提取液。測(cè)定前，將添加水平為1 000 μg/kg的樣品提取液按V(空白基質(zhì)提取液)∶V(樣品提取液)=9∶1進(jìn)行稀釋，其余添加水平的樣品不再進(jìn)行稀釋。計(jì)算添加回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采集、定量分析分別采用Analyst1.6.0和MultiQuant 3.0.2軟件，并通過Origin Pro 8軟件對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行作圖。

2 結(jié)果與討論

2.1 質(zhì)譜條件優(yōu)化

使用乙腈/水(0.1%甲酸)(4∶1,體積比)配制質(zhì)量濃度為0.1 mg/L的單標(biāo)溶液，采用注射泵以20 μL/min將單標(biāo)溶液分別注入離子源。首先在Q1 Mass模式下進(jìn)行全掃描，結(jié)果表明丁蟲腈，丁蟲腈硫醚和丁蟲腈酰胺在正離子模式下[M+H]+的響應(yīng)值顯著高于負(fù)離子模式，而丁蟲腈砜和氟蟲腈2種化合物則相反，在負(fù)離子模式[M-H]-下響應(yīng)值顯著高于正離子模式。然后在Product Ion模式下進(jìn)行碎片離子掃描，獲得高豐度和高穩(wěn)定性的子離子。最后在MRM模式下，對(duì)不同離子通道的裂解電壓(正離子模式0～300 V，負(fù)離子模式-300～0 V)和碰撞電壓(正離子模式5～180 eV，負(fù)離子模式-180～-5 eV)等參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，獲得最佳響應(yīng)的離子對(duì)信息。每種目標(biāo)化合物選擇2對(duì)離子對(duì)，以最高響應(yīng)的子離子為定量離子，另一子離子作為定性離子。采用上述優(yōu)化后的質(zhì)譜方法檢測(cè)不同濃度基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品及實(shí)測(cè)樣品，不同離子通道的質(zhì)譜圖顯示(圖2)，在上述幾種目標(biāo)物出峰位置均沒有雜質(zhì)峰干擾，且目標(biāo)物具有較好的重現(xiàn)性。

2.2 液相條件優(yōu)化

本文考察比較了乙腈/水和甲醇/水2種流動(dòng)相組成中，在水相中加入體積分?jǐn)?shù)0.1%甲酸后對(duì)于多種目標(biāo)物響應(yīng)值的影響，結(jié)果表明當(dāng)體積分?jǐn)?shù)0.1%甲酸水加入后，正離子模式下丁蟲腈、丁蟲腈酰胺和丁蟲腈硫醚的響應(yīng)值顯著提升，負(fù)離子模式下的丁蟲腈砜及氟蟲腈的響應(yīng)值變化不顯著，因此，0.1%甲酸水被用于水相。

選擇一種合適的固定相是實(shí)現(xiàn)多種目標(biāo)物快速分離和檢測(cè)的關(guān)鍵。本文在乙腈/0.1%甲酸水和甲醇/0.1%甲酸水流動(dòng)相體系下，進(jìn)一步考察比較了3種不同的色譜柱對(duì)于5種目標(biāo)化合物色譜保留和分離效果的影響。由圖2可以看出，使用F5柱在乙腈/0.1%甲酸水流動(dòng)相體系條件下可實(shí)現(xiàn)丁蟲腈及其4種代謝物的同時(shí)基線分離，且目標(biāo)物保留時(shí)間最短(<5.5 min)，分析效率最高。相比之下，在甲醇/0.1%甲酸水流動(dòng)相體系下，使用3種色譜柱均難以實(shí)現(xiàn)丁蟲腈酰胺和丁蟲腈的色譜分離。在乙腈/0.1%甲酸水流動(dòng)相體系下，使用T3柱僅能實(shí)現(xiàn)丁蟲腈及其代謝物的部分分離，使用C18柱難以實(shí)現(xiàn)丁蟲腈硫醚和丁蟲腈砜的色譜分離，且目標(biāo)物的保留時(shí)間均大于5.5 min。綜合考慮分析效率及色譜分離度，最終選擇F5柱-乙腈/0.1%甲酸水流動(dòng)相體系用于丁蟲腈及其代謝物的分析。

a F5柱-甲醇/0.1%甲酸水梯度洗脫；b F5柱-乙腈/0.1%甲酸水梯度洗脫；c T3柱-甲醇/0.1%甲酸水梯度洗脫；d T3柱-乙腈/0.1%甲酸水梯度洗脫；e C18柱-甲醇/0.1%甲酸水梯度洗脫；f C18柱-乙腈/0.1%甲酸水梯度洗脫；1-丁蟲腈酰胺；2-氟蟲腈；3-丁蟲腈；4-丁蟲腈硫醚；5-丁蟲腈砜圖2 流動(dòng)相組成及色譜柱對(duì)丁蟲腈及其代謝物色譜分離和保留時(shí)間的影響Fig.2 Effect of mobile phase compositions and chromatographic columns on chromatographic separation and retention time of flufiprole and its metabolites

2.3 小青菜和土壤凈化劑的選擇

蔬菜和土壤成分復(fù)雜，易對(duì)后續(xù)液質(zhì)檢測(cè)分析的準(zhǔn)確性造成影響，因此對(duì)凈化劑的選擇具有更高的要求。在本實(shí)驗(yàn)室前期發(fā)表的檢測(cè)方法基礎(chǔ)之上[16-17]，本文綜合比較了8種凈化劑對(duì)于樣品中雜質(zhì)凈化效果和目標(biāo)物回收率的影響。

由圖3可以看出，未凈化的土壤樣品的提取液中色素雜質(zhì)含量較低，故8種凈化劑對(duì)土壤的凈化效果外觀上差異不顯著。而對(duì)于小青菜樣品，上述幾種凈化劑的凈化效果則存在顯著差異。使用不同質(zhì)量(50和100 mg)的PSA凈化劑對(duì)提取液中的色素幾乎沒有去除效果，凈化效果顯著弱于其他凈化劑組合。色素雜質(zhì)會(huì)導(dǎo)致色譜柱堵塞及儀器靈敏度降低。相比之下，含GCB組合(50 mg GCB，100 mg GCB，50 mg GCB+50 mg PSA)以及3種不同外徑的MWCNTs則表現(xiàn)出良好的色素去除效果。

a-空白土壤樣品基質(zhì)凈化效果對(duì)比;b-空白小青菜樣品基質(zhì)凈化效果對(duì)比注：1未凈化空白基質(zhì)提取液；2～4分別為使用20 mg外徑為<8 nm，10～20 nm，20～30 nm的多壁碳納米管凈化的空白基質(zhì)提取液；5～9分別為使用50 mg PSA，100 mg PSA，50 mg GCB，100 mg GCB，50 mg PSA+50 mg GCB凈化的空白基質(zhì)提取液圖3 土壤及小青菜空白基質(zhì)樣品中不同凈化劑的凈化效果比較Fig.3 Comparison of purification efficacy of different sorbents in the control samples of pakchoi and soil

值得注意的是，GCB類凈化劑在對(duì)色素雜質(zhì)表現(xiàn)出較好的凈化效果的同時(shí)，也會(huì)對(duì)某些特殊結(jié)構(gòu)的目標(biāo)化合物產(chǎn)生一定程度的吸附，從而影響目標(biāo)化合物的準(zhǔn)確定量。鑒于此，本文進(jìn)一步考察比較了8種凈化劑對(duì)丁蟲腈及其代謝物回收率的影響。土壤樣品和小青菜添加回收試驗(yàn)各設(shè)置3次重復(fù)，添加濃度為0.1 mg/kg。由圖4可以看出，使用20 mg 10～20 nm MWCNTs作為凈化劑時(shí)，土壤和小青菜中丁蟲腈及其代謝物均可獲得滿意的回收率(大于83%)；使用50 mg PSA和100 mg PSA作為凈化劑時(shí)，小青菜中的丁蟲腈硫醚的回收率低于70%；使用100 mg GCB為凈化劑時(shí)，小青菜中丁蟲腈硫醚的回收率低于80%；使用50 mg GCB+50 mg PSA為凈化劑時(shí)，小青菜中丁蟲腈硫醚和丁蟲腈砜的回收率低于80%，土壤中丁蟲腈砜的回收率低于80%；使用50 mg GCB為凈化劑，目標(biāo)物的回收率均大于80%，但目標(biāo)物的回收率略低于20 mg外徑10～20 nm MWCNTs。綜合考慮凈化效果和回收率，最終本實(shí)驗(yàn)選擇20 mg外徑10～20 nm MWCNTs作為土壤樣品和蔬菜樣品的凈化劑。

2.4 方法驗(yàn)證

2.4.1 方法線性及基質(zhì)效應(yīng)

在0.5～100 μg/L的線性范圍內(nèi)，丁蟲腈及其代謝物在小青菜(根、莖和葉)及土壤基質(zhì)中的線性良好(相關(guān)系數(shù)≥0.9923)?；|(zhì)效應(yīng)(matrix effect,ME)是指目標(biāo)物的離子化受共流出物的影響，從而導(dǎo)致目標(biāo)物響應(yīng)值增高或降低的現(xiàn)象，通過ME=(基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率-溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率)/溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率計(jì)算[18]。ME在-20%～20%，屬于弱基質(zhì)效應(yīng)；ME在-50%～-20%和20%～50%，屬于中等基質(zhì)效應(yīng)；當(dāng)ME<-50%或ME>50%時(shí)，表現(xiàn)為強(qiáng)基質(zhì)效應(yīng)[19]。由表2可知，丁蟲腈及其4種代謝物在小青菜莖，葉和土壤基質(zhì)中ME均介于-20%～20%，屬于弱基質(zhì)效應(yīng)；而丁蟲腈、丁蟲腈酰胺、丁蟲腈砜和丁蟲腈硫醚在小青菜根基質(zhì)中存在中等基質(zhì)效應(yīng)，為-37.4%～-27.9%。由于存在中等基質(zhì)效應(yīng)，為了保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線被用于上述幾種目標(biāo)物的定量分析。

圖4 不同凈化劑對(duì)于土壤和小青菜中丁蟲腈及其代謝物回收率的影響Fig.4 Effects of different sorbents on the recovery of flufiprole and its metabolites in the soil and pakchoi samples

表2 丁蟲腈及其代謝物在小青菜(根、莖和葉)和土壤中的線性關(guān)系Table 2 Linear relationship of flufiprole and its metabolites in pakchoi (roots, stems and leaves) and soil samples

續(xù)表2

2.4.2 回收率和方法定量限

通過開展添加回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明丁蟲腈及其代謝物的回收率為76%～107%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)為0.8%～7.6%(表3)。以滿足農(nóng)藥殘留分析添加回收率要求的最低添加濃度為方法的定量限(limit of quantification,LOQ)[17]，丁蟲腈及其4種代謝物在小青菜(根、莖、葉)及土壤中的LOQ均為5 μg/kg。

表3 丁蟲腈及其代謝物在小青菜(根、莖和葉)和土壤中的添加回收率(n=5)Table 3 Recovery of flufiprole and its metabolites in pakchoi (roots, stems and leaves) and soil samples (n=5)

2.5 實(shí)際樣品檢測(cè)

如圖5所示，丁蟲腈酰胺、丁蟲腈砜以及氟蟲腈為丁蟲腈在小青菜-土壤系統(tǒng)中的主要代謝產(chǎn)物，而丁蟲腈硫醚在實(shí)際樣品中均未檢出。在小青菜根、莖和葉樣品中均檢測(cè)出一定含量的氟蟲腈和丁蟲腈砜殘留，殘留質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為3.702，0.107，0.018 mg/kg及0.020，0.029，0.215 mg/kg。鑒于氟蟲腈和丁蟲腈砜2種代謝物具有較高的非靶標(biāo)生物毒性，在丁蟲腈的使用過程中，應(yīng)當(dāng)注意其代謝產(chǎn)物殘留帶來的環(huán)境安全風(fēng)險(xiǎn)。

1 丁蟲腈酰胺；2 氟蟲腈；3 丁蟲腈；4 丁蟲腈硫醚；5 丁蟲腈砜圖5 小青菜(根、莖和葉)及土壤的實(shí)際樣品液質(zhì)檢測(cè)色譜圖Fig.5 Typical UPLC-MS chromatograms of real samples of pakchoi (roots, stems and leaves) and soil

3 結(jié)論

本研究建立了小青菜和土壤中丁蟲腈及其多種代謝物(丁蟲腈砜、丁蟲腈硫醚、丁蟲腈酰胺及氟蟲腈)殘留的UPLC-MS/MS檢測(cè)方法。供試樣品經(jīng)乙腈快速提取，MWNTs凈化，UPLC-MS/MS檢測(cè)，基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。該方法操作簡(jiǎn)單、快速準(zhǔn)確、靈敏度高、重現(xiàn)性良好，檢測(cè)成本低。該方法LOQ為5 μg/kg，滿足不同生長(zhǎng)階段小青菜樣品中目標(biāo)農(nóng)藥及代謝物殘留檢測(cè)的要求。實(shí)際樣品檢測(cè)結(jié)果表明，該方法具有較好的適用性，可用于土壤和小青菜中丁蟲腈及其多種代謝產(chǎn)物的快速篩查及準(zhǔn)確定量分析，同時(shí)為下一步開展土壤-小青菜系統(tǒng)中丁蟲腈的遷移、轉(zhuǎn)化、降解研究及殘留監(jiān)測(cè)提供參考。