許加明
(江蘇省漣水縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 223400)
羊痘屬于重特大動(dòng)物傳染性疫病,被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE) 列為A 類重大傳染病,我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疾病。羊痘的病原體為痘病毒,分為山羊痘病毒和綿羊痘病毒,兩者基因組非常相似,但在自然條件下一般不會(huì)發(fā)生交叉感染。在規(guī)范的飼養(yǎng)管理下,該病毒不易侵入感染羊群,若出現(xiàn)潮濕高熱、通風(fēng)不良、營(yíng)養(yǎng)不足、防疫不嚴(yán)等情況時(shí),羊群便極易爆發(fā)羊痘,影響羊群健康及皮毛質(zhì)量,大大降低了養(yǎng)殖效益。若養(yǎng)殖人員自我保護(hù)不當(dāng),接觸病羊后,也易感染羊痘病毒。因此,在日常飼養(yǎng)過(guò)程中需加強(qiáng)疫病防御,確保羊養(yǎng)殖業(yè)的穩(wěn)健發(fā)展。
1879 年,Hansen 首次報(bào)道了挪威的山羊痘,后來(lái)世界各地也陸續(xù)報(bào)道該病。羊痘病原為痘病毒,是一種DNA 病毒,呈現(xiàn)出編織狀圓柱形,長(zhǎng)度約300nm、寬度約200nm。該病毒主要侵染皮膚、黏膜等組織細(xì)胞,并可產(chǎn)生毒素,使宿主發(fā)生潰爛、化膿形成皰疹。痘病毒抗逆性較強(qiáng),在干燥條件下,0℃溫度下可長(zhǎng)時(shí)間生存,在羊毛、養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)生存約半年,干燥的痂皮內(nèi)能成活數(shù)月至數(shù)年。該病毒對(duì)醚、氯仿、直射陽(yáng)光、酸、堿及常規(guī)消毒劑都較敏感,一般55℃,30min 可將其殺死滅活。
易感動(dòng)物為羊,沒有品種和年齡的差異,其中羔羊?qū)Χ徊《镜拿舾行宰顝?qiáng),特別是斷奶前后羔羊和青年羔羊發(fā)病后致死率較高,死亡率可達(dá)70%。另外,綿羊中細(xì)毛羊比粗毛羊或土種羊易感染。
病羊是直接傳染源,羊痘病毒主要存在痘疹、滲出液、鼻黏膜分泌物、排泄物、乳汁、精液、脫落的痂皮、血液中,通過(guò)呼吸道和消化道傳播,或通過(guò)損傷的皮膚黏膜侵染。病羊接觸的護(hù)理工具、皮毛產(chǎn)品、飼料、水、墊草、體外寄生蟲、飼養(yǎng)管理人員及運(yùn)輸車輛都是該病毒的傳播媒介。
該病一年四季均可發(fā)生,但以春秋兩季多發(fā)。該病傳染性強(qiáng),往往呈地方性流行或廣泛性流行,一旦發(fā)現(xiàn)有羊感染該病毒,便迅速蔓延傳播至整個(gè)羊群。特別是在氣候寒冷、霜凍、梅雨季、枯草期、蚊蟲寄生蟲活動(dòng)頻繁和飼養(yǎng)管理等情況下,可促使發(fā)病和加重病情。
該病毒的潛伏期為2~12d。發(fā)病初期,病羊表現(xiàn)為精神不振、食欲不佳,體溫升至41~42℃,眼結(jié)膜潮紅充血,從眼角分泌出大量的清澈淚液,鼻腔中先是流出清澈鼻液,隨后變成膿性,呼吸困難,心跳加快等癥狀。同時(shí)在1~4d 內(nèi)鼻黏膜、眼角、唇邊、乳房、四肢內(nèi)側(cè)、陰囊出現(xiàn)小紅點(diǎn),1~2d 后形成丘疹,直徑3~5mm,豌豆大小,突出于皮膚表面。隨著病情的發(fā)展,丘疹不斷增大,有的羊只會(huì)擴(kuò)散至全身,逐漸形成白色水皰,并含有清亮的漿液,水皰周圍皮膚紅腫,羊只體溫會(huì)迅速降低。再過(guò)3~4d 后,水皰會(huì)變成膿皰,體溫又開始逐漸上升,羊只出現(xiàn)心跳加快,心率衰竭,食欲廢絕、精神極度萎靡等癥狀。1~2d 后膿皰破裂,膿包干涸形成棕紅色痂皮,痂皮脫落后皮膚表面留下紅斑,之后慢慢變淡,一般在2~3 周后能恢復(fù)健康。羔羊?qū)υ摬《咎貏e敏感,感染后膿皰之間相互融合形成大的膿皰,并呈現(xiàn)全身癥狀,甚至口腔黏膜、支氣管、胃腸道、肺臟、心臟、淋巴結(jié)等組織表面均會(huì)出現(xiàn)水皰和膿皰,極易引發(fā)敗血癥,造成較高的死亡率。此外,妊娠期母羊感染后易流產(chǎn)或生產(chǎn)出死胎。
本病通過(guò)對(duì)臨床癥狀的觀察和流行病學(xué)調(diào)查可以做出初步診斷,確診需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)室方法。實(shí)驗(yàn)室可以采用切片鏡檢的方法進(jìn)行檢查、也可以應(yīng)用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)檢查,還可以應(yīng)用分子生物學(xué)方法檢查。通過(guò)鏡檢和瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)是本病當(dāng)前最常見的檢測(cè)方法,但使用分子生物學(xué)方法可以有效提升檢測(cè)效率。
在病羊或病死羊皮膚上找出膿皰和硬皮,選擇沒有形成化膿灶或選擇剛剛形成的皮疹,將其切成薄片,對(duì)其進(jìn)行染色后應(yīng)用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行鏡檢,可見在視野中有一些橢圓形原生動(dòng)物體,還可以通過(guò)顯微鏡檢查病毒夾雜物。
分離病羊膿皰中的皰液,而后用磷酸緩沖液稀釋膿皰,將稀釋后的液體經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融,用超聲波對(duì)其進(jìn)行裂解,離心后取上清液備用。分離病羊血清后,應(yīng)用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)在37℃中放置24~48h 后,對(duì)結(jié)果進(jìn)行觀察,可見有明顯的沉淀線,確定其為陽(yáng)性感染。由此可以確定本病。
當(dāng)前用于檢測(cè)本病的分子生物學(xué)方法主要有PCR 方法和LAMP 方法。其中PCR 方法又分兩種,即多重PCR 和實(shí)時(shí)熒光PCR。多重PCR 方法是在普通PCR 的基礎(chǔ)上進(jìn)行重復(fù)的PCR,這樣可以提升PCR 技術(shù)的敏感度,而且在檢測(cè)時(shí)具有樣品少、誤差小和內(nèi)部對(duì)照等優(yōu)勢(shì)。還可同時(shí)對(duì)多種病原進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)時(shí)熒光PCR 技術(shù)是在PCR 基礎(chǔ)上添加熒光基團(tuán),在試驗(yàn)中可以達(dá)到對(duì)樣品反應(yīng)的實(shí)時(shí)檢測(cè)。以便達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板的分析。應(yīng)用本方法能提升試驗(yàn)靈敏度,通常只要有病原體,就可以通過(guò)本試驗(yàn)檢測(cè)到結(jié)果。因此,本試驗(yàn)具有高特異性、高靈敏度和簡(jiǎn)便高效的特點(diǎn),已逐漸成為本病的主要檢測(cè)方法。LAMP 是指環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增,應(yīng)用本方法具有較高的檢測(cè)率,其與實(shí)時(shí)熒光定量PCR 相媲美,進(jìn)一步降低試驗(yàn)條件,縮短試驗(yàn)的復(fù)雜度和試驗(yàn)時(shí)間。臨床應(yīng)用程度高于PCR 技術(shù)。
每年定期全群接種羊痘疫苗,每份疫苗以0.5ml 生理鹽水稀釋后皮下注射0.5ml。接種后第5 天就能形成免疫力,免疫有效期可維持1 年左右。新生羔羊滿月后進(jìn)行首免,斷奶后再進(jìn)行1 次加強(qiáng)免疫[1]。
本病預(yù)防還需要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,在飼養(yǎng)過(guò)程中需要保持羊舍清潔、干燥工作,羊舍最好每天打掃,及時(shí)將羊舍內(nèi)的各種污染物質(zhì)和有害物質(zhì)清理出去,可以避免這些有害物質(zhì)蓄積后造成病原滋生。羊舍要具有良好的通風(fēng)條件,能及時(shí)排出羊舍內(nèi)產(chǎn)生的有害氣體排。尤其是在天氣較為寒冷的季節(jié),羊舍需要在做好保暖度的同時(shí)進(jìn)行良好的通風(fēng),避免有害氣體在羊舍內(nèi)蓄積后,造成羊群亞健康狀態(tài)。養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)制定科學(xué)合理的消毒制度,定期對(duì)羊舍內(nèi)外進(jìn)行消毒,消毒要做到徹底和全面,不能留有死角。消毒液要定期更換,避免長(zhǎng)期應(yīng)用同一類消毒液而造成病原對(duì)消毒液不敏感,從而使消毒效果不好。對(duì)進(jìn)入養(yǎng)殖場(chǎng)的車輛和人員也要進(jìn)行嚴(yán)格消毒,通常養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)避免外來(lái)人員和車輛進(jìn)入,如確需要進(jìn)入,人員需要通過(guò)噴霧消毒的方式或紫外線照射的方式消毒,而車輛不僅要通過(guò)消毒池對(duì)車輪消毒,還要通過(guò)噴霧方式對(duì)車身進(jìn)行消毒。嚴(yán)格消毒才能避免病原侵入。
在飼養(yǎng)過(guò)程中要調(diào)節(jié)羊群飼養(yǎng)密度,確保密度合理,在天氣炎熱的季節(jié)將密度調(diào)小,在天氣寒冷的季節(jié)將密度調(diào)大。有利于保持溫度相對(duì)恒定。羊舍內(nèi)最好保持溫濕度相對(duì)恒定,以便羊群在最適宜的溫度中生活。
養(yǎng)殖場(chǎng)最好采取自繁自養(yǎng)的飼養(yǎng)方式,這樣可以避免外來(lái)病原微生物進(jìn)入。但有的養(yǎng)殖場(chǎng)確實(shí)需要引進(jìn)羊只,在引進(jìn)前要在引種地進(jìn)行嚴(yán)格檢疫,確保引進(jìn)的羊只沒有攜帶特種病原,在引進(jìn)羊只進(jìn)入養(yǎng)殖場(chǎng)后不能立刻混群飼養(yǎng),需要經(jīng)過(guò)30d 的隔離觀察,如果羊只在觀察期間沒有發(fā)生任何疾病,且經(jīng)過(guò)檢疫后也沒有攜帶病原,則可以混群飼養(yǎng)。沒有引進(jìn)羊只的養(yǎng)殖場(chǎng)也要定期進(jìn)行檢疫,以便能及早發(fā)現(xiàn)羊群中的病羊,一旦在檢疫中發(fā)現(xiàn)病羊,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行隔離治療,并對(duì)病羊所在圈舍進(jìn)行消毒,防止病原擴(kuò)散。且對(duì)病羊接觸過(guò)的各種物品均要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格處理,對(duì)器具等應(yīng)用福爾馬林浸泡消毒,圈舍內(nèi)有動(dòng)物時(shí)可用常規(guī)聚維酮碘進(jìn)行消毒,在沒有動(dòng)物的情況下可以應(yīng)用甲醛進(jìn)行熏蒸消毒。對(duì)病死羊應(yīng)采取無(wú)害化處理,對(duì)病羊尸體采取焚燒或深埋的方式進(jìn)行處理,可以有效防止病原擴(kuò)散。
隔離病羊時(shí)采取的隔離方式是將病羊帶入隔離區(qū)飼養(yǎng),并封鎖養(yǎng)殖場(chǎng)周圍5kg 內(nèi)的區(qū)域,嚴(yán)禁動(dòng)物進(jìn)出。
對(duì)本病的預(yù)防還需要進(jìn)行驅(qū)蟲和殺蟲。養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)定期對(duì)羊群進(jìn)行驅(qū)蟲,驅(qū)蟲可以通過(guò)口服或注射廣譜抗寄生蟲藥物,還可通過(guò)藥浴的方式進(jìn)行驅(qū)蟲。除驅(qū)蟲外,還要對(duì)周圍環(huán)境中的蚊蟲等進(jìn)行驅(qū)殺。
對(duì)病羊皮膚表面的丘疹和皰疹先使用高錳酸鉀溶液進(jìn)行沖洗,然后再涂上紫藥水或0.5%聚維酮碘溶液;病羊口腔中的丘疹或皰疹,可用高錳酸鉀溶液或稀醋清洗,每天2 次;病羊乳頭部位可用0.5%~1%聚維酮碘溶液浸泡。為防止繼發(fā)性感染,可用160 萬(wàn)單位阿莫西林、10ml 黃芪多糖注射液、10ml 魚金注射液(魚腥草、金銀花提取液)三者混合,肌肉注射;體重30kg 以上的羊只每日注射2 次,體重30kg 以下羊只藥量減半,每日注射2 次,連續(xù)用3d[2]。對(duì)已引發(fā)繼發(fā)感染的病羊,可按每千克體重肌肉注射30mg 卡那霉素,同時(shí)配合按體重使用0.5mg/kg 維生素C、0.6mg 維生素B2、0.8mg 嗎啉胍,每天2次,7d 為1 個(gè)療程[3]。
另外,采用中草藥治療效果也非常明顯,如牛子清理湯:15g 元參、10g 桔梗、10g 荊芥、8g 防風(fēng)、12g 山梔子、12g 牛蒡子、8g 西河柳、10g 黃芩、7g 甘草、8g 蟬蛻、15g 金銀花、12g 連翹、8g 霜桑葉,混合水煎,口服(大羊一次量)[4]。
羊痘預(yù)防關(guān)鍵是阻斷傳染源。在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中,堅(jiān)持自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出的飼養(yǎng)計(jì)劃,避免疫區(qū)引種;保持良好衛(wèi)生的養(yǎng)殖環(huán)境,定時(shí)對(duì)欄舍內(nèi)外進(jìn)行嚴(yán)格全面消毒、驅(qū)蟲;科學(xué)合理地搭配飼料,確保營(yíng)養(yǎng)均衡;嚴(yán)格執(zhí)行檢疫制度,全面掌控羊群生長(zhǎng)發(fā)育狀況;及時(shí)接種疫苗,結(jié)合中西醫(yī)治療防范,有效避免疫病的發(fā)生,從而提高養(yǎng)殖效益。