王曉蕾

（山東省煙臺市福山區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 265500）

為保證生豬養(yǎng)殖收益，研究者過多地關(guān)注如何選擇高產(chǎn)性狀，忽視了抗病性狀的選擇，同時由于生豬養(yǎng)殖密度增加，運(yùn)動量降低，造成生豬抗病力減弱，養(yǎng)殖戶不斷使用抗生素藥物造成細(xì)菌耐藥性問題突出，這些問題最終引發(fā)生豬遺傳改良效率顯著降低，不利于生豬產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。隨著生物技術(shù)和分子遺傳學(xué)研究的發(fā)展，生豬新品種培育必須朝著如何提高豬群抗病力方向發(fā)展，這樣才能保障豬只健康生長，保證豬肉產(chǎn)品食用安全。

1 生豬抗病性的遺傳基礎(chǔ)

1.1 抗病性

從遺傳機(jī)制上對生豬抗病性進(jìn)行分析，主要包括特異性和非特異性抗病。

生豬的特異性抗病性是指生豬對某種特定的細(xì)菌或病毒等病原體具有的抗病能力，這種抗病性主要和其對應(yīng)的抗性基因有關(guān)，受一個或多個抗病基因位點(diǎn)的控制。

生豬的非特異性抗病性主要和非典型癥狀有關(guān)，隨著抗生素耐藥性、繼發(fā)或混合感染等使生豬某種疫病的典型癥狀不突出，無法通過常規(guī)育種提高生豬的抗病能力，但生豬非特異性抗病性的增加可以增加豬群對抗病原體的感染范圍，減少抗生素使用。因此，提高豬群非特異抗病性可以極大地減輕生豬養(yǎng)殖負(fù)擔(dān)，提高豬群健康水平，目前，與非特異性抗病性有關(guān)的抗性基因研究報道越來越多，可作為抗病育種的選擇依據(jù)。

1.2 抗性基因

1.2.1 IFNs 基因

干擾素（Interferons,IFNs）誘導(dǎo)表達(dá)的基因?yàn)楦蓴_素基因，干擾素基因表達(dá)的蛋白對病毒復(fù)制具有抑制作用，且從病毒入侵到釋放多個階段均發(fā)揮抗病性作用。張麗偉（2021）等建立重組豬干擾素α6 的CHO 細(xì)胞分泌表達(dá)工藝，通過親和層析純化獲得豬干擾素α6 蛋白，生物活性為1.7×107U/mg，該蛋白對口蹄疫病毒毒株增殖具有抑制作用，細(xì)胞病變抑制結(jié)果顯示，不同稀釋比例對不同口蹄疫病毒感染的細(xì)胞具有抑制作用，為豬口蹄疫病毒防治提供新的治療途徑，也促進(jìn)了新型基因工程抗病毒制劑的開發(fā)[1]。周煒等（2020）建立了哺乳仔豬的豬流行性腹瀉病毒腹瀉模型，病豬感染72h 后全部出現(xiàn)脫水和腹瀉癥狀，采集小腸病料為豬流行性腹瀉病毒陽性樣本，通過重組豬干擾素α 對其進(jìn)行治療，治愈率達(dá)60%，表明重組豬干擾素α 可治療豬流行性腹瀉病毒，且對病豬腎臟具有一定的保護(hù)作用[2]。

1.2.2 NRAMP1 基因

NRAMP1 基因?yàn)樨i自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白1 基因，該基因表達(dá)的蛋白質(zhì)對沙門氏菌、結(jié)核桿菌等致病菌具有免疫作用。顧克翠（2011）通過構(gòu)建缺失表達(dá)載體研究了NRAMP1 基因啟動子在生豬肺泡巨噬細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)活性，研究發(fā)現(xiàn)，NRAMP1 基因核心啟動子區(qū)為pLUC487，在豬肺泡巨噬細(xì)胞中可特異性啟動下游目的基因的表達(dá)[3]。張斌等（2020）從分子遺傳學(xué)角度對滇陸豬不同基因型個體抗病性的遺傳差異進(jìn)行分析，研究發(fā)現(xiàn)，滇陸豬不同組織中NRAMP1基因表達(dá)量具有明顯差異（＜0.05），肺臟表達(dá)量最高，其次為肝臟、脾臟和心臟，該基因的第5 外顯子（SNP1）、第5 內(nèi)含子（SNP2）和第6 外顯子（SNP3）分別存在一個單核苷酸多態(tài)性，純合群體與雜合群體肝臟的Nramp1 基因-SNP2 表達(dá)量不同，雜合群體肝臟表達(dá)量顯著高于純合群體，SNP2 位點(diǎn)變異對生豬免疫應(yīng)答反應(yīng)具有影響，可作為滇陸豬抗病育種的分子標(biāo)記。

1.2.3 ETEC 受體基因

腸毒素大腸桿菌（ETEC）可引發(fā)不同年齡豬群腹瀉，ETEC 的致病性與病原菌在小腸上皮細(xì)胞的定居能力有關(guān)，ETEC 受體基因有許多，如F4、F5、F18 等，其中F4ac 型是ETEC 中最易感類型，當(dāng)生豬小腸黏膜上存在FE 受體，F(xiàn)4 黏附素即可集合感染發(fā)病，表現(xiàn)為致病性，若無受體存在則不發(fā)病，表現(xiàn)為抗病性。龍清孟等（2017）將加系大約克血緣導(dǎo)入到新培育的美系大約克抗腹瀉專門化新品系內(nèi)，研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)4ac 的受體基因MUC13 基因GG 型是一種腹瀉抗性基因型個體，在保留加系大約克血統(tǒng)條件下，通過雜交選育的方法成功將腹瀉抗性基因GG 型導(dǎo)入到美系大約克內(nèi)，獲得的具有腹瀉抗性品種可純繁推廣。

2 生豬抗病育種的途徑

2.1 表型選擇

生豬抗病性是由多個基因控制的閾性狀組成，呈非連續(xù)變異特征，當(dāng)X 超過某一遺傳閾值才會表現(xiàn)出的性狀，這也是在同樣飼養(yǎng)環(huán)境下，疫病流行時有的生豬發(fā)病而有的健康，發(fā)病后有的生豬可以康復(fù)而部分病豬會死亡的原因。

根據(jù)表型選擇具有抗病性的生豬，“有針對性的”讓其大量繁殖，這樣所產(chǎn)的后代群體中具有抗病性的生豬數(shù)量越來越多，這些群體多含有的抗病性基因頻率也會上升，最后獲得的群體抗病水平高。表型選擇是一種簡單且耗時的育種選擇方式，只有當(dāng)生豬發(fā)病后才可選擇抗病性豬只，由于抗病性狀遺傳力低，部分抗病基因與生產(chǎn)性狀呈負(fù)相關(guān)，造成選擇難度大，不便于后裔測定。

2.2 標(biāo)記輔助選擇

標(biāo)記輔助選擇是基于基因水平的育種選擇方式，包括抗病主基因或多基因兩種標(biāo)記輔助選擇。徐慶磊等（2019）對大白仔豬腹瀉抗性候選基因進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，整合素β5 基因在抗性大白仔豬小腸組織中的表達(dá)量顯著低于易感個體，黏蛋白13 基因在抗性大白仔豬小腸組織中的表達(dá)量顯著高于易感個體，兩個基因和仔豬腹瀉抗性有重要相關(guān)性，可作為抗腹瀉仔豬的標(biāo)記輔助選擇依據(jù)。楊荔等（2020）對引發(fā)斷奶仔豬腹瀉的F18 大腸桿菌受體相關(guān)分子—α-1,3 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因（FUT3）基因研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)UT3 基因在F18 大腸桿菌敏感型仔豬十二指腸中表達(dá)水平顯著高于抗性型，當(dāng)不同的F18 大腸桿菌刺激豬小腸上皮細(xì)胞后，F(xiàn)UT3 基因表達(dá)量均會極顯著升高，因此，F(xiàn)UT3 基因在仔豬細(xì)菌性腹瀉中具有抗性調(diào)控功能，對今后仔豬抗腹瀉育種具有一定的意義。

2.3 基因工程抗病育種

由于生豬疾病是由病原體基因和感染宿主基因間作用才引發(fā)的感染，當(dāng)宿主自身防御機(jī)能較低，病原體致病基因侵襲宿主后造成生理失衡才會引發(fā)的病變，因此，抗病育種也可從動物自身免疫入手，通過研發(fā)基因工程疫苗來改造病原體基因，進(jìn)而喪失致病作用。如李德山（2020）利用細(xì)菌展示和流式細(xì)胞儀篩選出14 株抗O 型口蹄疫病毒的高親和力豬源單鏈抗體，可以作為同源基因工程抗體進(jìn)行下一步的抗蹄疫病毒疫苗研究。

3 結(jié)語

綜上所述，隨著基因組學(xué)研究和技術(shù)的發(fā)展，傳統(tǒng)的抗病選擇不再僅僅依據(jù)表型選擇，以DNA 多態(tài)性為基礎(chǔ)的遺傳標(biāo)記被廣泛應(yīng)用于生豬抗病育種的選擇。隨著免疫學(xué)研究的深入，生豬抗病育種的研究也會不斷豐富和完善，為我國選育出抗病性強(qiáng)的生豬品種，同時可減少生豬養(yǎng)殖過程中抗生素藥物的使用，保障動物福利和豬肉食品安全。