●劉 飛 甘奇超 袁 淵 王 偉 黃 強(qiáng)

（1.重慶多普泰制藥股份有限公司 重慶 萬盛 400800；2.重慶銘實(shí)農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司 重慶 萬盛 400800）

日本醫(yī)蛭（Hirudo nipponica Whitman）屬于環(huán)節(jié)動(dòng)物門，醫(yī)蛭科，醫(yī)蛭屬[1]，別名水蛭稻田醫(yī)蛭[2]。水蛭作為一種傳統(tǒng)的活血化瘀藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[3]，是目前《中華人民共和國(guó)藥典》唯一收錄的以動(dòng)物血液為食物來源的水蛭藥材種類，具有破血通經(jīng)，逐瘀消癥的功能，主治血瘀經(jīng)閉，癥瘕痞塊、中風(fēng)偏癱、跌打 損傷[4]。近年來臨床研究表明，水蛭還具有抗血栓[5]、抗炎癥[6]、抗腫瘤[7-8]、抗動(dòng)脈粥樣硬化[9]等作用，我國(guó)以水蛭為原材料的中成藥有90余種[10-11]，如脈血康膠囊、通心絡(luò)膠囊等。

由于日本醫(yī)蛭市場(chǎng)需求銳增，群眾對(duì)其濫捕濫抓，加上生態(tài)環(huán)境的不斷惡化，導(dǎo)致野生資源逐漸減少，因此日本醫(yī)蛭人工養(yǎng)殖行業(yè)日漸興盛。在人工養(yǎng)殖的過程中發(fā)現(xiàn)我國(guó)各地區(qū)日本醫(yī)蛭顏色有所差異，主要為墨綠色、黃色和白色。其中墨綠色日本醫(yī)蛭主要分布于東北地區(qū)，俗稱“黑苗”；黃色日本醫(yī)蛭主要分布于山東、河北、湖北等地，俗稱“黃苗”；白色日本醫(yī)蛭主要分布于江西等地區(qū)，俗稱“白苗”。針對(duì)不同底色日本醫(yī)蛭的養(yǎng)殖差異性研究尚未見報(bào)道，本研究對(duì)不同底色日本醫(yī)蛭的成活率、增重率作差異性比較，為日本醫(yī)蛭人工養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

日本醫(yī)蛭鑒定方法采用楊潼教授《中國(guó)動(dòng)物志》中日本醫(yī)蛭鑒定方法，日本醫(yī)蛭采自東北地區(qū)及山東、江西等地，健康無病，平均體重 0.25 g。采集后的日本醫(yī)蛭養(yǎng)殖于120 cm× 60 cm×50 cm的聚乙烯塑料箱中，箱底設(shè)有30目防逃網(wǎng)，養(yǎng)殖用水為地下井水，水溫20～23℃，溶氧為5.8～8.2 mg/L，pH7.1～7.3。

1.2 試驗(yàn)方法及管理

將日本醫(yī)蛭進(jìn)行分箱養(yǎng)殖，每箱5000尾，并設(shè)5個(gè)平行試驗(yàn)組。將新鮮豬血作為餌料灌制到豬小腸中，按照每箱日本醫(yī)蛭5 L的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行投喂。飼養(yǎng)周期為30 d（2021年5月5日至2021年6月5日），投喂頻率為每7 d 1次，共計(jì)4次。養(yǎng)殖過程中觀察日本醫(yī)蛭活動(dòng)狀態(tài)，保持室內(nèi)安靜，做好遮光措施，避免強(qiáng)光照射，每天沖洗養(yǎng)殖箱，及時(shí)挑出死亡水蛭，保持養(yǎng)殖箱的 清潔。

1.3 樣品采集和數(shù)據(jù)分析

放入養(yǎng)殖箱前，稱量所有日本醫(yī)蛭總質(zhì)量（精確到0.01 g），計(jì)算個(gè)體平均體質(zhì)量，還需稱量每箱醫(yī)蛭的總質(zhì)量，稱量前用濕潤(rùn)的紗布或綿柔紙巾除去醫(yī)蛭表面水分和臟物。試驗(yàn)開始后，每次餌料投喂前后按實(shí)驗(yàn)分組分別統(tǒng)計(jì)日本醫(yī)蛭的總質(zhì)量和箱內(nèi)醫(yī)蛭剩余尾數(shù)，計(jì)算日本醫(yī)蛭的體重增重率和成活率。

試驗(yàn)結(jié)果數(shù)值用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS17.0在a=0.05水平下進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)經(jīng)方差分析后組間兩兩比較顯著性差異。體重增重率、成活率和攝食量見下列公式：

W1：每次投喂前日本醫(yī)蛭平均個(gè)體質(zhì)量（g）；W2：每次投喂7 d后日本醫(yī)蛭平均個(gè)體質(zhì)量（g）；S1：試驗(yàn)開始時(shí)日本醫(yī)蛭的尾數(shù)（尾）；S2：每次投喂7 d后日本醫(yī)蛭剩余尾數(shù)（尾）；V1：養(yǎng)殖箱中剩余餌料總量（L）；V2：投喂餌料總量（L）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同底色日本醫(yī)蛭成活率比較

不同底色日本醫(yī)蛭成活率，見表1。

表1 不同底色日本醫(yī)蛭成活率 單位：%

由表1可知，3種底色日本醫(yī)蛭在人工養(yǎng)殖下成活率存在顯著差異，前2次投喂黑苗成活率最低，分別是（92.54±3.34）%和（86.65±4.18）%，黃苗最高，分別是（99.12±0.23）%和（98.93± 0.54）%，黃苗和白苗兩者之間不存在顯著性差異；投喂3次以后黃苗與白苗之間成活率差異顯著，4次投喂后3種底色日本醫(yī)蛭成活率存在顯著性差異，最低的是黑苗，為（84.37±4.41）%，其次是白苗，為（90.42±1.35）%，最高的是黃苗，為（98.56±0.76）%。

2.2 不同底色日本醫(yī)蛭體重增重率比較

不同底色日本醫(yī)蛭體重增重率，見表2。

由表2可知，3種底色日本醫(yī)蛭在人工養(yǎng)殖下增重率差異顯著，第1次投喂，黑苗增重 率 最 高，為（380.45±9.78）%，其 次 是 黃苗，為（221.75±8.86）%，最低的是白苗，為（184.45±10.38）%，但黃苗和白苗兩者之間不存在顯著性差異；后3次投喂3種底色日本醫(yī)蛭增重率沒有達(dá)到顯著性差異；4次投喂后的總增重率黑苗最高，為（703.26±11.35）%，其次是黃苗，為（502.22±10.45）%，最低的是白苗，為（422.24±11.25）%。

2.3 不同底色日本醫(yī)蛭攝食量比較

不同底色日本醫(yī)蛭攝食量，見表3。

表3 不同底色日本醫(yī)蛭攝食量 單位：L

由表3可知，3種底色日本醫(yī)蛭在人工養(yǎng)殖下攝食量差異顯著，每次投喂的攝食量以及總攝食量都是黑苗最高，其次是黃苗和白苗，黃苗與白苗兩者之間攝食量不存在顯著性差異。

3 討論

隨著日本醫(yī)蛭養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，人工集約化程度逐漸加深，為了追求更大養(yǎng)殖利益，不僅對(duì)養(yǎng)殖技術(shù)提出更高要求，同時(shí)對(duì)日本醫(yī)蛭的種苗也提出更高要求。日本醫(yī)蛭在我國(guó)分布廣泛，我國(guó)國(guó)土面積幅員遼闊，氣候多樣，分布于不同區(qū)域的日本醫(yī)蛭的人工養(yǎng)殖水平也可能存在差異。

由于地域的不同，溫度、光照等氣候條件的差異，不同地理區(qū)域日本醫(yī)蛭受環(huán)境因子的影響而造成顏色有所差異。東北地區(qū)日本醫(yī)蛭底色偏深，呈墨綠色；山東、河北等地日本醫(yī)蛭底色偏黃；江西等部分地區(qū)日本醫(yī)蛭底色偏白。這與白云飛[12]2001年對(duì)羅非魚的研究結(jié)果類似，不同地區(qū)羅非魚相比，形狀整體上無顯著差異，但在某些可比性形狀上（體長(zhǎng)/體高、體長(zhǎng)/頭長(zhǎng)、頭長(zhǎng)/尾柄長(zhǎng)）具有顯著性差異。本研究結(jié)果表明：由于地域的不同，日本醫(yī)蛭不但底紋顏色上有所差異，攝食水平、增重率和成活率上都有所不同，因此溫度、光照等環(huán)境因子不僅影響了日本醫(yī)蛭的部分外觀形態(tài)，還影響了生長(zhǎng)性能。這與王信海等[13]2018年對(duì)寬體金線蛭的研究結(jié)果一致，不同地區(qū)寬體金線蛭幼蛭生長(zhǎng)指標(biāo)和成活率存在顯著性差異。

本研究中，第1次餌料投喂后3種底色日本醫(yī)蛭攝食量和體重增重率都顯著高于后期餌料投喂后的攝食量和體重增重率，這表明日本醫(yī)蛭在自然條件下是基本處于饑餓狀態(tài)，饑餓狀態(tài)時(shí)的攝食量比正常養(yǎng)殖狀態(tài)下要高，這與張濤等[14]2017年的研究結(jié)果一致。由表1、表2、表3的結(jié)果可知，日本醫(yī)蛭的攝食水平不僅影響其增重率，還影響成活率，過多的餌料攝入反而降低了日本醫(yī)蛭的成活率。分析認(rèn)為日本醫(yī)蛭體內(nèi)的微生物群落在其營(yíng)養(yǎng)代謝和免疫調(diào)節(jié)方面發(fā)揮極其重要作用，李赫[15]認(rèn)為日本醫(yī)蛭饑餓后再恢復(fù)攝食，隨著時(shí)間變化腸道菌群的多樣性和豐度都會(huì)發(fā)生重大改變。過多的餌料攝入可能導(dǎo)致日本醫(yī)蛭腸道菌群動(dòng)態(tài)平衡遭到破壞，影響日本醫(yī)蛭的代謝和免疫調(diào)節(jié)能力，田紅艷[16]2001年的研究結(jié)果也認(rèn)為，過高攝食量影響團(tuán)頭魴幼魚的氧化應(yīng)激，導(dǎo)致其免疫性能的下降以及抗病力的下降。這為后續(xù)日本醫(yī)蛭人工養(yǎng)殖的餌料投喂提供參考。

總之，不同地理區(qū)域日本醫(yī)蛭在人工養(yǎng)殖過程中增重率和成活率都有所差異，合理選擇日本醫(yī)蛭種苗能提高人工養(yǎng)殖的產(chǎn)量，本文的研究為日本醫(yī)蛭的種苗選擇和大規(guī)模人工養(yǎng)殖提供了一定的科學(xué)依據(jù)。