刁全平，郭俊生，呂 淼，秦櫻奇，侯冬巖

(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,遼寧 鞍山 114007)

硒元素是促進(jìn)植物生長的有益元素，也是人和動物必需的微量元素之一，具有抗氧化、抗輻射、防癌抗癌、調(diào)節(jié)免疫力、拮抗重金屬(如鎘、砷、鉛、汞等)毒性等作用[1-3]，主要通過食物進(jìn)行補充.硒具有生物二重性，如果攝入過量，會導(dǎo)致慢性或急性硒中毒，出現(xiàn)脫發(fā)、脫甲、偏癱等癥狀[4-5]，因此食品中硒含量的測定非常重要[6-7].目前，測定食品中硒的方法主要有高效液相色譜法[8]、原子光譜法[9]、氫化物原子熒光光譜法[10]、熒光分析法[11]、紫外分光光度法[12-15]、原子吸收分光光度法[16]和電化學(xué)分析法[17]等.本文以富硒農(nóng)產(chǎn)品為研究對象,以鄰苯二胺為顯色劑，采用紫外分光光度法測定硒含量,建立一種操作簡便、選擇性好、靈敏度高的硒測定方法.

1 材料和方法

1.1 樣品來源

富硒香菇,富硒木耳,富硒黃豆,富硒花生,富硒馬鈴薯,富硒大蒜(均產(chǎn)自湖北恩施)；富硒大米(產(chǎn)自黑龍江五常).

1.2 材料和試劑

硒粉(高純，北京化工廠)；鄰苯二胺、EDTA、高氯酸、氨水、甲苯、濃硝酸、濃鹽酸均為分析純;超純水自制.

1.3 儀器與設(shè)備

Cary 50紫外可見分光光度計(美國瓦里安公司)；FAI 2048電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；PB-10酸度計(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司).

玻璃容器均在10%HNO3中浸泡48 h以上，使用前超純水沖洗3次.

1.4 試驗方法

1.4.1 樣品預(yù)處理

富硒香菇(干)、富硒木耳(干)：粉碎后過孔徑0.425 mm篩，密封保存?zhèn)溆?

富硒黃豆、富硒大米：用超純水洗凈，在 60 ℃烘箱中烘干表面水分，冷卻至室溫，粉碎后過孔徑為0.425 mm篩，密封保存?zhèn)溆?

富硒花生：樣品去殼，在60 ℃烘箱中烘干水分，去皮，在60 ℃烘箱中烘干，冷卻至室溫，粉碎后過孔徑為0.425 mm篩，密封保存?zhèn)溆?

富硒馬鈴薯：樣品用刀去皮并切成片狀，在60 ℃烘箱中烘干，冷卻至室溫，粉碎后過孔徑為0.425 mm篩，密封保存?zhèn)溆?

富硒大蒜：樣品去皮，在60 ℃烘箱中烘干，冷卻至室溫，粉碎后過孔徑為0.425 mm篩，密封保存?zhèn)溆?

1.4.2 樣品的消解 精確稱取樣品1 g左右(精確至0.000 1 g)于100 mL凱氏燒瓶中，加入10 mL硝酸，待試樣完全浸潤后，再加入4 mL高氯酸,緩慢加熱，消化至溶液呈無色或微黃色，樣品溶液約黃豆粒大小后冷卻待用.

1.4.3 樣品的測定 將消解液置于具塞錐形瓶中，加入1.00 mL 5%EDTA 溶液，用1 mol/L的HCl和1 mol /L氨水調(diào)至pH=2.00.再加入5.0 mL 0.2%鄰苯二胺，混勻后在50 ℃水浴加熱30 min，加入10 mL甲苯萃取3次待測.

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

精確稱取0.010 0 g硒粉于100 mL燒杯中，用少許水潤濕后，加10 mL濃HNO3和1 mL濃HCl，蒸發(fā)至近干.冷卻后用少量超純水溶解后定容到100 mL，得質(zhì)量分?jǐn)?shù)為100 μg·g-1的 Se(IV)儲備液.

2.2 檢測波長的確定

取2 μg·g-1硒標(biāo)準(zhǔn)溶液5.0 mL于具塞錐形瓶中,按照1.4.3步驟處理，萃取液用紫外分光光度計進(jìn)行波長掃描，確定檢測波長為335 nm.

2.3 工作曲線的繪制

配置一系列不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的硒標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.4.3步驟依次進(jìn)行顯色，測其吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖1所示.回歸方程為A=0.143 1C+0.004 7，r=0.996 1，線性范圍為2.0～12.0 μg·g-1.

圖1 硒元素標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.4 精密度實驗

取9份相同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的硒標(biāo)準(zhǔn)溶液10 mL，按照1.4.3步驟進(jìn)行顯色，于335 nm處測定吸光度，計算儀器精密度，得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=1.67%，表明儀器精密度良好，詳見表1.

表1 精密度實驗

2.5 穩(wěn)定性實驗

取一份樣品溶液，按照1.4.3步驟依次進(jìn)行顯色，于335 nm處每隔10 min測定一次吸光度，結(jié)果表明該體系在1 h 內(nèi)穩(wěn)定性較好.

2.6 加標(biāo)回收率

準(zhǔn)確稱取1 g(精確至0.000 1 g)富硒大米3份，加入梯度量的硒溶液，按照1.4.3步驟進(jìn)行處理并測定，實驗結(jié)果表明加標(biāo)回收率在96.40%～97.20%之間，詳見表2.

表2 加標(biāo)回收率試驗

2.7 樣品測定結(jié)果

對樣品進(jìn)行測定，結(jié)果如表3所示.

表3 樣品中硒的含量

3 結(jié)論

本文采用消解法處理樣品，利用紫外分光光度計對富硒農(nóng)產(chǎn)品中硒的含量進(jìn)行測定，與其他分析方法相比較，具有結(jié)果可靠、成本低廉、應(yīng)用性強等優(yōu)點.不足之處是樣品消解前處理時間較長、操作過程不便.