劉書鋒 汪 珩 葉 慧 李 勝 趙玉潔 王文策 朱勇文* 楊 琳*

(1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，廣東省動(dòng)物營養(yǎng)調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510642；2.金錢飼料(東莞)有限公司，東莞 523147)

近年來，低碳養(yǎng)殖受到人們的高度重視，降低飼糧蛋白質(zhì)水平，提倡高效的低蛋白質(zhì)飼糧體系在畜牧業(yè)中的應(yīng)用，推動(dòng)養(yǎng)殖業(yè)綠色發(fā)展成為發(fā)展目標(biāo)。在玉米、豆粕等原料價(jià)格持續(xù)走高、缺乏蛋白質(zhì)飼料資源以及國家重視生態(tài)環(huán)境保護(hù)的時(shí)代大背景下，玉米、豆粕等原料的替代及低蛋白質(zhì)飼糧的應(yīng)用成為畜牧業(yè)發(fā)展的新趨勢。大麥的營養(yǎng)成分含量和營養(yǎng)價(jià)值與玉米相近，除粗纖維和β-葡聚糖等抗?fàn)I養(yǎng)因子含量偏高及有效能值略低以外，蛋白質(zhì)的質(zhì)和量等均占優(yōu)勢[1]。大麥通過發(fā)酵、制粒、添加酶制劑等措施處理后，畜禽對其消化率可得到改善，是良好的玉米替代源[2]。我國是稻谷生產(chǎn)第一大國，碎米是稻谷加工的副產(chǎn)物之一，成本較低，而且碎米比玉米含有更高的支鏈淀粉、更小的淀粉顆粒、更低的纖維和抗?fàn)I養(yǎng)因子含量，更容易被畜禽消化，完全可以在飼糧中替代玉米[3]。陳曉帥[3]、Prandini等[4]、Perera等[5]研究表明，飼糧中使用大麥或碎米替代玉米對畜禽的生產(chǎn)無不良影響。隨著一些必需氨基酸(EAA)的商品化生產(chǎn)，飼糧中添加必需氨基酸而減少蛋白質(zhì)飼料原料用量的做法已經(jīng)大量應(yīng)用于動(dòng)物生產(chǎn)中。在豬、雞等上的研究均已證實(shí)，通過補(bǔ)充合成氨基酸，可降低飼糧豆粕使用量和蛋白質(zhì)水平，減少氮排放，且對畜禽生產(chǎn)無不利影響[6-9]。馬岡鵝具有耐粗飼、生長快、肉質(zhì)好、體型大等特點(diǎn)，在我國養(yǎng)殖規(guī)模大，有較大的市場前景。目前，我國尚缺乏肉鵝營養(yǎng)需要量標(biāo)準(zhǔn)，且不同品種間可能存在較大的差異，有關(guān)肉鵝非常規(guī)飼料利用及低蛋白質(zhì)飼糧等方面的研究較少。鑒于以上情況，本研究以36～70日齡馬岡鵝為研究對象，通過研究低蛋白質(zhì)水平對其生長性能、屠宰性能、血清生化指標(biāo)和免疫性能的影響，精確評價(jià)大麥-碎米-豆粕型補(bǔ)充氨基酸飼糧中適宜的低蛋白質(zhì)水平，為我國中小體型肉鵝低蛋白質(zhì)飼糧的配制和非玉米飼料資源的科學(xué)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

飼養(yǎng)試驗(yàn)在惠來縣華南農(nóng)業(yè)大學(xué)科研合作基地進(jìn)行。試驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，設(shè)5個(gè)飼糧蛋白質(zhì)水平(16.50%、15.40%、14.30%、13.20%、12.10%)。選用健康、體重相近的36日齡馬岡公鵝、母鵝各150只，共300只，隨機(jī)分為5組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只(公母各5只)。以蛋白質(zhì)水平為16.50%的飼糧作為對照組飼糧，各試驗(yàn)組飼糧通過補(bǔ)充合成氨基酸使得飼糧賴氨酸、蛋氨酸+半胱氨酸、色氨酸、蘇氨酸、纈氨酸水平與對照組飼糧一致。采用舍內(nèi)網(wǎng)上雙層籠養(yǎng)，南北走向欄舍共3列，每列每層(共5欄)，按重復(fù)隨機(jī)分布。試驗(yàn)期間肉鵝自由采食和飲水，試驗(yàn)期為36～70日齡，共35 d。

1.2 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)采用大麥-碎米-豆粕型飼糧，各組飼糧蛋白質(zhì)水平按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)確定，其他營養(yǎng)水平參考NRC(1994)家禽營養(yǎng)需要推薦量及當(dāng)前我國鵝生產(chǎn)實(shí)際確定。參照《中國飼料成分及營養(yǎng)價(jià)值表(2017年第28版)》[10]設(shè)計(jì)飼糧配方，試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目Items飼糧蛋白質(zhì)水平Dietary protein levels/%16.5015.4014.3013.2012.10L-色氨酸 L-Trp (98%)0.030.030.060.08L-蘇氨酸 L-Thr (98%)0.070.140.170.23L-纈氨酸 L-Val (98%)0.090.160.230.30食鹽 NaCl0.400.400.400.400.40預(yù)混料 Premix1)1.001.001.001.001.00合計(jì) Total100.00100.00100.00100.00100.00營養(yǎng)水平 Nutrient levels2)代謝能 ME/(MJ/kg)11.5011.5011.5011.5011.50粗蛋白質(zhì) CP16.6115.3814.5213.1911.94粗纖維 CF6.005.995.976.016.05鈣 Ca0.900.900.890.900.90非植酸磷 NPP0.490.490.490.490.49賴氨酸 Lys0.840.840.840.840.84蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys0.620.620.620.620.62色氨酸 Trp0.170.170.170.170.17蘇氨酸 Thr0.610.610.610.610.61纈氨酸 Val0.860.860.860.860.86

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 生長性能指標(biāo)

于70日齡當(dāng)天08：00對試驗(yàn)鵝以重復(fù)為單位空腹稱重，稱重前6 h斷料不斷水，統(tǒng)計(jì)各組耗料量，并計(jì)算平均末重、平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.3.2 屠宰性能指標(biāo)

于70日齡時(shí)，從每重復(fù)中選取接近該重復(fù)平均體重的2只肉鵝進(jìn)行屠宰，頸靜脈放血致死，濕法拔毛瀝干水分后稱重，測定其屠宰性能。測定指標(biāo)包括屠宰率、全凈膛率、半凈膛率、胸肌率、腿肌率、腹脂率，并計(jì)算每個(gè)重復(fù)2只肉鵝上述指標(biāo)的平均值用于后續(xù)統(tǒng)計(jì)分析。試驗(yàn)操作及指標(biāo)的測定方法參照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計(jì)方法》(NY/T 823—2020)進(jìn)行。

1.3.3 血清生化和免疫指標(biāo)

于70日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)選取2只肉鵝頸靜脈采血20 mL，3 000 r/min離心10 min，取血清，-30 ℃冷凍保存。每個(gè)重復(fù)的2只肉鵝血清樣品等體積混合制備成混合樣品，用于后續(xù)血清生化和免疫指標(biāo)的測定。血清尿酸(UA)、尿素氮(UN)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量的檢測參照試劑盒說明書進(jìn)行，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)含量采用酶聯(lián)免疫吸附法測定，試劑盒購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.3.4 免疫器官指數(shù)的測定

每個(gè)重復(fù)選取的2只肉鵝采血后，頸靜脈放血致死，分離脾臟、胸腺及法氏囊，稱重后計(jì)算免疫器官指數(shù)。計(jì)算公式如下：

免疫器官指數(shù)(g/kg)=免疫器官
鮮重(g)/活體重(kg)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并采用Duncan氏法進(jìn)行組間多重比較，P<0.05表示差異顯著。各組試驗(yàn)結(jié)果使用平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示。

2 結(jié) 果

2.1 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對36～70日齡馬岡鵝生長性能的影響

由表2可知，低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對36～70日齡馬岡鵝的平均末重、平均日增重、平均日采食量無顯著影響(P>0.05)。隨飼糧蛋白質(zhì)水平的降低，料重比降低，平均末重和平均日增重升高，以12.10%組的平均末重和平均日增重最高，料重比最低，其中12.10%和13.20%組的料重比顯著低于16.50%和15.40%組(P<0.05)。

表2 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對36～70日齡馬岡鵝生長性能的影響

2.2 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝屠宰性能的影響

由表3可知，低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝的屠宰率、全凈膛率、半凈膛率、胸肌率無顯著影響(P>0.05)。隨飼糧蛋白質(zhì)水平的降低，腿肌率呈先升高后降低的趨勢，14.30%組腿肌率顯著高于16.50%、15.40%和12.10%組(P<0.05)；腹脂率以12.10%組最高，顯著高于15.40%、14.30%和13.20%組(P<0.05)。

2.3 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝血清生化指標(biāo)的影響

2.3.1 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝血清蛋白質(zhì)代謝指標(biāo)的影響

由表4可知，低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對馬岡鵝血清TP、ALB、GLB含量和ALB/GLB無顯著影響(P>0.05)。血清UA、UN含量均以12.10%組最低，其中UA含量顯著低于16.50%組(P<0.05)，UN含量顯著低于16.50%、15.40%和14.30%組(P<0.05)。

表4 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝血清蛋白代謝指標(biāo)的影響

2.3.2 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝血清糖、脂代謝指標(biāo)的影響

由表5可知，低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝血清GLU和HDL-C含量無顯著影響(P>0.05)。隨飼糧蛋白質(zhì)水平的降低，血清TC含量呈降低的趨勢，血清TG和LDL-C含量呈先上升后下降的趨勢。13.20%和14.30%組血清TG含量顯著高于12.10%組(P<0.05)。13.20%、12.10%和14.30%組血清TC含量顯著低于16.50%組(P<0.05)。14.30%組血清LDL-C含量顯著高于16.50%、15.40%和12.10%組(P<0.05)。

表5 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝血清糖、脂代謝指標(biāo)的影響

2.4 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝免疫性能的影響

2.4.1 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝免疫器官指數(shù)的影響

由表6可知，低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝胸腺、脾臟、法氏囊指數(shù)無顯著影響(P>0.05)。

2.4.2 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝血清免疫球蛋白含量的影響

由表7可知，低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對血清IgA含量無顯著影響(P>0.05)。隨飼糧蛋白質(zhì)水平的降低，血清IgM、IgG含量呈降低的趨勢。16.50%組血清IgM含量顯著高于14.30%、13.20%和12.10%組(P<0.05)；15.40%、14.30%和13.20%組血清IgM含量顯著高于12.10%組(P<0.05)。16.50%和15.40%組血清IgG含量顯著高于13.20%和12.10%組(P<0.05)。

3 討 論

3.1 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對36～70日齡馬岡鵝生長性能的影響

低蛋白質(zhì)飼糧在豬、家禽和反芻動(dòng)物上均有研究。在家禽上，較高的飼糧蛋白質(zhì)水平并不會對家禽產(chǎn)生有利影響，反而會降低家禽的生長性能，影響家禽的健康。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在補(bǔ)充氨基酸條件下，隨飼糧蛋白質(zhì)水平的降低，馬岡鵝的平均末重、平均日增重均有升高所升高但不顯著，而料重比呈降低的趨勢，且12.10%和13.20%組的料重比顯著低于16.50%和15.40%組，說明降低飼糧蛋白質(zhì)水平并補(bǔ)充氨基酸對36～70日齡馬岡鵝生長性能無不良影響，而且能顯著降低料重比，改善飼料轉(zhuǎn)化效率。與本試驗(yàn)結(jié)果相似，Chen等[11]研究表明，與蛋白質(zhì)水平為16.29%的對照組相比，降低2%蛋白質(zhì)水平的碎米型低蛋白質(zhì)飼糧顯著提高肉鵝70日齡體重和28～70日齡平均日增重。在肉鴨方面，Xie等[8]研究表明，基于類似標(biāo)準(zhǔn)化回腸可消化氨基酸譜添加結(jié)晶氨基酸，蛋白質(zhì)水平為15%的低蛋白質(zhì)飼糧不影響14～35日齡北京鴨的生長性能和胴體品質(zhì)。在肉雞方面，研究顯示，飼糧蛋白質(zhì)水平從19%下降至17.5%對肉仔雞的生長性能無顯著影響[12]；林廈菁等[7]研究表明，通過補(bǔ)充7種必需氨基酸，黃羽肉種雞產(chǎn)蛋高峰期的飼糧蛋白質(zhì)水平可以從16%下降至13%，對產(chǎn)蛋性能無不良影響。

表6 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝免疫器官指數(shù)的影響

表7 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝血清免疫球蛋白含量的影響

3.2 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝屠宰性能的影響

大量研究表明，家禽屠宰性能不僅受其遺傳因素的影響，也與飼糧蛋白質(zhì)和能量水平密切相關(guān)[13]。Alagawany等[14]研究表明，飼糧蛋白質(zhì)水平從16%升高至18%，可顯著改善埃及鵝的屠宰率、腹脂率和腿肌率。飼糧蛋白質(zhì)水平直接影響動(dòng)物體內(nèi)脂肪沉積，體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和分解均需要消耗能量，飼糧蛋白質(zhì)水平提高會增加對能量的消耗，從而減少脂肪的沉積。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨飼糧蛋白質(zhì)水平的降低，馬岡鵝的腹脂率呈先降低后上升的趨勢，以12.10%組最高。其原因可能是本試驗(yàn)中對照組飼糧蛋白質(zhì)水平已經(jīng)超出了營養(yǎng)需要量，過量的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為體脂而沉積。程紅娜[15]、閔育娜[16]、施壽榮[17]在鵝上的研究均發(fā)現(xiàn)，腹脂率隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的降低而升高，這與本研究結(jié)果一致。上述結(jié)果均表明，過高或過低的飼糧蛋白質(zhì)水平都不利于機(jī)體脂質(zhì)代謝平衡，低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧加重了腹脂的沉積，對脂質(zhì)代謝有不利的影響。

3.3 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝血清生化指標(biāo)的影響

血清脂質(zhì)相關(guān)指標(biāo)與機(jī)體的脂肪代謝存在密切關(guān)系，它是反映機(jī)體脂肪代謝的重要指標(biāo)[18]。HDL-C和LDL-C均能促進(jìn)TC/TG的轉(zhuǎn)運(yùn)，LDL-C能夠?qū)?dòng)物腸道中吸收的TC和TG轉(zhuǎn)移到肝臟，HDL-C在TC的逆轉(zhuǎn)運(yùn)中起重要作用[19]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨飼糧蛋白質(zhì)水平的降低，血清TC含量呈降低趨勢，TG和LDL-C含量呈先上升后下降的趨勢。UA和UN是蛋白質(zhì)、氨基酸和核酸的分解代謝產(chǎn)物，一定程度上能反映家禽的蛋白質(zhì)利用情況[20]。血清TP和ALB含量是反映體內(nèi)蛋白質(zhì)吸收與代謝情況的重要指標(biāo)。已有研究表明，低蛋白質(zhì)飼糧能有效提高氮營養(yǎng)素的利用效率[21-22]，而不影響血清TP及ALB含量[23-24]。飼糧中的氨基酸不平衡會加速氨基酸的分解，從而導(dǎo)致血清UA含量的增加[25]。反之，適當(dāng)降低飼糧蛋白質(zhì)水平且氨基酸平衡時(shí)蛋白質(zhì)合成加速，血清UN含量會降低[23]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，馬岡鵝血清UA、UN含量均隨飼糧蛋白質(zhì)水平的降低而降低，表明低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧可降低機(jī)體蛋白質(zhì)降解速度，改善體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝利用情況。

3.4 低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對70日齡馬岡鵝免疫性能的影響

家禽胸腺、脾臟、法氏囊是重要的免疫器官。免疫器官重量與其中的免疫細(xì)胞數(shù)量及其功能有關(guān)，器官指數(shù)的高低可粗略估計(jì)免疫功能的強(qiáng)弱[26]。本試驗(yàn)中，低蛋白質(zhì)補(bǔ)充氨基酸飼糧對馬岡鵝胸腺、脾臟及法氏囊指數(shù)的影響均不顯著，這提示低蛋白質(zhì)水平也可以滿足免疫器官對營養(yǎng)的需求。李倜宇等[27]報(bào)道，相較于蛋白質(zhì)水平為19%的對照組，飼糧蛋白質(zhì)水平下降1.5%或3%對42日齡肉仔雞免疫器官指數(shù)無顯著影響。石天虹等[28]研究發(fā)現(xiàn)，在必需氨基酸水平相同的條件下，汶上蘆花公雞采食蛋白質(zhì)水平為19%、18%或17%的飼糧不會影響免疫器官指數(shù)。多樂等[29]、曾曉閣等[30]分別在黃羽石岐雜雞和白羽肉仔雞上也得到了類似的結(jié)果。免疫球蛋白是一組具有抗體活性的球蛋白，IgA、IgG和IgM是家禽介導(dǎo)體液免疫的主要效應(yīng)分子，是反映機(jī)體免疫狀況的重要指標(biāo)[31]。本試驗(yàn)中，隨飼糧蛋白質(zhì)水平的降低，血清IgM、IgG含量呈降低趨勢，而IgA含量無顯著變化。與本結(jié)果相似，張恒碩[32]研究得出，飼糧蛋白質(zhì)水平從16.77%降低至15.22%，產(chǎn)蛋后期蛋雞血清IgA、IgG和IgM含量均呈下降趨勢。但有研究得出，與蛋白質(zhì)水平為19.5%的對照組相比，低蛋白質(zhì)飼糧(蛋白質(zhì)水平為18.5%)提高了42日齡肉仔雞血清中IgA和IgG的含量，但不顯著[33]。免疫球蛋白作為具有生物活性的蛋白質(zhì)，其合成需要一系列蛋白酶的參與，機(jī)體蛋白質(zhì)水平的高低會影響細(xì)胞內(nèi)酶的含量，從而影響抗體合成速度，進(jìn)而影響體液免疫的效果[27]。Tsiagbe等[34]、侯永清等[35]認(rèn)為，最大生長性能對營養(yǎng)的需求并不總是與最大免疫反應(yīng)對營養(yǎng)的需求相一致。本試驗(yàn)結(jié)果也反映了這一現(xiàn)象，低蛋白質(zhì)水平下馬岡鵝的生長性能表現(xiàn)較優(yōu)，但免疫性能可能受到一定程度的抑制。

4 結(jié) 論

在補(bǔ)充適量的賴氨酸、蛋氨酸、色氨酸、蘇氨酸及纈氨酸條件下，降低大麥-碎米-豆粕型飼糧的蛋白質(zhì)水平對36～70日齡馬岡鵝的生長性能無不良影響，并可改善飼料轉(zhuǎn)化效率和氮素的利用效率，但會降低其與體液免疫相關(guān)的血清免疫球蛋白含量。以馬岡鵝的生長性能為主要評價(jià)指標(biāo)，補(bǔ)充適量氨基酸的大麥-碎米-豆粕型飼糧的蛋白質(zhì)水平可降低至12.10%。