王 霞，楊少杰，晉小軍

（甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)院/甘肅省干旱生境作物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州 730070）

當(dāng)歸［Angelica sinensis（Oliv.）Diels.］，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》［1］，為傘形科當(dāng)歸屬2 年生草本植物，以干燥根入藥［2］，是上好的“婦科圣藥”，因其補(bǔ)血活血、潤(rùn)燥滑腸、調(diào)經(jīng)止痛、扶虛益損等功效［3-4］備受關(guān)注。甘肅地處西北，是我國(guó)當(dāng)歸栽培歷史最為悠久、種植面積最大的省份，占比高達(dá)90%，岷縣更是享有“中國(guó)當(dāng)歸之鄉(xiāng)”的美譽(yù)，種植當(dāng)歸已經(jīng)成為眾多藥農(nóng)脫貧致富的重要收入來(lái)源。然而，隨著當(dāng)歸種植大面積的開(kāi)發(fā)和對(duì)有限耕地資源連年輪耕或重茬耕種，當(dāng)歸病害也成為藥農(nóng)生產(chǎn)中的一大難題［5］，嚴(yán)重影響了當(dāng)歸產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。褐斑病、細(xì)菌性葉斑病為當(dāng)歸主要地上病害，麻口病、根腐病為主要地下病害，有研究表明引起當(dāng)歸褐斑病的病原屬半知菌亞門，殼針孢屬真菌（Septoriasp.）［6］，麻口病病原為莖線蟲(chóng)屬腐爛莖線蟲(chóng)（Ditylenchus destructorThorne）［7］，據(jù)調(diào)查，在甘肅岷縣當(dāng)歸麻口病發(fā)病率嚴(yán)重者高達(dá)84.9%以上，褐斑病發(fā)病嚴(yán)重度3級(jí)，嚴(yán)重時(shí)可致全株枯死［8］。近年來(lái)，關(guān)于當(dāng)歸的研究主要集中在栽培技術(shù)和藥效成分方面［9-10］，關(guān)于當(dāng)歸褐斑病、麻口病的流行規(guī)律及殺菌劑病菌的毒力測(cè)定已有相關(guān)報(bào)道［11-12］，但對(duì)病害的田間藥劑防治研究報(bào)道較少。本研究旨在現(xiàn)有的研究基礎(chǔ)上對(duì)當(dāng)歸主要病害進(jìn)行大田藥劑篩選，嚴(yán)格遵循“預(yù)防為主，綜合防治”的原則，分析比較不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸主要病害的田間防效、產(chǎn)量品質(zhì)的影響，以期為有效防控當(dāng)歸主要病害提供理想方案和高產(chǎn)栽培提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于渭源縣麻家集鎮(zhèn)塄坎村的甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院中藥材產(chǎn)學(xué)研示范基地，屬高寒陰濕氣候，海拔2 350 m，年平均降水量600～700 mm，無(wú)霜期130 d。前茬作物為蒙古黃芪，土壤為栗鈣土，pH 值7.9，含有機(jī)質(zhì)24.66 g/kg、全氮1.3 g/kg 、有效磷16.14 mg/kg、速效鉀112.8 mg/kg。

1.2 試驗(yàn)材料

當(dāng)歸種苗購(gòu)于渭源縣會(huì)川中藥材市場(chǎng)，由甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)晉小軍研究員鑒定為傘形科當(dāng)歸屬植物當(dāng)歸［Angelica sinensis（Oliv.）Diels］的種苗。70%惡霉靈可濕性粉劑（天津市綠亨化工有限公司）；50%氯溴異氰尿酸可濕性粉劑（河南銀田精細(xì)化工有限公司）；80%代森錳鋅可濕性粉劑（湖南農(nóng)大海特農(nóng)化有限公司）。

1.3 試驗(yàn)儀器與試劑

Sarturius-BS124S分析天平（北京賽多利斯天平有限公司）、LA-230S 型電子天平（北京賽多利斯儀器公司）、LGS20 型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海棱光技術(shù)有限公司）、APS80-16A 型高效液相色譜儀（河南奧普斯儀器設(shè)備有限公司）、H-S2 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）、SX2-2.5-10 型馬福爐（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司）、卷尺、游標(biāo)卡尺等。

對(duì)照品與試劑：阿魏酸、藁本內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品（成都樂(lè)美天醫(yī)藥科技有限公司，批號(hào)DST191029-001，DST191015-007，純度均≥99.0%）；丙酮、稀鹽酸均為分析純；無(wú)水乙醇、乙腈、甲醇均為色譜純。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，選擇大小基本一致的當(dāng)歸種苗，以70%惡霉靈可濕性粉劑（A）、50%氯溴異氰尿酸可濕性粉劑（B）、80%代森錳鋅可濕性粉劑（C）作為試驗(yàn)因素，分別設(shè)置4個(gè)水平：T1、T2、T3、T4，其中70%惡霉靈噴施濃度分別為0.17、0.34、0.51、0.68 g/L（以A1～A4表示）；50%氯溴異氰尿酸噴施濃度分別為0.62、1.24、1.86、2.48 g/L（以B1～B4 表示）；80%代森錳鋅噴施濃度分別為1.98、3.96、5.94、7.92 g/L（以C1～C4表示），以等體積清水作為空白對(duì)照（CK）。小區(qū)面積為15 m2（3 m × 5 m），共13 個(gè)處理，每組重復(fù)3次，共計(jì)39個(gè)小區(qū)。

種植前用每種濃度浸泡當(dāng)歸種苗根部15 min，晾干，于2020 年4 月初采用黑膜覆蓋露頭斜栽技術(shù)，株行距為15 cm×30 cm 移栽。于6 月25 日開(kāi)始首次噴施直至8 月下旬，每隔30 天噴施一次，整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育期共計(jì)噴施3 次，其他與普通田間管理一致。

1.4.2 指標(biāo)的測(cè)定及方法

1.4.2.1 生長(zhǎng)指標(biāo)及產(chǎn)量測(cè)定 每次施藥后15 d 直至收獲期，調(diào)查供試藥劑對(duì)當(dāng)歸生長(zhǎng)的影響，五點(diǎn)取樣，各小區(qū)隨機(jī)挖取5 株，每個(gè)處理共計(jì)15 株，測(cè)定主根長(zhǎng)、根粗、抽薹率、單株鮮重、干重，同時(shí)觀察是否有藥害發(fā)生。于10月中下旬統(tǒng)一進(jìn)行采挖，每個(gè)小區(qū)隨機(jī)取樣15 株，每個(gè)處理共計(jì)45 株進(jìn)行產(chǎn)量測(cè)定。

1.4.2.2 病害指標(biāo)測(cè)定 每次施藥后15 d，每個(gè)處理隨機(jī)取15 株，重復(fù)3 次，共取45 株，根據(jù)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)［13-14］計(jì)算各藥劑的發(fā)病率、病情指數(shù)及防治效果。統(tǒng)計(jì)方法如下：

（1） 分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

褐斑病病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)以1 片復(fù)葉尖端的3 片單葉病斑為標(biāo)準(zhǔn)［13］；

麻口病病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)參照劉學(xué)周［14］的進(jìn)行。

（2） 計(jì)算方法

發(fā)病率（%）=（發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）×100；

病情指數(shù)=［∑（各級(jí)病株數(shù)×發(fā)病等級(jí)）/（調(diào)查總株數(shù)×最高級(jí)）］×100；

防治效果（%）=（對(duì)照區(qū)病情指數(shù)-藥劑處理區(qū)病情指數(shù)）/對(duì)照區(qū)病情指數(shù)×100。

1.4.2.3 質(zhì)量指標(biāo)測(cè)定根據(jù)2020 年版《中華人民共和國(guó)藥典》（簡(jiǎn)稱《中國(guó)藥典》）［15］一部（通則2302、2201）灰分測(cè)定法、醇溶性浸出物測(cè)定法測(cè)定；阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量參照王婕等［16］建立的HPLC 法同時(shí)測(cè)定。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用Excel 2010 及SPSS 26.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和主成分分析，采用Duncan 法多重比較，字母法標(biāo)記顯著性，表、圖數(shù)據(jù)均采用（X±SE）表示。最后基于當(dāng)歸產(chǎn)量因子及抗病性等14 個(gè)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)［17］。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸抽薹率的影響

當(dāng)歸抽薹已成為當(dāng)歸生產(chǎn)中的一大難題。由圖1可知，不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸抽薹有較大差異。各殺菌劑最佳濃度處理較同組其它濃度處理抽薹率均達(dá)顯著差異（P＜0.05），各殺菌劑最佳濃度處理。由低到高依次為B3、A2、C4、CK。其中殺菌劑B3 處理可有效降低當(dāng)歸抽薹率，平均為13.33%，分別較CK、C4、A2下降18.89%、2.23%、1.95%。

圖1 不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸抽薹率的影響Fig.1 Effects of different fungicides on the bolting rate of A. sinensis

2.2 不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸產(chǎn)量構(gòu)成因素的影響

由表1 可知，不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸產(chǎn)量構(gòu)成因素具有不同程度影響。在殺菌劑處理濃度范圍內(nèi)，殺菌劑A2、B3、C4 處理的當(dāng)歸根長(zhǎng)較CK 顯著增長(zhǎng)，且C4 處理的當(dāng)歸根長(zhǎng)最長(zhǎng)，達(dá)26.94 cm。殺菌劑A的四個(gè)不同濃度處理間對(duì)當(dāng)歸根粗的影響不顯著（P＞0.05），但殺菌劑B、C 不同濃度處理間均差異顯著，且C4 處理的當(dāng)歸根粗最粗，達(dá)32.80 cm。不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸單根鮮、干重作用顯著（P＜0.05），且各殺菌劑處理當(dāng)歸單根鮮、干重趨勢(shì)一致，表現(xiàn)為C4＞B3＞A2＞CK，以C4 處理對(duì)當(dāng)歸單根鮮、干重作用最為顯著，較CK 分別提高124.33%和163.37%。

表1 不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸藥材產(chǎn)量構(gòu)成因素的影響Tab.1 Effects of different fungicides on yield components of A. sinensis

2.3 不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸病害防效的影響

2.3.1 對(duì)當(dāng)歸地上病害防效的影響

由表2可知，第一次施藥15 d后，各殺菌劑不同濃度處理以A2、B3 和C4 的田間防效最好，分別為63.66%、78.38%和62.16%，70%惡霉靈和80%代森錳鋅四種濃度處理之間田間防效差異不顯著（F=1.936，1.666，P=0.202，0.251）。第二次施藥15 d 后，各藥劑的田間防效大幅下降，各藥劑不同濃度處理仍以A2、B3 和C4 田間防效最好，分別為29.80%、29.69%和36.78%，各藥劑的田間防效差異顯著（P＜0.05）。第三次施藥15 d 后，病情指數(shù)升高，A2、B3和C4防效較其他處理達(dá)顯著差異（P＜0.05），分別為16.81%、20.20%、20.20%。整體來(lái)說(shuō)，各藥劑不同濃度處理對(duì)當(dāng)歸褐斑病發(fā)生初期具有較好的防效，后期防效較差，最終防效以B3和C4處理較好。

表2 不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸褐斑病的防治效果Tab.2 Control effects of different fungicides on brown spot of A. sinensis

2.3.2 對(duì)當(dāng)歸地下病害防效的影響

由表3可知，第一次施藥15 d后，各殺菌劑不同濃度處理以A2、B3 和C4 的防效最好，分別為83.60%、90.97%和83.66%，其次為B2 和C3，防效達(dá)82.08%、80.70%，各藥劑的田間防效差異顯著（P＜0.05）。第二次施藥15 d后，各藥劑不同濃度處理田間防效均有所下降，以A3、B3 和C4 的防效最好，分別為66.95%、82.37%和80.25%。第三次施藥15 d后，病情指數(shù)顯著升高，防效有所下降，但A2、B3 和C4的防治效果仍能保持65%以上，說(shuō)明其防治效果較好，且較其他處理達(dá)顯著差異（P＜0.05）。

表3 不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸麻口病的防治效果Tab.3 Control effects of different fungicides on Chinese Angelica coarse bark disease

2.4 不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸產(chǎn)量的影響

由圖2 可知，不同殺菌劑處理均能顯著提高當(dāng)歸藥材產(chǎn)量。各藥劑不同濃度處理以A2、B3、C4對(duì)當(dāng)歸藥材產(chǎn)量影響最為顯著（P＜0.05），其中C4增產(chǎn)效果最佳，鮮產(chǎn)量達(dá)26 585.59 kg/hm2，干產(chǎn)量達(dá)8 738.85 kg/hm2，同期CK 鮮產(chǎn)量為8 874.33 kg/hm2，干產(chǎn)量為3 025.54 kg/hm2，較CK 分別提高199.58%、188.84%；其次為A2 處理，鮮產(chǎn)量達(dá)16 600.39 kg/hm2，干產(chǎn)量達(dá)5 955.07 kg/hm2，較CK 分別提高87.06%、96.83%；B3 處理鮮產(chǎn)量達(dá)15 934.58 kg/hm2，干 產(chǎn) 量 達(dá)5 844.55 kg/hm2，較CK 分 別提 高79.56%、93.17%。

圖2 不同殺菌劑處理的當(dāng)歸藥材產(chǎn)量測(cè)定Fig.2 Yield determination of A. sinensis treated with different fungicides

2.5 不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸品質(zhì)的影響

由表4可知，不同殺菌劑處理下當(dāng)歸藥材中的總灰分、酸不溶性灰分含量符合2020年版《中國(guó)藥典》規(guī)定。醇溶性浸出物在59.51%～63.68%范圍內(nèi)，均高于《中國(guó)藥典》規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。不同濃度的70%惡霉靈、50%氯溴異氰尿酸、80%代森錳鋅對(duì)當(dāng)歸藥材中阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量影響顯著（P＜0.05），以A2、B3、C4影響最為顯著，阿魏酸含量分別為0.109 0%、0.136 3%、0.119 5%，較CK 分別提高了19.26%、49.12%、30.74%；藁本內(nèi)酯含量分別為0.900 3%、1.154 9%、1.134 6%，較CK 分別提高了11.48%、43.00%、40.49%。

表4 不同殺菌劑處理的當(dāng)歸藥材品質(zhì)測(cè)定Tab.4 Quality determination of A. sinensis treated with different fungicides

2.6 不同殺菌劑處理當(dāng)歸主成分分析

中藥具有成分復(fù)雜性、功效多樣性、成分間相互作用難以預(yù)測(cè)性的特點(diǎn)?，F(xiàn)行中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)模式難以體現(xiàn)中藥的整體性特征，多以化學(xué)指標(biāo)成分的定性和定量分析為主［18］，故基于當(dāng)歸藥材根部性狀、病害、產(chǎn)量品質(zhì)等14 個(gè)主要指標(biāo)進(jìn)行主成分分析綜合評(píng)價(jià)［17］。由表5 可知，共提取出4 個(gè)主成分（特征值均大于1），其貢獻(xiàn)率依次為64.736%、8.685%、8.124%、7.397%，累積貢獻(xiàn)率為88.941%，具有代表性。由表6 可知，不同殺菌劑處理下C4 綜合得分排名第一，說(shuō)明在該處理下當(dāng)歸主要病害防效、產(chǎn)量及品質(zhì)的綜合優(yōu)勢(shì)最強(qiáng)，處理更為優(yōu)越。B3 次之，A2 排名第三。整體排名結(jié)果為：C4＞B3＞A2＞B2＞C3＞C2＞B1＞A1＞A3＞C1＞B4＞A4＞CK。

表5 主成分分析方差貢獻(xiàn)率Tab.5 Principal component analysis variance contribution

表6 主成分分析綜合得分和排名Tab.6 Comprehensive scores and rankings by principal component analysis

3 結(jié)論與討論

目前當(dāng)歸病害種類多、危害大，強(qiáng)化病害防治是提高當(dāng)歸藥材產(chǎn)量、保證質(zhì)量的關(guān)鍵，選擇抗病栽培品種是不二之選，但目前當(dāng)歸抗病栽培品種匱乏，化學(xué)防治仍是最為有效的手段。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同濃度的70%惡霉靈可濕性粉劑、50%氯溴異氰尿酸可濕性粉劑、80%代森錳鋅可濕性粉劑對(duì)當(dāng)歸褐斑病及麻口病均具有一定的防治效果，其中0.34 g/L 70%惡霉靈、1.86 g/L 50%氯溴異氰尿酸和7.92 g/L 80%代森錳鋅防控效果較好，對(duì)褐斑病最終防效分別為16.81%、20.20%、20.20%，對(duì)麻口病最終防效分別為69.37%、76.35%、66.14%。70%惡霉靈可濕性粉劑是一種內(nèi)吸性殺菌劑，能抑制病菌孢子的萌發(fā)，具有提高作物生理活性、促進(jìn)根的分蘗、植株生長(zhǎng)的功效，已廣泛應(yīng)用于多種作物病害防治上［19］。有研究發(fā)現(xiàn)在馬鈴薯長(zhǎng)期連作田使用惡霉靈，能顯著改善土壤微生物數(shù)量，減輕馬鈴薯病害，提高馬鈴薯產(chǎn)量［20］。此外，惡霉靈與甲霜靈的復(fù)配劑對(duì)于煙草黑脛病也表現(xiàn)出了良好的抑制作用［21］。50%氯溴異氰尿酸可濕性粉劑具有內(nèi)吸和保護(hù)雙重作用，無(wú)交互抗性，對(duì)作物安全，環(huán)保無(wú)公害，是發(fā)展綠色農(nóng)業(yè)的首選殺菌劑［22］。常棟等［23］研究表明其對(duì)隱性感染煙苗根腐病具有良好的防效，同時(shí)對(duì)作物本身和其他有益生物無(wú)藥害現(xiàn)象產(chǎn)生。80%代森錳鋅可濕性粉劑殺菌范圍廣，不易產(chǎn)生抗性，防治效果明顯優(yōu)于其他同類殺菌劑［24］。韓偉君等［25］研究發(fā)現(xiàn)80%代森錳鋅可濕性粉劑對(duì)三七黑斑病防效可達(dá)90.20%。李自林等［26］研究發(fā)現(xiàn)80%代森錳鋅能有效防治煙草赤星病，促進(jìn)煙株生長(zhǎng)。田間防效試驗(yàn)結(jié)果表明，3 種殺菌劑均可減少當(dāng)歸褐斑病和麻口病的危害，但不同濃度處理之間差異顯著，對(duì)當(dāng)歸成藥栽培期褐斑病和麻口病的防效均基本呈一直遞減的變化趨勢(shì)，推測(cè)是因?yàn)樵? 月初當(dāng)歸病害發(fā)生率較小，防治效果也較好，8～10 月上旬為當(dāng)歸病害發(fā)生高峰期，病害發(fā)生嚴(yán)重，故防效也有所下降，但與對(duì)照相比均取得較好的防效。

當(dāng)歸目前已被納入藥食同源類中藥，從源頭嚴(yán)格把控藥材質(zhì)量至關(guān)重要。植物地上部分與地下部分生長(zhǎng)有著相互關(guān)聯(lián)、相互依賴的關(guān)系，一般來(lái)說(shuō)，當(dāng)?shù)厣喜糠终ＩL(zhǎng)、養(yǎng)分充足時(shí)，能通過(guò)光合作用為根系生長(zhǎng)提供光合同化物，促進(jìn)根系生長(zhǎng)發(fā)育。通過(guò)對(duì)各藥劑處理下當(dāng)歸生長(zhǎng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，各藥劑處理對(duì)當(dāng)歸生長(zhǎng)均無(wú)藥害發(fā)生，使用安全，且能在降低當(dāng)歸抽薹的同時(shí)促進(jìn)根系生長(zhǎng)發(fā)育，保障當(dāng)歸藥材產(chǎn)量、提高品質(zhì)。研究結(jié)論與邵正陽(yáng)等［27］發(fā)現(xiàn)藥劑聯(lián)用能有效防治當(dāng)歸病害的發(fā)生，顯著提高各生長(zhǎng)指標(biāo)、降低當(dāng)歸抽薹率；李鵬程等［7］發(fā)現(xiàn)40%辛硫磷+50%多菌靈可濕性粉劑1 000 倍液處理下當(dāng)歸產(chǎn)量較對(duì)照增產(chǎn)達(dá)29.4%一致。

綜上所述，不同殺菌劑處理對(duì)當(dāng)歸主要地上、地下病害防效顯著，在當(dāng)歸成藥栽培期無(wú)藥害現(xiàn)象發(fā)生，且具有顯著增產(chǎn)增效作用。適宜濃度多次噴施0.34 g/L 70%惡霉靈、1.86 g/L 50%氯溴異氰尿酸和7.92 g/L 80%代森錳鋅在當(dāng)歸褐斑病發(fā)生初期具有較好的防效，但發(fā)生盛期防效均不足25%，甚至0.68 g/L 70%惡霉靈最后失去防效，1.98 g/L 80%代森錳鋅有誘發(fā)褐斑病的可能，故生產(chǎn)上不推薦使用；相比之下，這三種殺菌劑濃度處理對(duì)當(dāng)歸麻口病整個(gè)發(fā)病時(shí)期均具有較好的防效，且對(duì)當(dāng)歸產(chǎn)量品質(zhì)提升作用較好，具有良好的應(yīng)用前景，可作為生產(chǎn)上防治當(dāng)歸麻口病的推廣藥劑。