彭銀琪　劉雁　禹利君

摘要：將莓茶與黑茶以不同配比得到系列莓茶黑茶復(fù)合物，接種冠突散囊菌發(fā)花，探究“金花”莓茶復(fù)合黑茶的抑菌能力及品質(zhì)成分變化。通過(guò)紙片抑菌實(shí)驗(yàn)，感官審評(píng)及HPLC分析方法，發(fā)現(xiàn)復(fù)合茶對(duì)青霉初期生長(zhǎng)有一定抑制作用，隨著青霉快速生長(zhǎng)其抑制作用減弱，對(duì)其生長(zhǎng)無(wú)明顯抑制作用;對(duì)大腸桿菌抑制作用顯著，對(duì)黑曲霉生長(zhǎng)不能起到有效抑制。莓茶復(fù)合發(fā)花黑茶較不發(fā)花黑茶，味更醇，色澤更艷;生物堿、總兒茶素含量顯著下降（P<0.01）;GCG含量顯著增加，莓茶復(fù)合發(fā)花黑茶樣比黑毛茶樣含量上升了1 927.31%（P<0.01）;沒(méi)食子酸含量顯著增加，上升幅度最大為462.69%（P<0.01）。

關(guān)鍵詞：莓茶復(fù)合發(fā)花黑茶;冠突散囊菌;抑菌作用;品質(zhì)成分

中圖分類號(hào)：S379.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1004-3020（2022）03-0025-07

Analysis of Anti-Bacterial and Quality Components Contents Varieties of Ampelopsis grossedentata-Dark Tea Compounds With Eurotium cristatum?Fermentation

Peng Yinqi Liu Yan Yu Lijun

（1.Xiangxi Open UniversityJishou416000;

2.Yiyang Testing Institute of Product and Commodity Quality SupervisionYiyang413000;

3.Department of Tea Science， College of Horticulture， Hunan Agricultural UniversityChangsha410128）

Abstract：In order to research anti-bacterial and quality components contents varieties of Ampelopsis grossedentata-dark tea compounds with E. cristatum?fermentation， blending different proportion of A. grossedentata?and dark tea and inoculating composite A. grossedentata-dark tea with E. cristatum. Paper anti-bacterial test showed that A. grossedentata-dark tea compounds with E. cristatum fermentation?could inhibit Penicilliumin?sp. during its earlier stage growth， but with the rapid growth of P. sp.， the inhibitory effects was weakened; cannot inhibit?Aspergillus niger growth when A.?niger produces visible black spores; but significant inhibit Escherichia coli?growth. Sensory evaluation results showed that all samples of A. grossedentata-dark tea with E. cristatum?fermentation have strong fragrant flowers aroma with E. cristatum，?soup color deepened as bright red color， taste mellow than dark tea primary samples. HPLC results showed contents of alkaloid， EGC， EGCG and total catechins declined significantly?（P<0.01）， but contents of GCG， gallic acid increased significantly （P<0.01）?comparing with dark tea primary samples without E. cristatum fermentation. Consequently， experimental results showed that A. grossedentata-dark tea compounds with E. cristatum’s fermentation have good inhibition ability for Escherichia coli， a certain inhibitory effect for P. sp. and no effective suppression for A. niger. Contents of alkaloid decreased， gallic acid increased， and catechins components fractional conversion make A. grossedentata-dark tea compounds with E. cristatum’s fermentation samples taste more mellow and sweet.

Key words：Ampelopsis grossedentata-dark tea compounds with Eurotium cristatu;Eurotium cristatum; Antifungal and antibacterial activities; quality components

1前言

莓茶，學(xué)名顯齒蛇葡萄Ampelopsis grossedentata?葡萄科蛇葡萄屬的野生藤本植物[1]，主要分布于長(zhǎng)江以南，又名藤茶、雪茶、甜茶、田婆茶、白茶等[2-3]。幼嫩莖葉殺青、揉捻、干燥后，表面形成的一層“霜”為黃酮類化合物析出晶體，霜狀物質(zhì)越多黃酮類化合物含量越高。其黃酮類物質(zhì)二氫楊梅素（dihydromyricetin，DMY）含量豐富，高達(dá)40%以上[4，5]，有降血糖血脂、保肝護(hù)肝、抗氧化、降疲勞、抗腫瘤及抗病毒[4-11]等功用。在湖南湘西南作為一種典型的藥食兩用植物，民間用于治療感冒發(fā)熱、咽喉腫痛、黃疸型肝炎、皰癤等癥已有數(shù)百年歷史，具有極高的飲用藥用價(jià)值。

黑茶是中國(guó)最具特色的茶類，在殺青、揉捻后有“渥堆”[12]這一特殊工序，屬于后發(fā)酵茶。相關(guān)研究表明，黑茶在消食去膩、止瀉止痢、解毒、降脂及抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗氧化、改善胃腸道功能、調(diào)節(jié)腸道免疫、保肝護(hù)肝作用明顯[12-15]。茯磚茶因優(yōu)勢(shì)菌種——冠突散囊菌Eurotium cristatum，俗稱金花而表現(xiàn)出獨(dú)特的風(fēng)味及功能[16]，是湖南黑茶特色茶類，冠突散囊菌不僅是茯磚茶中優(yōu)勢(shì)益生菌種，還在綠茶、紅茶、鐵觀音、白牡丹等茶葉基質(zhì)中進(jìn)行“散茶發(fā)花”，獲得了成功[17]。非茶類茶物，如銀杏葉、桑葉等也通過(guò)“散茶發(fā)花”技術(shù)“發(fā)花”成功[18]，豐富了冠突散囊菌生產(chǎn)發(fā)花茶類及類茶產(chǎn)品。

茶葉經(jīng)冠突散囊菌發(fā)花后，其茶多酚、氨基酸、水溶性蛋白質(zhì)和黃酮類物質(zhì)等呈味物質(zhì)含量下降，抑菌能力和黑毛茶比較有所下降。如何既保證黑茶具有調(diào)節(jié)腸胃、降脂減肥的良好功效，又能保持其較高的抗菌、消炎功效，是當(dāng)前發(fā)花黑茶需要解決的技術(shù)關(guān)鍵。因此，本研究利用莓茶中含有豐富的二氫楊梅素其良好的抑菌特性，與黑毛茶配比發(fā)花，進(jìn)行復(fù)合莓茶黑茶復(fù)合物抑菌試驗(yàn)及內(nèi)含成分變化研究，探究口感合適、黃酮類化合物保高留的黑茶新品，分析莓茶黑茶復(fù)合茶開(kāi)發(fā)的可行性。

2材料與方法

2.1材料

2.1.1供試材料

2017年4月中下旬采用湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)長(zhǎng)安基地茶樹(shù)品種碧香早一芽三、四葉及其同等嫩度對(duì)夾葉制備的黑毛茶及湖南湘西永順縣提供的莓茶作為供試材料。冠突散囊菌分離于益陽(yáng)茶廠的茯磚茶，自行保存;青霉、黑曲霉在分離茶樣過(guò)程發(fā)現(xiàn)并收集;大腸桿菌Escherichia coli由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院微生物教研室提供。

2.1.2培養(yǎng)基

馬鈴薯土豆培養(yǎng)基：超純水1 L、200 g土豆加適量超純水熬煮30 min取汁液、加20 g蔗糖及10 g瓊脂定容至1 L，121 ℃滅菌30 min后趁熱倒平皿備用，用于冠突散囊菌、青霉、黑曲霉的分離培養(yǎng);LB培養(yǎng)基：5 g酵母提取物、10 g蛋白胨和10 g NaCl，加雙蒸水至1 000 mL，5 mol·L NaOH（約0.2 mL）調(diào)pH值至7.2，分裝后121 ℃滅菌30 min備用，用于大腸桿菌的培養(yǎng)。

2.1.3儀器與設(shè)備

701-2型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海實(shí)驗(yàn)儀器總廠），LC-2010AHT高效液相色譜儀（島津）、D8611超純水器（Thermo Scientific）、AE24電子天平（METTLER）、HH數(shù)顯恒溫水浴鍋、SW-CJ-2D型超凈工作臺(tái)。

2.2方法

2.2.1茶樣制備

將黑毛茶與莓茶原料先配成一定比例，進(jìn)行感官審評(píng)，選擇口感適度的配比進(jìn)行發(fā)花實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)樣為：①黑毛茶;②發(fā)花黑毛茶;③“金花”莓茶復(fù)合黑茶復(fù)合樣Ⅰ（莓茶含量稍低，簡(jiǎn)稱為HM1）;④“金花”莓茶復(fù)合黑茶復(fù)合樣Ⅱ（莓茶含量稍高，簡(jiǎn)稱為HM2）;將2、3、4組茶樣按一定含水量接種分離純化的冠突散囊菌，28 ℃恒溫箱培養(yǎng)15 d、烘干，用于抑菌實(shí)驗(yàn)、生化成分分析及感官審評(píng)。

2.2.2青霉、黑曲霉菌種純化

在分離純化冠突散囊菌過(guò)程中，茶樣中的殘余的青霉、黑曲霉伴隨著冠突散囊菌一同生長(zhǎng)。將青霉、黑曲霉分別挑取，進(jìn)行3級(jí)分離純化，儲(chǔ)藏備用。

2.2.3紙片法抑菌實(shí)驗(yàn)

1、2、3、4組分別浸取各自組茶樣茶汁，茶汁濃度設(shè)置為水∶茶（10∶1），即30 g茶加入300 mL水于三角瓶中高溫滅菌25 min后冷卻備用?？瞻捉M圓形濾紙片作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照，即濾紙片不蘸茶汁、培養(yǎng)基上不接菌種;1、2、3、4組圓形濾紙片分別浸取各自組滅菌冷卻的茶樣茶汁，每個(gè)培養(yǎng)皿涂布50 μL相應(yīng)的青霉、黑曲霉、大腸桿菌菌液，放入4個(gè)浸取了相應(yīng)茶汁的小濾紙片，每組各有3個(gè)平行皿，28 ℃恒溫培養(yǎng)，觀察青霉、黑曲霉、大腸桿菌的生長(zhǎng)快慢及抑菌圈大小。

2.2.4品質(zhì)成分檢測(cè)

水分含量采用GB5009.3-2016方法，感官審評(píng)采用GB/T23776-2009方法，兒茶素組份及含量采用高效液相色譜法 （high performance liquid chromatography， HPLC）。

2.2.5數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用IBM SPSS Statistics 19.0軟件進(jìn)行方差分析，各組間采用最小顯著差數(shù)法（LSD法）分析;每組設(shè)置4個(gè)平行，3次重復(fù);統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s） 表示，多個(gè)樣本均數(shù)比較應(yīng)用單因素方差分析;檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.01，α= 0.05。

3結(jié)果與分析

3.1“金花”莓茶復(fù)合黑茶對(duì)青霉、黑曲霉、大腸桿菌生長(zhǎng)的影響

濾紙片不蘸茶汁、培養(yǎng)基上不接菌種作為空白對(duì)照組，10 d后仍然干凈整潔，沒(méi)有青霉、黑曲霉、大腸桿菌等外源微生物入侵;1、2、3、4組分別浸取各自茶樣茶汁，進(jìn)行青霉、黑曲霉、大腸桿菌生長(zhǎng)培養(yǎng)，出現(xiàn)促生長(zhǎng)及抑制等實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

3.1.1對(duì)青霉生長(zhǎng)的影響

各平板涂布1x10～1x106個(gè)青霉孢子懸液50 μL，1、2、3、4組濾紙片分別浸取各自茶樣茶汁，28 ℃恒溫培養(yǎng)，不間斷對(duì)小濾紙片周圍及平皿青霉生長(zhǎng)情況觀察。從圖1（A、B、C）3個(gè)代表性時(shí)間節(jié)點(diǎn)觀察結(jié)果分析，培養(yǎng)至50 h（圖1A），平皿中青霉淺白色、菌落清晰可見(jiàn);第1組浸黑毛茶其濾紙片周圍青霉菌落密度明顯大于平皿其它地方;第2組浸發(fā)花黑毛茶，上方2個(gè)濾紙片周圍青霉菌落生長(zhǎng)尤為茂密，下方2個(gè)濾紙片周圍青霉菌落明顯聚集;第3組浸HM1“金花”莓茶復(fù)合黑茶，右方2個(gè)濾紙片青霉生長(zhǎng)尤為茂密，左方2個(gè)濾紙片周圍有少量青霉菌落聚集;第4組浸HM2“金花”莓茶復(fù)合黑茶，右下方濾紙片青霉菌落生長(zhǎng)尤為茂密，其余3個(gè)濾紙片周圍右僅少量青霉菌落聚集;其它2平行培養(yǎng)皿對(duì)應(yīng)4個(gè)濾紙片周圍青霉菌落生長(zhǎng)趨勢(shì)一致。

培養(yǎng)至62 h（圖1B），平皿中青霉菌落明顯擴(kuò)增繁殖，白底泛青色;第1組浸黑毛茶其濾紙片周圍青霉菌落密度明顯大于平皿其它地方，形成了明顯突出的青霉同心圓圈;第2組浸發(fā)花黑毛茶，4個(gè)濾紙片周圍青霉菌落尤為茂盛，濾紙片基本上被青霉覆蓋住;第3組浸HM1“金花”莓茶復(fù)合黑茶，也形成了以濾紙為中心的同心圓，比其它地方更密集，小濾紙片上面也開(kāi)始布集青霉菌落;第4組浸HM2“金花”莓茶復(fù)合黑茶，小濾紙片周圍生長(zhǎng)情況與第3組相似，但小濾紙片上面基本上沒(méi)有青霉布集。培養(yǎng)至88 h（圖1C），平皿中青霉菌落明顯擴(kuò)增繁殖，菌落顏色基本上轉(zhuǎn)為青色;1、2、3、4組全部形成了以濾紙片為中心的菌落分布密集環(huán)，各濾紙片基本上被青霉菌落全覆蓋。

從圖1A、B、C不同培養(yǎng)時(shí)間濾紙片周圍青霉分布情況分析可知，在≤50 h培養(yǎng)初期， 1、2組之間青霉生長(zhǎng)無(wú)明顯差異，但添加了莓茶的3、4組青霉生長(zhǎng)狀況比1、2組差，這是少量莓茶起到了抑菌作用;培養(yǎng)至62 h，3、4組與1、2組青霉菌落分布差異明顯縮小;培養(yǎng)至88 h，青霉生長(zhǎng)旺盛，1、2、3、4組茶汁濃度不足以使青霉菌落分布產(chǎn)生差異。由此可知，茶汁為青霉生長(zhǎng)提供了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，發(fā)花其茶汁也為青霉生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)，莓茶浸取汁在初期能適度抑制青霉生長(zhǎng)，但至青霉生長(zhǎng)高峰期，未能起到明顯抑制作用。

3.1.2對(duì)黑曲霉生長(zhǎng)的影響

黑曲霉濾紙片法抑菌實(shí)驗(yàn)，各平板涂布1x10～1x10個(gè)黑曲霉孢子懸液50 μL，1、2、3、4組濾紙片分別浸取各自茶樣茶汁，28 ℃恒溫培養(yǎng)，不間斷對(duì)小濾紙片周圍及平皿黑曲霉生長(zhǎng)情況觀察。因黑曲霉生長(zhǎng)速度快，每隔6 h觀察1次，至32 h時(shí)開(kāi)始肉眼可觀察到黑曲霉，培養(yǎng)32 h、38 h時(shí)，不能明顯區(qū)分白色小菌落是冠突散囊菌或還是黑曲霉。培養(yǎng)44 h，1、2、3、4組的黑曲霉生長(zhǎng)均很茂盛，小濾紙片周圍厚度明顯加深，各平皿紙片周圍黑曲霉分布沒(méi)有明顯差異（圖2）;總體生長(zhǎng)速度比青霉快許多，其平板飽滿度優(yōu)于青霉培養(yǎng)88 h的狀況。尤以濾紙片周圍，黑曲霉密集度更高，說(shuō)明莓茶黑茶浸提物為黑曲霉生長(zhǎng)提供了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，不能對(duì)黑曲霉生長(zhǎng)起到抑制作用。

3.1.3對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響

大腸桿菌過(guò)夜培養(yǎng)至其OD值達(dá)0.6～0.7，取50 μL涂布平皿，1、2、3、4組濾紙片分別浸取各自茶樣茶汁，28 ℃恒溫培養(yǎng)，不間斷對(duì)小濾紙片周圍及平皿大腸桿菌生長(zhǎng)情況觀察。大腸桿菌培養(yǎng)至19 h（圖3），1、2、3、4組濾紙片周圍有明顯透亮的抑菌圈存在，但未浸取茶汁的小濾紙片周圍則無(wú)抑菌圈出現(xiàn);各處理組抑菌圈大小有一定差異，其直徑大小依次為：HM2>HM1發(fā)花黑毛茶>黑毛茶;測(cè)量各組所有小濾紙片抑菌圈的大小，1、2、3、4組各抑菌圈大小依次為：0.965 2±0.051 8、0.930 10±0.034 3、0.998 6±0.042 4、1.113 7±0.060 6，數(shù)據(jù)進(jìn)行SPSS19.0分析及作圖（圖4），發(fā)現(xiàn)4組與1、2、3組均達(dá)到了差異極顯著水平（P<0.01）;2組與3組也達(dá)到了差異極顯著水平（P<0.01）。說(shuō)明HM2對(duì)大腸桿菌抑制能力最強(qiáng)，其次是HM1、黑毛茶，發(fā)花黑毛茶抑菌能力最弱;但黑毛茶與發(fā)花黑毛茶的抑菌能力沒(méi)有達(dá)到差異顯著水平。由此可知，發(fā)花后導(dǎo)致黑茶對(duì)大腸桿菌抑菌能力稍有減弱，而添加莓茶一起發(fā)花對(duì)大腸桿菌抑制能力提高，隨之莓茶添加量增加，抑菌圈也增大，說(shuō)明莓茶在黑茶中的含量在一定程度內(nèi)與抑菌作用呈正相關(guān)。

由圖1～4可知，黑毛茶、發(fā)花黑毛茶、HM1、HM2總體上來(lái)說(shuō)，對(duì)青霉、黑曲霉有助生長(zhǎng)作用，但對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)有明顯抑菌作用。

3.2黑毛茶莓茶復(fù)合配比及發(fā)花后感官審評(píng)

將黑毛茶與莓茶原料先配成系列比例，進(jìn)行初次感官審評(píng)，挑選口感度較好的復(fù)合配比樣進(jìn)行冠突散囊菌發(fā)花實(shí)驗(yàn)。通過(guò)對(duì)黑毛茶、發(fā)花黑毛茶、HM1、HM2的感官審評(píng)可知（表1），與未發(fā)花黑毛茶相比，發(fā)花后黑毛茶、HM1、HM2均有明顯的菌花香;湯色在黑毛茶黃色明亮的基礎(chǔ)上加深、變紅變棕紅，亮度有所消減;滋味也呈現(xiàn)明顯菌花味，添加了莓茶的HM1、HM2滋味回甘，有一定收斂性;葉底色澤由黃褐轉(zhuǎn)為棕褐色，HM1、HM2中的莓茶葉底與黑茶葉底顏色匹配、不突兀。

3.3黑毛茶及其莓茶復(fù)合發(fā)花產(chǎn)品的化學(xué)組分變化

3.3.1生物堿含量變化

比較1、2、3、4組可可堿、咖啡堿及茶堿含量變化，由表2可知，發(fā)花黑毛茶與黑毛茶對(duì)照樣比較，可可堿、咖啡堿含量分別下降56.0%、4.9%。HM1、HM2與黑毛茶對(duì)照樣比較，可可堿含量顯著性下降（P<0.01），而發(fā)花黑毛茶與黑毛茶對(duì)照樣比較，可可堿含量下降（P<0.05）;發(fā)花黑毛茶、HM1、HM2與黑毛茶比較，咖啡堿含量均顯著下降（P<0.01）;4組樣品以HM2可可堿、咖啡堿含量下降幅度最大，但HM1、HM2之間無(wú)顯著性差異;所有樣品茶堿含量HPLC未檢測(cè)出。復(fù)合莓茶黑茶配比中莓茶比例僅占10%～20%，但發(fā)花后可可堿、咖啡堿含量比黑毛茶對(duì)照樣下降36%～37%，由此可知，在黑毛茶發(fā)花及在此基礎(chǔ)上配比添加少量莓茶，可顯著降低生物堿含量，降低人飲茶后失眠等生物效應(yīng)，并且增加產(chǎn)品濃強(qiáng)度和舒適的感覺(jué)，避免黑茶發(fā)花后味淡的弱點(diǎn)。

3.3.2兒茶素組分及沒(méi)食子酸變化

通過(guò)HPLC方法，對(duì)各組別茶樣進(jìn)行兒茶素等組分分析，獲知各兒茶素組分沒(méi)食子酸的含量變化（表3）。

比較1、2、3、4組兒茶素組分含量變化，由表3可知，與黑毛茶相比，發(fā)花黑毛茶、HM1、HM2兒茶素總量在發(fā)花后均呈下降趨勢(shì)，發(fā)花黑毛茶下降幅度最大為71.68%，而HM1、HM2中莓茶的存在，則有效地緩解了兒茶素含量的減少趨勢(shì)。簡(jiǎn)單兒茶素中，僅DL-C的含量在發(fā)花之后顯著上升，發(fā)花黑毛茶上升幅度最大達(dá)到361.95%;EGC、EC結(jié)果中顯示，與黑毛茶相比，發(fā)花黑毛茶、HM1、HM2簡(jiǎn)單兒茶素含量顯著下降，且HM2下降幅度最大，分別為80.21%、100%。酯型兒茶素中，EGCG，ECG的含量變化，與黑毛茶相比，發(fā)花黑毛茶、HM1、HM2的含量均顯著下降（P<0.01），下降幅度無(wú)明顯差異;但GCG含量結(jié)果發(fā)生了極為顯著的變化：與黑毛茶相比，發(fā)花黑毛茶、HM1、HM2的含量分別上升了82.03%、1 927.31%、1 551.24%（P<0.01）;與發(fā)花黑毛茶相比，HM1、HM2的含量分別上升了1 013.75%、807.15%（P<0.01）。

由此得知，黑毛茶進(jìn)行發(fā)花，使兒茶素含量顯著降低，使其抑菌作用被抑制;而加入一定的比例的莓茶，則使黑茶的抑菌效果得到充分發(fā)揮，又能保持口感的厚度。

通過(guò)HPLC方法得到4組茶樣沒(méi)食子酸含量變化（表3），比較4組茶樣沒(méi)食子酸含量，與1組黑毛茶相比，2，3，4組發(fā)花黑毛茶、HM1、HM2沒(méi)食子酸含量顯著上升（圖5），且HM2上升幅度最大，為462.69%，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.05）。與發(fā)花黑毛茶相比，HM1無(wú)明顯差異，HM2則與其差異性極顯著，HM1、HM2之間差異性極顯著（P<0.01，P<0.05）。表明酯型兒茶素水解使沒(méi)食子酸含量增加，且莓茶促進(jìn)了沒(méi)食子酸含量的升高，使“金花”莓茶復(fù)合黑茶的抑菌作用增強(qiáng)。

4結(jié)論與討論

綜合分析，在抑菌能力上，李佳蓮[20]、彭曉赟[21]等在之前已經(jīng)證明冠突散囊菌與黑茶的抑菌作用，莓茶的抑菌作用在多年的研究中也得到有效地證明[4-9]。本研究中“金花”莓茶復(fù)合黑茶的抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)分析，再次驗(yàn)證了“金花”莓茶復(fù)合黑茶在對(duì)青霉以及大腸桿菌的抑菌作用上的良好表現(xiàn)，對(duì)黑曲霉的生長(zhǎng)無(wú)明顯抑制作用。但因黑曲霉極易生長(zhǎng)繁殖，推測(cè)是樣品的高濃度茶汁為黑曲霉提供了極為豐沃的生長(zhǎng)環(huán)境，使得“金花”莓茶復(fù)合黑茶對(duì)黑曲霉的生長(zhǎng)無(wú)明顯抑制作用。

通過(guò)HPLC方法發(fā)現(xiàn)，“金花”莓茶復(fù)合黑茶的品質(zhì)成分有著明顯改變：生物堿含量顯著下降，總兒茶素含量降低，沒(méi)食子酸含量顯著增加。生物堿含量顯著下降，能降低人飲茶后失眠等生物效應(yīng)，并且增加產(chǎn)品濃強(qiáng)度、舒適感，使其味更醇;發(fā)花使黑茶兒茶素總含量顯著下降，但莓茶能夠有效地緩解這種下降趨勢(shì)，使黑茶保持其原有的抑菌能力的同時(shí)，保存其醇厚的口感，增加物質(zhì)感;在內(nèi)含成分的影響上，與劉武嫦[22]的研究成果一致;由本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以順理推測(cè)在原材料良好的降血壓、血脂、保肝等保健作用上，此次結(jié)合可能又會(huì)發(fā)揮出優(yōu)秀的作用，后續(xù)的實(shí)驗(yàn)可以進(jìn)行此方面的藥理實(shí)驗(yàn)。

本研究中發(fā)現(xiàn)“金花”莓茶復(fù)合黑茶對(duì)黑曲霉不能有效抑制的結(jié)論，可能是本次實(shí)驗(yàn)所采用的茶汁濃度給予了黑曲霉過(guò)于豐富的生長(zhǎng)基質(zhì)，使其無(wú)法被有效抑制，可以在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中對(duì)茶汁濃度進(jìn)行梯度設(shè)置以尋找能有效抑制黑曲霉及青霉生長(zhǎng)的茶汁濃度，作為后續(xù)生產(chǎn)過(guò)程中的依據(jù)。

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（責(zé)任編輯：鄭京津）