周煒津 楊提昆 王億童 劉江濤 潘曉陽 趙雨鑫 王慧

【摘要】 目的：研究木瓜苷（glucosides of chaenomeles speciosa，GCS）對佐劑型關(guān)節(jié)炎（adjuvant arthritis，AA）大鼠的抗炎效果及對細(xì)胞因子表達(dá)的影響。方法：將40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組（8只）和造模組（32只），造模組建立AA大鼠模型。將造模成功的AA大鼠隨機(jī)分為模型組、GCS低、中、高劑量組，每組8只。在實驗第14天，對GCS低、中、高劑量組（30、90、120 mg/kg）AA大鼠連續(xù)灌胃給藥21 d。測定大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度、關(guān)節(jié)炎炎癥評分、脾臟分?jǐn)?shù)和胸腺分?jǐn)?shù)，HE染色觀察各組大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織病理變化情況;采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）檢測血清白細(xì)胞介素-1（IL-1）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）、前列腺素E2（PGE2）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）。結(jié)果：與正常組相比，在實驗第14天，模型組AA大鼠關(guān)節(jié)炎炎癥評分顯著升高（P<0.05）;在實驗第35天，模型組AA大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度明顯，可見一定程度畸形，脾臟分?jǐn)?shù)、胸腺分?jǐn)?shù)、血清IL-1、PGE2、TNF-α水平均顯著升高，IL-10水平顯著降低（P<0.05）。與模型組相比，在實驗第35天，GCS各治療組AA大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度均有不同程度的降低，關(guān)節(jié)炎炎癥評分、胸腺分?jǐn)?shù)、脾臟分?jǐn)?shù)、血清IL-1、PGE2、TNF-α水平均顯著降低，IL-10水平均顯著升高（P<0.05）;GCS中、高劑量組AA大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織可觀察到滑膜組織增生、大量炎性細(xì)胞浸潤等炎癥病理變化均有所改善。結(jié)論：GCS具有一定的抗炎效果，可以有效地治療佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠所出現(xiàn)的臨床癥狀，減輕大鼠關(guān)節(jié)腫脹和關(guān)節(jié)炎的炎癥程度。該機(jī)制可能是調(diào)節(jié)促炎-抗炎因子平衡狀態(tài)，改善機(jī)體內(nèi)細(xì)胞因子的紊亂狀態(tài)，減慢炎癥的進(jìn)展。

【關(guān)鍵詞】 木瓜苷 AA大鼠 IL-1 TNF-α PGE2

Effects of Glucosides of Chaenomeles Speciosa on Anti-inflammatory Intervention and Cytokine Expression in AA Rats/ZHOU Weijin， YANG Tikun， WANG Yitong， LIU Jiangtao， PAN Xiaoyang， ZHAO Yuxin， WANG Hui. //Medical Innovation of China， 2022， 19（16）： 034-039

[Abstract] Objective： To investigate the glucosides of chaenomeles speciosa （GCS） on anti-inflammatory effect and cytokine expression in adjuvant arthritis （AA） rats. Method： A total of 40 male SD rats were randomly divided into normal group （n=8） and model group （n=32）， AA rat model was established in model group. AA rats with successful modeling were randomly divided into model group and GCS low， medium and high-dose groups， 8 rats in each group. On the 14th day of experiment， AA rats in GCS low-dose， medium-dose and high-dose groups （30， 90 and 120 mg/kg） were intragastric for 21 d. The degree of joint swelling， arthritis inflammation score， spleen score and thymus score of rats were determined， HE staining was used to observe the histopathological changes of synovium in each group; the serum interleukin-1 （IL-1）， interleukin-10 （IL-10）， rostaglandin E2 （PGE2） and tumor necrosis factor-α （TNF-α） were determined by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. Result： Compared with the normal group， the arthritis score of AA rats in the model group increased significantly on the 14th day of the experiment （P<0.05）. On the 35th day of the experiment， the joint swelling degree of AA rats in the model group was obvious， and a certain degree of deformity was observed， including spleen fraction， thymus fraction and serum IL-1， PGE2， and TNF-α levels were significantly increased， and the IL-10 level was significantly decreased （P<0.05）. Compared with the model group， on the 35th day of the experiment， the degree of joint swelling of AA rats in each treatment group of GCS decreased in varying degrees， including arthritis score， spleen fraction， thymus fraction and serum IL-1， PGE2， and TNF-α levels were significantly decreased， and the IL-10 levels were significantly increased （P<0.05）. The synovial tissue of AA rats in the medium and high dose groups of GCS could observe that the inflammatory pathological changes such as synovial tissue proliferation and a large number of inflammatory cell infiltration were improved. Conclusion： GCS has a certain anti-inflammatory effect， and it can effectively treat the clinical symptoms of adjuvant arthritis rats， reduce joint swelling and inflammation degree of arthritis. This mechanism may be to regulate the balance state of pro-inflammatory and anti-inflammatory regulatory network， improve the disorder of cytokines in body， and slow down the progress of inflammation.

[Key words] Glucosides of chaenomeles speciosa AA rats IL-1 TNF-α PGE2

First-author’s address： Qiqihar Medical College， Qiqihar 161006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.16.008

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種病因未明的慢性、全身性自身免疫性疾病，其臨床表現(xiàn)以侵蝕性、對稱性多關(guān)節(jié)炎為主[1]。病理變化為關(guān)節(jié)滑膜組織的慢性炎癥、血管翳形成，關(guān)節(jié)軟骨及其組織被逐漸損傷，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能喪失[2]。流行病學(xué)資料顯示，RA可發(fā)生于任何年齡，女性患者2～3倍于男性[3]，在我國擁有較高的發(fā)病率和致殘率，發(fā)病率為0.32%～0.36%[4]。近年來，已有臨床資料顯示中醫(yī)藥對RA具有一定的療效，同時又可以有效地減輕西藥的毒副作用，具有高效性、低毒性、多途徑等特點[5]，適宜長期服用。木瓜為薔薇科植物貼梗海棠Chaenomeles speciosa （sweet） Nakai的干燥近成熟果實，具有舒筋活絡(luò)、祛濕除痹的功效[6]。目前，已有實驗研究表明木瓜提取物--木瓜苷對RA的治療效果較為顯著[7-8]。本實驗以佐劑型關(guān)節(jié)炎（adjuvant arthritis，AA）大鼠模型為實驗對象，通過灌胃木瓜苷給藥治療，觀察不同劑量的木瓜苷干預(yù)AA大鼠后，炎性細(xì)胞因子的變化情況，旨在進(jìn)一步探究木瓜苷對AA大鼠的治療效果，同時為木瓜苷的藥用價值和RA疾病的治療提供更廣泛的臨床依據(jù)?，F(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物 SD大鼠，雄性，體重（270±25）g，由遼寧長生生物技術(shù)股份有限公司提供（普通級），實驗動物許可證：SCXK（遼）2020-0001。飼養(yǎng)于齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。動物飼養(yǎng)于普通的鼠籠中，每籠8只，自由進(jìn)食，飲自來水，喂標(biāo)準(zhǔn)的顆粒飼料，每天更換墊料，保持室內(nèi)溫度16～20 ℃，相對濕度55%，自然光照，常規(guī)飼養(yǎng)觀察一周后使用。

1.2 藥物及試劑 木瓜苷（glucosides of chaenomeles speciosa，GCS）為粉末狀藥物，由宣木瓜經(jīng)乙醇加熱浸泡，回流提取，冷卻濾過，再次回流提取濾液，由齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院臨床藥理研究所自制提供。完全費(fèi)氏佐劑（生產(chǎn)廠家：碧云天生物科技有限公司，批號：072220201030，規(guī)格：50 mL）;白介素-1（IL-1）、白介素-10（IL-10）、前列腺素E2（PGE2）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）采用酶聯(lián)免疫吸附檢測（ELISA）試劑盒（生產(chǎn)廠家：合肥萊爾生物科技有限公司，批號：LE-B0372，LE-B0415，LE-B0748，LE-B0126，規(guī)格：96T）檢測。

1.3 儀器 HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋購自金壇區(qū)白塔金昌實驗儀器廠;移液槍購自愛來寶（濟(jì)南）醫(yī)療科技有限公司;H4-20KR臺式高速冷凍離心機(jī)購自蘇州威爾實驗用品有限公司;JD-SY96A酶標(biāo)儀購自山東競道光電科技有限公司;ES500-2B電子天平購自河南愛博特科技發(fā)展有限公司。

1.4 方法

1.4.1 AA大鼠模型制備 將40只SD雄性大鼠隨機(jī)分為正常組（8只）和造模組（32只）。造模組建立AA大鼠模型，造模方法參考文獻(xiàn)[9]中的方法，分別在大鼠的右后足足跖皮內(nèi)注射含卡介苗的完全費(fèi)氏佐劑（Complete Freund’s adjuvant，CFA）0.1 mL。正常組大鼠在相同部位注射生理鹽水0.1 mL，參考文獻(xiàn)[10]，采用0～4級評分法對大鼠四肢的病變程度進(jìn)行評分并累計積分，每只大鼠的最高炎癥評分為16分，當(dāng)炎癥評分大于2分時，即為造模成功。0～4級評分法：0分，關(guān)節(jié)正常無紅腫;1分，皮膚或腳趾關(guān)節(jié)輕度紅腫;2分，皮膚和腳趾關(guān)節(jié)中度紅腫;3分，跖關(guān)節(jié)至腳趾重度紅腫，但還可以彎曲和行走;4分，踝或腕關(guān)節(jié)嚴(yán)重紅腫，不能彎曲和行走，即發(fā)生殘疾。

1.4.2 動物分組及給藥方案 在實驗第14天，將造模成功的32只AA大鼠按照隨機(jī)分配法分為4組，分別為模型組和GCS低、中、高劑量組，每組8只。GCS低、中、高劑量組分別灌注胃木瓜苷30、90、120 mg/kg，正常組及模型組灌胃等體積的生理鹽水，連續(xù)給藥21 d。

1.5 觀察指標(biāo)

1.5.1 大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度及關(guān)節(jié)炎炎癥評分 從實驗開始后，每7天對大鼠四肢進(jìn)行一次觀察，記錄關(guān)節(jié)腫脹程度并進(jìn)行關(guān)節(jié)炎炎癥評分，評分方法參考文獻(xiàn)[10-11]。

1.5.2 大鼠體重測定和采集標(biāo)本 從實驗開始后，每7天對大鼠進(jìn)行一次體重測定。末次灌胃給藥24 h后，對AA大鼠進(jìn)行取材，用10%水合氯醛腹腔注射進(jìn)行麻醉，取出脾臟、胸腺和關(guān)節(jié)滑膜組織。

1.5.3 胸腺分?jǐn)?shù)和脾臟分?jǐn)?shù)的測定 在實驗第35天，分別對模型組、GCS低、中、高劑量組AA大鼠胸腺、脾臟進(jìn)行稱量測重。分別稱量取出的脾臟和胸腺，計算其相對應(yīng)的脾臟分?jǐn)?shù)和胸腺分?jǐn)?shù)。胸腺分?jǐn)?shù)=大鼠的胸腺質(zhì)量/大鼠的體重×100%;脾臟分?jǐn)?shù)=大鼠的脾臟質(zhì)量/大鼠的體重×100%。

1.5.4 關(guān)節(jié)滑膜組織的病理學(xué)改變 在實驗第35天，對正常組、模型組、GCS低、中、高劑量組AA大鼠關(guān)節(jié)組織進(jìn)行病理組織形態(tài)學(xué)觀察。將取出的關(guān)節(jié)滑膜組織用4%甲醛固定，進(jìn)行脫鈣處理后縱向切開，石蠟包埋，蠟塊定型后制作切片，隨后按照蘇木精-伊紅（HE）染色方法操作，顯微鏡下觀察組織學(xué)病理變化。

1.5.5 ELISA檢測血清中細(xì)胞因子變化 在實驗第35天，分別對模型組、GCS低、中、高劑量組AA大鼠血清中IL-1、PGE2、TNF-α、IL-10進(jìn)行測定。腹主動脈取血后，將血液3 000 r/min離心10 min，迅速小心地分離血清和紅細(xì)胞，靜置后取出血清。按照試劑盒的操作步驟，檢測血清中IL-1、PGE2、TNF-α及IL-10的含量，用酶標(biāo)儀在450 nm波長處測量吸光度值（OD值）。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 22.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗，多組間比較采用方差分析;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 木瓜苷對AA大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度和關(guān)節(jié)炎炎癥評分的影響 實驗第14、21、28、35天，五組關(guān)節(jié)炎炎癥評分比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;在實驗第14天，與正常組相比，模型組和GCS低、中、高劑量組AA大鼠關(guān)節(jié)炎炎癥評分顯著增加（P<0.05）;在實驗第21、28、35天，與模型組相比，GCS低、中、高劑量組AA大鼠給予不同濃度GCS治療后，關(guān)節(jié)炎炎癥評分顯著降低（P<0.05）。見表1。在實驗第35天，對各組AA大鼠的關(guān)節(jié)腫脹程度進(jìn)行觀察：與正常組相比，模型組AA大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度明顯，末端小關(guān)節(jié)處可見一定程度畸形;與模型組相比，GCS低、中、高劑量組AA大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度均有不同程度的降低。見圖1。

2.2 木瓜苷對脾臟分?jǐn)?shù)和胸腺分?jǐn)?shù)的影響 五組胸腺分?jǐn)?shù)和脾臟分?jǐn)?shù)比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;與正常組相比，模型組AA大鼠免疫器官胸腺和脾臟明顯腫大，脾臟分?jǐn)?shù)和胸腺分?jǐn)?shù)顯著升高（P<0.05）;與模型組相比，GCS低、中、高劑量組AA大鼠胸腺分?jǐn)?shù)和脾臟分?jǐn)?shù)均有不同程度降低（P<0.05）。見表2。

2.3 木瓜苷對AA大鼠血清炎癥因子水平的影響 五組血清各炎癥因子比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;與正常組相比，模型組血清IL-1、PGE2和TNF-α水平顯著升高，IL-10水平顯著降低（P<0.05）;與模型組相比，GCS低、中、高劑量組血清中IL-1、PGE2和TNF-α均顯著降低，IL-10水平均顯著升高（P<0.05）。見表3。

2.4 木瓜苷對AA大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織的病理學(xué)改變 正常組大鼠滑膜組織未見增生，未見血管翳形成，軟骨及其組織未發(fā)現(xiàn)損傷。模型組大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織可見增生，伴有大量炎性細(xì)胞浸潤，可見血管翳的形成，可損傷軟骨及其組織。與模型組相比，GCS中、高劑量組可以顯著改善出現(xiàn)的病理變化，抑制滑膜組織增生，減輕炎性細(xì)胞浸潤，抑制血管翳的形成，減輕對軟骨及其組織的損傷。見圖2。

3 討論

RA大多為慢性起病，以對稱性指、腕、足等多關(guān)節(jié)腫痛為首發(fā)表現(xiàn)，常累及關(guān)節(jié)外的其他器官及血清類風(fēng)濕性因子呈陽性，可導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形及功能喪失。

TNF-α主要由活化的單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，是引發(fā)炎癥和關(guān)節(jié)破壞的主要細(xì)胞因子之一，在TNF轉(zhuǎn)基因小鼠模型中TNF的系統(tǒng)性過度表達(dá)似乎足以引發(fā)慢性滑膜炎和軟骨破壞，并在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和其他過程中發(fā)揮重要作用[11-12]。IL-1主要由活化的單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，可以協(xié)同刺激APC和T細(xì)胞活化，促進(jìn)B細(xì)胞增殖和分泌抗體，對關(guān)節(jié)軟組織呈持續(xù)進(jìn)行性損傷，這與RA的產(chǎn)生密切相關(guān)[13]。IL-10是一種多細(xì)胞源、多功能的細(xì)胞因子，作為抗炎因子可拮抗炎性介質(zhì)，通過控制炎癥反應(yīng)而避免組織損傷，是公認(rèn)的炎癥與免疫抑制因子。PGE2是一種重要的細(xì)胞炎癥因子，具有強(qiáng)烈的致炎致痛作用，是二十碳不飽和脂肪酸花生四烯酸在環(huán)氧化酶-2（COX-2）的環(huán)氧化活性及各種前列腺素合成酶的作用下代謝生成具有生物活性的前列腺素，是體內(nèi)合成最廣泛的前列腺素。PGE2的合成與COX-2密切相關(guān)，已有研究表明，在炎癥反應(yīng)過程中，COX-2的含量明顯增高，促進(jìn)PGE2的合成，進(jìn)一步誘導(dǎo)炎性因子向炎癥部位聚集趨化，同時增大毛細(xì)血管的通透性，促進(jìn)炎性滲出，加快局部的炎癥反應(yīng)進(jìn)程[14-16]。

本實驗結(jié)果顯示，在實驗第14天，與正常組相比，模型組、GCS低、中、高劑量組AA大鼠關(guān)節(jié)炎炎癥評分顯著升高（P<0.05）。在實驗第21、28、35天，與模型組相比，GCS低、中、高劑量組AA大鼠給予不同濃度GCS治療后，關(guān)節(jié)炎炎癥評分顯著降低（P<0.05）。在實驗第35天，與正常組相比，模型組AA大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度明顯，可見一定程度畸形，脾臟分?jǐn)?shù)和胸腺分?jǐn)?shù)顯著升高（P<0.05）;血清中IL-1、PGE2、TNF-α水平顯著升高（P<0.05），IL-10水平顯著降低（P<0.05）;模型組AA大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織在病理組織形態(tài)學(xué)下可觀察到關(guān)節(jié)滑膜組織增生、大量炎性細(xì)胞浸潤、血管翳的形成、軟骨及其組織損傷等病理性變化，與文獻(xiàn)[17]報道較為一致。在實驗第35天，與模型組相比，GCS低、中、高劑量組AA大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度均有不同程度的降低，胸腺分?jǐn)?shù)和脾臟分?jǐn)?shù)均有不同程度降低（P<0.05），血清中IL-1、PGE2、TNF-α顯著降低，IL-10水平顯著升高（P<0.05）。GCS中、高劑量組AA大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織在病理組織形態(tài)學(xué)下可觀察到炎性細(xì)胞浸潤、滑膜組織增生、血管翳形成、關(guān)節(jié)軟骨破壞等炎癥病理變化均有所改善。木瓜苷的抗炎作用可能與抑制多種細(xì)胞中炎性介質(zhì)的分泌有關(guān)，其中PGE2的含量變化最為顯著，筆者做出推測：木瓜苷可能通過降低COX-2表達(dá)的下調(diào)節(jié)來減少PGE2的催化合成，抑制COX-2和其他炎癥信號通路形成反饋循環(huán)，減輕關(guān)節(jié)炎炎癥級聯(lián)反應(yīng)，以延緩減輕疾病的進(jìn)展和發(fā)展。

滑膜組織增生主要是由于細(xì)胞增殖與細(xì)胞凋亡不平衡所導(dǎo)致的。大量促炎細(xì)胞因子被誘導(dǎo)產(chǎn)生，滑膜成纖維細(xì)胞中的MAP激酶被激活后，表現(xiàn)為逐級磷酸化，參與到細(xì)胞增殖與凋亡的過程中[18]。另一方面，已有研究表明，促炎細(xì)胞因子IL-1能抑制抗Fas抗體誘導(dǎo)的凋亡，因此，在炎癥狀態(tài)下由于滑膜細(xì)胞通過Fas/FasL通路發(fā)生凋亡，但這種凋亡過程可被促炎細(xì)胞因子抑制，最終引起滑膜細(xì)胞增生、關(guān)節(jié)破壞等病理變化[19]。

血管翳是RA病變過程中的特征性病理變化，是引起關(guān)節(jié)病變、軟骨破壞的主要病因及病理基礎(chǔ)。已有研究表明，當(dāng)機(jī)體處于炎癥狀態(tài)時，巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞可分泌大量的TNF-α、IL-1，血管翳的形成主要受IL-1濃度的影響，當(dāng)IL-1達(dá)到一定的濃度時，大量滑膜細(xì)胞聚集在關(guān)節(jié)軟骨表面，促進(jìn)血管翳的形成[20]。而TNF-α則可以誘導(dǎo)成纖維樣滑膜細(xì)胞的增殖，促進(jìn)血管翳的形成。TNF-α和IL-1能刺激滑膜細(xì)胞合成并分泌PGE2，這些促炎細(xì)胞因子可以上調(diào)膠原酶和基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)水平，導(dǎo)致軟骨及其組織發(fā)生損傷[21]。

本次實驗?zāi)Ｐ徒MAA大鼠鏡下觀察到的滑膜組織增生，大量炎性細(xì)胞浸潤，形成血管翳等病理變化與RA鏡下病理變化一致。經(jīng)治療后，GCS中、高劑量組AA大鼠鏡下可見滑膜組織增生被抑制，炎性細(xì)胞浸潤程度減輕，血管翳的形成被抑制，軟骨及其組織的損傷減輕等病理變化，根據(jù)以往對AA大鼠的研究[22-23]，同時結(jié)合本次實驗的血清細(xì)胞因子研究結(jié)果，筆者做出推測其改變可能由于：GCS通過抑制滑膜炎時滑膜細(xì)胞釋放促炎因子PGE2，降低毛細(xì)血管的通透性，減少炎性滲出，減輕炎癥反應(yīng)和軟骨損傷;通過抑制促炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-1的分泌，抑制滑膜組織增生和血管翳的形成。

綜上所述，當(dāng)機(jī)體有炎癥反應(yīng)等異常情況時，機(jī)體內(nèi)促炎細(xì)胞因子（TNF-α、IL-1、PGE2等）和抗炎細(xì)胞因子（IL-4、IL-10等）之間的平衡狀態(tài)被打破，促炎細(xì)胞因子被迅速誘導(dǎo)產(chǎn)生，大量促炎因子的產(chǎn)生使機(jī)體促炎-抗炎復(fù)雜有序的細(xì)胞因子平衡調(diào)節(jié)狀態(tài)發(fā)生紊亂，進(jìn)一步誘導(dǎo)局部及全身炎癥反應(yīng)，加快、加重對機(jī)體和組織的損傷。GCS可有效減輕模型組AA大鼠出現(xiàn)的炎癥反應(yīng)，其抗炎機(jī)制可能是通過降低IL-1、PGE2及TNF-α促炎因子含量，增加IL-10抗炎因子含量，從而改善機(jī)體內(nèi)細(xì)胞因子的紊亂狀態(tài)，恢復(fù)促炎-抗炎因子的平衡狀態(tài)。因此，GCS是一種有待挖掘的抗RA藥物，根據(jù)其消炎抗風(fēng)濕的藥理作用，有可能成為治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的新型藥物，需要進(jìn)一步深入研究。

參考文獻(xiàn)

[1]田杰祥，陶永明，王鋼，等.中醫(yī)藥治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜炎的機(jī)理研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥學(xué)報，2019，47（3）：122-124.

[2]孫標(biāo)，鄧翠翠，王加，等.黃芩苷對大鼠類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎軟骨損傷的影響[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2021，38（7）：1440-1446.

[3] JIN S Y，LI M T，F(xiàn)ANG Y F，et al.Chinese Registry of rheumatoid arthritis（CREDIT）：Ⅱ.prevalence and risk factors of major comorbidities in Chinese patients with rheumatoid arthritis[J].Arthritis Research & Therapy，2017，19（1）251-258：

[4] CONN D L，TILIAKOS A，BAO G，et al.Correction to：Effect of daily low dose prednisone， divided or single daily dose，in the treatment of African Americans with early rheumatoid arthritis[J].Springer London，2018，37（2）：355-365.

[5]李蓉，寧喬怡，姚血明，等.中醫(yī)藥對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞凋亡和增殖作用的研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)雜志，2017，44（4）：868-870.

[6]國家藥典委員會.中國人民共和國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020：62-63.

[7]抗晶晶.木瓜苷抗炎作用研究進(jìn)展[J].中國野生植物資源，2016，35（4）：57-59，75.

[8]代琪，佘穎祺，葉俏波，等.中藥木瓜和木瓜籽的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2021，17（8）：219-223.

[9]劉琪，張巧琳，陳曉蕓，等.性別差異對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎模型的影響[J].中國藥理學(xué)通報，2020，36（9）：1328-1332.

[10]余納，蔡小燕，林小軍，等.蒽貝素對大鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎炎癥評分及炎癥細(xì)胞因子的影響[J].南昌大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2016，56（4）：19-22，64，107.

[11]高柳冰，楊榮志，高艷華，等.RA患者血清中TNF-α、IL-6、miR-155、PA及TGF-β1水平及臨床意義[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2020，20（12）：1585-1588，1599.

[12]任云麗，張小麗.血清炎癥因子在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎進(jìn)展中的價值[J].中國老年學(xué)雜志，2021，41（19）：4302-4305.

[13]武曄，王曉磊，姜淑華，等.銀苓消腫丸對濕熱痹阻型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清IL-1、IL-6、BlyS表達(dá)的影響[J].風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2017，6（6）：21-24.

[14]朱潔宜，吳鑫宇，潘軍英，等.烏腺金絲桃對佐劑性關(guān)節(jié)炎模型大鼠血清中IL-17、PGE2、MMP-9、IFN-γ含量的影響[J].中醫(yī)藥信息，2017，34（5）：13-15.

[15]付聰敏，王敏，徐松濤，等.槐果堿的鎮(zhèn)痛、抗炎作用及其對COX-2/PGE2信號通路的影響[J].中國藥房，2019，30（13）：1775-1780.

[16]蔡樹焓.花椒新傷油劑對大鼠急性軟組織損傷PGE2含量及COX-2、mPGES-1 mRNA基因表達(dá)的影響[D].成都：成都體育學(xué)院，2021.

[17]顧正位，馮帥，蔣海強(qiáng)，等.木瓜醇提物對大鼠類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)炎癥及滑膜細(xì)胞凋亡的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2020，26（18）：45-50.

[18]文建庭，劉健，王馨，等.新風(fēng)膠囊通過調(diào)控lncRNA MAPKAPK5-AS1對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞凋亡與炎癥的影響[J/OL].中國中藥雜志，2021，46（24）：6542-6548.

[19] WANG X H，DAI C，WANG J，et al.Therapeutic effect of neohesperidin on TNF-α-stimulated human rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes[J].Chinese Journal of Natural Medicines，2021，19（10）：741-749.

[20]孫標(biāo)，鄧翠翠，王加，等.黃芩苷對大鼠類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎軟骨損傷的影響[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2021，38（7）：1440-1446.

[21]單兆亞，王波.右美托咪定調(diào)控急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型大鼠血清炎性因子水平及滑膜功能效果研究[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2021，50（9）：1052-1055.

[22]王海燕，覃慧林，張永峰，等.木瓜三萜對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織中Akt、NF-κB和促炎因子的表達(dá)影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2017，23（5）：141-146.

[23]韓宇飛，高明利，劉東武.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展綜述[J].中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理，2021，12（1）：162-165.

（收稿日期：2021-12-02） （本文編輯：程旭然）