傅斌 陳建章 范姝 包奇昌 萬軍 洪建勛

【摘要】 目的：探討清中愈瘍湯對脾胃濕熱型胃潰瘍的治療作用，為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：將60只Wistar大鼠隨機(jī)分為6組，正常對照組、模型對照組、清中愈瘍湯高劑量組、清中愈瘍湯中劑量組、清中愈瘍湯低劑量組、奧美拉唑組，每組10只。正常對照組正常飼養(yǎng)，其余各組均制作為實(shí)驗(yàn)性脾胃濕熱型胃潰瘍大鼠模型。造模成功予以持續(xù)治療30 d后，處死大鼠取其血樣和胃黏膜組織。測量計(jì)算大鼠潰瘍面積及潰瘍抑制率;將胃黏膜組織制成病理切片行蘇木素伊紅（HE）染色，在顯微鏡下觀察各組大鼠胃黏膜組織的病理學(xué)變化，并檢測大鼠血清中腫瘤壞死因子（TNF-α）、白介素-8（IL-8）、胃動(dòng)素（MTL）、前列腺素E2（PGE2）等水平，比較干預(yù)前后各組相關(guān)指標(biāo)變化情況。通過Western blot法檢測大鼠胃黏膜組織中核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）通路相關(guān)蛋白水平，包括磷酸化核因子κB亞基65（p-NF-κB p65）、磷酸化核因子κB抑制蛋白（p-IκBα）。結(jié)果：與正常對照組比較，模型對照組胃黏膜發(fā)生明顯病理變化，黏膜上皮細(xì)胞明顯缺損，可見黏膜組織充血及水腫現(xiàn)象，并存在明顯炎性細(xì)胞浸潤。干預(yù)后，各組潰瘍面積、潰瘍抑制率、TNF-α、IL-8、MTL及PGE2水平、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα蛋白表達(dá)水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;干預(yù)后，與正常對照組比較，模型對照組潰瘍面積增加，NF-κB p65、IκBα蛋白表達(dá)水平均降低，p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表達(dá)水平均升高（P<0.05）;干預(yù)后，與模型對照組比較，清中愈瘍湯高、中、低劑量組及奧美拉唑組潰瘍面積均明顯減少，TNF-α、IL-8水平均下降，MTL、PGE2水平均升高，（P<0.05）;與奧美拉唑組比較，清中愈瘍湯高、中劑量組潰瘍面積均明顯減少，潰瘍抑制率均明顯增加（P<0.05）;與清中愈瘍湯低劑量組比較，清中愈瘍湯高、中劑量組潰瘍面積均明顯減少，潰瘍抑制率均明顯增加（P<0.05）。與清中愈瘍湯中劑量組比較，清中愈瘍湯高劑量組明顯減少，潰瘍抑制率明顯增加（P<0.05）。與模型對照組比較，清中愈瘍湯高、中、低劑量組均出現(xiàn)不同程度的NF-κB p65、IκBα蛋白表達(dá)水平升高、p-NF-κB p65下降;清中愈瘍湯高劑量組p-IκBα蛋白表達(dá)水平低于模型對照組（P<0.05）。結(jié)論：清中愈瘍湯可通過抑制炎癥因子釋放以及抑制NF-κB信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)，以減少潰瘍面積，并促進(jìn)胃黏膜內(nèi)源性物質(zhì)分泌以及胃活動(dòng)功能，從而達(dá)到對脾胃濕熱型胃潰瘍的治療作用，促進(jìn)潰瘍愈合。

【關(guān)鍵詞】 胃潰瘍 脾胃濕熱型 清中愈瘍湯 大鼠模型

Experimental Study on the Effect of Qingzhong Yuyang Decoction on Gastric Ulcer of Spleen and Stomach Damp-heat Type/FU Bin， CHEN Jianzhang， FAN Shu， BAO Qichang， WAN Jun， HONG Jianxun. //Medical Innovation of China， 2022， 19（16）： 0-034

[Abstract] Objective： To explore the therapeutic effect of Qingzhong Yuyang Decoction on gastric ulcer of spleen-stomach damp-heat type， and to provide experimental basis for clinical medication. Method： A total of 60 Wistar rats were randomly divided into 6 groups： normal control group， model control group， high-dose Qingzhong Yuyang Decoction high-dose group， Qingzhong Yuyang Decoction medium-dose group， Qingzhong Yuyang Decoction low-dose group， Omeprazde group， 10 animals in each group. The normal control group was fed normally， and the other groups were used as experimental gastric ulcer rat models of spleen-stomach damp-heat type. After successful modeling and continuous treatment for 30 days， the rats were sacrificed to obtain blood samples and gastric mucosal tissue. The ulcer area and the ulcer inhibition rate of the rats were measured and calculated; the gastric mucosa tissue was made into pathological sections and stained with hematoxylin and eosin （HE）， the pathological changes of the gastric mucosa tissue of the rats in each group were observed under a microscope， and the serum levels of the rats were detected. The levels of tumor necrosis factor （TNF-α）， interleukin-8 （IL-8）， motilin （MTL）， and prostaglandin E2 （PGE2） were compared， and the changes of related indicators in each group before and after the intervention were compared. Western blot was used to detect the levels of nuclear factor κB （NF-κB） pathway-related proteins in rat gastric mucosa， including phosphorylated nuclear factor κB subunit 65 （p-NF-κB p65）， phosphorylated nuclear factor κB inhibitory protein （ p-IκBα）. Result： Compared with normal control group， gastric mucosa in model control group showed obvious pathological changes， with obvious defect of epithelial cells， hyperemia and edema of mucosal tissue， and obvious inflammatory cell infiltration. After intervention， there were significant differences in ulcer area， ulcer inhibition rate， TNF-α，

IL-8， MTL and PGE2 levels， and protein expression levels of NF-κB p65， P-NF -κB p65， IκBα and P-I κBα among all groups （P<0.05）. After intervention， compared with normal control group， ulcer area increased， NF-κB p65 and IκBα protein expression decreased， and P-NF -κB p65 and P-I κBα protein expression increased in model control group （P<0.05）. After intervention， compared with model control group， ulcer area in Qingzhong Yuyang Decoction high-dose， medium-dose and low-dose groups and Omeprazole groups were significantly reduced， TNF-α and IL-8 levels were decreased， MTL and PGE2 levels were increased （P<0.05）. Compared with omeprazole group， ulcer area in Qingzhong Yuyang Decoction high-dose and medium-dose groups was significantly reduced， and ulcer inhibition rate was significantly increased （P<0.05）. Compared with the Qingzhong Yuyang Decoction low-dose group， the ulcer area in the Qingzhong Yuyang Decoction high-dose and medium-dose groups were significantly reduced， and the ulcer inhibition rate were significantly increased （P<0.05）. Compared with Qingzhong Yuyang Decoction medium-dose group， the ulcer inhibition rate in Qingzhong Yuyang Decoction high-dose group was significantly increased （P<0.05）. Compared with model control group， protein expression levels of NF-κB p65 and IκBα were increased and p-NF-κB p65 was decreased in Qingzhong Yuyang Decoction high-dose， medium-dose and low-dose groups. The protein expression level of P-I κBα in Qingzhong Yuyang Decoction high-dose group was lower than that in model control group （P<0.05）. Conclusion： Qingzhong Yuyang Decoction can reduce the ulcer area by inhibiting the release of inflammatory factors and inhibiting the expression of NF-κB signaling pathway-related proteins， and promote the secretion of endogenous substances in gastric mucosa and gastric motility function， so as to achieve the therapeutic effect on gastric ulcer of spleen-stomach damp-heat type， and promote ulcer healing.

[Key words] Gastric ulcer Spleen and stomach damp-heat type Qingzhong Yuyang Decoction Rat model

First-author’s address： Jiangxi College of Traditional Chinese Medicine， Fuzhou 344000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.16.007

胃潰瘍（gastric ulcer，GU）是常見的消化系統(tǒng)疾病，該病遷延難愈、反復(fù)發(fā)作，且易引起各種并發(fā)癥，嚴(yán)重危害患者健康，其中引起過度炎癥反應(yīng)的因素主要為核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）及其抑制蛋白α（IκBα）異常表達(dá)。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)在治療過程中常采用H2受體拮抗劑以及奧美拉唑等質(zhì)子泵抑制劑進(jìn)行治療，但依然存在易產(chǎn)生副作用以及復(fù)發(fā)率較高的情況[1-2]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，胃潰瘍屬于“胃脘痛”范疇，臨床辨證分型以脾胃濕熱型較為常見，其發(fā)生機(jī)制一般與外邪侵襲、飲食不節(jié)、脾胃虛弱等因素相關(guān)，濕熱內(nèi)蘊(yùn)脾胃則運(yùn)化受阻，日久可損傷血絡(luò)以致化腐成瘍，需要辨證論治[3]，中醫(yī)通過清熱化濕、理氣和胃，可減輕臨床癥狀[4]。本研究通過在清代中醫(yī)著作《醫(yī)宗金鑒》中“清中湯”方藥基礎(chǔ)上加味形成“清中愈瘍湯”，并通過制備脾胃濕熱型胃潰瘍大鼠模型觀察清中愈瘍湯對胃潰瘍的治療效果以及作用機(jī)制，以期為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 Wistar大鼠60只，雄雌各半，體重為180～220 g，由江西中醫(yī)藥高等專科學(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，該實(shí)驗(yàn)經(jīng)江西中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.1.2 藥物 清中愈瘍湯方藥組成：白豆蔻10 g、法半夏10 g、陳皮10 g、茯苓10 g、佩蘭10 g、黃連6 g、梔子6 g、生甘草6 g、蒲公英20 g、馬勃6 g、吳茱萸2 g、白及10 g、海螵蛸20 g。由本校制劑室煎成湯劑，放置冰箱低溫保存?zhèn)溆?。奧美拉唑（生產(chǎn)廠家：北京協(xié)和藥廠，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H11021000，規(guī)格：20 mg）。

1.1.3 試劑 腫瘤壞死因子（TNF-α）、白介素-8（IL-8）大鼠ELISA試劑盒購于上海酶聯(lián)生物科技有限公司;胃動(dòng)素（MTL）、前列腺素E2（PGE2）大鼠ELISA試劑盒購于武漢華美生物工程有限公司;NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65）IκBα、磷酸化IκBα（p-IκBα）等兔多克隆抗體購于美國Cell Signaling公司。

1.1.4 儀器 Multiskan MK3酶標(biāo)儀（芬蘭雷柏公司）;Centrifuge 5810R型高速冷凍離心機(jī)（德國Eppendorf公司）;CX23型光學(xué)顯微鏡（日本Olympus公司）。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 將60只Wistar大鼠隨機(jī)分為6組，正常對照組、模型對照組、清中愈瘍湯高劑量組、清中愈瘍湯中劑量組、清中愈瘍湯低劑量組、奧美拉唑組，每組10只。正常對照組于正常環(huán)境中飼養(yǎng)，同時(shí)予以正常飲食。其余各組均制成脾虛濕熱型大鼠模型，將其養(yǎng)育于潮濕環(huán)境中，隔日喂養(yǎng)進(jìn)食，可自由飲水，并從第5天起將飲水替換為10%蜂蜜與10%白糖混合飲料50 mL。自第5日起，隔日給予每只大鼠豬脂20 g，直至第29日;自第5日起，每隔3日用1 mL酒精含量為56%的白酒對大鼠進(jìn)行灌胃。于造模第30天，除正常對照組，其余各組均灌無水乙醇1 mL/200 g，灌無水乙醇前禁食24 h。

1.2.2 給藥方法 模型建立后，正常對照組與模型對照組灌胃等體積0.9%氯化鈉溶液，1次/d。清中愈瘍湯煎劑按《動(dòng)物與人體每公斤體重劑量折算系數(shù)表》中成人用藥量與大鼠等效劑量（普通人60 kg服藥量為120 mL/d，即2 mL/kg）換算，以成人用藥量的6倍作為大鼠用藥劑量，即大鼠用藥量為

1.2 mL/100 g，并以此作為清中愈瘍湯高劑量組用藥量;以高劑量的0.5倍作為清中愈瘍湯中劑量組用藥量，即0.6 mL/100 g;以中劑量的0.5倍作為清中愈瘍湯低劑量組用藥量，即0.3 mL/100 g。清中愈瘍湯高、中、低劑量組灌胃均2次/d。同時(shí)，取奧美拉唑按成人日劑量40 mg換算為大鼠日劑量0.4 mg/100 g，奧美拉唑水溶液400 mg/L折算為1 mL/100 g。奧美拉唑組1 mL/100 g灌胃，1次/d。以上各組均連續(xù)用藥14 d。

1.2.3 標(biāo)本采集及潰瘍指標(biāo)計(jì)算 末次給藥后禁食12 h，經(jīng)大鼠腹主動(dòng)脈穿刺采血后分離血清。采血完畢后處死大鼠，摘取全胃，沿胃大彎剪開并用0.9%氯化鈉沖洗干凈胃內(nèi)容物，將其置于玻璃板上觀察記錄胃黏膜潰瘍情況。用游標(biāo)卡尺測量潰瘍組織的最大橫徑及最大縱徑數(shù)據(jù)，計(jì)算潰瘍面積和潰瘍抑制率。潰瘍面積=π×最大橫徑/2×最大縱徑/2;潰瘍抑制率=（模型對照組潰瘍面積-給藥治療組潰瘍面積）/模型對照組潰瘍面積×100%[5]。測量完畢后用手術(shù)刀切取潰瘍組織，正常對照組切取胃前部近幽門處組織。

1.2.4 蘇木素伊紅（HE）染色 將大鼠胃黏膜常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片后進(jìn)行HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察組織病理學(xué)結(jié)構(gòu)變化。胃黏膜病理顯示明顯充血、黏膜固有層存在大量炎癥細(xì)胞浸潤，黏膜層腺體缺損及潰瘍形成，主細(xì)胞和黏液細(xì)胞形態(tài)不完整等系列變化，則提示GU造模成功。

1.2.5 血清TNF-α、IL-8、MTL、PGE2水平測

定 將采集到的血樣進(jìn)行血清分離，采用3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min，嚴(yán)格按照各試劑盒具體操作步驟對血清中TNF-α、IL-8、MTL、PGE2水平進(jìn)行相應(yīng)檢測。

1.2.6 Western blot檢測NF-κB通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平 將取材好的胃黏膜組織剪碎，加入500 μL的RIPA裂解液進(jìn)行約30 min的裂解并離心，收集上清液，則可得到總蛋白提取液。將十二烷基硫酸鈉（SDS）緩沖液加入同等體積樣品中，通過SDS-PAGE轉(zhuǎn)模，接著使用封閉液封閉1 h。加入合適濃度的一抗溶液，于室溫下孵育2 h。利用TBST漂洗3次，10 min/次。最后通過ELC發(fā)光法進(jìn)行蛋白表達(dá)檢測，顯影沖洗。

1.3 觀察指標(biāo) 比較干預(yù)前后各組潰瘍面積、潰瘍抑制率變化，TNF-α、IL-8、MTL、PGE2水平以及NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα等相關(guān)通路蛋白水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組內(nèi)比較采用配對t檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析（F檢驗(yàn)），兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HE染色結(jié)果 正常對照組大鼠胃黏膜結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞排列整齊，黏膜肌層清晰分明，未見炎癥細(xì)胞浸潤等現(xiàn)象;模型對照組大鼠黏膜明顯損傷，黏膜肌層大面積壞死病變，潰瘍病灶形成，潰瘍處上皮層及肌層消失，出現(xiàn)不同程度充血及水腫現(xiàn)象，可見大量炎癥細(xì)胞滲出;奧美拉唑組胃黏膜上皮細(xì)胞少量缺損，存在少量炎癥細(xì)胞及水腫情況，但形態(tài)較為完整;清中愈瘍湯低、中、高劑量組黏膜下層微血管充血及水腫、炎癥細(xì)胞浸潤等情況均有所改善，黏膜組織形態(tài)改善，潰瘍組織呈現(xiàn)不同程度修復(fù)與愈合，潰瘍周圍組織出現(xiàn)再上皮化，且隨劑量增加愈合效果越明顯，見圖1。

2.2 各組干預(yù)前后潰瘍面積與潰瘍抑制率比較 干預(yù)后，各組潰瘍面積與潰瘍抑制率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=30.608、411.703，P=0.000、0.000）;干預(yù)后，與正常對照組比較，模型對照組潰瘍面積增加（P<0.05）;與模型對照組比較，清中愈瘍湯高、中、低劑量組及奧美拉唑組潰瘍面積均明顯減少（P<0.05）;與奧美拉唑組比較，清中愈瘍湯高、中劑量組潰瘍面積均明顯減少，潰瘍抑制率均明顯增加（P<0.05）;與清中愈瘍湯低劑量組比較，清中愈瘍湯高、中劑量組潰瘍面積均明顯減少，潰瘍抑制率均明顯增加（P<0.05）。與清中愈瘍湯中劑量組比較，清中愈瘍湯高劑量組明顯減少，潰瘍抑制率明顯增加（P<0.05）。見表1。

2.3 各組干預(yù)前后TNF-α、IL-8、MTL及PGE2水平比較 干預(yù)后，各組TNF-α、IL-8、MTL及PGE2水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=30.548、57.136、7.861、49.691，P=0.000、0.000、0.000、0.000）;正常對照組和模型對照組干預(yù)前后上述指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;干預(yù)后，與模型對照組比較，清中愈瘍湯高、中、低劑量組及奧美拉唑組TNF-α、IL-8水平均下降，MTL、PGE2水平均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.4 各組NF-κB通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平比較 各組NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα蛋白表達(dá)水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;與正常對照組比較，模型對照組NF-κB p65、IκBα蛋白表達(dá)水平均降低，p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表達(dá)水平均升高（P<0.05）;與模型對照組比較，清中愈瘍湯高、中、低劑量組均出現(xiàn)不同程度的NF-κB p65、IκBα蛋白表達(dá)水平升高、p-NF-κB p65下降;清中愈瘍湯高劑量組p-IκBα蛋白表達(dá)水平低于模型對照組（P<0.05）。奧美拉唑不作用于NF-κB通路，故不與奧美拉唑組進(jìn)行比較。見表3。

3 討論

各種致病因子通過共同作用可引起炎癥反應(yīng)、黏膜肌層局限性組織缺損壞死等病理改變，導(dǎo)致GU發(fā)生。研究指出，GU病位在胃腸道，與肝、脾、胃等臟腑功能失調(diào)相關(guān)[6]。GU活動(dòng)期病因主要為“熱毒”壅滯于脾胃，濕熱內(nèi)蘊(yùn)，氣機(jī)不暢，中焦脾胃受困，濕熱蘊(yùn)久而肉腐，終成潰瘍。近年來中醫(yī)藥逐漸被廣泛應(yīng)用于臨床消化系統(tǒng)疾病的治療中，并取得不錯(cuò)的療效，相較于抗生素的副反應(yīng)，中醫(yī)藥遵循急則治其標(biāo)、緩則治其本的原則，在臨床治療中顯示出一定優(yōu)勢[7-8]。

本研究結(jié)果顯示，HE染色結(jié)果可見經(jīng)藥物干預(yù)后的清中愈瘍湯高、中、低劑量組及奧美拉唑組大鼠胃黏膜組織形態(tài)明顯改善，充血及水腫狀態(tài)減輕，炎癥細(xì)胞浸潤情況好轉(zhuǎn)，潰瘍組織呈現(xiàn)不同程度修復(fù)與愈合，提示選擇合適劑量的清中愈瘍湯治療脾胃濕熱型胃潰瘍具有較好的效果。本研究結(jié)果顯示，干預(yù)后，各組潰瘍面積、潰瘍抑制率、TNF-α、IL-8、MTL及PGE2水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;與正常對照組比較，模型對照組潰瘍面積增加，TNF-α、IL-8水平均升高，MTL、PGE2水平均降低（P<0.05）。其中正常對照組大鼠干預(yù)前后潰瘍觀察指標(biāo)無明顯變化，胃黏膜表面光滑完整，黏膜組織局部顏色紅潤且褶皺紋理清晰;模型對照組大鼠干預(yù)前后潰瘍觀察指標(biāo)無明顯變化，可見較大面積糜爛潰瘍，胃竇處出現(xiàn)橢圓形潰瘍凹陷缺損，潰瘍周邊皺襞消失;干預(yù)后的清中愈瘍湯高、中、低劑量組及奧美拉唑組大鼠潰瘍觀察指標(biāo)較干預(yù)前呈現(xiàn)不同程度改善，潰瘍面積縮小，尤以清中愈瘍湯高劑量組潰瘍抑制率最高。潰瘍愈合情況隨劑量增加而治療效果越明顯，說明選擇合適劑量的清中愈瘍湯治療脾胃濕熱型胃潰瘍具有較好的效果。TNF-α是導(dǎo)致潰瘍生成的烈性介質(zhì)，也是主要的致炎因子，并促進(jìn)IL-8或其他炎性因子的釋放，加強(qiáng)T細(xì)胞和B細(xì)胞的增殖與分化，從而促進(jìn)中性粒細(xì)胞聚集，以及啟動(dòng)血管內(nèi)凝血引起局部血液循環(huán)障礙，進(jìn)一步影響?zhàn)つぱ豕┙o，加重機(jī)體內(nèi)炎癥反應(yīng)，損傷胃腸黏膜，最終發(fā)展成潰瘍[9-10]。IL-8是一種具有免疫調(diào)節(jié)和炎癥介導(dǎo)等多功能細(xì)胞因子，在人體免疫系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)中發(fā)揮調(diào)控作用[11]。MTL則是由M細(xì)胞合成及分泌的多肽，廣泛分布于十二指腸、胃竇等，可增強(qiáng)胃竇蠕動(dòng)和胃腸道收縮活動(dòng)[12-13]。PGE2是胃黏膜中具有細(xì)胞保護(hù)作用的內(nèi)源性物質(zhì)，研究指出PGE2可通過調(diào)節(jié)胃黏膜上皮黏液和碳酸氫鹽分泌以及胃黏膜血液循環(huán)、維持其完整性以及調(diào)節(jié)胃酸分泌[14]，從而進(jìn)一步避免潰瘍損傷胃黏膜。通過刺激胃黏膜黏液分泌，形成黏液-碳酸氫鹽屏障，并通過增加胃黏膜血流量刺激基底細(xì)胞上移，促進(jìn)胃黏膜細(xì)胞增殖和抑制胃黏膜細(xì)胞凋亡，以保護(hù)胃黏膜組織及其功能[15]。

清中愈瘍湯方中白豆蔻化濕行氣，黃連清熱燥濕、瀉火解毒，二者起清熱祛濕解毒之功，用為君藥。佩蘭醒脾化濕;濕困脾胃易聚而生痰，法半夏燥濕化痰;陳皮理氣健脾、燥濕化痰;茯苓滲濕健脾。四味合用，共助君藥起祛濕化痰之效，用為臣藥。蒲公英清熱解毒，是濕熱證脾胃病的常用治療藥物;梔子清熱化痰;馬勃清熱解毒、止血斂瘡;白及、海螵蛸收斂止血、愈瘍生肌，白及成分中白及多糖可有效降低TNF-α水平，抑制炎癥反應(yīng)，海螵蛸通過中和胃酸以促進(jìn)PGE2對胃黏膜的保護(hù)作用[16];吳茱萸性味辛辣，使黃連、梔子等苦寒藥物清熱燥濕而不傷正。上六味共同輔佐君臣清熱解毒，用為佐藥。生甘草補(bǔ)中解毒、調(diào)和諸藥，用為使藥。諸藥合用，標(biāo)本兼顧，君臣佐使諸藥協(xié)同作用，共奏清熱化濕、愈瘍生肌之效。“多因、多效、多靶點(diǎn)”的作用特點(diǎn)使其在治療過程中通過多種機(jī)制綜合調(diào)控，已達(dá)到最佳的整體效應(yīng)[17]。因此，本研究以清中愈瘍湯用于治療濕熱內(nèi)蘊(yùn)型胃潰瘍，可有效清熱解毒、燥濕化濁，減少潰瘍組織面積，提高潰瘍抑制率。并在一定程度上促進(jìn)炎癥修復(fù)，受損胃黏膜修復(fù)后，可正向調(diào)控炎癥細(xì)胞凋亡，達(dá)到抑制TNF-α、IL-8等炎癥因子異常分泌以及降低其水平的功效，并激發(fā)免疫系統(tǒng)進(jìn)一步促進(jìn)潰瘍愈合，緩解胃黏膜損傷狀態(tài)，也使得MTL、PGE2水平升高。

NF-κB信號通路與炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展以及胃黏膜損傷聯(lián)系密切，通過NF-κB p65結(jié)合IκBα，覆蓋NF-κB p50的核定位信號，從而無法正常進(jìn)行轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)。外界刺激可使上游級聯(lián)反應(yīng)進(jìn)一步誘導(dǎo)IκBα磷酸化以及NF-κB p65亞基磷酸化，并釋放NF-κB p50的核定位信號，從而激活炎癥基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，導(dǎo)致炎癥發(fā)生[18]。同時(shí)，炎癥或免疫反應(yīng)發(fā)生時(shí)，NF-κB被激活，從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核中進(jìn)一步調(diào)控TNF-α、IL-8等炎癥因子的表達(dá)，并在外周血中釋放大量炎癥介質(zhì)，加劇炎癥浸潤。清中愈瘍湯通過降低大鼠胃黏膜組織中的NF-κB p65和IκBα磷酸化表達(dá)，進(jìn)一步抑制NF-κB信號通路所介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，并在一定程度上起到保護(hù)胃黏膜作用。因此，清中愈瘍湯可在一定程度上起到預(yù)防胃潰瘍的作用，同時(shí)本研究也為胃潰瘍生物學(xué)機(jī)制探索和臨床中藥方治療脾胃濕熱型胃潰瘍提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

綜上所述，清中愈瘍湯可通過抑制炎癥因子釋放以及抑制NF-κB信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)，以減少潰瘍面積，并促進(jìn)胃黏膜內(nèi)源性物質(zhì)分泌以及胃活動(dòng)功能，從而達(dá)到對脾胃濕熱型胃潰瘍的治療作用，促進(jìn)潰瘍愈合。

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（收稿日期：2022-04-12） （本文編輯：姬思雨）