孫衍昶 劉達(dá)遠(yuǎn) 許鵬翔 歐陽一彬 莫業(yè)和

星形細(xì)胞瘤占顱內(nèi)腫瘤的13%～26%，多呈浸潤性生長(zhǎng)，預(yù)后較差[1]。研究表明星形細(xì)胞瘤的發(fā)生、發(fā)展與多種因素有關(guān)，是多基因與蛋白異常表達(dá)共同作用的結(jié)果[2]。文獻(xiàn)報(bào)道Friend 白血病整合素1轉(zhuǎn)錄因子（Friend leukemia integration 1 transcription factor，F(xiàn)LI-1）對(duì)肝惡性血管源性腫瘤具有一定診斷價(jià)值[3]。Ahmed等[4]指出FLI-1在尤文肉瘤/外周原始神經(jīng)外胚層腫瘤中表達(dá)異常，尤其與分化簇99聯(lián)合應(yīng)用，對(duì)這類腫瘤的診斷陽性率更高。本文探討星形細(xì)胞瘤FLI-1的表達(dá)變化及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2015 年6 月～2018 年6 月手術(shù)切除并經(jīng)術(shù)后病理檢查確診的星形細(xì)胞瘤標(biāo)本112例，其中男68 例，女44 例；年齡26～58 歲，平均（46.23±10.07）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理證實(shí)為星形細(xì)胞瘤，成年病人，術(shù)前無放療、化療等輔助治療。另選59 例顱腦損傷內(nèi)減壓術(shù)獲得非腫瘤腦組織為對(duì)照，其中男36 例，女23 例；年齡21～60 歲，平均（47.19±11.54）歲。本研究獲醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法 采用免疫組化法檢測(cè)星形細(xì)胞瘤、非腫瘤腦組織FLI-1 蛋白表達(dá)情況，同時(shí)檢測(cè)星形細(xì)胞瘤組織異檸檬酸脫氫酶1（isocitrate dehydrogenase1，IDH1）、p53蛋白表達(dá)情況。常規(guī)石蠟切片（厚4 μm）、烤片，經(jīng)二甲苯脫蠟，行梯度酒精水化，PBS清洗3×3 min。微波抗原修復(fù)15 min，蒸餾水洗滌5 min。加入3%牛血清蛋白、10%羊血清混合液，37 ℃靜置40 min。加一抗4 ℃孵育過夜，PBS 清洗3×5 min。加二抗室溫反應(yīng)30 min，PBS 清洗3×5min。DAB顯色后顯微鏡下觀察。隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野（×400）觀察染色情況，胞漿與胞膜呈淡黃、棕黃、棕褐染色為陽性（圖1）[5]。IDH1 陽性率超過5%為IDH1突變[6]。

圖1 FLI-1蛋白表達(dá)的免疫組化染色（SP法，×400）

1.3 隨訪方法 術(shù)后1 d為隨訪起始時(shí)間，以2021年6月30 日為隨訪截止期，記錄無進(jìn)展生存、總生存情況，其中無進(jìn)展生存為預(yù)后良好，腫瘤進(jìn)展或病人死亡為預(yù)后不良。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 20.0軟件分析，計(jì)量資料以±s表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)；利用多因素logistic回歸模型分析星形細(xì)胞瘤生存預(yù)后的危險(xiǎn)因素；采用Spearman 相關(guān)系數(shù)分析FLI-1 蛋白與IDH1、p53 蛋白表達(dá)的相關(guān)性；繪制Kaplan-Meier 生存曲線分析FLI-1 蛋白表達(dá)與病人生存預(yù)后的關(guān)系；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 星形細(xì)胞瘤FLI-1的表達(dá)變化 星形細(xì)胞瘤FLI-1 表達(dá)陽性率[66.96%（75/112）]明顯高于對(duì)照組[16.95%（10/59）；P＜0.05]。

2.2 星形細(xì)胞瘤FLI-1表達(dá)與IDH1、p53表達(dá)的相關(guān)性 FLI-1 表達(dá)與IDH1 表達(dá)呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.682，P＜0.001），與p53表達(dá)呈正明顯相關(guān)（r=0.711，P＜0.001）。

2.3 星形細(xì)胞瘤的預(yù)后情況及影響因素112 例中，預(yù)后良好62 例，預(yù)后不良50 例。單因素分析顯示，腫瘤病理分級(jí)、腫瘤大小、p53 表達(dá)、FLI-1 表達(dá)、腫瘤切除程度、IDH1 突變、術(shù)后放/化療與病人預(yù)后有關(guān)（P＜0.05，表1）。多因素logistic 回歸分析顯示W(wǎng)HO 分級(jí)Ⅲ～Ⅳ級(jí)、腫瘤直徑≥3 cm、p53表達(dá)陽性、FLI-1表達(dá)陽性、腫瘤未全切除是星形細(xì)胞瘤預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05，表2），IDH1 突變、術(shù)后放/化療是預(yù)后良好保護(hù)因素（P＜0.05，表2）。

表1 本文星形細(xì)胞瘤預(yù)后影響因素的單因素分析（例）

表2 本文星形細(xì)胞瘤預(yù)后影響因素的多因素logistic 回歸分析

2.4 FLI-1 表達(dá)與星形細(xì)胞瘤無進(jìn)展生存率的關(guān)系生存曲線分析顯示，F(xiàn)LI-1表達(dá)陰性病人3年累積無進(jìn)展生存率（75.68%）、3 年累積總生存率（81.08%）均明顯高于FLI-1表達(dá)陽性的病人（分別為45.33%、49.33%；圖2）。

圖2 生存曲線分析FLI-1蛋白表達(dá)與星形細(xì)胞瘤生存預(yù)后的關(guān)系

3 討論

星形細(xì)胞瘤惡性程度高，預(yù)后非常差[1]。如何提升星形細(xì)胞瘤的診療效果，并優(yōu)化治療方案，改善病人預(yù)后仍是臨床研究的重點(diǎn)課題。靶向治療是一種有潛力的治療方法，但目前仍缺乏理想的治療靶標(biāo)。研究表明FLI-1 蛋白表達(dá)與血管生成密切相關(guān)，F(xiàn)LI-1缺失可導(dǎo)致血管生成活性受到抑制[7]。而新生血管生成在腫瘤進(jìn)展過程中有重要作用，并且能夠促進(jìn)腫瘤的浸潤以及轉(zhuǎn)移[8]。楊勇等[9]發(fā)現(xiàn)FLI-1 蛋白表達(dá)參與血管球瘤的進(jìn)展。本文結(jié)果發(fā)現(xiàn)星形細(xì)胞瘤FLI-1 蛋白表達(dá)陽性率明顯增高。FLI-1 蛋白是Ets 轉(zhuǎn)錄因子家族的重要成員，在正常情況下，主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞、造血干細(xì)胞，對(duì)祖細(xì)胞與造血干細(xì)胞的分化及增殖有調(diào)節(jié)作用。當(dāng)FLI-1蛋白呈過表達(dá)時(shí)，可促進(jìn)實(shí)體腫瘤發(fā)病以及進(jìn)展[10]。FLI-1在多種腫瘤中有促腫瘤作用，且調(diào)控機(jī)制較復(fù)雜。Yan等[11]發(fā)現(xiàn)FLI-1能促進(jìn)乳腺癌進(jìn)展，對(duì)不良預(yù)后有預(yù)測(cè)作用，沉默F(xiàn)LI-1 表達(dá)能抑制腫瘤細(xì)胞增殖。FLI-1在小細(xì)胞肺癌組織中表達(dá)上調(diào)，可通過激活miR-17-92 通路，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展，敲除FLI-1 基因表達(dá)，能促使腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞增殖[12]。

本文發(fā)現(xiàn)FLI-1蛋白陽性表達(dá)是星形細(xì)胞瘤預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。FLI-1 蛋白的促腫瘤進(jìn)展的作用機(jī)制可能與其激活血管生成因子有關(guān)，從而促進(jìn)新生血管生成，為腫瘤細(xì)胞的增殖與分化提供營養(yǎng)供給，導(dǎo)致病情惡化[13]。本文結(jié)果顯示星形細(xì)胞瘤FLI-1 表達(dá)與IDH1 表達(dá)呈負(fù)性相關(guān)，而與p53表達(dá)呈正相關(guān)。IDH1 突變能減弱腫瘤細(xì)胞線粒體葡萄糖氧化能力，對(duì)谷氨酰胺酶進(jìn)行抑制，并阻止其轉(zhuǎn)化成谷氨酰酸酯，延緩腫瘤進(jìn)展[14]。p53蛋白能削弱p53基因的抑癌作用，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，促進(jìn)病情進(jìn)展[15]。本研究顯示FLI-1 蛋白陽性表達(dá)星形細(xì)胞瘤無進(jìn)展生存率、總生存率明顯下降。這可能與FLI-1 蛋白的促腫瘤作用有關(guān)。FLI-1 能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，能提升腫瘤細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移能力，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展，增加腫瘤進(jìn)展與死亡風(fēng)險(xiǎn)[16]。

綜上所述，星形細(xì)胞瘤組織FLI-1 蛋白呈陽性表達(dá)，是病人預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。