張靜博，程 鵬，趙龍妹，曹平華，馬彥博，范收武，李 旺*

（1.河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院，河南洛陽 471023；2.洛陽歐科拜克生物技術(shù)股份有限公司，河南洛陽 471611）

抗生素自發(fā)現(xiàn)以來，因其有抑制有害菌生長繁殖，提高飼料利用率和畜禽生長性能的作用，在畜禽、水產(chǎn)動物等飼料中被廣泛使用?？股氐拇罅渴褂媒o畜牧行業(yè)帶來了良好的經(jīng)濟效益，但抗生素過量使用會導(dǎo)致畜禽體內(nèi)的殘留，病原體耐藥性增加以及對環(huán)境造成污染等問題，對食品安全和畜牧業(yè)的健康發(fā)展產(chǎn)生嚴(yán)重威脅。

在全球禁止使用促生長型抗生素以來，安全高效的抗生素替代品成為研究熱點。益生菌作為一種綠色飼料添加劑，在畜禽的生產(chǎn)性能和免疫功能等方面表現(xiàn)出良好的積極作用。枯草芽孢桿菌是益生菌中應(yīng)用最廣泛的菌種之一。飼糧中添加枯草芽孢桿菌能夠促使畜禽生長性能和免疫功能提高，其原因是枯草芽孢桿菌在生長繁殖過程中會產(chǎn)生多種能夠分解動物本身不能消化吸收的營養(yǎng)物質(zhì)的酶，幫助動物腸道消化吸收營養(yǎng)物質(zhì)，促進生長發(fā)育，保護動物的機體健康。同時枯草芽孢桿菌能夠通過抑制有害菌的生長繁殖，對畜禽的腸道微生物菌群的平衡進行調(diào)整。也有研究認(rèn)為，可能是由于枯草芽孢桿菌對特定腸道微生物的影響，其中包括增加有益菌數(shù)量、減少某些致病菌數(shù)量，而表現(xiàn)出促生長作用?？股刂薪鹈顾赜幸欢ǖ拇偕L作用，同時能夠治療傷寒和白痢等疾?。畸}霉素是一種新型雞用防球蟲劑。本試驗旨在研究枯草芽孢桿菌對肉雞生長性能、屠宰性能和免疫功能的影響，為抗生素替代品枯草芽孢桿菌在家禽產(chǎn)業(yè)中的效益評價提供了更全面的視角以及枯草芽孢桿菌在生產(chǎn)中的施用提供一定的指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 枯草芽孢桿菌由洛陽歐科拜克生物技術(shù)股份有限公司提供，為粉狀制劑，活菌數(shù)為1×10CFU/g?？股貫槭袌鲑徺I，金霉素和鹽霉素純度均為20%，質(zhì)量比1:1 混合。飼料購自洛陽某飼料廠（顆粒料）。

1.2 試驗設(shè)計及試驗飼糧 選用1 日齡身體狀況相近、健康的愛拔益加（AA）肉仔雞144 只（公母混雛），隨機分為3 個處理組，每個處理6 個重復(fù)，每個重復(fù)8 只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧（無任何添加物），枯草芽孢桿菌組在基礎(chǔ)飼糧中添加150 mg/kg 枯草芽孢桿菌，抗生素組在基礎(chǔ)飼糧添加300 mg/kg 20%金霉素和300 mg/kg 20%鹽霉素。按照肉雞標(biāo)準(zhǔn)化管理流程，采用3 層籠養(yǎng)。試驗期間肉雞自由采食和飲水，全程無免疫。試驗分為2 個階段，第1 階段為1～21 日齡，第2 階段為22～42 日齡，試驗期42 d。飼養(yǎng)階段光照時間控制為14L:8D。飼糧配方及營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 樣品采集和指標(biāo)測定

1.3.1 生產(chǎn)性能 在21 日齡和42 日齡時提前禁食8 h，以每個重復(fù)為單位分別稱重，統(tǒng)計采食量和剩料量，計算2 個飼養(yǎng)階段每個處理組的平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.3.2 屠宰性能 42 日齡試驗結(jié)束時，每個重復(fù)隨機抽取3 只肉雞，空腹稱取重量，然后參考《家禽生產(chǎn)學(xué)》進行常規(guī)屠宰，測定屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重和腹脂重，并根據(jù)相關(guān)計算公式計算屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。

1.3.3 免疫功能 在21 日齡和42 日齡，每個重復(fù)取3只肉雞翅下靜脈采血測定血漿免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）；然后剖解，稱重胸腺、脾臟和法氏囊重量。免疫球蛋白采用上海鈺博生物科技有限公司試劑盒用酶標(biāo)儀（Spectra Max M-5）測定。

1.4 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用 SPSS 19.0 統(tǒng)計分析軟件進行單因素方差分析（One-way ANOVA），并進行Duncan's 多重比較檢驗，＜0.05 表示顯著差異，＜0.01 表示差異極顯著，試驗數(shù)據(jù)均以平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 枯草芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響 由表2 知，在1～21 日齡，與對照組相比，飼糧中添加枯草芽孢桿菌降低了肉雞21 日齡體重、平均日增重（＜0.01）及平均日采食量（＜0.05），提高耗料增重比（＜0.05）。與對照組相比，抗生素組肉雞21 日齡體重和平均日增重降低（＜0.01），耗料增重比提高（＜0.05），對1～21 日齡肉雞平均日采食量沒有顯著影響。與抗生素組相比，枯草芽孢桿菌組肉雞平均日采食量下降（＜0.05），其他指標(biāo)無顯著差異。在22～42 及1～42日齡，3 個處理組間的生長性能均無顯著差異。

表2 枯草芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響

2.2 枯草芽孢桿菌對肉雞屠宰性能的影響 由表3 可知，枯草芽孢桿菌組的腿肌率較對照組提高5.04%（＜0.05），抗生素組與對照組相比腿肌率差異不顯著。3 個處理組的其他屠宰性能指標(biāo)均差異不顯著。

表3 枯草芽孢桿菌對肉雞屠宰性能的影響 %

2.3 枯草芽孢桿菌對肉雞免疫功能的影響

2.3.1 枯草芽孢桿菌對肉雞免疫器官指數(shù)的影響 由表4 可知，在1～21 日齡，3 個處理組的脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)及胸腺指數(shù)差異均不顯著。在22～42 日齡，枯草芽孢桿菌組肉雞的胸腺指數(shù)高于對照組（＜0.05），其他指標(biāo)差異均不顯著。

表4 枯草芽孢桿菌對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

2.3.2 枯草芽孢桿菌對肉雞免疫因子的影響 由表5 可知，在21 日齡時，與對照組相比，抗生素組和枯草芽孢桿菌組的IgA 含量提高（＜0.01），3 組的IgG、IgM 無顯著差異。在42 d 時，抗生素組和枯草芽孢桿菌組的IgA 含量較對照組提高（＜0.01），IgG 含量為抗生素組＞枯草芽孢桿菌組＞對照組（＜0.01），但IgM 含量在3 組間無顯著差異。

表5 枯草芽孢桿菌對肉雞免疫因子的影響

3 討 論

3.1 枯草芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響 枯草芽孢桿菌作為一種益生菌，廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖?？莶菅挎邨U菌在進入腸道后在迅速繁殖時會消耗大量的氧，降低腸道內(nèi)的氧含量，抑制有害菌生長，促進有益菌增殖；另一方面，枯草芽孢桿菌通過改善腸道菌群結(jié)構(gòu)和腸道形態(tài)，改善肉雞對飼料的利用效率，促進動物健康生長。趙強等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加100 g/t 芽孢桿菌科丁酸梭菌能夠促進肉雞平均日采食量和平均日增重的提高，并且在添加100、200、400、600 g/t 芽孢桿菌科丁酸梭菌的4 個處理組中表現(xiàn)出的效果最佳，這與劉曉東等的研究結(jié)果相似。鐘光等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加枯草芽孢桿菌顯著降低了肉雞21 日齡體重、1～21 日齡的平均日增重和平均日采食量，顯著提高22～42 日齡的平均日增重。張安榮等研究表明，在肉雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌顯著降低1～21 日齡的平均日采食量，顯著提高22～42 日齡的耗料增重比。

本試驗中，飼糧中添加枯草芽孢桿菌顯著降低了肉雞生長前期的平均日采食量，極顯著降低了21 日齡體重和平均日增重，耗料增重比顯著提高，而在生長后期提高了平均日采食和平均日增重、降低了耗料增重比，但差異不顯著。這與上述報道研究結(jié)果不完全相同，原因可能與枯草芽孢桿菌的提取工藝和有效活菌數(shù)不同以及產(chǎn)品本身有關(guān)，也可能是本試驗枯草芽孢桿菌添加量過大，從而對肉雞腸道內(nèi)菌群的穩(wěn)態(tài)造成不良影響，從而沒有表現(xiàn)出積極的作用；而生長后期隨著腸道微生物區(qū)系平衡的建立，使得肉雞的平均日采食量和平均日增重提高?？股乜梢种朴泻L繁殖，會影響肉雞的腸道微生態(tài)平衡，從而影響肉雞生長前期的生長性能。

3.2 枯草芽孢桿菌對肉雞屠宰性能的影響 屠宰率、全凈膛率、半凈膛率、胸肉率和腿肉率是衡量肉雞肉用性能的重要指標(biāo)。崔宇等研究發(fā)現(xiàn)在飼糧中添加枯草芽孢桿菌能夠顯著提高AA+肉雞的全凈膛率和半凈膛率。廖玉英等研究表明，在飼糧中添加益生菌（由乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢桿菌組成）制劑可以使黃羽肉雞的屠宰率、全凈膛率和胸肌率顯著提高，顯著降低腹脂率。本試驗中，除腿肌率之外，其他屠宰指標(biāo)在各組間差異均不顯著，但抗生素組和枯草芽孢桿菌組與對照組相比在全凈膛率和半凈膛率有一定的提高?？莶菅挎邨U菌的腿肌率與對照組相比有顯著提高，但與抗生素組相比屠宰性能中各項指標(biāo)沒有顯著差異。

3.3 枯草芽孢桿菌對肉雞免疫功能的影響 禽類免疫功能的強弱在一定程度上可以用免疫器官指數(shù)來表示，即免疫器官與禽類機體的相對重量。郭瑞萍等研究表明，AA 肉雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌能夠在一定程度上提高其免疫性能。林顯華等研究也表明，肉雞飼糧中添加5×10CFU/g 枯草芽孢桿菌 B7，在21 日齡時脾臟和法氏囊指數(shù)顯著提高，機體免疫能力增強；劉美鳳等研究表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌后肉雞的胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)、脾臟指數(shù)顯著提高。家禽血液中參與體液免疫的IgA、IgG、IgM 含量在一定程度上反映了動物機體免疫功能的強弱。研究表明，在飼糧中添加微生態(tài)制劑可以提高IgA、IgG、IgM 含量，使動物機體的免疫能力增強。范秋麗等研究表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌提高了22～42 日齡IgA、IgG、IgM 含量，其中IgM 含量顯著提高。

本試驗也表明，在肉雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌可以在生長前期提高免疫器官指數(shù)，但不顯著，與添加抗生素的免疫器官指數(shù)沒有顯著差異，在生長后期胸腺指數(shù)有顯著提高，這與上述報道結(jié)果類似。同時，添加枯草芽孢桿菌可以于生長前期極顯著提高IgA 含量，于生長后期極顯著提高IgA、IgG 含量。這與范秋麗等的研究結(jié)果不完全相同，可能是因為本試驗枯草芽孢桿菌添加量過大。

4 結(jié) 論

本試驗結(jié)果表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌能降低肉雞的21 日齡平均日采食量和平均日增重，提高耗料增重比、腿肌率，21 日齡IgA 含量，42 日齡IgA、IgG含量、胸腺指數(shù)，顯著改善生產(chǎn)性能，免疫功能等，能夠替代抗生素應(yīng)用于肉雞飼糧中。

致謝：感謝程鵬、任強、張俊偉、李文希、劉雪純在試驗過程中給予的幫助。