鐘曉嬌 劉麗娜 王磊 肖婷婷 黃靜

(貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴州 貴陽 550025)

羧甲司坦是一種黏液調(diào)節(jié)劑，具有明顯抗炎、抑制氧化反應(yīng)及減輕氧自由基對(duì)肺組織損傷等作用，能明顯緩解氣喘、氣促等癥狀，減少急性癥狀發(fā)作次數(shù)，可直接作用于支氣管腺體，充分降低痰液黏稠性，起到顯著止咳、化痰的效果[1]。目前羧甲司坦廣泛用于改善呼吸系統(tǒng)疾病，尤其是慢性阻塞性肺疾病[2]。當(dāng)前市場(chǎng)上有四種劑型：普通片劑，口服液，顆粒，泡騰片。由于羧甲司坦半衰期短，以上四種劑型均需一天多次給藥[3]。將羧甲司坦制成緩釋劑型不僅能減少患者服藥次數(shù)，提高患者順從性，服用方便，同時(shí)也能使其在體內(nèi)緩慢平穩(wěn)的釋放，血藥濃度平穩(wěn)，避免出現(xiàn)峰谷現(xiàn)象，降低毒副作用及程度，提高臨床用藥的安全性。然而，查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)前尚無羧甲司坦緩釋片相關(guān)研究被報(bào)道。鑒于此，本研究首次制備羧甲司坦緩釋片，為后續(xù)研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

1.1實(shí)驗(yàn)儀器 電子分析天平 (上海浦春計(jì)量?jī)x器有限公司、型號(hào)：JY2001，感量：0.01 mg)，超聲波清洗器(型號(hào)：HS-10260D)，溶出度試驗(yàn)儀(天津盛達(dá)三合光學(xué)儀器有限公司，型號(hào)：ZRS-8G)，高速冷凍離心機(jī)(型號(hào)：TD5，上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司)，單沖式壓片機(jī)(型號(hào)：DP30A，北京國藥龍立科技有限公司)，電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(型號(hào)：GZX-9420MBE，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)，電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(型號(hào)：DHG-9420A，上?！憧萍加邢薰?等。

1.2試藥 羧甲司坦(型號(hào)：160613)，聚乙烯吡咯烷酮K30(縮寫：PVP-K30，批號(hào)：20190102，廠家：廣東汕頭市西隴化工廠)，高粘度羥丙基纖維素(縮寫：HPC，批號(hào)：SS0913GB14，廠家：上海源葉生物科技有限公司)，玉米淀粉(批號(hào)：豫藥準(zhǔn)字F20040001號(hào)，廠家：河南正弘藥用輔料有限公司)，羧甲淀粉鈉(縮寫：CMS-Na，批號(hào)：161110，型號(hào)：高膨脹型，廠家：安徽山河藥用輔料股份有限公司)，羥丙甲纖維素(縮寫：HPMC，規(guī)格：75HD4000，批號(hào)：20200002，廠家：山東優(yōu)索化工科技有限公司)，羧甲基纖維素鈉(縮寫：CMC-Na，批號(hào)：040706，廠家：廣東汕頭市西隴化工廠)，聚乙烯醇(縮寫：PVA，批號(hào)：190401，廠家：上海展云化工有限公司)，微晶纖維素(縮寫：MCC，批號(hào)：P21111115，廠家：山東優(yōu)索化工科技有限公司)，聚乙烯吡咯烷酮K90(縮寫：PVP-K90，批號(hào)：津Q/HG3364-99，廠家：天津博迪化工股份有限公司)，低取代羥丙甲纖維素(縮寫：L-HPC，批號(hào)：151022 ，型號(hào)：QW-08，廠家：安徽山河藥用輔料股份有限公司)，乙醇95%(批號(hào)：20200309，廠家：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，硬脂酸鎂(批號(hào)：20190730，廠家：天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)，滑石粉，乳糖，蒸餾水等。

2 方法與結(jié)果

2.1工藝操作方法 查有關(guān)文獻(xiàn)，確定了羧甲司坦處方量為每片含0.5 g[4]，設(shè)計(jì)處方為50%主藥、28%填充劑、10%崩解劑、適量的粘合劑、10%骨架材料、1%助流劑和1%的潤滑劑，采用濕法制粒制備羧甲司坦緩釋片[5]。將原輔料及羧甲司坦分別粉碎、過100目篩后，充分干燥。稱取羧甲司坦25 g、填充劑[乳糖：MCC(1:2)]14 g、崩解劑5 g、骨架材料5 g放入研缽中，充分混合均勻，加入3%PVP乙醇作為黏合劑，過16目篩粒制軟材，60℃烘干1 h，通過16目篩整粒，加入滑石粉和硬脂酸鎂各0.5 g，充分混合均勻后再開始實(shí)行壓片。預(yù)實(shí)驗(yàn)中，各批投料量均為50片。

2.2羧甲司坦緩釋片釋放度測(cè)定 采用中國藥典溶出度測(cè)定二法槳法，以PH=6.6的磷酸鹽緩沖溶液作為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r/min進(jìn)行藥物釋放度測(cè)定，取樣時(shí)間點(diǎn)為1 h、2 h、4 h、6 h、8 h、12 h。每次取樣4 mL，5 000 r/min離心20 min，取上清液1 mL于25 mL容量瓶中，加2%茚三酮溶液1 mL，PH6.6的磷酸鹽緩沖液1 mL，充分搖勻，熱水浴加熱15 min，顯色后冰浴冷卻，用蒸餾水定容。最后采用紫外—可見分光光度法在567 nm最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值。

2.3單因素的考察 按2. 1的處方和制備工藝，以體外釋放速度作為主要指標(biāo)，對(duì)影響緩釋片質(zhì)量的主要因素粘合劑、崩解劑及骨架材料的種類進(jìn)行考察，篩選較優(yōu)的工藝處方。

2.3.1親水凝膠骨架材料的考察 按照2.1的處方和制備工藝制備緩釋片，分別選用HPMC、CMC-Na、PVA作為骨架材料，其余各組份均不變。并測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)緩釋片劑的累積釋放度，繪制釋放曲線，見圖1。由圖1可知，以PVA和CMC-Na作為骨架材料時(shí)釋放度過快，2 h內(nèi)接近100%，而HPMC可達(dá)到緩慢釋放的效果，故親水凝膠骨架材料為HPMC。

圖1 骨架材料選擇的釋放度測(cè)定結(jié)果

2.3.2粘合劑的考察 以HPMC為骨架材料，分別選用10%淀粉漿、5%高粘度HPC、3%PVP乙醇作為粘合劑，其余各組份均保持不變，制備羧甲司坦緩釋片，考察指標(biāo)為制粒難易及顆粒性狀，結(jié)果見表1。測(cè)定不同時(shí)間緩釋片的累計(jì)釋放度，結(jié)果見圖2。根據(jù)表1及圖2的結(jié)果可知，以3%PVP乙醇作粘合劑，容易制粒，用量較少，干顆粒形狀圓滑，硬度較好，所制得的緩釋片片面光潔度及硬度較好。且以3%PVP作為粘合劑所制緩釋片的釋放度較10%淀粉漿及5%HPC溶出緩慢平緩，因此選擇3%PVP乙醇作為粘合劑。

表1 粘合劑篩選及結(jié)果

圖2 粘合劑選擇的釋放度測(cè)定結(jié)果

2.3.3崩解劑的選擇 以HPMC為骨架材料，3%PVP乙醇作為粘合劑，選用L-HPC、干淀粉、CMS-Na作為崩解劑，其余各組份均不變，制備羧甲司坦緩釋片。以緩釋片的釋放度作為主要考察指標(biāo)，考察不同崩解劑對(duì)片劑釋放度的影響，結(jié)果見圖3。由圖3可知，CMS-Na和干淀粉在2小時(shí)時(shí)釋放較低，且L-HPC釋放平緩，故崩解劑選擇L-HPC。

圖3 崩解劑選擇的釋放度測(cè)定結(jié)果

2.4正交試驗(yàn)優(yōu)選最佳處方 對(duì)經(jīng)過單因素考察篩選的骨架材料(A)、崩解劑(B)、粘合劑(C)及填充劑(D)4個(gè)因素進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化篩選。結(jié)合單因素考察結(jié)果，對(duì)4個(gè)因素進(jìn)行考察，對(duì)每個(gè)因素選擇三個(gè)水平進(jìn)行試驗(yàn)，按L9(34)正交表制備羧甲司坦緩釋片，采用綜合評(píng)價(jià)法，對(duì)各處方緩釋片于2 h、4 h、12 h等3個(gè)時(shí)間點(diǎn)的溶出度進(jìn)行評(píng)分﹐將評(píng)分結(jié)果加權(quán)相加后得出總分﹐最后采用方差和直觀分析法進(jìn)行分析。2 h、4 h、12 h累計(jì)釋放率(E%、F%和G%)分別以30%、60%和 100%為基準(zhǔn)，它們的權(quán)重系數(shù)定為1，得到計(jì)算公式：H=|E-30|×1+|F-60|× 1+|G-100 | × 1，H值越小，因素水平越佳，以釋放度的為主要考察指標(biāo)，選擇最合適的處方[6]。因素水平表見表2。根據(jù)表2的因素與水平，列出表3所示的正交試驗(yàn)計(jì)劃表。按表3稱取主藥、親水凝膠骨架材料、填充劑，崩解劑，放入研缽中，充分混合均勻，加入粘合劑過16目篩粒制軟材，60℃烘干一小時(shí)，通過16目篩整粒，加入滑石粉0.5 g和硬脂酸鎂0.5 g，充分混合均勻后再開始實(shí)行壓片。結(jié)果見表3、表4，結(jié)果可知親水凝膠骨架材料為關(guān)鍵因子，對(duì)羧甲司坦緩釋片的處方影響較大，崩解劑、黏合劑與填充劑對(duì)其影響較小。故初步得出最佳處方為A2B1C1D2。即親水凝膠骨架材料HPMC10%、填充劑選擇乳糖:微晶纖維素=1:1，崩解劑5%L-HPC，粘合劑3%PVP乙醇，助流劑1%滑石粉，潤滑劑1%硬脂酸鎂。

表2 輔料用量選擇因素與水平

表3 L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果

表4 方差分析結(jié)果

2.5最佳制備工藝的考察 查閱相關(guān)文獻(xiàn)，根據(jù)表5的因素與水平，分別對(duì)制備工藝的制粒粒徑14目、16目和18目、干燥溫度50℃、55℃和60℃、干燥時(shí)間60 min、120 min和180 min，進(jìn)行了正交試驗(yàn)的考察，以羧甲司坦緩釋片的硬度為主要考察指標(biāo)，表觀形態(tài)與脆碎度為次要考察指標(biāo)，篩選出最佳制備工藝的干燥溫度、制粒粒徑和干燥時(shí)間[5]。按照表5列出表6所示的正交試驗(yàn)計(jì)劃表。按表6的制備條件分別制備羧甲司坦緩釋片，處方為羧甲司坦原料藥50%，親水凝膠骨架材料HPMC10%、填充劑33%(乳糖:微晶纖維素=1:1)，崩解劑5%L-HPC，粘合劑3%PVP乙醇，助流劑1%滑石粉，潤滑劑1%硬脂酸鎂。按處方量稱取羧甲司坦主藥和輔料充分混合均勻后，用3%PVP乙醇作粘合劑，采用濕法制粒壓片法分別制備，然后開始?jí)浩?。結(jié)果見表6、表7。分析正交試驗(yàn)結(jié)果，干燥溫度(A) 制粒粒徑 (B) 干燥時(shí)間(C)對(duì)羧甲司坦緩釋片的硬度、表觀形態(tài)與脆碎度的影響差異不顯著(見表7)，經(jīng)表6研究顯示，依據(jù)正交試驗(yàn)表格各組(K值及其極差R的大小作為基本依據(jù)，本實(shí)驗(yàn)所選擇的三個(gè)因素R值排列的順序?yàn)镃>A>B，說明因素C即干燥時(shí)間的影響因素最大，干燥溫度為次之，制粒粒徑為影響最小，故初步得出最佳制備工藝條件為A3B2C1。即干燥溫度為60℃，過16目篩制粒，干燥時(shí)間為60 min。綜上所述，羧甲司坦緩釋片的最佳處方為：羧甲司坦 25 g，乳糖：MCC(1:1)14 g，L-HPC 2.5 g，HPMC 5 g，滑石粉 0.5 g，硬脂酸鎂 0.5 g，3%PVP乙醇適量制備工藝采用濕法制粒制，過16目篩制粒，60℃干燥60 min，成50片。

表5 制備條件選擇與水平

表6 L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果

表7 方差分析結(jié)果

3 討 論

目前，緩釋片這一新劑型相比于普通片劑，具有減少藥物快速溶出給胃腸道帶來刺激，減慢藥物在體內(nèi)的過程，減少給藥次數(shù)，避免和減少血藥濃度峰谷現(xiàn)象，提高藥物療效等特點(diǎn)[7]。因此，將羧甲司坦片制備成緩釋片劑型，同時(shí)研究其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，將改善原先普通片劑所存在的缺點(diǎn)和不足，提高治療效果，減少患者服用次數(shù)[8]。

通過極差分析與方差分析可知，羧甲司坦緩釋片的釋放度與輔料的組成及用量有關(guān)。親水凝膠骨架材料為重要因子，崩解劑、粘合劑與填充劑的影響較小，由圖1可知HPMC的溶出比CMC-Na、PVA緩慢，且CMC-Na和PVA約在2 h已全部溶解，不能達(dá)到緩釋的效果[9]。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，極差分析簡(jiǎn)單易懂，計(jì)算量也小，但是存在一些不足，不能確定分析因子對(duì)指標(biāo)的影響是水平改變引起還是試驗(yàn)誤差引起，所以有時(shí)在極差中是主要影響因素而在方差中卻是次要的。為了確保正交試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，實(shí)驗(yàn)結(jié)合了方差分析法和極差分析[10]。采用單因素實(shí)驗(yàn)與正交試驗(yàn)選擇羧甲司坦緩釋片的處方可以減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)，縮短實(shí)驗(yàn)周期。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知采用親水凝膠骨架材料作為羧甲司坦緩釋片的輔料，可延緩羧甲司坦的釋放，起到了長(zhǎng)效的作用，從理論上可能克服了60歲以上老年人、12歲以下兒童及吞服有困難患者的給藥次數(shù)，提高藥物療效，具體療效有待進(jìn)一步的體內(nèi)試驗(yàn)驗(yàn)證。

在羧甲司坦緩釋片的制備工藝研究中，從正交試驗(yàn)表6結(jié)果可知干燥時(shí)間對(duì)緩釋片的硬度影響較大，干燥溫度和制粒粒徑影響較小，因此本研究探索同一壓力下，干燥溫度、制粒粒徑和干燥時(shí)間對(duì)緩釋片硬度的影響。從表6實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知各因素下緩釋片硬度的差異較大，這主要是由于在操作過程中，本試驗(yàn)中使用的單沖壓片機(jī)壓力不可變，從而導(dǎo)致緩釋片硬度較難控制。與此同時(shí)，針對(duì)不同的輔料，壓片機(jī)壓出的片子硬度也不一樣，而該研究實(shí)驗(yàn)采用的是單因素，正交試驗(yàn)篩選處方，故實(shí)驗(yàn)僅設(shè)計(jì)在同一壓力下對(duì)所有輔料進(jìn)行壓片，而未考慮針對(duì)單個(gè)輔料進(jìn)行壓力調(diào)整。故我們?cè)谖磥韺⑦M(jìn)一步考慮生產(chǎn)工藝參數(shù)如濕度、pH，不同輔料的壓片壓力等對(duì)藥物質(zhì)量的影響來進(jìn)行合理調(diào)整,建立更符合實(shí)際生產(chǎn)要求的設(shè)計(jì)空間。

綜上所述，本研究通過篩選出的最佳處方及制備工藝制備的羧甲司坦緩釋片外觀光潔圓整，穩(wěn)定性好，具有顯著的緩釋效果。