林 紅， 龍方懿， 王 婷*

(1)電子科技大學醫(yī)學院，四川省腫瘤醫(yī)院藥學部， 成都 610054；2)四川省婦幼保健院實驗醫(yī)學中心， 成都 610041)

1976年，Sanger等首次發(fā)現(xiàn)，植物類病毒以環(huán)狀RNA(circular RNA，circRNA)而非線狀RNA這種前所未知的分子形式的存在。在1979 年，通過電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)其存在于真核細胞中[1]。近年來，隨著高通量測序技術和生物信息學的飛躍發(fā)展，許多circRNA被發(fā)現(xiàn)存在于各種生物體內，它們具有結構穩(wěn)定、進化保守、高度豐富和組織特異性等特征。越來越多研究表明，circRNA廣泛參與了細胞的生長、分化和凋亡等各個病理生理過程，并與多種惡性腫瘤的發(fā)病機制有關[2,3]。

轉錄后修飾已成為多種生理病理過程中重要的調控因子。在過去幾十年里，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了100多種RNA修飾類型[4]。其中，N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine，m6A)修飾是真核生物中最常見的一種RNA修飾。m6A修飾是一個動態(tài)的調節(jié)過程，在RNA的翻譯、剪接、降解等多個方面發(fā)揮作用。m6A修飾不僅發(fā)生在mRNA等編碼RNA中，也發(fā)生在一些非編碼RNA(non-coding RNA，ncRNA)中，例如微小RNA(microRNA，miRNA)和circRNA[5]。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，circRNA的m6A修飾在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮調控作用。本篇綜述總結了RNA m6A修飾機制、m6A修飾對circRNA的調控作用，以及circRNA的m6A修飾在腫瘤中的作用，也討論了m6A修飾的circRNA在未來腫瘤的診斷與治療中的潛在應用價值。

1 環(huán)狀RNA概述

1.1 circRNA分類及形成機制

CircRNA是一種具有新型結構的RNA分子，其3′-和5′-末端共價連接形成環(huán)狀閉合結構。根據(jù)circRNA的來源不同，可分為4類：外顯子circRNA(exonic circRNA，ecRNA)、內含子circRNA(intronic circRNA，ciRNA)、外顯子-內含子circRNA(exon-intron circRNA，EIciRNA)和線粒體編碼的circRNA(mitochondria-encoded circRNA，mecciRNA)[6, 7]。MecciRNA是一種最近發(fā)現(xiàn)的新型circRNA，已經(jīng)在人類和鼠細胞中發(fā)現(xiàn)了數(shù)百種。同時，一些mecciRNA被證明可以促進核基因組編碼的蛋白質進入線粒體，以幫助線粒體適應不同的生理條件[7]。CircRNA通常來源于前體mRNA(pre-mRNA)，它的形成機制較為復雜，尚未完全闡明。目前，主要有3種模型解釋它的形成機制：(1)套索驅動的環(huán)化；(2)內含子配對驅動的環(huán)化；(3)RNA結合蛋白(RNA-binding protein，RBP)依賴性的環(huán)化。在套索驅動的環(huán)化模型中，環(huán)化過程隨著2個不相鄰的外顯子結合在一起，最終產(chǎn)生circRNA。在內含子配對驅動的環(huán)化模型中，pre-mRNA的外顯子1和外顯子3之間的2個內含子中的互補序列能夠相互配對連接以誘導環(huán)化，最終產(chǎn)生circRNA。在RBP依賴的環(huán)化模型中，一些RBPs能夠結合到pre-mRNA的外顯子1和外顯子3之間的2個內含子序列的特定位點上，代替內含子中反向重復序列或者互補序列的作用，促進供體和受體序列共價結合形成環(huán)化序列，進而使相鄰外顯子連接環(huán)化，最終產(chǎn)生circRNA[8, 9]。

1.2 circRNA的生物學功能

1.2.1 circRNA充當miRNA分子海綿 許多circRNA具有不同類型和數(shù)量的miRNA結合位點。這些位點能夠特異性與miRNA結合，從而消除miRNA對其靶基因的抑制作用，上調相應靶基因的表達[10]。研究表明，許多circRNA可以充當miRNA分子海綿，調控腫瘤的發(fā)生發(fā)展。Ma等[11]發(fā)現(xiàn)，circNFATC3可能直接作為miR-9-5p海綿來調節(jié)黏結蛋白聚糖2(syndecan-2，SDC2)的表達及其下游信號通路，從而促進宮頸癌的發(fā)展。circTRIM33-12吸附miR-191，從而抑制肝細胞癌細胞的增殖、遷移和侵襲[12]。

1.2.2 circRNA調控基因轉錄 部分circRNA可以作為轉錄調控因子調控基因轉錄過程。一些ciRNA和EIciRNA通過結合RNA聚合酶 Ⅱ(RNApolymerase Ⅱ，Pol Ⅱ)轉錄復合物和轉錄相關蛋白質來調控親本基因的轉錄或剪接過程。Zhang等[13]報道, ci-ankrd52和ci-sirt7可以通過與Pol Ⅱ相互作用作為親本基因轉錄的正向調控因子。此外，Li等[14, 15]發(fā)現(xiàn)了2個EIciRNA(circ-EIF3J和circ-PAIP2)，它們可以結合U1核小核糖核蛋白(small nuclear ribonucleic proteins, snRNPs)，進一步與親本基因啟動子處的Pol Ⅱ相互作用，增強親本基因的表達。

1.2.3 circRNA與功能蛋白質相互作用 RBPs包含1個或多個RNA結合域，在基因表達的各個方面發(fā)揮著重要作用，例如轉錄、pre-mRNA剪接和RNA修飾等過程。CircRNA可以與RBPs直接特異性相互作用，作為競爭元素來阻斷蛋白質作用。CircRNA可以與RBPs相互作用的一個典型例子是circFoxo3，它與細胞周期進展相關，沉默內源性circFoxo3可促進細胞增殖。circFoxo3通過與周期蛋白依賴性激酶2(cyclin-dependent kinase 2，CDK2)和p21結合，形成circFoxo3-p21-CDK2三元復合物，抑制了CDK2發(fā)揮功能，進而阻斷了細胞周期的進程[16]。

1.2.4 circRNA可被翻譯成蛋白質 長期以來，circRNA被忽視了其翻譯產(chǎn)生蛋白質的功能。直到2017年Legnini等[17]發(fā)現(xiàn)，circ-ZNF609通過非帽依賴的方式翻譯為小鼠成肌細胞中的蛋白質，這一發(fā)現(xiàn)為真核生物中circRNA能夠編碼蛋白質提供了依據(jù)。迄今為止，已報道了若干circRNA的翻譯功能在人類癌癥中發(fā)揮重要作用。例如，Li等[18]發(fā)現(xiàn)，circ-HER2可編碼一種新的蛋白質HER2-103，HER2-103通過與表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)或HER3的直接作用，誘導EGFR/HER3或EGFR/EGFR的二聚化，進而激活下游AKT信號通路，促進三陰性乳腺癌細胞的增殖。

2 RNA m6A修飾的機制

m6A修飾主要是由3類酶蛋白參與的動態(tài)調節(jié)過程，包括m6A甲基轉移酶(writers)、m6A去甲基化酶(erasers)和m6A識別蛋白(readers)。m6A修飾參與調節(jié)RNA剪接、輸出、翻譯和降解等多個過程[19](Fig.1)。

2.1 m6A甲基轉移酶

m6A甲基轉移酶是一類具有催化活性的蛋白質，它們能夠結合形成甲基轉移復合物(methyltransferase complex, MTC)，催化RNA特定位點發(fā)生m6A修飾。甲基轉移復合物包括甲基轉移酶樣蛋白3(methyltransferase-like 3，METTL3)、甲基轉移酶樣蛋白14(methyltransferase-like 14，METTL14)、腎母細胞瘤1-相關蛋白(Wilm’s tumor 1-associated protein，WTAP)、RNA結合基序蛋白15(RNA-binding motif protein 15，RBM15)、病毒樣m6A甲基轉移酶相關蛋白(Vir like m6A methyltransferase associated protein，VIRMA)和鋅指CCCH域蛋白13(zinc finger CCCH domain-containing protein 13，ZC3H13)等[20]。METTL3和METTL14形成穩(wěn)定的復合物，在基底的識別中發(fā)揮關鍵作用。其中，METTL14 本身無甲基轉移酶活性，主要幫助METTL3識別底物[21]。WTAP 和METTL3 直接結合，確保了METTL3-METTL14異二聚體的定位，提高催化活性[22]。RBM15與m6A復合體結合，并將其招募至特定的RNA位點[23]。此外，METTL16是一種新發(fā)現(xiàn)的甲基轉移酶，催化U6 snRNPs中核小RNA(small nuclear RNA，snRNA)的m6A修飾，參與pre-mRNA的剪接[24]。

2.2 m6A去甲基化酶

m6A去甲基化酶的功能與甲基轉移酶相反，主要發(fā)揮讓m6A修飾的RNA去甲基化的作用。m6A去甲基化酶主要包括脂肪和肥胖相關蛋白(fat mass and obesity-associated protein，F(xiàn)TO)和Alk B同源物 5(Alk B homolog 5，ALKBH5)，兩者均屬于Fe2+/α-酮戊二酸依賴型雙氧酶ALKB家族成員。FTO是第1個被發(fā)現(xiàn)的m6A去甲基化酶，Jia等[25]發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)TO具有使體外RNA中大量m6A殘基的有效氧化脫甲基活性。敲除FTO導致mRNA中m6A的量增加，而FTO的過表達導致人細胞系中m6A的量減少,從而證明了FTO催化去甲基的活性。ALKBH5為第2個被鑒定出的m6A去甲基化酶。ALKBH5缺乏的雄性小鼠mRNA的m6A修飾增多，而且ALKBH5選擇性地分布在核斑點中，影響核mRNA的輸出和RNA的代謝[26,27]。

2.3 m6A識別蛋白

m6A識別蛋白能夠“閱讀”m6A介導的生理行為，從而影響RNA行使功能。常見的閱讀子有YT521-B同源(YT521-B homology，YTH)結構域家族的蛋白(YTHDC1、YTHDC2、YTHDF1、YTHDF2和YTHDF3)、核不均一核糖核蛋白C(heterogeneous nuclear ribonucleoproteins，HNRNP)家族蛋白(HNRNPA2B1、HNRNPC和HNRNPG)、胰島素樣生長因子2 mRNA結合蛋白(insulin-like growth factor 2 mRNA-binding proteins，IGF2BPs)、真核起始因子3(eukaryotic initiation factor 3，eIF3)和Prrc2a(proline rich coiled-coil 2 A)[28,29]。不同的閱讀子(readers)執(zhí)行不同的功能。YTHDC1有助于RNA的剪接和輸出[30, 31]；YTHDC2增強RNA的翻譯效率，降低mRNA的豐度[32]；YTHDF1、YTHDF2分別促進mRNA翻譯和降解[33]；而YTHDF3增強YTHDF1和YTHDF2各自的作用[34]。與YTHDF2的功能相反，IGF2BPs在正常和應激條件下以m6A依賴的方式促進其靶mRNA的穩(wěn)定性和儲存，從而影響基因表達輸出[35]。Prrc2a是一種最近新發(fā)現(xiàn)的RBP，具有穩(wěn)定mRNA表達的作用[36]。

Fig.1 m6A methylation is a dynamic and reversible process m6A RNA modification is regulated by writers, erasers and readers. m6A methylation is installed by the m6A methyltransferases (writers), including METTL3/14, WTAP, RBM15, VIRMA and ZC3H1. And it could be removed by RNA demethylases (erasers), such as FTO and ALKBH5. In addition, m6A methylation could be specifically recognized by m6A-binding proteins (readers), including YTH domain containing reader proteins YTHDC1-2 and YTDF1-3, IGF2BPs and eIF3. The Readers perform various functions in RNA export, splicing, stability, translation and degradation

3 m6A修飾對環(huán)狀RNA的調控作用

3.1 m6A修飾促進circRNA的核輸出

成熟RNA轉錄物的核輸出對于其正常功能的行使至關重要。不同類型的RNA包含不同的信號序列，用于確定通過哪種途徑將其自身從細胞核輸送到細胞質。例如，隨著mRNA的合成，它與RBPs結合，形成核糖核蛋白顆粒(ribonucleoprotein particles，mRNPs)。異二聚體輸出受體NXF1-NXT1被招募發(fā)出mRNPs裝配完成的信號，隨后通過核孔復合體(nuclear pore complex，NPC)將mRNA以mRNPs的形式輸出[37]。不同類型的circRNA具有不同的定位，ciRNA和EIciRNA主要保留在細胞核中，而ecRNA主要定位于細胞質[38]。CircRNA是如何從細胞核中輸出的研究較少，其輸出途徑仍然還在不斷探索中。

Huang等[39]使用RNAi篩選發(fā)現(xiàn)，果蠅DExH/D-box解旋酶Hel25E的缺失導致長circRNA(> 800 nt)在細胞核中的大量積累。他們進一步在人類細胞中測試了這種長度依賴的circRNA輸出途徑。令人驚訝的是，他們發(fā)現(xiàn)，Hel25E的2個人類同源物(UAP56和URH49)參與circRNA的定位，但具有不同的特征。UAP56負責長circRNA(> 1 200 nt)的核輸出，而短circRNA(< 400 nt)的核輸出需要URH49。然而，由這2種同源物如何測量circRNA長度的詳細機制仍不清楚。最近的一項研究表明，m6A修飾會促進circRNA的核輸出。細胞核中m6A修飾的circNSUN2可被YTHDC1識別，并促進其輸出到細胞質中，敲除YTHDC1或METTL3導致circNSUN2在細胞核中大量積累，而這種現(xiàn)象可以通過它們的重新表達來逆轉[40](Fig.2)。這些研究為circRNA的核輸出機制提供了新的視角。

3.2 m6A修飾驅動circRNA的翻譯

CircRNA通常被認為是一種ncRNA。然而近年大量研究表明，circRNA具有編碼蛋白質潛能[18, 41, 42]。在真核生物中，傳統(tǒng)的mRNA翻譯是由帽依賴途徑所介導。帽依賴途徑需要真核翻譯起始因子4F(eukaryotic initiation factor 4F，eIF4F)復合物的參與。eIF4F復合物是由eIF4A、eIF4E 和eIF4G所組成，其定位于5′帽子結構處，起始翻譯過程[43]。但是，由于circRNA的環(huán)狀閉合結構，缺乏5′端帽子結構，不能通過此途徑編碼蛋白質。在研究者的不斷探究下，發(fā)現(xiàn)了2種非帽依賴翻譯途徑：核糖體介入位點(internal ribosome entry site，IRES)介導的翻譯途徑和m6A修飾介導的翻譯途徑。IRESs是位于mRNA 5′UTR的序列，可以直接招募核糖體(ribosome)啟動翻譯。IRES所介導的翻譯最初是在RNA和DNA病毒中發(fā)現(xiàn)。隨后的一些研究表明，在某些壓力條件下，真核生物mRNA也可以通過IRES所介導的途徑翻譯[44]。近年來，一些IRES所介導的circRNA翻譯也被發(fā)現(xiàn)，并參與腫瘤的調控過程。Zhang等[42]發(fā)現(xiàn)，circ-SHPRH可以通過IRES介導途徑編碼SHPRH-146aa，在U251和U373膠質母細胞瘤細胞中，過表達SHPRH-146aa降低了膠質母細胞瘤細胞的體內外惡性行為和致瘤性。

另一個重要的非帽依賴翻譯途徑是m6A修飾所介導的。研究表明，5′UTR中的m6A可以直接與eIF3結合，它足以招募43 S核糖體復合物來啟動翻譯。不同的細胞應激選擇性地增加了5′UTR內m6A的水平，表明5′UTR中的 m6A修飾在介導應激誘導的翻譯反應中很重要[45]。Yang等[46]最近進行的一項研究發(fā)現(xiàn)，circRNA中有豐富的m6A修飾，含有m6A修飾的circRNA在細胞內被翻譯，并且調控circRNA中的m6A水平會影響翻譯效率。這種m6A驅動的翻譯需要eIF4G2和m6A識別蛋白YTHDF3，eIF4G2負責招募eIF4A和eIF4B組成翻譯起始復合物eIF4，啟動 circRNA翻譯(Fig.2)。在應激條件下，敲除m6A去甲基化酶FTO會抑制circRNA翻譯，而敲除m6A甲基轉移酶METTL3/14則會促進circRNA翻譯。通過進一步分析，發(fā)現(xiàn)有數(shù)百種內源性circRNA具有編碼蛋白質潛力，此研究擴展了人類轉錄物組的編碼范圍。此外，Timoteo等進行的另一項研究中也發(fā)現(xiàn)，YTHDF3和eIF4G2可以通過識別m6A修飾位點來調控circ-ZNF609的翻譯[47]。

3.3 m6A修飾促進circRNA的降解

CircRNA由于其封閉的環(huán)狀結構，比親本線性RNA更穩(wěn)定。有研究表明，含有m6A的mRNA主要有2種不同的降解途徑:YTHDF2-CCR4 /NOT復合物去烯酰化和YTHDF2-HRSP12-RNase P/MRP復合物核內裂解[48]。然而，circRNA的降解機制在很大程度上是未知的，仍然在不斷探索中。此前有研究報道，miRNA可以通過Ago2切片依賴的方式引導circRNA降解[49]。但對于一些無miRNA海綿功能的circRNA不起作用。Jia等[50]發(fā)現(xiàn)，果蠅GW182及其人類同源基因(TNRC6A、TNRC6B和TNRC6C)對circRNA的降解具有調節(jié)作用，但是這種機制尚未完全闡明，仍需要其他機制的補充。

最近的一項研究報道，m6A修飾的circRNA也可以通過YTHDF2-HRSP12-RNase P/MRP軸被核糖核酸內切酶切割。經(jīng)免疫共沉淀實驗發(fā)現(xiàn)，HRSP12發(fā)揮連接YTHDF2和RNase P/MRP的作用。YTHDF2是m6A閱讀子，可以識別circRNA上的m6A修飾位點。RNase P/MRP是一種核糖核酸內切酶，其通過HRSP12與YTHDF2相連接，形成YTHDF2-HRSP12-RNase P/MRP復合物，切割circRNA[51](Fig.2)。此外，Chen等[52]發(fā)現(xiàn)，內源性m6A修飾的circRNA結合YTHDF2不能刺激視黃酸誘導基因蛋白I(retinoic acid-inducible gene-I，RIG-I)通路，抑制先天性免疫的發(fā)生，推測這可能是由于YTHDF2介導的circRNA降解。Paramasivam等[53]報道，缺乏m6A修飾的外源性circRNA可激活RIG-I通路，誘導先天性免疫。這一發(fā)現(xiàn)揭示了m6A修飾在區(qū)分內源性circRNA和外源性circRNA中的作用，并暗示了YTHDF2識別m6A修飾所介導的circRNA降解在抑制先天性免疫中的潛在作用。

Fig.2 Roles of m6A methylation in the regulation of circRNA (a) YTHDC1 binds to m6A methylation sites and promotes circRNA nuclear export. (b) The m6A-driven translation of circRNA is initiated by factor eIF4G2, eIF4, eIF4B and m6A reader YTHDF3. (c) M6A-modified circRNA is endoribonucleolytically cleaved via the YTHDF2-HRSP12-RNase P/MRP axis

4 環(huán)狀RNA的m6A修飾在腫瘤中的調控作用

隨著高通量測序技術以及生物信息學的迅速發(fā)展，越來越多的circRNA在腫瘤組織中被發(fā)現(xiàn)，它們在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要的作用[11, 12, 18]。m6A修飾是circRNA一種常見的修飾方式，其參與circRNA的核輸出、非帽依賴的翻譯和降解等過程，在維持circRNA的生物學活性上具有重要的作用，從而調節(jié)circRNA在腫瘤細胞增殖、遷移、侵襲和耐藥性等方面的作用。在這里，對近幾年來有關“circRNA的m6A修飾在腫瘤中調控作用”的研究進行了簡單總結。

4.1 宮頸癌

宮頸癌是世界上第4常見的女性惡性腫瘤，高危型人乳頭瘤病毒(HPV)是導致宮頸癌發(fā)生的高危因素，是一個重大的全球健康挑戰(zhàn)[11]。盡管HPV篩查和疫苗接種計劃被認為是有效預防宮頸癌工具，但對高危型HPV病毒如何從潛在感染發(fā)展為不可治愈的癌癥的了解仍然不完整。在最近的一項研究中發(fā)現(xiàn)，HPV病毒能產(chǎn)生1種circRNA(circE7)，m6A修飾賦予circE7翻譯產(chǎn)生E7癌蛋白的能力，從而促進宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。同時，m6A對circE7的修飾，幫助病毒逃脫宿主的抗病毒免疫反應[54]。這一發(fā)現(xiàn)，推動了對人類乳頭瘤病毒導致宮頸癌發(fā)病機制新見解的產(chǎn)生。

4.2 結直腸癌

結直腸癌是一種常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。近年來，我國結直腸癌的發(fā)病率和死亡率呈上升趨勢，確定有效的診斷和預后生物標志物至關重要[55]。Chen等[40]發(fā)現(xiàn)，m6A修飾的circNSUN2在結直腸癌肝轉移患者的腫瘤組織和血清樣本中經(jīng)常上調，并預測患者較低的存活率。經(jīng)深入研究的結果表明，m6A修飾的circNSUN2可被YTHDC1識別并輸出到細胞質中，然后參與形成circNSUN2/胰島素樣生長因子2-mRNA結合蛋白(Insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 2，IGF2BP2)/高遷移率族蛋白2(high mobility group AT-hook，HMGA2)三元復合物。circNSUN2增強HMGA2 mRNA的穩(wěn)定性，從而促進結直腸癌的侵襲和肝轉移。circNSUN2可能成為結直腸癌肝轉移的潛在治療靶點。

4.3 肝細胞癌

肝細胞癌是最常見的原發(fā)性肝癌類型，全球癌癥相關死亡的主要原因之一。肝細胞癌病人5年生存率很低，探究肝細胞癌的發(fā)生發(fā)展機制至關重要[56]。Rao等[57]發(fā)現(xiàn)，乙肝病毒x蛋白(hepatitis B virus x protein，HBx)上調了甲基轉移酶METTL3的表達，從而增加了circ-ARL3的m6A修飾，然后YTHDC1結合m6A修飾的circ-ARL3，有利于它的反向剪接和生物合成，促進circ-ARL3在肝細胞癌細胞和組織中顯著上調。此外，circ-ARL3能夠通過海綿作用拮抗miR-1305，抑制下游靶基因從而促進乙型肝炎病毒相關肝細胞癌進展?；熓侵委熗砥趷盒阅[瘤的一種有效方法，但是腫瘤細胞在治療過程中會對多種藥物產(chǎn)生耐藥性，導致治療失敗。索拉菲尼是治療晚期肝細胞癌的一線藥物，由于其耐藥性限制了它的臨床應用。近年來，許多研究揭示了circRNA與腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥性的關系。例如，最近一項研究在索拉非尼耐藥的肝細胞癌細胞中發(fā)現(xiàn)了circRNA-SORE上調。circRNA-SORE通過充當miRNA分子海綿吸附miR-103a-2-5p和miR-660-3p，從而競爭性激活Wnt/β-catenin通路，并誘導索拉非尼耐藥性產(chǎn)生，且其異常表達的機制為m6A對circRNA-SORE的修飾，使其穩(wěn)定性增強[58]。

4.4 非小細胞肺癌

肺癌是常見的癌癥之一，在世界范圍內具有很高發(fā)病率和死亡率。其中，非小細胞肺癌約占85%[59 ]。盡管非小細胞肺癌的診斷與治療取得了一定的進展，但仍然存在一定的局限性，需要更多的探索。據(jù)報道，IGF2BPs在非小細胞肺癌中上調，高水平的IGF2BPs會促進腫瘤的生長與轉移。最近，Li等[60]發(fā)現(xiàn)，circNDUFB2可以作為一種支架增強TRIM25和IGF2BPs之間的相互作用，而且這種作用可以通過m6A修飾得到進一步的加強。TRIM25是一種E3泛素連接酶，所以m6A修飾的circNDUFB2會進一步促進IGF2BPs的泛素化和降解，進而抑制非小細胞肺癌的進展。此外，circNDUFB2也可以被RIG-I識別，以激活免疫信號級聯(lián)，并將免疫細胞募集到腫瘤微環(huán)境(tumor microenvironment，TME)中。TME被認為是導致腫瘤增殖、轉移和化療耐藥性的關鍵因素[61]，這一發(fā)現(xiàn)為非小細胞肺癌治療提供了新方向。

4.5 胃低分化腺癌

胃低分化腺癌是胃癌中的一種，預后較差。最近，Zhang等[62]通過circRNA測序技術，對胃低分化腺癌組織以及配對的正常胃組織中的circRNA表達情況進行了檢測，發(fā)現(xiàn)了一系列差異性表達的circRNAs。其中，Hsa-circRNA-0077837與對照組相比差異最顯著，可作為臨床診斷標志物。而且大部分表達差異的circRNA都有m6A修飾，m6A修飾的變化趨勢主要與circRNA表達水平一致。但是，對于m6A修飾如何影響circRNA在胃低分化腺癌的生物學功能，仍需進行深入的研究。

5 問題與展望

如今，隨著人們生活水平的大幅度提高，各種惡性腫瘤的發(fā)病率逐年上升，因此，迫切需要尋找到更多有效的早期診斷、預后標志物，以及潛在的治療靶點。CircRNA作為ncRNA類的新星，吸引了越來越多研究者的注意力。隨著高通量測序技術以及生物信息學的迅速發(fā)展，許多circRNA在腫瘤組織中被發(fā)現(xiàn)，它們在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要的調控作用。m6A修飾是circRNA一種常見的修飾方式，它通過參與調節(jié)circRNA的核輸出、翻譯和降解等過程，從而調控circRNA在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的生物學功能。這些m6A修飾的circRNA有望成為腫瘤有效的早期診斷、預后標志物，以及潛在的治療靶點，為腫瘤的診斷與治療提供了新的思路。但是，目前關于circRNA的m6A修飾的研究仍較少，m6A修飾對circRNA的哪些方面具有調控作用的了解也較少，僅僅局限于circRNA的核輸出、翻譯和降解等幾方面。circRNA的m6A修飾如何影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展的機制也尚未完全闡明，仍有待進一步的研究。因此，完全揭示circRNA的m6A修飾對腫瘤以及其他疾病的調控機制仍然有較長一段路要走，任重而道遠。在未來，仍需要更多的研究來進一步闡明m6A修飾與circRNA之間的關系，以及它們在疾病中的調控機制。隨著研究的深入，對circRNA的m6A修飾機制的探索有望為腫瘤的診斷與治療開啟新的篇章。